老年人对狂犬病疫苗的免疫应答

罗马La Sapienza大学卫生研究所设立的狂犬病中心具有100年狂犬病接触后免疫接种经验,他们在日常工作中发现,50岁以上的老年人接种狂犬病疫苗后产生的中和抗体滴度比年轻人低,因此,本文作者进一步观察了不同年龄组人群对现行狂犬病疫苗的免疫应答情况。 试验采用两种疫苗,纯化的鸭胚狂犬病疫苗（PDEV）人二倍体细胞狂犬病疫苗（HDCV）。两种疫苗均采用狂犬病病毒Pit-man-Moore株,均用β丙内酯灭活。每剂疫苗的抗原值应≥2.5IU（NIH法）。 260名受试对象的年龄为11～25岁或50岁以上。均未接种过狂犬病疫苗。免疫程序为0、3、7、14、30和90天。最终共有204人完成全程免疫,其中11～25岁者111人;50岁以上者93人。分别在接种疫苗前（T_0）、接种第5针疫苗前（T_1）以及接种第6针疫苗前（T_2）采血,用改良的间接荧光抗体微量试验检测抗狂犬病抗体。另外,要求受试者在疫苗接种期间记录接种部位和全身反应情况。 结果表明,两种疫苗均能很好耐受。107名HDCV接种者中仅1人出现乏力,2人有接种部位疼痛。97名接种PDEV者中有4人出     

破伤风特异性免疫对献血浆者体内循环免疫复合物含量的影响

目的 通过检测献血浆者血浆中循环免疫复合物（circulating immune complex,CIC）补体成分3d（complement component 3d,C3d）含量,分析破伤风特异性免疫对献血浆者CIC含量的影响。方法 选取2020年8月25日至9月4日期间,在山东省夏津泰邦单采血浆站和山亭泰邦单采血浆站的献血浆者,分为普通组、常规免疫组和强化免疫组,采用CIC-C3d ELISA试剂检测献血浆者血浆CIC-C3d含量。结果 3组献血浆者CIC-C3d浓度均＜16 μg/ml,3组献血浆者CIC-C3d浓度间差异无统计学意义（F=1.00,P=0.37）。结论 破伤风特异性免疫对献血浆者体内CIC浓度无明显影响。     

β1肾上腺素受体肽段免疫家兔后心脏形态学的改变

目的:研究β1肾上腺素受体抗体在扩张性心肌病发病中可能的作用.方法:将14只新西兰兔随机分为两组,免疫组和对照组.β1受体肽段作为抗原,给予免疫组家兔每月一次皮下注射,免疫时程为1a.对照组除用生理盐水替代抗原外,注射过程同免疫组.ELISA法测定家兔血清中β1受体抗体效价.1a后取两组动物心肌电镜下观察.结果:免疫前两组动物及免疫后对照组动物β1受体抗体效价均很低,而免疫后免疫组动物效价明显增高.免疫1a后对照组动物心脏电镜下无异常表现;免疫组示心脏有坏死灶、心肌纤维缺失、过度收缩带出现等.结论:β1受体抗体可能在扩张性心肌病发病中起致病作用.     

兔抗肠道病毒71型血清制备中不同免疫剂量对抗体效价的影响

目的 研究兔抗肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）血清制备中不同免疫剂量对抗体效价的影响。方法 将9只实验兔简单随机分为3组,每组3只。5、50和100 μg 3个剂量EV71灭活疫苗和弗氏佐剂均匀混合后,通过肌内注射途径分别免疫3组动物,于第0、7、14及28天各免疫1次,每7天采血,分离血清,检测抗EV71中和抗体效价。结果 100 μg剂量组兔血清抗体效价显著高于5和50 μg剂量组（第42天t值分别为–3.282和–2.486,P值均<0.05）。第42天时,兔血清抗体效价和免疫剂量（5~100 μg范围内）呈线性关系,回归方程y=478.229x–2 041.820。结论 在本实验选择的3个免疫剂量中,随着免疫剂量升高,产生的血清抗体效价也升高,且呈线性关系。     

