建立实验性自身免疫性重症肌无力大鼠模型的一种方法

目的:建立实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠模型。方法:采用亲和层析技术从电鳗电器官中提取、纯化乙酰胆碱受体,以此免疫Lewis大鼠,观测其临床表现、乙酰胆碱受体抗体及重复神经电刺激等变化。结果:模型组大鼠出现肌无力症状,重复神经电刺激动作电位衰减率及乙酰胆碱受体抗体检测均为阳性,有统计学意义,对照组无明显改变。结论:乙酰胆碱受体主动免疫Lewis大鼠可成功诱导产生EAMG大鼠模型。     

实验性自身免疫性重症肌无力动物模型的建立

实验性自身免疫性重症肌无力动物模型在临床表现、药理学、电生理、免疫学及组织学表现等方面已经证明与重症肌无力患者极为相似，是进一步研究人类重症肌无力的极佳工具。介绍实验性自身免疫性重症肌无力动物模型的各种制备方法、其检测指标及影响动物模型成功的因素。     

补脾强力方对实验性自身免疫重症肌无力大鼠作用研究

目的:研究补脾强力方对实验性自身免疫重症肌无力大鼠的治疗作用及量-效关系。方法:选择Lewis大鼠,经造模,随机分为正常对照组、模型对照组、强的松5.4 mg/kg组、补脾强力方9.49 g/kg、7.12 g/kg、4.75 g/kg组,除正常对照组外,均采用鼠源性AchR-α亚基97-116肽段序列(R97-116)免疫接种复制实验性自身免疫重症肌无力大鼠模型。给药后,采用ELISA法检测各组大鼠血清中AchR-Ab水平及细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-17的含量。结果:补脾强力方对实验性自身免疫重症肌无力大鼠体质量的作用效果与给药剂量的高低成正相关;与模型对照组相比,强的松组5.4 mg/kg组、补脾强力方9.49 g/kg、7.12 g/kg、4.75 g/kg组中AchR-Ab水平及细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-17的含量明显下降,且下调趋势与剂量高低成正相关。而大鼠血清中IL-10的含量,各给药组间均无明显差异。结论:补脾强力方可明显改善实验性自身免疫重症肌无力大鼠的体质量,同时,可明显下调该模型大鼠血清中细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-17的含量,抑制AchR-Ab的产生而起到治疗作用,且干预效果与给药剂量成正相关。     

葛根复方对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠血清RNS和AchR-Ab表达影响

目的研究葛根复方(葛根、黄芪、丹参、苍术、黄柏等)对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠腓肠肌重复性神经刺激电位(RNS)和乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab)表达的影响,并探讨其机制。方法将100只Lewis大鼠随机分为4组,除正常组,模型组、强的松组、葛根复方组采用皮下注射鼠源性AchR-α亚基97~116肽段方法建立重症肌无力的实验模型,造模成功的两组分别给予强的松、葛根复方灌胃4周,观察大鼠治疗前后的RNS和AchR-Ab的变化。结果治疗前与正常组比较,造模各组大鼠的RNS都有明显衰减;治疗后与模型组比较,强的松组和葛根复方组的RNS衰减程度都减弱;治疗后与强的松组比较,葛根复方组的RNS衰减程度明显低。治疗前造模各组大鼠的AchR-Ab表达水平明显高于正常组(P0.01);强的松组和葛根复方组治疗后和模型组比较,两组中AchR-Ab表达水平明显下降(P0.05);治疗后强的松和葛根复方组比较,葛根复方组的AchR-Ab表达水平明显偏低(P0.05)。结论葛根复方能促进实验性自身免疫性重症肌无力大鼠腓肠肌的肌力恢复。     

实验性自身免疫性重症肌无力动物模型的建立

实验性自身免疫性重症肌无力动物模型在临床表现、药理学、电生理、免疫学及组织学表现等方面已经证明与重症肌无力患者极为相似,是进一步研究人类重症肌无力的极佳工具.介绍实验性自身免疫性重症肌无力动物模型的各种制备方法、其检测指标及影响动物模型成功的因素.     

