不同提取方法对人工牛黄中胆酸含量的影响

目的:研究不同提取方法对人工牛黄中胆酸含量的影响。方法:选择3个不同产地的人工牛黄,采用经水解处理和未经水解处理2种方法提取胆酸,并用高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定胆酸含量。结果:经水解处理的样品中胆酸含量高于未经水解处理的同批样品。结论:水解过程将人工牛黄中的结合型胆酸转化为游离型胆酸,从而使胆酸的含量升高。因此,将总胆酸含量和游离胆酸含量共同作为人工牛黄质量控制的指标更为合理。     

利多卡因水解物不同处理方法对TLC结果的影响

采用氯仿提取法、碱性环境蒸干法及酸性环境蒸干法分别对利多卡因水解样品进行了薄层色谱前处理,并比较了不同处理方法对样品薄层色谱图的影响。结果表明,采用蒸干法时,若供试品溶液呈酸性,则利多卡因的酸性水解产物不可检出;若供试品溶液呈碱性,则利多卡因的碱性水解产物不可检出。采用氯仿提取法时,所得的薄层色谱图,杂质斑点齐全,且操作方便。     

纤维蛋白原细菌内毒素检测中干扰因素的分析与排除

目的分析并排除鲎试剂法检测纤维蛋白原中细菌内毒素时供试品对鲎试剂的干扰。方法取家兔法热原试验合格的纤维蛋白原,按标示量加细菌内毒素检查用水溶解后分别置80℃水浴保温30、60min,100℃水浴保温30min,保温结束后取上清液进行细菌内毒素检测。结果经过上述3种方法处理后的检测结果一致,并且80℃水浴保温30min对细菌内毒素没有影响。结论纤维蛋白原溶液在80℃水浴保温30min后,可消除供试品对鲎试剂的干扰。     

新型冠状病毒灭活操作对替考拉宁血药浓度的影响及一致性评价

摘要：目的:考察不同的新型冠状病毒灭活方式对替考拉宁血药浓度的影响,评价未经灭活操作与经灭活操作后替考拉宁血药浓度结果的一致性。方法:以替考拉宁质控对照品、质控血浆样品和临床实测样本作为考察对象,分别经56℃水浴加热30 min或经紫外照射60 min后,考察质控对照品和质控血浆样品的稳定性;并采用组内相关系数、Passing-Bablok回归法和Bland-Altman分析法,对灭活前后临床实测标本浓度结果进行统计分析。结果:紫外灭活条件下,替考拉宁的质控对照品不稳定;湿热灭活法条件下,替考拉宁质控对照品和质控血浆样品均稳定。52例临床样本经湿热灭活与未灭活浓度结果的组内相关系数为0.994（P<0.001）;Passing-Bablok回归方程为Y=0.9994X-0.214 2（R2=0.996,n=52）;96.15%（50/52）的检测数据在95%一致性界限内。3种统计结果均表明未经灭活操作与经湿热灭活法操作后,两者血药浓度结果的相关性与一致性良好。结论:替考拉宁的临床血药浓度检测标本可采用湿热病毒灭活法进行预处理,以减少实验室工作人员的病毒感染风险。     

人胰岛素免疫测定用国家标准品研制

一批人胰岛素原料，经高效液相，聚丙烯酰胺凝胶电泳，放射免疫分析证实是具有较高生物活性和免疫活性的单组分人胰岛素，适宜作为国家免疫标准品原料，用含蔗糖和人血清白蛋白的醋酸溶液将此原料配制成１０ＩＵ／Ｌ溶液，按每支１ｍＬ分装，经冻干制备成待标品。用ＷＨＯ人胰岛素免疫测定用国际标准品为对照品，进行免疫活性标定，２２组结果的均值为１０．０４ｍＵ／支，分别以国际标准品和待标品为对照测定同一组质控血清，其均值     