β_1肾上腺素能受体肽段免疫家兔后心脏超声心动图改变的研究

目的 :研究β1 肾上腺素能受体抗体在扩张性心肌病发病中的作用。方法 :将 14只新西兰兔随机分为两组 ,免疫组和对照组。免疫组动物每月注射一次 β1 受体肽段抗原和佐剂的混和物 ,而对照组除用等量生理盐水替代抗原溶液外 ,给药程序同免疫组。免疫前后采血测定血清中 β1 受体抗体效价 ,于 M型超声下比较免疫后两组动物心脏收缩功能改变。结果 :免疫前两组动物 β1 受体抗体效价均在 1∶ 10 0以下 ,M型超声心动图下左室后壁收缩末期厚度(L VPWS)及短轴缩短率 (FS)无明显差异。免疫后免疫组效价明显增高达 1∶ 12 80 0以上 ,而对照组无明显改变。于免疫第 3月 ,免疫组 FS及 L VPWS此两项指标均明显高于对照组。结论 :β1 受体抗体可能对心脏有β1 受体激动样作用。     

放射免疫法和酶联免疫法检测人血浆乙肝表面抗体效价比较

目的比较放射免疫法和酶联免疫法检测人血浆中乙型肝炎病毒表面抗体效价的效果。方法选取中国生物制品检定所提供的国家参比品3份。国家临检中心质控品2份,单采血浆公司血浆1000份,分别用北京北方生物技术研究所放射免疫试剂盒、北京万泰公司酶联免疫定量检测试剂盒．放免仪和酶标仪测定乙型肝炎病毒表面抗体效价。结果酶联免疫法和放射免疫法试剂盒检测表面抗体效价无明显的偏差,两种方法检测结果相关性良好f相关系数r=0．951。结论酶联免疫法检测血浆乙肝表面抗体效价,具有准确度高、特异性强、方法简单快捷、检验成本低等特点,对血液制品行业乙型肝炎人免疫球蛋白生产用原料血浆乙肝表面抗体效价的筛杏具有广泛府用的意义．     

乙型肝炎疫苗两剂免疫方案:在青年人中致应答和记忆应答的验证

为了研究两剂重组乙型肝炎(HB)疫苗免疫方案诱导的初次和记忆应答,作者将200名18～39岁健康成人随机分成两组,分别于0、6月接种10μg(Ⅰ组)或20μg(Ⅱ组)酵母重组HB疫苗,并于初次接种后2年加强1次.于初次接种后1、2、3、6、7、24个月、2年后1周及2年后3～4周采血,用放射免疫法检测抗-HBs滴度,滴度≥10mIU/ml定为具有保护作用.结果表明,在接种第2剂疫苗前,Ⅰ组和Ⅱ组分别只有46%和67%的人抗-HBs≥10mIU/ml(P=0.006),而初次接种后3～6月,两组各有74%～78%和80%～87%的人可检出抗体,两组累积血清阳转率均较高且     

角鲨烯作为新型佐剂的免疫效果研究

目的研究以角鲨烯作为新型佐剂制备的新城疫、禽流感H5N1和H9灭活疫苗在SPF鸡体内的抗体效价水平以及对机体的细胞免疫作用。方法本试验油相中按一定的比例添加角鲨烯,按照常规方法制备灭活疫苗,免疫SPF鸡后,采用微量血凝抑制法和MTT法分别检测了SPF鸡免疫不同疫苗后机体的抗体效价水平和机体外周血T淋巴细胞的动态增殖变化。结果免疫以角鲨烯作为新型佐剂制备的新城疫、禽流感H5N1和H9灭活疫苗后,HI抗体在免疫后第2周检测为阳性,第3周达到最大值,持续到第4周抗体效价无明显下降(P>0.05);免疫组外周血T淋巴细胞增殖显著高于对照组。结论表明以角鲨烯作为新型佐剂制备的新城疫、禽流感H5N1和H9灭活疫苗对SPF鸡的促抗体效价作用和细胞免疫作用均有显著增强。     

