转化生长因子-β1对骨形态发生蛋白诱导成骨的促进作用

目的：我们通过观察转化生长因子β1（transforming growth factorβ,TCF－β1）和骨形态发生蛋白(bone morpho-genetic protein,BMP)共同修复骨缺损,达到进一步阐明BMP诱导成骨机制的目的,方法：实验采用日本大耳白兔左尺骨中段12mm骨缺损实验模型,分为实验组,对照组和空白组,缺损内分别植入BMP／TGF－β1／载体,BMP／载体,载体,通过X线,组织学及电镜对比观察三组骨缺缶修复情况,结果：实验组骨缺损无论是骨痂出现还是骨接发生时间均较对照组明显提前,空白组骨缺损形成骨不连,实验组成骨细胞和软骨细胞无论出现的时间,数量和功能活跃程度均优于对照组,电镜观察见成骨细胞,软骨细胞内线粒体丰富,内质网增多,而对照组则相对较少,软骨细胞内线粒体丰富,内质网络增多,而对照组则相对较少,结论：TGF－β1具有促进BMP诱导成骨的作用,TGF－β1通过促进间充质细胞分裂增殖为BMP提供靶细胞,促进成骨细胞及软骨细胞的分裂增殖,促进骨细胞合成产生I型胶原,促进基质钙化,碱少骨吸收等作用来促进BMP的诱导成骨。     

骨碎补总黄酮对牵张成骨过程中骨形态发生蛋白-2和转化生长因子-β1表达的影响

【目的】探讨骨碎补总黄酮对家兔股骨牵张成骨的影响。【方法】选用健康家兔32只,随机分为治疗组和对照组,每组16只。行单侧股骨牵张术,以自制延长器固定。经7 d延迟期,以1 mm/d的速度牵张,2次/d,连续10 d。治疗组动物自术后第1天用骨碎补总黄酮溶液灌胃,至实验结束。固定28 d后处死动物,留取标本,行组织学观察及免疫组织化学检测。【结果】治疗组新生骨组织成熟骨质区域增大,成骨细胞数、骨小梁面积百分比均显著高于对照组,骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和转化生长因子-β1(TGF-β1)呈棕色深染,染色程度显著高于对照组。【结论】骨碎补总黄酮能有效地加速骨牵张中新生骨质的生成与成熟。     

胰岛素对2型糖尿病大鼠种植体周围骨形成蛋白-2表达的影响

目的探讨胰岛素对2型糖尿病大鼠种植体周围骨形成蛋白-2表达的影响及意义。方法将SD大鼠30只,随机分为3组正常组、糖尿病组、糖尿病+胰岛素组。糖尿病模型采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素诱导建立;种植模型于大鼠胫骨近骺端植入纯钛种植体(直径1.3mm,长度5mm)。糖尿病+胰岛素组每日定时给予胰岛素皮下注射,正常组、糖尿病组注射等量生理盐水。12周后测量血糖水平及体重,拍摄x线片,取胫骨标本,免疫组化法测定种植体周围骨组织骨形成蛋白-2(BMP-2)的表达水平。结果糖尿病+胰岛素组种植体周围BMP-2表达水平高于糖尿病组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论胰岛素可使糖尿病大鼠种植体周围BMP-2表达水平提高,可能促进种植体周围的骨形成。     

重组人骨形成蛋白-2对正常人骨髓成纤维样基质细胞的影响

目的:研究重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对正常人骨髓成纤维样基质细胞系HFCL的影响。方法:Western Blot检测HFCL细胞PCNA表达的改变,并用软件对Western Blot结果进行密度扫描,计算量的变化。瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态变化和计算细胞核分裂像指数。流式细胞仪检测细胞周期及CD11b、CD14细胞表面抗原进一步鉴定细胞分化。结果:经过rhBMP-2作用24h后,HFCL细胞PCNA表达下降,经灰度扫描下降幅度为0.65倍;瑞氏-吉姆萨染色后发现细胞核分裂像减少,分裂指数下降,但细胞形态没有变化;HFCL细胞S期中的细胞数量减少,G1期数量增多,出现G1期阻滞;rhBMP-2作用没有使HFCL细胞向髓系或单核方向分化的趋势。结论:rhBMP-2可抑制HFCL细胞的增殖,但对HFCL细胞向髓系或单核方向分化影响不大。     

