氯化镧对原代培养的星形胶质细胞的氧化损伤作用

目的研究氯化镧(lanthanum chloride,LaCl3)对原代培养的星形胶质细胞的氧化损伤作用。方法原代培养的星形胶质细胞经0、0.25、0.5、1.0 mmol/L LaCl3处理24 h后,采用MTT法和Alamar Blue还原法检测星形胶质细胞的存活率,并测定星形胶质细胞中谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxydase,GSH-Px)活性。结果各LaCl3处理组星形胶质细胞的存活率均显著低于对照组,且具有一定的剂量-反应关系。0.25 mmol/L LaCl3组星形胶质细胞的GSH含量和GSH-Px活性显著低于对照组;0.5 mmol/L LaCl3组星形胶质细胞的GSH含量和GSH-Px活性显著低于对照组和0.25 mmol/L LaCl3组;1.0mmol/LLaCl3组星形胶质细胞的GSH含量和GSH-Px活性分别降低至对照组的66%和43%,均显著低于对照组、0.25和0.5 mmol/L LaCl3组。此外,各LaCl3组星形胶质细胞的MDA含量均显著高于对照组,且随...     

氯化镧对原代大鼠星形胶质细胞凋亡和细胞周期的影响

目的研究不同浓度的氯化镧对原代大鼠星形胶质细胞凋亡和细胞周期的影响,探讨氯化镧所致神经损伤的机制。方法取新生大鼠大脑皮质进行原代星形胶质细胞分离和培养。在纯化及鉴定细胞后,用0,0.25,0.5,1.0 mmol/L氯化镧(LaC l3)处理24 h后,应用MTT法检测细胞活力,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放,应用倒置相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪法检测细胞凋亡和细胞周期。结果随着LaC l3暴露浓度的增加,细胞活力明显降低,LDH释放明显增加,细胞形态出现不同程度的损伤,细胞凋亡率从0.72%上升至11.6%(P<0.05),G1期细胞指数从78.35%上升至92.11%(P<0.05),S期细胞指数从6.19%下降至1.53%(P<0.05),G2期细胞指数从15%下降至7.09%(P<0.05),均呈现剂量-效应关系。结论氯化镧可诱发原代大鼠星形胶质细胞凋亡,改变细胞周期,从而产生神经毒性。 更多还原     

氟化物对大鼠颅骨成骨细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响

目的 :研究氟化物对大鼠颅骨成骨细胞生长、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法 :应用酶消化法分离培养大鼠颅骨的成骨细胞 ;AlamarBlue摄入法检测细胞活性 ;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果 :氟化钠 (NaF)浓度为 0～ 2mmol L、2 4h对细胞活性无影响 ;浓度为 2mmol L时 ,S期细胞数增多 ,G0 G1 期和G2 M期细胞无明显改变。NaF浓度为 4mmol L时 ,细胞活性受抑制 ,S期细胞数明显增多 ,G2 M期细胞明显减少。NaF浓度为 2mmol L和 4mmol L时 ,凋亡百分率明显增加。结论 :过量氟化物可影响大鼠颅骨成骨细胞活性及细胞周期的分布 ,使细胞停滞于S期 ,并可诱导细胞凋亡     

米非司酮对宫颈癌Caski细胞增殖的影响

目的:探讨米非司酮对人宫颈鳞癌Caski细胞增殖的影响和机制。为临床应用米非司酮治疗宫颈鳞癌提供实验依据。方法:体外培养人宫颈鳞癌Caski细胞,应用不同浓度的米非司酮处理Caski细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,测定米非司酮对Caski细胞增殖活性的作用;流式细胞术分析细胞周期的变化;异硫氰酸荧光素(FITC)荧光标记流式细胞术(FCM)法,测定米非司酮对Caski细胞HPV-E6,p53的表达和活性变化。结果:①MTT比色法结果显示:12.5mg/L以上浓度米非司酮可抑制体外培养的Caski细胞生长,且呈明显的浓度-时间依赖方式,1.25mg/L的米非司酮对Caski细胞无显著的抑制作用(IR5%)。②流式细胞术结果显示:12.5mg/L以上浓度的米非司酮能使Caski细胞周期阻滞于G1期,呈明显的浓度-时间依赖方式。③FITC荧光标记FCM法结果显示:米非司酮作用于Caski细胞后,HPV-E6蛋白表达下调,p53蛋白表达上调,呈浓度依赖方式(P0.05)。结论:①大剂量(12.5～20mg/L)米非司酮具有抑制Caski细胞生长作用,能使其周期阻滞于G1期。②米非司酮对Caski细胞增殖有抑制作用,与下调HPV16-E6蛋白表达,上调p53蛋白表达有关。     