人狂犬病免疫球蛋白和人二倍体细胞疫苗的抗狂犬病免疫作用

对暴露感染狂犬病者的预防处理,一般认为:一、尽早产生血清中和抗体;二、血清中和抗体在一年内能维持在较高水平;三、自动或被动免疫产生的血清中和抗体需达到可测水平,且最好为IgG。由于过去使用的狂犬病疫苗免疫原性较低,且初次免疫注射后,IgM转变为IgG的过程尤为缓慢,所以迄今仍同时用异种狂犬病抗血清或免疫球蛋白进行被动免疫。该血清一疫苗合并使用的方法增强了狂犬病预防注射的免疫效果,但失败病例仍时有报导。     

口服脊髓灰质炎疫苗免疫人群的抗体持续时间

为了确定口服脊髓灰质炎疫苗(OPV)再次免疫的必要性,许多作者首先把注意力集中在初次免疫后血清中和抗体持久性的观察。本文作者对捷克2～40岁具有不同免疫史的283人进行了为期6年(1970～1976)的观察。根据国内脊髓灰质炎病毒流行的主要型别和遗传稳定性差异,着重调查了Ⅰ、Ⅱ型中和抗体水平经初次免疫后的变动情况。将283名调查对象依原抗体滴度分成三组:A组具有三个型1∶128以上高抗体滴度;B组为Ⅰ型低抗体水平(1∶4或1∶8);C组为Ⅲ型低抗体水平。又根据免疫史不同进一步分为四个亚组:a亚组:近期OPV免疫的2～3岁小儿;b亚组:远期OPV免疫的5～10岁儿童;c亚组:11～24岁曾接种过Salk和Sabin疫苗的人;d亚组:未经免疫的30～40岁个体。原具有三个型高抗体滴度的2～3岁小儿,6年后普遍下降,Ⅰ型降低1个血清稀释度,Ⅲ型降低2.58个稀释度。原Ⅰ、Ⅲ型抗体滴度低的小儿,因被检人数太少,难以作出评价。Ⅰ、Ⅲ型抗体滴度高的5～10岁儿童,后来分别下降了0.91和2.18个稀释度。而原来Ⅰ、Ⅲ型抗体滴度低的儿童,则各上     

基于仓鼠模型的新型冠状病毒抗体依赖性感染增强研究

目的   利用仓鼠模型探究新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2）感染后是否存在抗体依赖性感染增强（antibody-dependent enhancement,ADE）现象,为疫苗研发和接种提供实验依据。方法   实验室构建SARS-CoV-2感染仓鼠模型,分成对照组、感染组、二次感染组、免疫组,ELISA法检测仓鼠血清总抗体以及细胞因子IL-6和转化生长因子-β含量;中和试验法检测仓鼠血清病毒中和抗体;免疫印迹法和定量逆转录PCR检测仓鼠肺组织病毒含量;苏木精-伊红染色法观察仓鼠肺组织病理变化;分离培养仓鼠腹腔原代巨噬细胞,检测仓鼠免疫血清能否促进SARS-CoV-2对巨噬细胞的感染。结果   二次感染组和免疫组仓鼠血清总抗体滴度差异无统计学意义（P>0.05）;但免疫组中和抗体水平显著低于二次感染组（P<0.001）;与感染组相比,二次感染组和免疫组仓鼠感染病毒后体质量保持稳定（P<0.01）,肺组织炎症反应轻,仅免疫组在感染后第2天的肺组织中检出病毒;各组仓鼠血清中促炎因子IL-6和抗炎因子转化生长因子-β的含量差异无统计学意义（P>0.05）;在有或无仓鼠免疫血清的条件下,SARS-CoV-2均不能感染仓鼠腹腔巨噬细胞,但可被吞噬。结论   基于仓鼠感染模型的初步实验结果,不支持SARS-CoV-2感染中存在巨噬细胞介导的ADE现象。     

人3型副流感病毒感染小鼠模型的建立及免疫应答特点

目的:建立人3型副流感病毒(human parainfluenza virus type 3,HPIV3)感染小鼠模型,并研究其免疫应答特点。方法:用HPIV3兰州分离株HPIV3LZ1728C19毒株鼻腔接种BALB/c小鼠,每天检测体温和体质量。用ELISA检测血清HPIV3特异性IgG、IgA滴度,实时定量PCR...     

