大鼠胚胎脊髓移植物对成体损伤脊髓运动功能修复的影响

为了探讨胚胎脊髓移植物对成体损伤脊髓运动功能修复的效应，取妊娠１４天胚胎大鼠脊髓组织，移植到成年大鼠脊髓半切洞损伤模型，术后进行联合行为记分（ＣＢＳ）和运动诱发电位（ＭＥＰ）检查。结果发现，移植组ＣＢＳ与对照组比较相差显著（Ｐ＜０．０５），移植术后４周以内两者相差非常显著（Ｐ＜０．０１）。移植组ＭＥＰ早期反应（Ｐ１，Ｎ１）的峰潜伏时恢复优于对照组（Ｐ＜０．０５）。结果提示，胚胎脊髓移植对成年宿主损伤脊髓的功能修复具有促进作用。这可能与胚胎脊髓组织能分泌多种神经营养因子、神经生长因子、神经递质，或激素的调节作用有关。     

脊髓损伤患者行间歇性导尿对膀胱功能康复的影响

目的:探讨对脊髓损伤患者行间歇性导尿(IC)在膀胱功能康复中的意义.方法:选取脊髓损伤后膀胱功能障碍患者160例,按随机化原则将其分为试验组(康复护理组,n=81)和对照组(传统护理组,n=79),对照组患者仅采取传统护理模式进行护理,康复护理组患者在此基础上采取间歇性导尿结合膀胱功能训练的护理方式进行康复护理.分别于入院时、病后一个月、病后六个月评估两组患者膀胱功能和泌尿系并发症的发生率.结果:康复组患者膀胱功能康复情况明显优于对照组(P＜0.01),其并发症的发生率均明显低于对照组(P＜0.01),两组差别有高度显著性意义.结论:间歇性导尿有益于脊髓损伤患者膀胱功能的恢复,且并发症发生率明显低于对照组.     

产甘油假丝酵母两种转化方法的比较

为了研究产甘油假丝酵母高产甘油和耐高渗的机制,以Zeocin作为选择标记,考察和比较了两种转化方法,即醋酸锂法和电转化法的转化效果,以建立简单有效的产甘油假丝酵母转化体系。结果表明,细胞生长时期是影响转化率的关键因素。在OD600约为1.3时制备感受态细胞,在电压为1.5 kV时进行电击,可获得较高转化率,为每微克DNA 139个转化子。在OD600约为1.0时制备感受态细胞,醋酸锂预处理细胞1 h,获得的转化率为每微克DNA 154个转化子。综合考虑,醋酸锂法更适合于产甘油假丝酵母的转化。     

新生鼠和成年鼠脊髓损伤后胚胎脊髓移植对大鼠损伤脊髓功能恢复的影响

目的研究新生鼠和成年鼠脊髓损伤后胚胎脊髓移植对大鼠损伤脊髓功能恢复的影响。方法将新生鼠和成年鼠腰段脊髓半切洞损伤,取E14胚胎脊髓组织移植到损伤区,手术后4、8、12周,进行组织学检查,联合行为评分,感觉诱发电位,运动诱发电位检查。结果组织学检查发现移植的胚胎脊髓在宿主脊髓中存活。联合行为评分,感觉诱发电位,运动诱发电位潜峰时的恢复,新生鼠移植组均优于成鼠移植组(P<0.05)。结论通过各种功能检查(CBS,SEP,MEP)表明胚胎脊髓移植能够促进脊髓损伤后新生鼠和成鼠运动功能的恢复。     

