骨巨细胞瘤中的多核巨细胞体外骨吸收研究

目的：比较破骨细胞与骨巨细胞瘤中多核巨细胞的特点，明确后者的性质和来源。方法：用倒置相差显微镜观察体外培养的多核巨细胞的一般形态及降钙素对它的影响；用骨片与多核巨细胞共同培养法观察多核巨细胞的体外骨吸收功能，用扫描电镜观察骨吸收陷窝，Ｇｏｍｏｒｉ染色观察多核巨细胞的酸性磷酸酶活性。结果：倒置相差显微镜下可见多核巨细胞胞核较多（２０个以上），胞浆周边不规则，有伪足样突起；胞浆内可见较多大小不等的空泡；降钙素（１００μｇ·Ｌ－１）可抑制多核巨细胞的伪足样运动；多核巨细胞与灭活的骨片共同培养时可见骨吸收陷窝形成，扫描电镜下可见吸收陷窝底面有原纤维；Ｇｏｍｏｒｉ染色时可见多核巨细胞的酸性磷酸酶呈阳性。结论：证实了多核巨细胞具有破骨细胞的形态特征与骨吸收功能，可能来源于骨髓的破骨细胞前体细胞     

骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源

目的:研究骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源,探讨骨巨细胞瘤是破骨细胞或者是肿瘤细胞。方法:本次试验标本30例为解放军222医院病理科经病例证实的手术标本。采用链菌素亲生物素一过氧化物酶连接法(sp)免疫组化技术。抗体PCNA、P53、P21、CD68、AACT以及SP染色试剂均为即用型,阳性判断以细胞浆、细胞膜或细胞核着棕色颗粒为阳性反应,以缓冲液PBS代替一抗作阴性对照,确定骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源。结果:30例骨骨细胞瘤中的多核巨细胞均不表达PCNA、p53及c-er Bb2、有8例表达p21,其包浆课件棕褐色的阳性颗粒,所有标本中的巨细胞均呈现CD68强阳性,棕褐色的颗粒绝大多数位于细胞浆中,少数多核巨细胞呈Vimentin阳性反应,还有一部分多核巨细胞呈Lysozyme中性或阳性反应。结论:巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞在形态学及酶组织化学与免疫组织化学与破骨细胞相似。多核巨细胞具有一定的破骨能力,由此可见,多核巨细胞是破骨细胞,属于终末细胞,而不是肿瘤细胞。     

骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源

目的：研究骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源,探讨骨巨细胞瘤是破骨细胞或者是肿瘤细胞。方法：本次试验标本30例为解放军222医院病理科经病例证实的手术标本。采用链菌素亲生物素一过氧化物酶连接法（sp）免疫组化技术。抗体 PCNA、P53、P21、CD68、AACT 以及 SP 染色试剂均为即用型,阳性判断以细胞浆、细胞膜或细胞核着棕色颗粒为阳性反应,以缓冲液 PBS 代替一抗作阴性对照,确定骨巨细胞瘤中多核巨细胞的来源。结果：30例骨骨细胞瘤中的多核巨细胞均不表达 PCNA、p53及 c －erBb2、有8例表达 p21,其包浆课件棕褐色的阳性颗粒,所有标本中的巨细胞均呈现 CD68强阳性,棕褐色的颗粒绝大多数位于细胞浆中,少数多核巨细胞呈 Vimentin 阳性反应,还有一部分多核巨细胞呈 Lysozyme 中性或阳性反应。结论：巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞在形态学及酶组织化学与免疫组织化学与破骨细胞相似。多核巨细胞具有一定的破骨能力,由此可见,多核巨细胞是破骨细胞,属于终末细胞,而不是肿瘤细胞。     

IL—1α促进骨巨细胞瘤中破骨样细胞体外骨吸收研究

目的：比较骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞骨吸收的功能特点。方法：体外分离骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养，观察ＩＬ－１α对多核巨细胞体外骨吸收的影响。结果：ＩＬ－１α可使多核巨细胞骨吸收陷窝的数目和面积增加；其作用随剂量增加而增强；ＩＬ－１α对多核巨细胞的促进作用具有长效性。结论：ＩＬ－１α具有促进多核巨细胞体外骨吸收作用，说明多核巨细胞与破骨细胞在骨吸收功能方面有相似性。     

IL-1α促进骨巨细胞瘤中破骨样细胞体外骨吸收研究

目的：比较骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞骨吸收的功能特点。方法：体外分离骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养，观察ＩＬ１α（５０μｇ／Ｌ，１００μｇ／Ｌ）对多核巨细胞体外骨吸收的影响。结果：ＩＬ１α可使多核巨细胞骨吸收陷窝的数目和面积增加；其作用随剂量增加而增强；ＩＬ１α对多核巨细胞的促进作用具有长效性。结论：ＩＬ１α具有促进多核巨细胞体外骨吸收作用，说明多核巨细胞与破骨细胞在骨吸收功能方面有相似性。     

