CD34、CD14、CD10、CD31和因子Ⅷ在人胚胎卵黄囊血岛、AGM区和肝造血细胞中的表达

目的研究CD34、CD31、CD14、CD10和凝血因子Ⅷ(FⅧ)在人胚胎发育第3～12周卵黄囊血岛、PAS／主动脉-生殖腺-中肾(AGM)区和肝造血细胞的表达。方法药物流产受精龄3～12周人胚胎共32例，石蜡包埋切片，苏木精一伊红和免疫组化染色，光镜观察。结果第3～4周人胚卵黄囊血岛由外周的血管内皮细胞和中心的造血细胞组成。血岛的血管内皮细胞和造血细胞均为CD10、CD14、CD31和FⅧ表达阳性。此外，血管内皮细胞还表达CD34，而造血细胞为CD34阴性。第32天，卵黄囊血岛的造血细胞已经迁移。在第4周，主动脉、中肾和肝造血灶内开始出现CD34、CD10、CD14、CD31和FⅧ阳性的造血细胞。到第7周，CD10、CD14阳性细胞数量达到最高。到第11～12周，上述各区域中多为无核的红细胞，CD34、CD10、CD14、CD31和FⅧ表达为阴性。第4～12周，胚体内所有血管内皮细胞均为CD34阳性。结论卵黄囊血岛造血细胞和内皮细胞共表达CD10、CD14、CD31和FⅧ，卵黄囊血管内皮细胞表达CD34，而造血细胞不表达CD34。背主动脉、中肾和肝的造血细胞主要在第4～7周表达CD34、CD10、CD14、CD31和FⅧ。抗CD34抗体可标记人胚胎3-12周各种血管的内皮细胞。     

VEGFA、VEGFC及其受体和angiopoietin-1/angiopoietin-2及其受体在发育第3-12周人胚胎肝的表达

本研究观察VEGFA和VEGFC及其受体和angiopoietin-1／angiopoietin-2及其受体在发育第3—12周人胚胎肝的表达。在征得意外流产孕妇同意并签字后，收集其意外流产受精龄为第3—12周的人胚胎，4％多聚甲醛固定，石蜡包埋切片，HE和免疫组织化学染色，光镜观察。结果表明：在发育第4周，肝由少量肝索组成，肝内未见造血细胞和血细胞。肝内大、圆、有核的原始血细胞于发育第5周开始出现，并强表达VEGFA、flt-4和Tie-2，其数量在发育第7周达高峰。第11—12周，阳性细胞数量减少。这类细胞仅于发育第6周时短暂表达Flk-1。第7—12周，肝细胞表达VEGFC和flt-1，阳性反应产物积聚在细胞质中。发育第5周到第12周胚胎肝血管内，有angiopoie—tin-1和angiopoietin-2阳性反应的细胞存在，细胞形态同上述VEGFA、fkt-4和Tie-2阳性细胞。angiopoietin-1和angiopoietin-2阳性反应较弱，Tie-2的免疫反应强。发育各期，肝细胞也弱表达angiopoietin-1和angiopoiefin-2和Tie-2。发育各期血管内皮细胞为上述各种因子和受体阴性反应。结论：发育第7周之前和第7周之后，VEGF家族及其受体在肝内造血灶的细胞表达模式不同。胎肝造血与肝细胞的发育可能相关。     

受体蛋白质酪氨酸激酶和血管内皮生长因子在人胚胎卵黄囊和胎肝中的表达

目的研究人胚胎发育不同时期卵黄囊和胎肝内受体酪氨酸激酶(KDR)、血管内皮生长因子(VEGF)和CD34的分布及表达,为胚胎造血分化提供理论依据。方法取15份不同胎龄的胎儿卵黄囊和胎肝,固定、切片,进行免疫组织化学SP法染色,观察KDR、VEGF和CD34的表达及分布。结果在卵黄囊和胎肝中均有KDR+、VEGF+和CD34+细胞。在中期胎肝组,KDR和VEGF的灰度值分别为103.8±6.1和96.4±6.3,表达强于晚期胎肝组(KDR和VEGF的灰度值分别为90.4±6.0和87.4±6.3)(P<0.05),KDR与VEGF的表达具有一定相关性(P<0.05)。结论KDR和CD34在胎肝和卵黄囊中广泛表达,提示在胎肝和卵黄囊中可能有成血管血液干细胞存在,KDR和VEGF相互作用,可能介导成血管血液干细胞的存活、扩增和分化。     

雌激素受体、孕激素受体、C-erbB-2和Ki-67在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理的关系