Effect of Iodide Excess on Human Thyroid Cells ( Nthy-ori 3-1) Apoptosis

目的 探讨碘过量对人正常甲状腺细胞(Nthy-ori 3-1)的损伤作用及机制.方法 用0(对照)、1、10、50mmol/L的碘化钾(KI)作用于体外培养的Nthy-ori 3-1细胞24h后,分别采用噻唑蓝(MTT)法、乳酸脱氢酶(LDH)比色法检测细胞存活率和LDH漏出率,利用流式细胞术检测活性氧(ROS)水平、细胞周期构成比及凋亡率.结果 与对照组相比,50 mmol/L碘染毒组细胞存活率明显下降(P＜0.05),LDH漏出率明显上升(P＜0.05).各剂量组之间ROS产生水平差异无统计学意义.50 mmol/L碘染毒组G0/G1期细胞百分比明显增多(P＜0.05),但S期百分比明显减少(P＜0.05),且细胞凋亡率明显上升(P＜0.05).结论 一定剂量的碘能降低甲状腺细胞存活率,增加LDH漏出率,细胞G0/G1期阻滞和诱导细胞凋亡,碘对甲状腺的损伤作用可能与碘对细胞周期的影响有关.     

酒精抑制脑星形胶质细胞胶原纤维酸性蛋白和S_(100)蛋白的表达

目的研究酒精对脑星形胶质细胞GFAP和S_(100)蛋白表达的影响。方法对体外分离培养的大鼠胚胎脑星形胶质细胞分别施以不同剂量酒精(2、5和20mmol/L),染毒7天后,以免疫细胞化学法观察酒精对星形胶质细胞GFAP和S_(100)蛋白表达的影响。结果随酒精剂量增加,脑星形胶质细胞GFAP和S_(100)蛋白表达强度下降,高剂量组细胞数量轻度减少。结论提示酒精能抑制星形胶质细胞GFAP和S_(100)蛋白表达。酒精诱导的星形胶质细胞蛋白表达异常可能是酒精引起中枢神经系统发育异常的主要机制之一。     

补阳还五汤对乳鼠星形胶质细胞组织因子表达的影响

目的　观察补阳还五汤 (BHD)对脂多糖 (LPS)诱导大鼠星形胶质细胞表达组织因子 (TF)的影响。　方法　培养Wistar乳鼠星形胶质细胞 ,用抗神经胶质纤维酸性蛋白单克隆抗体确认星形胶质细胞。细胞冻融液TF活性检测采用一期血浆复钙时间法。　结果　与对照组相比 ,LPS使星形胶质细胞表达TF明显增加 (5 91± 3 3mU·ml 1vs 3 82± 2 5mU·ml 1,n =12 ,P <0 .0 1) ,并呈剂量依赖性 (r =0 .993 ) ;补阳还五汤能明显地抑制LPS诱导星形胶质细胞表达TF(99± 17mU·ml 1vs 5 91± 3 3mU·ml 1,n =12 ,P <0 .0 1)。　结论　LPS促进星形胶质细胞表达TF ,而BHD能抑制LPS诱导星形胶质细胞表达TF。     