钛合金颗粒存在下破骨细胞的体外诱导培养

目的 探讨钛合金颗粒存在下小鼠巨噬细胞体外诱导培养为成熟破骨细胞的方法.方法 获取小鼠骨髓巨噬细胞,采用巨噬细胞集落刺激因子依赖性前体细胞诱导法,于钛合金Ti-6Al-4V颗粒存在条件下进行诱导培养,培养后细胞行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,RT-PCR法检测破骨细胞特异性TRAP、CK、CR mRNA表达;采用相同方法于骨片上诱导培养细胞并观察骨吸收陷窝.结果 Ti-6Al-4V颗粒存在下培养第6天细胞开始出现融合,第9天出现多核巨细胞,TRAP染色阳性,细胞内有破骨细胞特异性TRAP、CK、CR mRNA表达;于骨片上诱导培养的细胞可形成骨吸收陷窝.结论 钛合金颗粒存在下,成功将小鼠骨髓巨噬细胞体外诱导培养为成熟破骨细胞.     

钛合金颗粒存在下破骨细胞的体外诱导培养

目的 探讨钛合金颗粒存在下小鼠巨噬细胞体外诱导培养为成熟破骨细胞的方法。方法 获取小鼠骨髓巨噬细胞,采用巨噬细胞集落刺激因子依赖性前体细胞诱导法,于钛合金Ti-6Al-4V颗粒存在条件下进行诱导培养,培养后细胞行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,RT-PCR法检测破骨细胞特异性TRAP、CK、CR mRNA表达;采用相同方法于骨片上诱导培养细胞并观察骨吸收陷窝。结果 Ti-6Al-4V颗粒存在下培养第6天细胞开始出现融合,第9天出现多核巨细胞,TRAP染色阳性,细胞内有破骨细胞特异性TRAP、CK、CR mRNA表达;于骨片上诱导培养的细胞可形成骨吸收陷窝。结论 钛合金颗粒存在下,成功将小鼠骨髓巨噬细胞体外诱导培养为成熟破骨细胞。     

骨巨细胞瘤中p53基因的异常

应用免疫组化及分子杂交方法研究了１０例骨巨细胞瘤及４例胎儿骨标本。大部分多核巨细胞及约２０％－４０％的单核基质细胞对抗巨噬细胞单抗标记呈阳性，胎儿骨中破骨细胞对抗巨噬细胞单抗标亦呈阳性。在抗Ｐ５３蛋白单抗染色中，３０％－６０％的ＳＴＣ标记阳性。     

骨巨细胞瘤中的多核巨细胞体外骨吸收研究

目的：比较破骨细胞与骨巨细胞中多核巨细胞的特点，明确后的性质和来源。方法：用倒置相差显微镜观察休外培养的多核巨细胞的一般形态及降钙素对它的影响，用骨片与多核巨细胞共培养法观察多核巨细胞的体外骨吸收功能，用扫描电镜观察同吸收陷窝，Ｇｏｍｏｒｉ染色观察多核巨细胞的酸性酸酸酶活性，结果：倒置相差显微镜下可见多核巨细胞核较多（２０个以上）胞浆周边不规则，有伪足样突起，胞闪内可可见较多大小不等的空泡；降钙     

骨巨细胞瘤体外培养及其生物学特性的观察

１９８３～１９９２年作者通过组织培养，组化及免疫组化、电镜、细胞遗传学，动物接种等方法，对骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）的生物学特性进行研究，认为ＧＣＴ的基质细胞有两种，即间叶性基质细胞及巨噬细胞性基质细胞，巨噬细胞性基质细胞可能为许多种不同的巨噬细胞混合体，这两种类型细胞在瘤组织内互相依赖存活。在体外培养见巨噬细胞性基质细胞逐渐减少而消亡，间叶性基质细胞则在没有巨噬细胞性基质细胞的情况下也容易老化及消亡，故目前尚未有本瘤的细胞株建立。多核巨细胞是一反应性及终末性细胞，可能由于基质细胞分泌目前尚末清楚的细胞因子，吸引血中破骨细胞前身的单核巨噬细胞到瘤组织内，并促进其分化成破骨细胞样多核巨细胞。     