目的探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、表皮生长因子受体-2(C-erbB-2)和增殖细胞核抗原-67(Ki-67)在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理的关系。方法依据整群随机抽样的方法回顾性选取2018年5月至2019年5月青岛市中心医疗集团妇瘤科收治的子宫内膜癌患者154例,将其作为子宫内膜癌组,另依据整群随机抽样的方法选取同期青岛市中心医疗集团妇瘤科收治的因其他妇科疾病手术刮宫或切除的子宫内膜标本120例作为子宫内膜标本组,统计分析两组子宫内膜组织中ER、PR、C-erbB-2、Ki-67的阳性表达情况,分析子宫内膜癌组患者子宫内膜组织中ER、PR、C-erbB-2、Ki-67阳性表达情况与临床病理的相关性。结果子宫内膜癌组患者子宫内膜组织中ER、PR、C-erbB-2、Ki-67阳性率分别为53. 2%、44. 2%、51. 9%、59. 7%;子宫内膜标本组不典型增生患者子宫内膜组织中ER、PR、C-erbB-2、Ki-67阳性率分别为80. 0%、76. 7%、50. 0%、33. 3%,正常子宫内膜人员子宫内膜组织中ER、PR、C-erbB-2、Ki-67阳性率分别为90. 0%、93. 3%、0%、6. 7%。子宫内膜癌组患者子宫内膜组织中ER、PR阳性表达率均显著低于子宫内膜标本组中不典型增生、正常子宫内膜人员(P 0. 05),C-erbB-2、Ki-67阳性表达率均显著高于子宫内膜标本组中不典型增生、正常子宫内膜人员(P 0. 05)。子宫内膜癌组Ⅲ～Ⅳ期患者的子宫内膜组织中ER、PR阳性表达率均显著低于Ⅰ、Ⅱ期患者(P 0. 05),Ⅰ期患者子宫内膜组织中ER、PR阳性表达率均显著低于Ⅱ期患者(P 0. 05);Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ期患者子宫内膜组织中C-erbB-2、Ki-67阳性表达率均显著高于Ⅰ期患者(P 0. 05),Ⅱ期患者子宫内膜组织中C-erbB-2阳性表达率显著高于Ⅲ～Ⅳ期患者(P 0. 05),Ki-67阳性表达率显著低于Ⅲ～Ⅳ期患者(P 0. 05)。分化程度G1、G2、G3患者子宫内膜组织中ER、PR阳性表达率均逐渐降低(P 0. 05),C-erbB-2、Ki-67阳性表达率均逐渐升高(P 0. 05)。浸润程度≤1/2患者子宫内膜组织中ER、PR、C-erbB-2阳性表达率均显著高于 1/2患者(P 0. 05),Ki-67阳性表达率显著低于 1/2患者(P 0. 05)。有淋巴结转移患者子宫内膜组织中ER、PR、C-erbB-2阳性表达率均显著低于无淋巴结转移患者(P 0. 05),Ki-67阳性表达率显著高于无淋巴结转移患者(P 0. 05)。结论 ER、PR在子宫内膜癌中的阳性表达率降低,C-erbB-2和Ki-67阳性表达率提升,雌激素受体、孕激素受体、C-erbB-2和Ki-67与临床病理密切相关。     

Th1/Th2、CD28、ICOS、PD-1和CTLA-4在桥本甲状腺炎患者外周血中的表达及与甲状腺相关实验室指标的相关性

目的 探讨辅助性T淋巴细胞1与辅助性T淋巴细胞2比值(Th1/Th2)、CD28、可诱导共刺激分子(ICOS)、程序性死亡受体1(PD-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)在桥本甲状腺炎(HT)患者外周血中的表达及与甲状腺相关实验室指标的相关性。方法 收集2021年在该院门诊或住院治疗的HT患者40例为HT组,另选择同期健康体检者40例为对照组。采用全自动化学发光免疫分析仪检测血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)水平,采用酶联免疫吸附试验检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4和IL-10水平,采用流式细胞仪检测外周血中Th1与Th2细胞,以及CD3⁺CD4⁺T淋巴细胞表面共信号分子CD28、ICOS、PD-1、CTLA-4水平。结果 HT组血清FT4和TPOAb水平均明显高于对照组,TSH、FT3水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。HT组外周血中Th1细胞及其相关细胞因子IFN-γ和IL-2水平,以...     