黄绿青霉素对人脐静脉血管内皮细胞的毒性及硒的保护作用

目的观察黄绿青霉素(citreoviridin,CIT)对血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VEC)的毒性及硒(selenium,Se)的保护作用。方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞(human vascular endothelial cell,HUVEC),以亚硒酸钠(Na_2SeO_2)和黄绿青毒素(CIT)处理,分为:对照;Se(培养基含Se元素0.1mg/L);CIT低剂量(含0.2mg/L CIT);CIT高剂量(含0.4 mg/L CIT);Se+CIT(0.2mg/L Se和0.4mg/L CIT)5组。药物作用12 h后分别用MTT法检测细胞增殖活性,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期。结果 CIT组细胞增殖活性低于对照组,Se+CIT组细胞增殖活性高于CIT组(P0.05);CIT组细胞凋亡率高于对照组,Se+CIT组细胞凋亡率低于CIT组(P0.05);CIT组细胞发生G0/G1期细胞周期阻滞,Se+CIT组G0/G1期细胞周期阻滞不明显。结论 CIT可促进细胞凋亡,通过G0/G1期细胞周期的阻滞作用抑制HUVECs增殖活。     

2,2’,4,4’-四溴联苯醚对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞周期、凋亡及p53蛋白表达的影响

目的研究PBDE-47对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞周期、凋亡和p53蛋白表达的影响。方法用低、中、高剂量(0、0.5、2.5、5μg/ml)的PBDE-47对体外培养的SH-SY5Y细胞进行染毒,24h后采用流式细胞术检测细胞周期构成比和细胞凋亡率,用Westernblot检测p53蛋白的表达水平。结果与对照组相比,低、中、高剂量染毒组G0/G1期细胞数均明显增加,S期细胞数均明显减少(P0.001)。与对照组相比,高剂量染毒组细胞凋亡率明显升高(P0.001),中、高剂量染毒组p53蛋白表达水平均明显升高(P0.01)。结论 PBDE-47可导致SH-SY5Y细胞在G0/G1期发生阻滞及细胞凋亡,并诱导p53蛋白表达增加,PBDE-47导致的细胞周期阻滞与凋亡可能与p53蛋白表达水平增加有关。     

芳烃类有机溶剂对原代培养神经胶质细胞的谷氨酸重摄取的影响

[目的 ]研究芳烃类有机溶剂对原代培养大鼠神经胶质细胞的谷氨酸重摄取的影响。 [方法 ]取新生SD大鼠的海马神经胶质细胞进行原代培养 ,培养 2周后 ,用芳烃类有机溶剂 (甲苯、二甲苯和乙苯 )染毒 ,染毒浓度为 3mmol/L、6mmol/L和 9mmol/L ,染毒时间为 4h、12h和 2 4h ,并设空白对照组和赋形剂蓖麻油组 ,染毒后 ,观察神经胶质细胞的存活率、乳酸脱氢酶 (LDH)活性以及氨基酸重摄取的变化。 [结果 ]染毒后 ,神经胶质细胞摄取谷氨酸的能力显著下降(P <0 0 5 ) ,有明显的剂量 反应关系 (r =0 87,P <0 0 1) ,当染毒浓度为 9mmol/L浓度时 ,抑制率达 70 %以上 ;但染毒后神经胶质细胞的存活率与对照组相比无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,LDH的活性差异亦无显著性 (P >0 0 5 )。 [结论 ]芳烃类有机溶剂对神经胶质细胞本身的致死性毒作用较小 ,但对神经胶质细胞的谷氨酸重摄取功能有较强的抑制作用     

日本血吸虫培养细胞SDH、AKP和ACP的组织化学观察

目的 探讨日本血吸虫成虫培养细胞琥珀酸脱氢酶（SDH）、碱性磷酸酶（AKP）和酸性磷酸酶（ACP）的组织化学变化。方法 应用组织化学染色法显示日本血吸虫培养细胞SDH、AKP和ACP。结果 日本血吸虫成虫培养细胞均具有SDH、AKP、ACP活性，体积较大的在胞膜附近和鞭毛细胞的鞭毛部位SDH活性最强；圆颗粒细胞、三角扇形细胞合胞体的AKP活性细胞质较细胞核弱，团簇状排列的细胞主要分布在细胞质、而鞭毛细胞则集中于细胞核和鞭毛部位；ACP的活性均较强，尤其是体积较大的培养细胞，活性部位集中中分布在核周或弥散分布在细胞质中。结论 日本血吸虫培养细胞SDH、AKP和ACP的组化染色可做为简便易行、快速敏感的细胞培养条件优劣的评价指标。     