重肌灵片对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的影响

目的观察重肌灵片对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的影响。方法用从电鳐电器官提取的含 N_2-AchR 粗提液加完全弗氏佐剂免疫 Lewis 大鼠制成 EAMG,动物于第2次免疫后第5天开始给药,对 EAMG 大鼠的临床症状、肌力、运动能力、肌电图,血清中抗 N_2-AchR-Ab、突触后膜 N_2-AchR 的数目以及淋巴细胞转化等指标进行观察。结果重肌灵片可以改善 EAMG 大鼠的临床症状,提高该鼠体重、肌力和运动能力,抑制血清中抗 N_2-AchR-Ab,降低连续低频电刺激后出现的肌肉收缩幅度的衰减,提高突触后膜 N_2AchR 数目。抑制 N_2-AchR 诱导的 EAMG 大鼠特异性淋巴细胞增殖反应,但对 ConA 诱导的非特异性增殖反应有一定增强作用(P<0.01或P<0.05)。结论重肌灵片药理作用不同于西药的免疫抑制剂,具有选择性免疫调节作用,即下调针对 N_2-AchR 特异性病理免疫性反应,对正常免疫功能不抑制反而增强。     

升陷汤对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠免疫机制研究

目的:探讨升陷汤治疗实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental Autoimmune Myasthenia Gravis,EAMG)大鼠的免疫机制。方法:采用人工合成鼠源乙酰胆碱受体(acetylcholinergic receptor,ACh R)α亚基97-116肽段免疫Lewis大鼠制备EAMG模型,经模型评估确定建模成功后将大鼠随机分为佐剂对照组,模型对照组,西药对照组(强的松),升陷汤低、中、高剂量组。给药1个月后检测各组大鼠肌电图,血清中乙酰胆碱抗体(ACh R-Ab)滴度和IFN-γ(Interferon,IFN)含量,及外周血中淋巴细胞亚型CD_4~+、CD_8~+细胞及CD_4~+/CD_8~+的比例。结果:与佐剂对照组相比,造模组AChR-Ab、IFN-γ均显著上升(P<0.05);与模型对照组相比,给药组的AChR-Ab、IFN-γ含量都显著下降(P<0.05)。与模型对照组相比:升陷汤低、中剂量组CD_4~+/CD_8~+显著下降(P<0.01);西药对照组CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+显著下降(P<0.01)。结论:升陷汤可能通过升高CD_4~+淋巴细胞含量,降低CD_4~+/CD_8~+的比例,从而降低IFN-γ含量,进而抑制ACh Rab的合成或促进其降解,起到治疗EAMG大鼠的作用。     

重症肌无力危象20例临床分析

目的总结重症肌无力危象的临床特点及急救和预防经验。方法回顾性分析1998年-2008年我院神经内科诊治的82例重症肌无力患者20例重症肌无力危象的病例资料。结果死亡1人，痛死率1．22％。综合利用气管切开正压辅助呼吸、激素治疗、丙种球蛋白静脉输注、胆碱酯酶抑制剂、抗生素预防感染等可改善重症肌无力危象的预后，且明显降低病死率。结论发生危象的主要为Osserman Ⅲ型和Ⅳ型患者。感染发热性疾病及加、减药量过快或突然停药为危象发生的主要诱因。适当调整胆碱酯酶抑制剂的用量，联合应用甲泼尼龙和丙种球蛋白冲击，注意控制感染等综合措施治疗。可使肌无力危象病死率明显降低。     

乙酰胆碱受体α亚基97-116肽段制作实验性重症肌无力模型的研究

目的 研究用乙酰胆碱受体α亚基97-116肽段制作实验性重症肌无力(EAMG)的动物模型.方法 给实验组Lewis鼠皮下注射人工合成的鼠源性乙酰胆碱受体α亚基97-116肽段,观察接种后大鼠一般情况及体重、Lennon评分变化,应用低频重复电刺激检测电衰减反应,并与对照组鼠比较.结果 模型组大鼠在第1次强化免疫后逐渐出现肌无力症状,体重增长缓慢或下降,甚至消瘦,毛发变得暗淡、粗糙甚至脱落,再次加强免疫后上述症状明显加重.Lennon临床评分29只评分在1级以上,并行RNS检测,36只模型鼠中32只5 Hz重复刺激电衰减率>10%,而对照组衰减率均<10%,两组比较差异有显著性(P<0.01).结论 皮下注射鼠源性乙酰胆碱受体α亚基97-116肽段可成功制作实验性自身免疫性重症肌无力大鼠模型.     