CD 40、PCNA在人膀胱移行细胞癌中的表达及意义

[目的]探讨CD40、PCNA在人膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及临床应用价值. [方法]采用免疫组化技术检测56例BTCC组织、20例正常膀胱组织中的CD40和PCNA的表达,分析CD40、PCNA表达水平与肿瘤病理分级、临床分期相关性,以及两指标间的相关性.[结果]①CD40、PCNA 在BTCC中的表达为66.1%、64.3%,明显高于正常膀胱黏膜.②CD40在高分化、表浅性BTCC中的表达为91.7%、83.3%,明显高于中低分化、浸润性BTCC.而PCNA在高分化、表浅性BTCC中的表达为33.3%、52.8%,明显低于中低分化、浸润性BTCC.③CD40、PCNA 在BTCC 中表达呈负相关.[结论]CD40在BTCC发生过程中可能起重要的作用,可作为诊断、评估恶性程度的指标.     

骨髓增殖性肿瘤患者外周血细胞中JAK2V617F突变和p-STAT5蛋白表达及其与临床特征的相关性

本研究旨在探讨骨髓增殖性肿瘤（MPN）患者外周血细胞中JAK2V617F突变和p-STAT5蛋白表达的情况及二者与疾病临床特征之间的相关性,为临床实践及靶向治疗研究提供理论依据。选择山东大学附属省立医院血液科确诊的45名BCR-ABL阴性的MPN患者及15例健康成年人为研究对象,提取外周血单个核细胞的DNA及蛋白质,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应和免疫蛋白印迹法定量检测研究对象的朋K2V617F突变比例及p-STAT5蛋白表达量,并结合收集的临床病例资料进行相关性分析。结果表明,MPN患者JAK2V617F突变总体阳性率为73．3％（33／45）,其中真性红细胞增多症（PV）的以K2V617F突变阳性率为83．3％（20／24）,原发性血小板增多症（ET）的阳性率为68．8％（11／16）,特发性骨髓纤维化（IMF）患者的阳性率为40．0％（2／5）;PV、ET、IMF患者的J14K2V617F突变比例分别为0．472±0．245,0．216±0．162,0．435±0．239;p-STAT5蛋白表达灰度值分别为1．396±0．758,0．760±0．623,0．792±0．612;JAK2V617F突变负荷与p-STAT5蛋白表达灰度值呈线性相关（P〈0．05）;在PV患者中,JAK2V617F突变负荷越高,白细胞计数、血红蛋白水平及红细胞压积越高,血小板水平越低;ET患者中JAK2V617F突变负荷越高者,年龄越大,白细胞计数、血红蛋白水平及红细胞压积越高,与血小板水平无明显相关性;IMF患者中JAK2V617F突变负荷越高者白细胞、血小板计数、血红蛋白水平及红细胞压积均较低。JAK2V617F突变阳性者更易发生脾肿大、出血及血栓事件。结论：JAK2V617F突变在BCR-ABL阴性的MPN患者中阳性率较高,突变负荷越高者其下游p-STAT5蛋白的表达量越大,发生脾肿大、血栓事件的几率越高。     

乳腺癌雌孕激素受体与C-erbB-2基因、多药耐药基因MDR1(P-gp)蛋白表达及相关分析研究

目的观察乳腺癌组织中雌孕激素受体(ER、PR)与C erbB 2基因、多药耐药基因MDR1(P gp)的蛋白表达并探讨其相互关系。方法用免疫组织化学法 (EnVision法 )对 10 9例术前未行化疗的乳腺癌手术切除标本福尔马林固定、石蜡包埋组织进行ER、PR、C erbB 2、MDR1(P gp)检测 ,结果作统计学分析。结果①ER、PR阳性表达率分别为 5 5 .0 %和 43.1%;②C erbB 2、MDR1(P gp)的阳性表达率各为5 4.1%和15 .6 %,乳腺导管内癌患者的C erbB 2阳性表达高于浸润性导管癌的患者 (P <0 .0 5 ) ;③ER、PR均阳性患者的C erbB 2阳性表达明显低于ER、PR均阴性患者 (P <0 .0 5 ) ,ER阳性组的C erbB 2阳性表达明显低于ER阴性组 (P <0 .0 5 )。结论ER、PR与C erbB 2基因在乳腺癌中有一定的内在联系 ,C erbB 2表达与ER表达呈负相关 ;多药耐药基因MDR1(P gp)的表达与ER、PR无关。     