TRH对大鼠脊髓损伤后SCBF和SEP的影响

脊髓损伤（ＳＣＩ）后内源性阿片肽释放，并参与脊髓的继发损伤机制。ＴＲＨ可阻断阿片肽的自主神经效应，而不影响痛觉。本实验探讨大剂量ＴＲＨ（２ｍｇ／ｋｇ／ｈ）治疗对大鼠脊髓打击伤（Ａｌｌｅｎｓ法１０ｇｘ５ｃｍ）后脊髓血流量（ＳＣＢＦ）和脊髓诱发电位（ＳＥＰ）的影响。脊髓损伤后１ｈ，ＳＣＢＦ开始显著下降，持续至伤后２４ｈ，ＳＥＰ峰潜时呈进行性延长趋势；伤后即刻静脉注射ＴＲＨ（２ｍｇ／ｋｇ／ｈ，共５次），可使伤后即刻和２４ｈ的ＳＣＢＦ显著升高，并使伤后ＳＣＢＦ下降时间延迟３ｈ，同时ＳＥＰ峰潜时有不同程度改善。结果表明，ＴＲＨ对受伤脊髓早期有一定的防治作用，并具有一定的后发效应；同时也可促进脊髓的神经传导功能。本文亦对ＴＲＨ治疗ＳＣＩ的病理生物学机制进行了讨论。     

大鼠脊神经前根切断后脊髓内Slit1表达的变化

目的 :探讨脊神经前根损伤后,大鼠脊髓组织中Slit1的表达变化,为进一步研究Slit1在神经再生中的作用提供依据。方法:应用2月龄SD大鼠共100只,体重250±20g,其中80只SD大鼠实施左侧L5及L6脊神经前根切断,分别在伤后1d、3d、7d、14d时处死(每个时间点20只),取L5~L6脊髓节段,标记左右;左侧半L5~L6脊髓节段为实验组;右侧半为自身对照组。假手术大鼠(20只)实施麻醉及暴露L5及L6脊神经手术,未行L5及L6脊神经前根切断术,取其L5~L6脊髓节段为空白对照组。采用免疫组化、Western blotting及RT-PCR法检测大鼠脊髓组织中Slit1的变化。结果:脊神经前根切断后1d、3d、7d、14d,实验组中Slit1阳性细胞数分别为5.78±1.53、15.85±2.65、23.93±1.53、8.78±1.78;自身对照组中分别为2.31±1.63、2.57±1.89、3.20±2.16、3.02±2.15。各时间点实验组中Slit1阳性细胞数显著高于空白对照组(2.89±1.26)及自身对照组(P0.05)。Western blotting示脊神经前根切断后1d、3d、7d、14d,实验组Slit1相对表达量分别为0.326±0.09、0.448±0.05、0.638±0.07、0.304±0.07;自身对照组分别为0.038±0.02、0.038±0.01、0.035±0.02、0.046±0.03。各时间点实验组Slit1相对表达量与空白对照组(0.038±0.03)及自身对照组比较,差异有显著性(P0.05)。RT-PCR示脊神经前根切断后1d、3d、7d、14d,实验组Slit1 m RNA相对量分别为0.380±0.03、0.425±0.04、0.768±0.05、0.605±0.04;自身对照组分别为0.210±0.04、0.265±0.03、0.292±0.02、0.261±0.02。各时间点实验组Slit1 m RNA相对量与空白对照组(0.231±0.03)及自身对照组比较,差异有显著性(P0.05)。结论 :脊神经前根切断后,同侧脊髓灰质前角内Slit1的表达显著增加。     

硫酸软骨素酶ABC对大鼠急性脊髓损伤后神经中丝和胶质纤维酸性蛋白的影响

目的：探讨硫酸软骨素酶ABC（ChABC）对大鼠急性脊髓损伤后神经中丝200（NF200）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的影响.方法：SD大鼠72只,雌雄不限,随机分为假手术组（A组）、损伤对照组（B组）和ChABC治疗组（C组）,每组24只.A组仅打开椎板及置管,不损伤脊髓,不给药;C组和B组均采用Allen＇s法制作大鼠T10脊髓损伤模型,分别在伤后即刻和随后每天1次连续1周蛛网膜下腔注射ChABC（6μl/次）和等量生理盐水.术后1d、1周、2周和4周每组各处死6只大鼠,B组和C组以损伤区为中心、A组在相应部位切取1cm长的脊髓组织,以HE染色观察脊髓组织形态变化,应用免疫组化方法检测脊髓组织中NF200和GFAP的变化.结果：HE染色示A组脊髓无胶质细胞增生和胶质瘢痕形成;B、C组脊髓损伤区有胶质细胞增生和胶质瘢痕,C组明显少于B组.A组术后1d、1周、2周和4周时NF200阳性细胞数及灰度值和GFAP染色阳性面积无差异,1、2、4周时B、C组脊髓损伤区NF200染色阳性细胞数及灰度值和GFAP染色阳性面积均较A组显著增加（P＜0.05或P＜0.01）,1d和1周时C组NF200染色阳性细胞数及灰度值与B组比较无显著性差异,2周和4周时C组明显高于B组（P＜0.05）;1d、1周和4周时C组GFAP染色阳性面积与B组无显著性差异,2周时C组显著小于B组（P＜0.05）.结论：ChABC能提高大鼠急性脊髓损伤后神经细胞内NF200的表达并抑制GFAP的表达,进而促进神经细胞的修复,抑制胶质细胞的增生和胶质瘢痕的形成,对脊髓损伤具有保护作用.     