骨巨细胞瘤内多核巨细胞的超微结构观察

本文观察了六例骨巨细胞瘤,探讨了多核巨细胞的超微結构改变,其组织发生有迹象表明由单核基质细胞融合形成的。根据形态特征、恒定存在和生物学行为综合分析,认为多核巨细胞也是骨巨细胞瘤的实质瘤细胞。     

Apoptosis in giant cell tumors of bone

Although giant cell tumor of bone (GCT) is characterized by the extensive multinucleated giant cells among mononuclear stromal cells, proliferation of these cells and multinucleation are not without limit in certain cases. Few studies on oncogenesis of GCT have focused on the negative growth control, including growth arrest and apoptosis. The purpose of this study was to investigate the mechanism of cell death in multinucleated giant cells and stromal cells of GCT. In this study, we have demonstrated that GCT cells can undergo apoptosis. The cells in surgical specimen were positively stained in situ nick end labeling methods, and electron micrographs showed the morphological changes associated with apoptosis in some of stromal cells and multinucleated giant cells. A candidate responsible for this apoptosis was then examined using cultured GCT cells. We focused on Fas that is a major trigger of apoptosis. Cultured GCT cells expressed detectable amount of Fas on their surface. Although GCT cells did a little undergo apoptosis following treatment with anti-Fas alone, combination treatment with cyclohexamide led to an increase in apoptosis of the GCT cells. These data suggested that the sensitizing activity of cyclohexamide on anti-Fas mediated cytotoxicity could happen in vitro.     

骨巨细胞瘤的细胞生物学

目的 探讨骨巨细胞瘤中多核巨细胞和单核基质细胞的起源及在肿瘤中的作用,方法 应用免疫组织化学方法检测50例骨巨细胞瘤手术标本的增殖细胞核抗原（PCNA）、巨噬细胞抗原（CD68）、波形蛋白、抗糜蛋白酶（AACT）、抗胰蛋白酶（ACT）以及溶菌酶的表达和分布状况。结果 多核巨细胞主要表达CD68、AACT、ACT以及溶菌酶,无一表达PCNA;单核基质细胞可分为两种类型,以纤维母细胞型占优势,主要表达波形蛋白和PCNA;组织细胞型主要表达CD68、AACT、ACT以及溶菌酶。结论 多核巨细胞并非肿瘤细胞,它可能来自单核巨噬细胞系统,单核基质细胞中的纤维母细胞型为肿瘤的主要增殖成分,可能来自间充质。     

Effect of cytokines on in vitro bone resorption by cells isolated from giant cell tumor of bone

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｃｙｔｏｋｉｎｅｓｏｎｉｎｖｉｔｒｏｂｏｎｅｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎｂｙｃｅｌｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｇｉａｎｔｃｅｌｔｕｍｏｒｏｆｂｏｎｅ．ＭｅｔｈｏｄｓＭｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｓｔｒｏｍ...     

骨巨细胞瘤Jaffe分级的PCNA评价

目的观察骨巨细胞瘤Ｊａｆｆｅ组织分级与瘤细胞增殖的关系。方法应用免疫组化ＡＢＣ法对２７例不同组织级别的骨巨细胞瘤进行增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）检测。结果ＰＣＮＡ的阳性反应仅见于基质细胞的胞核中，多核巨细胞呈阴性反应。不同组织级别的骨巨细胞瘤之间，ＰＣＮＡ阳性检出率无显著差别（Ｐ＞０．０５）。结论骨巨细胞瘤Ｊａｆｆｅ分级系统与肿瘤细胞的增殖情况无关；多核巨细胞非肿瘤细胞。     

骨巨细胞瘤瘤组织中M-CSF、TNF_(-α)的检测及其意义

目的：探讨细胞因子与骨巨细胞瘤局部溶骨的关系。方法：通过ＥＬＩＳＡ法、Ｗｅｓｔｅｎｂｌｏｔ法和免疫组化法对１０例骨巨细胞瘤、５例骨肉瘤和５例正常人血清进行了ＴＮＦ－α和Ｍ－ＣＳＦ表达及定位检测。结果：骨巨细胞瘤组织ＴＮＦ－α含量和Ｍ－ＣＳＦ表达率明显高于骨肉瘤和正常人血清。ＴＮＦ－α由骨巨细胞瘤的部分单核基质细胞和多核巨细胞分泌;而Ｍ－ＣＳＦ由部分单核基质细胞分泌,多核巨细胞则不表达。结论：骨巨细胞瘤中各种细胞分泌不同的细胞因子可能参与该肿瘤的局部骨质吸收。     