散发性结直肠癌中hMLH1及hMSH2基因与p53、PCNA表达关系的研究

目的:研究hMLH1及hMSH2两种错配修复(mismatchrepair,MMR)蛋白在散发性结直肠癌的表达变化,与p53、PCNA表达的关系,并评估其可能的临床意义。方法:采用EnVision免疫组化两步法对150例散发性结直肠癌石蜡切片进行hMLH1、hMSH2、p53及PCNA表达的检测。结果:(1)150例散发性结直肠癌中,hMLH1失表达有24例,占16%(24/150),hMSH2失表达有5例,占3.3%(5/150);两者之和占总散发性结直肠癌病例的19.3%(29/150)。hMLH1或hMSH2蛋白失表达与患者肿瘤部位、组织学类型密切相关。近端结肠、低-未分化腺癌及黏液腺癌MMR蛋白失表达比例高(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤大体类型、肿块大小、浸润深度、淋巴结转移与否远处转移与否以及患者的Dukes分期均无显著相关(P>0.05);(2)hMLH1/hMSH2蛋白失表达组p53阳性表达率及PCNA标记指数均低于表达组(P<0.05)。结论:(1)一定比例的散发性结直肠癌中存在MMR基因的缺陷,并具有相对特殊的临床病理特征;(2)hMLH1/hMSH2蛋白失表达与p53表达及PCNA标记指数呈负相关。     

αdβ2 Integrin Is Expressed on Human Eosinophils and Functions as an Alternative Ligand for Vascular Cell Adhesion Molecule 1 (VCAM-1)

The β2 family of integrins, CD11a, CD11b, CD11c, and αd, are expressed on most leukocytes. We show that the newest member of this family, αd, is expressed on human eosinophils in peripheral blood, and surface expression can be upregulated within minutes by phorbol ester or calcium ionophore A23187. Culture of eosinophils with interleukin 5 (IL-5) leads to a two- to fourfold increase in αd levels by 3–7 d without a change in α4 integrin expression. Eosinophils isolated from late phase bronchoalveolar lavage fluids express αd at levels similar to that seen after 3 d of IL-5 culture. Regarding αdβ2 ligands, in both freshly isolated and IL-5–cultured eosinophils, as well as αdβ2-transfected Chinese hamster ovary cells, αdβ2 can function as a ligand for vascular cell adhesion molecule 1 (VCAM-1). This conclusion is based on the ability of monoclonal antibodies to αd, β2, or VCAM-1 to block cell attachment in static adhesion assays. In experiments with eosinophils, the relative contribution of αdβ2 integrin– mediated adhesion is enhanced after IL-5 culture. These experiments demonstrate that αdβ2 is an alternative ligand for VCAM-1, and this integrin may play a role in eosinophil adhesion to VCAM-1 in states of chronic inflammation.     

Ag85B/IL-2融合蛋白在体外对PBMC增殖及Th1型细胞因子分泌的影响

[目的]研究Ag85B/IL-2融合蛋白对人外周血单个核细胞（PBMC）增殖及Th1型细胞因子分泌的影响.[方法]MTT法测定不同浓度的Ag85B/IL-2融合蛋白在不同时相对人PBMC的增殖活性,ELISA法检测Ag85B/IL-2融合蛋白作用人PBMC不同时间后IL-12和IFN-γ的分泌水平,并与Ag85B和BCG作对比.[结果]以0.8 μg/ml Ag85B/IL-2融合蛋白刺激组的人PBMC增殖活性为最强,此组在各时段均显著高于空白对照组（P〈0.01,P〈0.05）;各浓度Ag85B/IL-2融合蛋白刺激48 h后的IL-12水平均显著高于空白对照组（P〈0.01,P〈0.05）,以0.8 μg/ml的浓度刺激PBMC 72 h时,IL-12的分泌达最高;0.8 μg/ml和1.6 μg/ml刺激组的IFN-γ浓度在各个时相点均显著高于空白对照组（P〈0.01,P〈0.05）.Ag85B/IL-2融合蛋白刺激PBMC 分泌IL-12和IFN-γ的作用,均显著强于Ag85B和BCG（P〈0.01）.[结论]Ag85B/IL-2融合蛋白具有促人PBMC增殖和Th1型细胞因子分泌的作用.     

抗CXCR4单克隆抗体对HL-60细胞粘附性及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

本研究通过观察抗CXCR4单克隆抗体(12G5)对HL-60细胞粘附性及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响，探讨趋化因子SDF-1在维持HL-60细胞生存中的作用。培养HL-60细胞，并再与骨髓基质细胞共培养，在抗CXCR4单克隆抗体阻断SDF-1生物活性后，观察骨髓基质层上HL-60细胞的粘附情况并测定其粘附率；应用免疫组织化学技术检测HL-60细胞Bcl-2及Fas蛋白的表达。结果显示，12G5显著降低HL-60细胞的粘附率，与此同时Bcl-2表达下调，Fas表达上调。结论：抑制SDF-1活性可一定程度地阻抑白血病细胞生存，促进凋亡。