一氧化氮合成酶抑制剂对大鼠损伤脊髓血液及功能的影响

通过Ｎｙｓｔｒｏｍ脊髓后路压迫模型造成脊髓中度损伤，应用激光多普勒血流仪观测了大鼠伤前３０ｍｉｎ，蛛网膜下腔注射生理水及亚硝基左旋精氨酸甲酯０．１５ｍｇ、１．５ｍｇ三组动物伤后局部脊髓血流的动态变化，并评定了伤后４周神经功能恢复情况。     

脊髓损伤相关中枢性疼痛与CGRP阳性的初级传入纤维再生的相关性研究

[目的]观察脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后发生中枢性疼痛(central pain,CP)大鼠损伤远端脊髓背角中生长相关蛋白43(GAP-43)和降钙基因相关肽(CGRP)的共定位表达情况,探讨CP与CGRP阳性的初级传入神经纤维出芽再生之间的关系。[方法]SD大鼠16只,随机等分为SCI组和假术(SHAM)组。SCI组大鼠用NYU撞击器损伤L1节段脊髓,撞击力为10 g×12.5 mm。SHAM组大鼠仅切除椎板,不损伤脊髓。术后每天观察双后肢自噬现象,每周测量双后肢运动功能评分(BBB scores,developed by Basso,Beattie and Bresnahan at Ohio State University)。术后4~8周每周测量后肢触压痛痛阈及冷热过敏症状,了解CP的发生情况。术后8周每组取4只行损伤远端脊髓GAP-43与CGRP免疫荧光双标记并在共聚焦显微镜下观察二者的共定位表达情况。[结果]SCI组大鼠术后均出现双后肢瘫痪及明显的CP症状,其损伤远端脊髓背角中GAP-43与CGRP的共定位表达量明显升高,分布范围明显扩大,与SHAM组比较,差异有统计学意义(P0.01)。[结论]CP的发生与SCI后感受伤害性刺激的CGRP阳性感觉传入纤维的出芽再生有关。     

实验性大鼠胚胎脊髓移植对损伤脊髓影响的观察

目的 建立了一个胚胎脊髓（ｆｅｔａｌ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ）组织的低温保存方法笔一个损伤移植模式。方法 通过病理学、组织化学和免疫组织化学的研究,选用胎龄１４天的Ｗｉｓｔａｒ大鼠,分离胚胎脊髓,逐步降温,最后置于液氮中保存。１５天后取出,快速复温,并植入损伤大鼠脊椎内。全部动物于伤后８周处死。结果 经过低温保存的移植物能够在异体脊髓内存活并与宿主组织融合,其在损伤移植区的胶质细胞增生少于对照组。     

产甘油假丝酵母酸性磷酸酯酶突变株的选育及其性质研究

运用化学诱变法从高产甘油的工业生产菌株产甘油假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｇｌｙｃｅｒｏｌｇｅｎｅｓｉｓ）ＷＬ２００２－５（Ｈ－）筛选获得两类酸性磷酸酯酶突变株．一类为阻遏型酸性磷酸酯酶缺失突变株;另一类为对磷调节不敏感的部分去阻遏调节突变株,并研究了它们的发酵性能     