人重组骨形态发生蛋白-2和β转化生长因子在诱导成骨中的协同作用

目的:对人重组骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)和β转化生长因子(TGF-β)在诱导成骨的协同作用进行探讨. 方法:210只BALB/c小鼠随机分为3组,每组70只,试验侧均位于右后肢,设立rhBMP-2/牛松质骨载体、单纯牛松质骨载体为对照组. 分别于术后12 h～21 d共11个时间点取材,观察其诱导成骨过程. 结果:rhBMP-2/TGF-β/牛松质骨载体组在诱导间充质细胞增殖、分化,软骨细胞及新生骨形成方面均早于rhBMP-2/牛松质骨载体组,成骨量优于rhBMP-2/牛松质骨载体组,其碱性磷酸酶水平高峰较对照组提前,其组织钙含量明显高于对照组(P<0.05). 而单纯牛松质骨载体组在21 d 仅出现了少量增殖的间充质细胞. 结论:rhBMP-2和TGF-β在诱导成骨调节中存在着协同作用.     

骨代谢指标与胰岛素样生长因子1的相关性

随着人口老龄化的加速、生活方式的改变及代谢性疾病的影响,骨质疏松症的患病率日渐增加。骨质疏松症及其引起的骨折已经成为严重危害人类健康的世界性的公共卫生问题,但其病因至今尚未明确。近年来,很多学者对骨质疏松症的发病机制进行了研究,其中胰岛素样生长因子1对骨代谢的调节作用越来越受到关注。     

转化生长因子-?茁1促进骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化

目的：探讨转化生长因子?茁1（transforming growth factor-?茁1,TGF-?茁1）在骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic protein 9,BMP9）诱导间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）成骨分化过程中的作用。方法：应用鼠MSC C3H10T1/2,以重组腺病毒法将BMP9导入,施加TGF-?茁1处理,建立BMP9联合TGF-β1诱导MSC成骨分化模型。改良SEAP化学发光法检测碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性;茜素红S染色进行钙盐沉积检测;实时荧光定量PCR检测成骨相关基因Ⅰa2型胶原（collagenⅠa2,COLⅠa2）、骨桥素（osteopotin,OPN）、骨钙素（osteocalcin,OCN）的mRNA转录表达水平,免疫细胞化学法检测细胞内OPN、OCN表达变化。荧光素酶报告基因法检测信号通路的Smad水平。结果：TGF-?茁1与BMP9联合处理较BMP9单独处理能更早更多地提高ALP活性和引起钙盐沉积（F处理=18 782.10,P=0.000）,持续处理达17 d后不再显示明显差异,TGF-?茁1单独处理与对照组间无明显差异（F=1.03,P=0.318）。TGF-?茁1与BMP9联合处理较BMP9单独处理可使COLⅠa2、OPN、OCN mRNA转录水平明显增高（COLⅠa2的F处理=250.30,P=0.000;OPN 的F处理=795.64,P=0.000;OCN的F处理=206.55,P=0.000）,COLⅠa2增高发生较早和显著（F=250.30,P=0.000）;细胞内OPN、OCN蛋白阳性表达显著增强。TGF-β1联合BMP9处理能刺激信号通路相应的Smad荧光素报告活性（?字2=32.84,P=0.000）。结论：在BMP9诱导MSC成骨分化中,联合应用TGF-?茁1具有促进成骨作用,BMP9与TGF-?茁1在成骨分化中可能存在互补效应。     

胰岛素样生长因子-1与骨重建

胰岛素样生长因子-1 (insulin-like growth factor-1,IGF-1)是1种由70个氨基酸组成的单链多肽,几乎所有组织中都含IGF-1,现将IGF-1的研究现状作一综述.1 IGF-1的发现和命名Salmon和Daughaday首次发现IGF-1能促进小鼠软骨组织对硫酸盐35S的吸收,当时命名为"硫酸化因子".1963年,Froesch等将它描述为具有不可抑制的胰岛素样活性物质.1972年,又将它命名为"促生长因子".1976年Rinderknecht和Humbel从人血浆中分离出活性物质,由于它的结构与胰岛素原相似,重新将它命名为胰岛素样生长因子-1[1].     