硒拮抗氟诱导肾脂质过氧化及酶组织化学改变的研究

给ＳＤ大鼠饮用含氟化钠，亚硒酸钠，氟化钠和亚硒酸钠的水溶液８周，观察硒对氟诱导肾脏脂质过氧化及肾酶组织化学改变的影响。结果表明，氟可使肾脏脂质过氧化物含量明显增加，并可使肾近曲小管上皮细胞琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性明显降低，乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性明显增高。同时补硒可促进肾脏的氟排泄，降低肾脏脂质过氧化物含量，对氟引起的生物膜损伤具有较强的防护作用，从而减轻氟对肾近曲小管上皮细胞中ＳＤＨ、ＡＣＰ活性的影响，而硒对氟所致的肾近曲小管上皮细胞ＡＬＰ、ＬＤＨ活性改变的拮抗作用则不明显。可以认为，硒对氟致肾损害具有一定拮抗作用。     

乙基亚硝基脲致大鼠脑星形胶质细胞DNA损伤及对P53和P21蛋白表达的影响

目的研究乙基亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱发原代大鼠脑星形神经胶质细胞DNA损伤及对P53、P21蛋白表达的影响.方法采用机械分离技术,在体外培养大鼠脑神经胶质细胞,通过传代培养的方法纯化大鼠脑星形胶质细胞.给予不同浓度ENU(1.7、3.4、6.8、13.6、27.2 mmol/L)染毒,采用单细胞凝胶电泳(single-cell gel electrophoresis,SCGE)和免疫组织化学的方法观察ENU对星形胶质细胞DNA的损伤作用和抑癌基因p53、p21的产物P53、P21蛋白在细胞中表达.结果不同染毒浓度下,各染毒组对星形胶质细胞均有不同程度DNA损伤作用,各染毒组拖尾细胞百分率与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),且随受试物浓度增加而增加,表现出明显的剂量-效应关系(r=0.916).各染毒组细胞DNA的迁移距离(尾长)与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).在13.6、27.2 mmol/L ENU染毒组,P53有阳性表达,与阴性对照组比较,有统计学意义(P＜0.01),而P21在各实验组均未见阳性表达.结论ENU对大鼠脑星型胶质细胞的毒性主要表现在诱导细胞遗传物质DNA损伤以及抑癌基因p53的表达水平升高.     

氟化钠对乳鼠成骨细胞c—fos,c—jun基因表达及细胞增殖？…

目的 探讨氟对钠（ＮａＦ）对离体成骨细胞ｃ－Ｆｏｓ、ｃ－Ｊｕｎ基因表达的调控及细胞增殖的影响。方法 采用新生大鼠头盖骨分离成骨细胞,在不同浓度ＮａＦ（１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ）中进行培养,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞增殖,用免疫组化ＳＰ法结合计算机图像处理系统检测ＮａＦ诱导的ｃ－Ｆｏｓ、ｃ－Ｊｕｎ表达。结果 实验表明ＮａＦ可刺激成骨细胞增殖,并诱导成骨细胞     

硒和锌对氟致大鼠肾脏细胞凋亡及增殖周期变化的影响

目的 研究一定剂量的硒和锌对氟引起的大鼠肾脏细胞凋亡和细胞增殖周期变化的作用。方法 给Wstar大鼠饮用含50mg／L氟化钠的高氟水,同时通过灌胃方式给予不同剂的硒和锌制剂。6个月后,用TUNEL法和流式细胞术检测大鼠肾脏细胞凋亡和细胞增殖周期的变化。结果 氟能明显诱导大鼠肾脏细胞凋亡,并使G2／M期细胞明显下降,DNA相对含量（DNARC）也显著下降。一定剂量的硒和锌制剂对氟诱导拓大鼠肾脏细胞凋亡具有明显的拮抗作用,而且能明显抑制氟引起的G2／M期细胞减少,但对氟引起的DNARC下降却无明显拮抗作用。结论 氟可诱导大鼠肾脏细胞凋亡并可使细胞增殖周期改变;硒和锌制剂对氟诱导的大鼠肾脏细胞凋亡和细胞增殖周期的变化具有一定的拮抗作用。     