脊髓Ⅱ号对大鼠损伤脊髓轴浆运输的影响

选取24只Wistar大白鼠，将其中18只制成胸髓右半侧横断损伤的大鼠模型，分别以脊髓Ⅱ号方剂、激素、生理盐水灌喂治疗。未造模的6只大鼠作为正常组，常规喂养。一个月后，注入辣根过氧化物酶（HRP），检测路经损伤区的上下行神经传导束始发核团中的标记细胞。发现脊髓Ⅱ号组HRP标记细胞数明显多于另两组，而与正常大鼠相比没有统计学上的显著差异。说明脊髓Ⅱ号方剂在恢复损伤传导来神经纤维的正常连续性，恢复神经元轴浆运输，促进神经细胞修复再生方面，有显著的效应。     

一氧化氮合成酶抑制剂对大鼠损伤脊髓血流及功能的影响

通过Nystrom脊髓后路压迫模型（35．0g／10min）造成脊髓中度损伤，应用激光多普勒血流仪观测了大鼠伤前30min，蛛网膜下腔注射生理盐水及亚硝基左旋精氨酸甲酯（L－NAME）0．15mg、1．5mg三组动物伤后局部脊髓血流的动态变化，并评定了伤后4周神经功能恢复情况。结果发现，L－NAME0.15mg短时间内抑制了脊髓血流，而L－NAME1．5mg较长时间抑制了脊髓血流。4周后L－NAME0．15mg组脊髓功能优于盐水组，而L－NAME1．5mg组脊髓功能较盐水组差。结果提示，适量的L－NAME由于短时间限制了一氧化氮（NO）的释放，有利于神经功能恢复；大剂量的L－NAME由于持续抑制了NO释放而致脊髓损伤加重。     

好氧发酵法生产甘油的转化率和生产强度

设计了小型玻璃连续发酵反应器，考察了甘油发酵的生产强度和转化率变化规律。结果表明：转化率随发酵时间的延长趋于一定值。对甘油发酵过程作碳源衡算，求得理论转化率ＹＰ＝１．５７；甘油浓度对发酵时间作图是一条“Ｓ”形曲线，生产强度随发酵时间有一峰值的变化。采用了高密发酵来提高发酵生产强度，结果表明：菌体浓度为１１％～１２％发酵液发酵６０ｈ甘油浓度达到１０８．９ｇ／Ｌ，生产强度为１．８１ｇ／（Ｌｈ），８０ｈ甘油浓度为１４２ｇ／Ｌ，生产强度为１．７７ｇ／（Ｌｈ）．发酵结束转化率达到５２％．     

同种胚胎脊髓移植对成年大鼠损伤脊髓组织形态与功能的修复作用

探讨大鼠胎脊髓组织移植对成年大鼠损伤脊髓组织形太民与功能的修复作用。在半切洞损伤的成年大鼠脊髓内，植入大鼠胚胎脊髓组织，术后行联合行为记分、诱发电位及组织学检查。结果“移植物能在宿主脊髓损伤部位存活，并能生长、分化、修复宿主脊髓的组织损伤，诱导宿主神经纤维系的建建，改善宿主损伤脊髓的神经传导，促进功能恢复。     

不同胎龄脊髓移植物对成年大鼠完全横断脊髓修复的影响

为探讨不同胎龄大鼠胚脊髓移植植物对成年大鼠脊髓完全横断修复作用的影响，在成年大鼠完全横断脊髓内造腔，分别移植胎龄为１２天、１３天和１４天的大鼠胚胎脊髓组织，术后行常规组织学检查。结果表明，共有８２．５％的移植物能够存活、生长、分化，并可不同程度地修复受体脊髓组织的损伤，以妊娠１３在的胚胎脊髓移植物的组织修复最为理想，部分标本显示它几乎完全修复横新的受体脊髓。     