重组人骨形成蛋白-2在诱导C3H10T1/2干细胞成骨中对MMP-9 mRNA表达的影响

目的：测定MMP-9mRNA在C3H10T1／2 clone 8(10T1／2)中的表达,探讨rhBMP-2诱导10T1／2产生成骨细胞时对MMP-9mRNA表达的影响。方法：取10T1／2培养至细胞完全贴壁,加入rhBMP-2培养28天,同时利用Real—time PCR检测MMP-9在10T1／2中不同时间段的表达。结果：10T1／2经rhBMP-2的诱导14天出现钙化点,MMP-9mRNA也随着rhBMP-2的加入表达降低,而对照组几乎不变化。结论：rhBMP-2在诱导10T1／2产生成骨细胞的同时抑制着MMP-9mRNA的表达。     

人重组骨形态发生蛋白—2和β转化生长因子在诱导成骨中的 …

对人重组骨形态发生蛋白－２和β转化生长因子在诱导成骨的协同作用进行探讨。方法：２１０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分为３组,每组７０只,试验侧均位于右后肢,设立ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体,单纯牛松质骨载体为对照组,分别于术后１２ｈ－２１ｄ共１１个时间占才,观察其诱导成骨过程。结果ｒｈＢＭＰ－２／ＴＧＦ－β／牛松质骨载体组在诱导间充质细胞增殖,分化,软骨细胞及新生骨形成方面均早于ｒｈＢＭＰ－２牛松质骨载体     

重组人骨形成蛋白-2促进兔下颌牵张成骨的实验研究

目的：研究重组人骨形成蛋白-2（recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2）对兔下颌牵张成骨的作用。方法：建立兔下颌双侧牵张成骨动物模型．于下颌右侧骨断端间植入含有rhBMP-2的可吸收胶原海绵（absorbable collagen sponge,ACS）,左侧单纯应用ACS作为对照。分别于固定期第3、5周末处死动物。取标本行X线及组织学观察。结果：应用rhBMP-2侧新骨形成的速度以及骨小梁的密度均高于对照。结论：局部应用rhBMP-2能够提高牵张区新骨形成的速度和质量．对下颌牵张成骨具有促进作用。     

hBMP-2转染自体兔骨髓基质细胞附和异体兔脱钙骨基质的成骨实验研究

目的 :探讨人骨发生蛋白 2 (hBMP 2 )转染兔自体骨髓基质细胞 (rMSCs)的骨生成诱导作用以及附和异体兔脱钙骨基质 (DBM )后的成骨效能。方法 :取兔自体骨髓基质细胞培养扩增 ,用脂质体介导的方法转染人骨发生蛋白 2基因 ,将转染和未转染人骨发生蛋白 2基因的自体骨髓基质细胞附和于异体兔脱钙骨基质形成新的生物植骨材料 ,连同空白及单纯脱钙骨基质对照组植入兔前肢肌袋和桡骨缺损。 2、4、6、8周分别取材进行大体 ,放射线和病理观察。结果 :肌袋试验 6周后 ,转染人骨发生蛋白 2基因的自体骨髓基质细胞附和异体兔脱钙骨基质材料中出现骨组织细胞 ,末转染组和单纯异体兔脱钙骨基质组为纤维组织。骨缺损试验中 ,三组均能产生骨的形成和缺损的修复 ,但仍然是转染复合材料组的骨修复再生能力最大。结论 :局部应用hBMP 2基因转染的BMSCs -DBM材料可以诱导骨形成促进骨修复     