SpyTag/SpyCatcher体系蛋白共价连接条件的分析

目的 比较不同实验条件下SpyTag/SpyCatcher体系共价连接的效率,分析得出优化后的连接条件,为今后相关纳米颗粒疫苗的开发提供实验依据。方法 用大肠埃希菌系统表达分别带有SpyTag和SpyCatcher结构的两种蛋白,摸索共价连接的反应时间、温度、缓冲体系和混合比例,采用非还原型凝胶电泳检测共价连接的效率。结果 反应时间对共价连接的影响有统计学意义（F=22.028,P<0.05）,带有SpyTag和SpyCatcher结构的两种蛋白质可形成稳定的共价键,6 h后连接效率约为50%,偶联蛋白在25 ℃稳定存在至少72 h。反应温度和缓冲体系对共价连接的影响没有统计学意义。SpyTag和SpyCatcher结构蛋白比例为物质的量比1.0∶2.0混合。结论 SpyTag/SpyCatcher共价连接体系的关键工艺参数为反应时间,且能适用于多种温度和缓冲条件。     

细胞工厂在乙型脑炎减毒活疫苗生产中的应用

目的  采用40层细胞工厂（CF40）替代15 L转瓶工艺制备乙型脑炎（乙脑）减毒活疫苗。方法  分别采用CF40和15 L转瓶工艺制备乙脑减毒活疫苗,通过显微镜观察和细胞计数来考察细胞质量。病毒收获时观察细胞病变情况,并对2种工艺制备的原液、半成品以及成品进行病毒滴度检测对比,成品37 ℃放置7 d考察成品热稳定性。结果  两种工艺相比,细胞工厂内单位面积内细胞数量差异存在统计学意义（P＜0.05》）,生长一致性和单只地鼠制备的细胞数量均优于15 L转瓶;CF40和15 L转瓶制备的单一病毒收获液平均滴度分别为7.59 lgPFU/ml和7.56 lgPFU/ml,没有显著差异(P＞0.05),但CF40单一病毒收获液收率一致性更好;两种工艺制备的原液、半成品、成品滴度以及7 d后37 ℃热稳定性均符合企业注册标准规定。结论  使用CF40制备乙脑减毒活疫苗是可行的,并且在产品收率和一致性方面优于15 L转瓶工艺。     

抗柯萨奇病毒A组10型中和抗体检测用毒株的应用研究

目的 研究抗柯萨奇病毒A组10型（Coxsackievirus A10,CV-A10）中和抗体检测用毒株的应用。方法 对CV-A10毒株进行扩增培养,建立3级种子批并进行相关检定。采用3人3次独立测定病毒滴度,对工作种子批进行滴度标定,通过分别与肠道病毒71型（enterovirus A71,EV-A71）、CV-A16、CV-A6免疫血清进行交叉中和反应,评价该毒株的专属性。对CV-A10自然感染人血清和CV-A10小鼠免疫血清样品进行中和抗体效价检测,对其应用进行评价研究。结果 获得一株CV-A10中和抗体检测用毒株,3级种子批的无菌检查、支原体检查等项目均符合中国药典2020年版三部相关要求;经标定,平均病毒滴度为7.903 lg半数细胞培养物感染量（50% cell culture infectious dose,CCID₅₀）/ml（95%置信区间：7.868~7.937 lgCCID₅₀/ml）,变异系数为1.10%;与EV-A71、CV-A16、CV-A6免疫血清无交叉反应,专属性良好;检测CV-A10自然感染人血清和CV-A10小鼠免疫血清,中和抗体的最大值与最小值倍数差均小于4,中和抗体检测变异系数分别为6.38%和3.64%。结论 抗CV-A10中和抗体检测用毒株具有较好的专属性可很好的应用于后续抗CV-A10中和抗体的相关检测。     

COVID-19康复者恢复期血浆及COVID-19静注人免疫球蛋白的IgG亚类检测分析

目的:探讨COVID-19康复者恢复期血浆及COVID-19静注人免疫球蛋白(human intravenous immunoglobulin,IVIG)(COVID-19-IVIG)IgG及亚类的水平。方法:选择2020年2月至3月国药集团武汉血液制品有限公司采集的COVID-19康复者恢复期血浆及制备的COVID-...     