间断鞘内注射不同浓度罗哌卡因对大鼠脊髓及神经根早期超微结构的影响

目的观察鞘内间断注射不同浓度罗哌卡因对大鼠脊髓、神经根早期超微结构的影响。方法雄性SD大鼠24只,按改良Yaksh法置入导管至脊髓腰段鞘内8 cm。随机分为4组(n=6):N 组(对照组)经导管注入0.9%氯化钠40μl,每1.5 h一次,共3次。R1、R2、R3注药方式同N组,分别注入0.5%、0.75%、1%罗哌卡因40μl。各组在注药后6 h取腰膨大处1mm3脊髓及神经根,电镜下观察其早期超微结构变化。结果N、R1、R2组脊髓、神经根早期超微结构基本正常。R3组大多数神经元细胞固缩,大多数粗面内质网扩张,线粒体及内质网结构模糊,有少数神经元细胞完全变性;部分有髓神经纤维变性,板层结构疏松;雪旺氏细胞固缩。与R3组比较,N、R1、R2组神经元胞质空泡形成或变性评分、灰质内空泡评分、髓鞘丢失断裂评分、内、外轴膜清晰度评分及神经根空泡变性评分均降低(P<0.05),而灰质内出血评分差异无统计学意义(P>0.05)。N、R1、R2组间以上评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论0.5、0.7%罗哌卡因间断鞘内注射对大鼠脊髓、神经根超微结构无明显影响,1%罗哌卡因则可造成脊髓损害。     

胚胎脊髓移植和损伤区上下神经根吻合对损伤大鼠脊髓神经元的影响

近年来实验方法治疗脊髓损伤取得了许多进展 ,如实验性胚胎脊髓移植、周围神经移植、神经细胞移植、大网膜移植、神经营养因子的应用等治疗脊髓损伤取得了较好的效果 ,但实验结果仍然不能令人满意[1 ,2 ] 。我们拟采用胚胎脊髓移植和损伤区上下神经根吻合的方法 ,观察手术后对防止成鼠脊髓轴突损伤引起的神经元萎缩的作用。材料与方法一、动物分组 :Wistar成年大鼠 ,体重 180～ 2 5 0 g,雌雄不拘 ,每个时相点每组 6只动物 ,正常对照组 6只动物 ,共 10 2只大鼠。随机将动物分为 A组 ,单损伤组 ;B组 ,损伤加损伤区上下神经根吻合组 ;C组 ,损…     

同种胚胎脊髓移植物对成年大鼠损伤脊髓组织形态与功能的修复作用

探讨大鼠胚胎脊髓组织移植物对成年大鼠损伤脊髓组织形态与功能的修复作用。在半切洞损伤的成年大鼠脊髓内，植入大鼠胚胎脊髓组织，术后行联合行为记分、诱发电位及组织学检查。结果：移植物能在宿主脊髓损伤部位存活，并能生长、分化、修复宿主脊髓的组织损伤，诱导宿生神经纤维联系的重建，改善宿主损伤脊髓的神经传导，促进功能恢复。以上结果提示：胚胎脊髓移植物对成年大鼠损伤脊髓组织形态与功能均具有修复作用。     

颈部脊髓损伤患者神经丝蛋白与ASIA功能分级的关系

【摘要】目的 探讨颈部脊髓损伤患者神经丝蛋白与美国脊髓损伤学会(ASIA)功能分级的关系。方法 选取2016年2月至2019年3月本院收治234例颈部脊髓损伤患者作为本文研究对象,根据颈髓损伤ASIA分级标准,将患者分成五组,即A组(完全性损伤,n=33),B组(不完全性损伤,n=31),C组(不完全性损伤,n=28),D组(不完全性损伤,n=53)和E组(正常,n=89)。比较不同ASIA功能分级患者血清神经丝蛋白水平,并应用Pearson法分析血清神经丝蛋白与ASIA功能分级的相关性。结果 五组患者血清神经丝蛋白水平差异有统计学意义(P<0.05);A组患者血清神经丝蛋白水平明显高于B组、C组、D组和E组,B组患者血清神经丝蛋白水平明显高于C组、D组和E组(P<0.05),C组患者神经丝蛋白水平明显高于D组和E组,且D组患者血清神经丝蛋白水平明显高于E组(P<0.05);血清神经丝蛋白与脊髓损伤ASIA功能分级呈负相关(r=-0.927, P<0.001)。结论 血清神经丝蛋白水平与ASIA功能分级呈负相关,颈部脊髓损伤的严重程度与血清神经丝蛋白水平的提高有关。