人外周血CD68+单核细胞体外的分选及诱导分化为破骨细胞

目的 建立高纯度人活性破骨细胞方法,用于对破骨细胞生物化学和分子生物学的研究。方法 用免疫磁珠法在人类外周血单核细胞中分选出CD68⁺细胞,用流式细胞仪分析分选效能,体外在10^-8 mol/L地塞米松及25 μg/L巨噬细胞集落刺激因子的培养条件下用16 μg/L可溶性核因子κB受体活化子配体诱导(s-RANKL)分化,用降钙素受体抗体免疫组化染色及抗酒石酸磷酸酶染色鉴定,扫描电镜观察骨片贴壁细胞及骨吸收陷窝。结果 分选获得CD68⁺单核细胞纯度为(93.06±0.61)%(n=4),经核因子κB受体活化子配体诱导后降钙素受体抗体免疫组化染色阳性,抗酒石酸磷酸酶染色,扫描电镜观察有骨吸收陷窝形成。结论 人外周血单核细胞中CD68⁺细胞是破骨前体细胞,在RANKL在诱导下分化为成熟破骨细胞。     

uPA-uPAR系统对骨巨细胞瘤细胞p44(MAPK)信号转导的影响

目的研究uPA／uPAR系统对骨巨细胞瘤细胞MAPK信号转导的影响。方法分离并培养骨巨细胞瘤细胞，用免疫组化检测骨巨细胞瘤组织中uPAR的表达水平，用免疫共沉淀方法检测外源激活或阻断uPA—uPAR对骨巨细胞瘤细胞信号转导通路的p44（MAPK）蛋白磷酸化水平的影响。结果仅有单核基质细胞可以在体外培养中长期生存；在骨巨细胞瘤组织中uPAR主要表达在部分单核基质细胞和一些多核巨细胞的胞膜上；将uPA—ATF加入培养的骨巨细胞瘤细胞后，细胞信号通路上的p44蛋白磷酸化水平明显增高。用uPAR抗体处理后，细胞p44蛋白磷酸化水平明显降低。说明uPA—ATF具有细胞信号转导活性，该活性受uPAR拮抗剂的影响。结论本实验检测到uPA—uPAR系统是通过p44（MAPK）信号转导通路转导信息，从而调节骨巨细胞瘤细胞增殖、分化及其他生物学行为。     

1,25(OH)2维生素D3诱导大鼠骨髓单核细胞形成破骨细胞

目的 观察1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2 D3]诱导成年大鼠骨髓来源的单核细胞形成多核破骨细胞的作用.方法 实验分为单核细胞诱导组和全骨髓诱导组,每组各10只大鼠.密度梯度离心法分离大鼠骨髓中的单核细胞,α-MEM培养液中加入10-8 mol/L的1,25(OH)2 D3诱导单核细胞向破骨细胞分化.利用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、倒置相差显微镜和扫描电镜,观察诱导不同时相TRAP阳性(TRAP )多核细胞的形态学特征、特异性酶表达、以及骨吸收陷窝.进而计数诱导的破骨细胞数量,鉴定其功能活性,并与全骨髓诱导方法比较.结果 骨髓单核细胞诱导组在培养第7 d出现TRAP 多核细胞,第14 d TRAP 多核细胞数量达峰值,第21 d TRAP 多核细胞数量开始减少.从培养第14 d到第23 d,单核细胞诱导组TRAP 多核细胞数量多于全骨髓诱导组(P＜0.05);培养第10 d到第23 d单核细胞诱导组骨吸收陷窝数量多于全骨髓诱导组 (P＜0.05).单核细胞诱导组破骨细胞数量高峰期可持续7 d,全骨髓诱导法仅持续3 d.结论 1,25(OH)2 D3能够诱导成年大鼠骨髓来源的单核细胞形成破骨细胞;所诱导的破骨细胞的数量和峰值持续时间、以及骨吸收活性均高于全骨髓诱导方法.     

肺原发性巨细胞型恶性纤维组织细胞瘤（附一例报告）

报道1例肺原发性巨细胞型恶性纤维细胞细胞瘤。肉眼见右肺下叶两个分界清楚的结节,切面呈灰黄、灰红色,有骨化、灶性出血和坏死。镜下见弥漫分布的瘤细胞呈圆形、椭圆形,部分为梭形,并形成典型的车辐状结构,瘤组织内可见大量多核瘤巨细胞或破骨细胞样多核巨细胞,肿瘤的边缘见反应性骨组织形成。瘤组织中可见零星分布的凋亡多核巨细胞。免疫组化瘤细胞对vimentin、alpha-1-antitrypsin、lysozyme和mac387呈阳性,但对cyto-keratin、actin、S－100、NSE和NF均呈阴性。肺原发性巨细胞型恶性纤维组织细胞瘤非常罕见,临床治疗主要采取根治性手术切除。