2015—2019年西双版纳傣族自治州流行性腮腺炎流行特征分析

目的 分析2015－2019年西双版纳傣族自治州（西双版纳）流行性腮腺炎的流行特征,为进一步预防控制流行性腮腺炎提供参考依据。方法 对2015－2019年中国疾病预防控制信息系统报告的流行性腮腺炎病例和暴发疫情资料进行描述性分析。结果 西双版纳2015－2019年共报告2 452例流行性腮腺炎,年平均报告发病率为41.87/10万;男、女性报告发病率比为1.16:1.00;夏冬季为高发季节;0~14岁人群发病率最高（154.39/10万）;总病例的64.23%为学生,7次暴发疫情均发生于学校。2015－2019年共接种136 433剂次含腮腺炎成分疫苗,其中104 133剂次麻疹-腮腺炎-风疹联合疫苗,其余为腮腺炎疫苗。结论 2015－2019年西双版纳流行性腮腺炎发病率呈上升趋势,建议完善麻疹-腮腺炎-风疹联合疫苗儿童免疫规划,提高疫苗接种覆盖率,做好学校晨检工作,加强预防接种证查验工作和流行性腮腺炎的主动监测。     

ELISA检测庆大霉素残留量数据拟合模型的探讨

目的 探讨ELISA检测乙型脑炎减毒活疫苗中庆大霉素残留量的数据拟合模型,以验证和优化定量检测系统。方法 采用商品化庆大霉素残留酶联免疫检测试剂盒对乙型脑炎减毒活疫苗进行庆大霉素残留量检测,通过二次多项式模型、对数线性模型和四参数logistic模型对实验数据进行拟合处理,分析比较各模型的决定系数（R²）、实验点分布、回收率等指标。结果 二次多项式模型、对数线性模型和四参数logistic模型的变量显著性检验均有统计学意义（P<0.05）,R²均值分别为0.997 0、0.994 4、0.999 3,二次多项式模型和四参数logistic模型拟合优度较好;各拟合模型的标准品实验点在标准曲线两侧的分布都较为均匀,四参数logistic模型最佳,尤其是在中、低浓度范围（0.1~0.9 ng/ml）;各拟合模型在0.1～8.1 ng/ml浓度范围的标准品回收率均达到中国药典要求,且差异无统计学意义。结论 二次多项式模型、对数线性模型和四参数logistic模型均适用于ELISA检测庆大霉素残留量的数据分析,其中二次多项式模型和四参数logistic模型拟合较好,这对持续优化该项定量检测具有重要指导意义。     

水痘减毒活疫苗的稳定性考察

 目的  考察水痘减毒活疫苗（水痘疫苗）的稳定性。方法  取32批由上海生物制品研究所有限责任公司（上海公司）于2013—2019年生产的水痘疫苗,按照水痘疫苗注册标准和中国药典2015年版三部的要求进行各项检定;在0个月进行热稳定性试验,在0和24个月分别进行鉴别试验、外观检查、异常毒性检查、无菌检查和细菌内毒素含量、牛血清白蛋白残留量、抗生素残留量、渗透压摩尔浓度、pH值、病毒滴度、水分检测。结果  2013—2019年水痘疫苗在有效期内各项指标检定结果均符合注册标准和中国药典要求。疫苗水分不高于3.0%。病毒滴度在每0.5毫升 3.3～4.5 lg噬斑形成单位。结论  上海公司生产的水痘疫苗安全、有效、稳定。