犬面中份缝牵引成骨过程中骨形成蛋白-2的表达

目的:研究骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)-2在犬面中份缝牵引成骨过程中的表达,探讨缝牵引成骨的机制.方法:18只12周龄杂种犬随机分为牵引成骨组12只和正常对照组6只,在牵引5、10、15 d,固定10、20 d,去固定1个月分别处死实验犬2只和对照犬1只,免疫组化法观察BMP-2在各骨缝的表达情况.结果:牵引期和固定期,BMP-2在实验犬各骨缝边缘大量增殖的未成熟成骨细胞、间充质细胞以及新生骨基质中呈阳性表达,对照犬也有少量表达.随着机械应力牵引, BMP-2在各骨缝表达量逐渐上升,在牵引15 d阳性表达最强,以后逐渐下降,到去固定1个月时表达水平接近正常.结论:机械牵张力刺激可以导致内源性BMP-2产生,BMP-2可能在缝牵引新骨生成过程中扮演重要的角色.     

碱性成纤维细胞生长因子促进rhBMP-2诱导成骨的载体

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在诱导成骨中的适宜载体。方法 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠１４０只随机分为４组,每组３５只。设立ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ／ＰＶＰ为实验组,ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ,ｒｈＢＭＰ－２／ＰＶＰ和ｒｈＢＭＰ－２３组为对照组,分虽于术后３～２１ｄ共６个时间点取材,进行组织学、Ｘ线分析以及钙含量测定,观察４组诱导成骨情况。结果 ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ／ＰＶＰ组在诱导间充质细胞     

血清胰岛素样生长因子-1、胰岛素样生长因子结合蛋白-3与2型糖尿病肾病的关系

目的:测定血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGF-BP3)水平,探讨其与2型糖尿病肾病的关系。方法:选择2型糖尿病患者86例,根据其尿微量白蛋白排泄率(UAER)结果分为单纯糖尿病组(SDM组)33例、早期糖尿病肾病组(EDN组)28例和临床期肾病组(CDN组)25例。检测IGF-1、IGF-BP3、UAER等指标,分析IGF-1、IGF-BP3与糖尿病肾病的发病和病情轻重的关系。结果:CDN组血清IGF-1、IGF-BP3和UAER均明显高于SDM与EDN组(P <0.01),CDN组血清IGF-1、IGF-BP3和UAER亦均明显高于EDN组(P <0.01)。 IGF-1与肌酐、尿素氮、UAER和IGF-BP3均呈正相关关系(P <0.01),与年龄和糖化血红蛋白均无相关关系(P >0.05),而与空腹血糖呈负相关关系(P <0.01)。结论:血清IGF-1、IGF-BP3水平与2型糖尿病肾病的发生发展有相关性,可作为糖尿病肾病早期的诊断指标之一。     

TGF-β增强rhBMP-2诱导成骨中Ⅰ, Ⅱ型胶原及碱性磷酸酶的表达

目的 对β转化生长因子（TGF-β）增强人重组骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2)诱成骨中CollagenⅠ，Ⅱ及碱性磷酸酶（ALP）的表达进行研究。方法 BALB/c小鼠110只随机分为2组，每组55只，设立rhBMP-2/TGF-β为实验组，rh-BMP-2为对照组，分别于3-21d共8个时间点取材，采用免疫组织化学方法对新生骨组织中的Ⅰ，Ⅱ型胶原进行检测；对ALP活性进行定量分析。观察2组在诱导成骨中CollagenⅠ，Ⅱ及ALP的表达情况。结果 Ⅱ型胶原的出现是和成软骨，软骨细胞的出现相伴随的，但是，肥大，变性的软骨细胞并不表达Ⅱ型胶原，作为成骨细胞成熟标志物的Ⅰ型胶原，ALP在软骨形成期即有表达，但是随着成骨细胞的出现，骨组织的形成Ⅰ型胶原仍表现为高表达，而ALP的表达则呈下降趋势。实验组CollagenⅠ，Ⅱ及ALP的表达早于对照组。结论 TGF-β增强了rhBMP-2诱导成骨中CollagenⅠ，Ⅱ及ALP的表达。     

2～7岁小于胎龄儿血Ghrelin、胰岛素样生长因子—1和胰岛素样生长因子结合蛋白—3的水平及其意义

目的:探讨Ghrelin与生长激素—胰岛素样生长因子(GH-IGF)轴的关系,以及对小于胎龄儿(SGA)生后生长发育的影响.方法:选择新生儿期足月小于胎龄、现年龄为2～7岁儿童30例作为SGA组,根据有无追赶生长(CUG)分为SGA-CUG组(19例)和SGA-无CUG组(11例);足月适于胎龄(AGA)的2～7岁矮小...     