针刺对重症肌无力模型兔血清IL-18的影响

目的:观察针刺阳陵泉对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)兔乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)和白介素18(IL-18)的影响。方法:选用3月龄雌性日本大白兔造模,评估后随机分组:模型组、单纯针刺组、单纯中药组、针药结合组。予以相应处理。各组于第0、4、8周取血,测定AChR-Ab和IL-18。结果:针刺阳陵泉和中药均能不同程度地降低EAMG兔血液AChR-Ab和IL-18的含量,针药结合有协同作用(P<0.01)。结论:针灸可以影响EAMG兔血液AChR-Ab和IL-18含量,这可能是针灸治疗重症肌无力的作用机制之一。     

强力方对实验性自身免疫性重症肌无力细胞因子含量的影响

为研究强力方（黄芪、熟地黄、仙灵脾、党参、白术、升麻、葛根、锁阳、甜苁蓉、制首乌、炙甘草）对实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）细胞因子含量的影响,采用乙酰胆碱受体（ＡｃｈＲ）与福氏佐剂乳化多次免疫ＳＤ大鼠复制ＥＡＭＧ模型,以强的松作为对照,观察该方对模型大鼠体重、活动情况、负荷游泳时间以及乙酰胆碱受体抗体（ＡｃｈＲ－Ａｂ）滴度、肌电图、血清ＩＦＮ－ｒ和ＴＮＦ－ａ含量等的影响结果表明强力方对ＥＡ     

针刺治疗重症肌无力对AchRab的影响及其临床意义

目的：研究针刺治疗对重症肌无力（MG）患者乙酰胆碱受体抗体（AchRab）的影响及AchRsb与临床分型和疗效的相关性。方法：采用针刺治疗MG，检测AchRab。结果：MG患者治疗前后AchRab组间比较差异有显著性意义（P＜0．005）；不同临床分型的MG患者（治疗前）AchRab组间比较差异无显著性意义（P＞0．05）；不同疗效的MG患者（治疗前）AchRab组间比较差异有显著性意义（P＜0．01）。结论：针刺能降低AchRab；AchRab与临床分型无关，与疗效密切相关。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎Wistar大鼠模型建立

目的:用豚鼠脑脊髓匀浆(GPSCH)和百日咳杆菌诱导Wistar大鼠,建立实验性自身免疫性/过敏性/变态反应性脑脊髓炎(experi mental autoi mmune/allergic encephalomyelitis,EAE)模型。方法:将大鼠随机分为实验组A,阳性对照组B,阳性对照组C,正常对照组D。观察免疫后20天内各组动物EAE的发生率及临床神经功能评分。免疫后第20天处死全部动物,取脑、脊髓组织标本,在光镜下作病灶计数后相加,进行显著性检验。结果:A组动物从第12天起出现EAE症状,在随后的5~6天内发病数急速增加、严重程度加重,甚至死亡,组织学检查出现典型的急性EAE病理表现;B组动物从免疫后第15天起出现EAE症状,在随后的2~3天内发病数及严重程度轻度增加,但症状在免疫后第16天开始恢复。A组发病率、临床神经功能评分和病理改变都较B组明显,P<0.05。C、D组没有出现EAE症状。结论:本研究用豚鼠脑脊髓匀浆和百日咳杆菌免疫Wistar大鼠,诱导EAE模型的方法是稳定有效的,且可重复性高。     