外源性血管内皮生长因子基因在新生鼠缺氧缺血性脑损伤模型中的表达

目的:研究外源性血管内皮生长因子(VEGF)在新生鼠缺氧缺血脑损伤(Hypoxic-ischemic brain damageHIBD)模型中的表达情况。方法:构建了负载有鼠VEGF120 cDNA的真核表达质粒pCDNA3.1,建立新生鼠缺氧缺血脑损伤模型,将质粒注射至新生鼠缺氧缺血脑损伤局部,探讨外源性VEGF在新生鼠脑内的表达情况。应用VEGF免疫组织化学方法检测转移pCDNA3.1/rVEGF120真核表达质粒后大鼠脑中VEGF的表达情况。结果:与转移空载质粒的对照组相比,脑内注射外源性VEGF基因,在大脑皮质及海马的神经细胞、神经胶质细胞及血管内皮细胞胞浆中高度表达。结论:在HIBD模型中,脑内注射的外源性VEGF基因在大脑皮质及海马处神经细胞、胶质细胞、血管内皮细胞胞浆中高度表达。     

中药“热毒清”对矽肺防治效应的实验研究

为探讨中药“热毒清”对矽肺的防治效应,本文取提纯的不同培养阶段的四组小鼠腹腔巨噬细胞,用形态学和细胞化学的方法,对细胞的形态及ACP和SDH活性进行了动态观察。结果表明,SiO_3组巨噬细胞吞噬SiO_2粉尘后远较中药和P_(204)组迅速死亡、崩解。细胞内ACP和SDH活性也大大地低于中药和P_(204)组(P<0.01),但中药与P_(204)组间无显著差异(P>0.05)。认为“热毒清”有明显的防治矽肺效应。     

Propentofylline对体外培养的星形胶质细胞GFAP表达的影响

目的观察体外培养的星形胶质细胞损伤后，propentofylline对其胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表迭的改变，探讨propentofylline对损伤星形胶质细胞的影响。方法建立体外培养大鼠纯化的星形胶质细胞机械损伤模型，利用免疫细胞化学方法观察propentofylline干预后星形胶质细胞GFAP的变化，星形肢质细胞机械损伤后星形胶质细胞随机分为2组（n=2）：药物干预组、对照组。药物干预组子propentofylline处理，用免疫细胞化学染色的方法和图像分析测定法观察星形胶质细胞GFAP蛋白表达的变化及星形胶质细胞的数量。结果机械损伤后12h后损伤边缘区GFAP细胞数目增加、胞体肥大，GFAP表达增强，propentofylline干预后GFAP表达增强被抑制，胞体肥大程度减轻，GFAP阳性细胞数减少。结论propentofylline对损伤后的体外培养的星形胶质细胞的活性具有明显的调节作用。     

三硝基甲苯对大鼠睾丸某些生化功能的影响

本研究采用急性染毒方式，观察三硝基甲苯（ＴＮＴ）对大鼠睾丸某些生化功能的影响。结果表明，２０００ｍｇ／ｋｇＴＮＴ染毒组睾丸葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ－６－ＰＤ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、山梨醇脱氢酶（ＳＤＨ）和酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性下降，睾丸锌含量下降，而血清锌含量上升。１０００ｍｇ／ｋｇＴＮＴ染毒组睾丸Ｇ－６－ＰＤ和ＡＣＰ活性也下降，而血清锌含量升高。表明睾丸中Ｇ－６－ＰＤ和ＡＣＰ活性以及血清锌含量变化较为敏感。