2型糖尿病患者血清IGF-1、IGFBP-3及胰岛素水平的变化与结直肠癌关系的研究

目的研究结直肠癌（CRC）和/或2型糖尿病（T2DM）患者胰岛素样生长因子1（IGF-1）、胰岛素样生长因子结合蛋白3（IGFBP-3）及胰岛素（Ins）水平,并探讨其与结直肠癌发病的关系。方法结直肠癌合并2型糖尿病患者24例为C＆D组,2型糖尿病患者排除结直肠癌31例为DM组,结直肠癌患者排除2型糖尿病28例为CRC组,健康自愿者28人为正常对照组（NC组）。检测各组收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、空腹血糖（FPG）、餐后血糖（PPG）、空腹胰岛素（Fins）、糖化血红蛋白（HbA1C）、甘油三脂（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）及高密度脂蛋白（HDL-C）;采用酶联免疫吸附法检测胰岛素样生长因子1（IGF-1）和胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP3）水平,同时计算体质指数（BMI）、腰臀比（WHR）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IRI）及IGF-1/IGFBP-3比值。结果 C＆D组FPG、PPG、HbA1C、Fins及HOMA-IRI与CRC组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。C＆D组PPG、TC及HOMA-IRI与DM组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。C＆D组IGF-1和IGF-1/IGFBP-3与DM组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。多元线性逐步回归分析显示,TC、PPG、IGF-1/IGFBP-3及HOMA-IRI对结直肠癌有影响。结论 CRC患者存在IGF-1和IGF-1/IGFBP-3水平变化;高胆固醇血症、餐后血糖升高和胰岛素抵抗可能参与CRC的发生。     

Implantation of xenogeneic bone combined with recombinant human bone morphogenetic protein-2 into bone defect—An scanning electron microscopic study

Xenogeneicbonehasagreatpotentialforgraftingowingtoitsunlimitedsourcesandsimple,economicalcharacters'However,theimmunere-jectionevokedbyxenograftrestrictsitsclinicalap-plication.Howtoeliminatetheantigenicityofthegraftwhilepreserveitsosteoinductivepropertiesisthekeytosuccessfulgraftingandisalsothepur-poseofthisstudy.Thechemicallytreatedsheepcancellousbonehasasuitableframeworkformechanicalsupportandisagoodcarrierofbonemorphogeneticprotein(BMP)withattenuatedantigenicity,butitlacksosteoinductivefa…     

IGF-1及其受体在子宫平滑肌瘤中的表达以及与雌、孕激素关系

目的探讨胰岛素样生长因子1（IGF-1）及其受体（IGF-1R）在子宫肌瘤发病中的作用,以及与雌、孕激素的关系。方法采用ELISA方法测定23例子宫肌瘤患者平滑肌瘤、正常子宫平滑肌组织及血清中IGF-1、IGF-1R的表达;同时用E IA方法测定血清雌二醇（E2）、孕酮（P）水平。选择30例健康妇女作为血清指标测定的对照组。结果（1）子宫平滑肌瘤组织IGF-1、IGF-1R的表达较正常子宫平滑肌高（P〈0.01）。（2）子宫肌瘤组血清IGF-1表达与对照组无统计学差异（P〉0.05）：IGF-1R表达较对照组增强（P〈0.01）。（3）观察组血清增生期、分泌期E2、P水平均与对照组无统计学差异（P〉0.05）。结论子宫平滑肌瘤组织中IGF-1、IGF-1R过度表达可能是子宫肌瘤发生的机制之一,雌、孕激素介导IGF-1对子宫肌瘤的作用,IGF-1对雌、孕激素诱导肌瘤细胞生长、分化主要以自分泌、旁分泌方式在局部起作用,IGF-1可能是子宫肌瘤生长的调节因子。