双向电泳-质谱法探索实验性重症肌无力大鼠疾病相关蛋白

目的：分离和鉴定实验性自身免疫性重症肌无力大鼠血清差异表达蛋白，寻找并比较疾病相关蛋白，以进一步阐明重症肌无力的发病机制。方法：采用二维蛋白电泳技术分离正常组和模型组大鼠血清差异表达蛋白，凝胶经银染显色后，Bio—Rad凝胶扫描仪扫描，Imagemaster图像软件分析，差异蛋白点用基质辅助激光解析电离-两级飞行时间串联质谱法进行鉴定。结果：通过双向电泳，建立血清蛋白质双向电泳图谱，重症肌无力组血清双向电泳图谱可见678个蛋白点，而正常对照组可见702个蛋白点。选取9个具有明显差异的蛋白点进行质谱鉴定，共鉴定出5种蛋白质。结论：正常组和模型组大鼠间存在一定的差异表达蛋白。该类蛋白为一些与机体免疫应答、信息调控相关的蛋白质。     

补脾益肾起痿汤对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠模型免疫机制的影响

目的:探讨中药复方补脾益肾起痿汤对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠模型免疫机制的作用机理。方法:通过人工合成免疫原方法构建EAMG大鼠模型,应用抗原包被法检测大鼠血清AChR-Ab的水平变化,采用免疫光比浊法检测大鼠血清总IgG、补体C3、TGF-β1的浓度变化。结果:运用人工合成的鼠源性AChR-α亚基97～116肽段为免疫原诱导LEWIS大鼠成功建立实验动物模型,模型组大鼠抓握、撕咬无力,毛发不泽,体质量增长缓慢或减轻;重复神经电刺激测肌电波幅衰减大于10%;血清AChR-Ab水平、总IgG浓度明显升高,TGF-β1、补体C3浓度明显下降。经补脾益肾起痿汤治疗4周后,大鼠血清AChR-Ab水平、总IgG浓度均有不同程度的下降,TGF-β1、补体C3浓度上升,与模型组相比均有显著性差异(P0.01)。结论:补脾益肾起痿汤可有效调节EAMG大鼠免疫功能,降低AChR-Ab浓度水平,可指导临床对重症肌无力患者的中医药诊疗。     

他克莫司治疗重症肌无力疗效观察

目的 观察他克莫司治疗重症肌无力(MG)的疗效、安全性及对胸腺瘤复发的影响。方法 选取2020年2月—2022年2月就诊于河北省重症肌无力临床医学研究中心成员单位的63例MG患者,均给予他克莫司治疗,起始剂量为3 mg/d,维持剂量为2～6 mg/d。分别于治疗前及治疗1,3,6个月时进行重症肌无力日常生活量表(MG-ADL)、重症肌无力肌群耐力评分量表(MGMES)评估及血清乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)水平检测,统计治疗1,3,6个月后的临床疗效,动态复查胸腹CT观察有胸腺瘤病史的6例患者是否存在胸腺瘤复发,记录治疗过程中不良事件发生情况。结果 治疗1个月后,患者MG-ADL评分、MGMES评分及血清AchR-Ab水平与治疗前比较差异均无统计学意义(P均>0.05);治疗3个月、6个月后MG-ADL评分、MGMES评分及治疗6个月后血清AchR-Ab水平均明显低于治疗前(P均<0.05),且呈逐渐降低趋势。治疗1个月后总有效率为9.52%(6/63),治疗3个月后为46.03%(29/63),治疗6个月后为69.84%(44/63)。有胸腺瘤病史的6例患者,治疗1,...     

益筋方对实验性自身免疫性重症肌无力小鼠临床症状及IL-2、Bcl-2的影响

目的 探寻温肾活血、益气升清的益筋方对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)小鼠的治疗作用.方法 采用重症肌无力患者的血清被动免疫C57BL/6小鼠,建立EAMG模型.分组后分别给予益筋方、强的松灌胃21d,期间观察小鼠体重和肌无力症状,处死动物后采血、取胸腺.利用流式细胞仪技术,以IL-2为指标,观察益筋方、强的松对EAMG小鼠细胞因子的影响;检测胸腺Bcl-2的表达.结果 益筋方、强的松均能改善EAMG小鼠肌无力症状,降低IL-2水平.减低胸腺Bcl-2的表达.结论 益筋方能改善EAMG小鼠肌无力症状,通过影响IL-2、Bcl-2来调控免疫,起到治疗重症肌无力的作用.     

中医药治疗重症肌无力研究进展

从辨证论治、经验方、单方、针灸、中西医结合疗法等方面,综述近年来中医药治疗重症肌无力的研究进展。