刺五加注射液含量测定方法的影响因素考察

目的考察刺五加注射液含量测定过程中的各种影响因素。方法在显色过程中,设置不同温度、光线强度并在显色后放置不同时间,用比色法在510nm波长处分别测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度值。结果显色过程中,温度、光线强度、显色后放置时间对样品溶液的吸光度有明显影响,而对对照品溶液的吸光度影响较小。结论温度、光线强度及显色后放置时间可导致含量测定结果偏低,应予以避免。     

槐耳颗粒蛋白含量测定方法的改进

目的:对槐耳颗粒蛋白含量测定方法进行改进.方法:采用比色法,调整了对照品溶液和供试品溶液两个浓度,使吸收度测定符合药典标准规定,采用离心或滤纸过滤制备样品,对显色条件进行探讨并确定了最佳显色条件.结果:蛋白浓度在40.1μg/mL～200.6μg/mL范围内与吸收度之间呈良好的线性关系,r=0.9982.对照品溶液和供试品溶液的吸收度均在0.3～0.8之间,样品溶液在显色反应前需经干燥滤纸过滤,加样回收率为102.7%,RSD=1.6%(n=6).结论:经改进后的蛋白含量测定方法能消除不溶性辅料引起的干扰,提高了测定的准确度和精密度,较真实反映药品的质量.     

转换曲线分光光度法测定复方磺胺甲(口恶)唑片中磺胺甲(口恶)唑与甲氧苄啶的含量

目的应用转换曲线分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲唑及甲氧苄啶的含量。方法取复方磺胺甲唑片样品和对照品磺胺甲噁唑及甲氧苄啶分别按规定的方法制成供试品溶液,于波长210~220 nm范围内,间隔1 nm分别记录样品溶液和对照品溶液吸光度(A)值,计算各自吸光度的转换值,将两组吸光度转换值作线性回归,按转换曲线法计算样品溶液磺胺甲噁唑及甲氧苄啶的含量。结果样品溶液吸光度转换值与对照品溶液吸光度转换值成良好的线性关系,r=0.996 6,样品测定其平均回收率为:磺胺甲噁唑(97.60±0.37)%,甲氧苄啶(98.7±0.28)%。结论转换曲线分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑及甲氧苄啶的含量快速可行。     

重组人促卵泡激素(rhFSH)肽图分析方法研究

目的建立重组人促卵泡激素(rh-FSH)的标准肽图分析方法。方法通过超滤、透析、冷冻干燥法富集制备rh-FSH对照品。通过尿素变性、二硫苏糖醇(DTT)还原、碘乙酸酰基化制备供试品溶液。采用N型-糖苷酶F(PNGaseF)酶解去除rh-FSH糖侧链,经SDS-PAGE验证切糖结果后,用胰蛋白酶水解,酶解所得肽段通过RP-HPLC分析,得到rh-FSH肽图。结果利用国外原研厂rh-FSH制剂富集制备的rh-FSH结构完整,可用作rh-FSH肽图分析的对照品。国产样品的肽图谱与对照品一致。结论建立的肽图分析方法可作rh-FSH产品的结构确证。     

Agacutase体外水解牛纤维蛋白原机制的研究(英文)

Agacutase是自尖吻蝮蛇蛇毒中分离出的新的具有止血功能的蛇毒类凝血酶,它能够将纤维蛋白原转化为纤维蛋白单体。通过SDS-PAGE和ELISA方法,我们研究了Agacutase体外水解牛纤维蛋白原的分子机制。实验结果显示,Agacutase仅仅水解牛纤维蛋白原的α亚基并释放血纤肽A,而对牛纤维蛋白原的β和/或γ亚基没有影响。研究表明Agacutase属于血纤肽A类(FP-A类型)的类凝血酶。     

无菌异丙醇开瓶后有效期的初步研究

 目的 通过研究3个批次无菌异丙醇在3种不同洁净度的环境中开瓶后，瓶内外观、无菌状态及异丙醇含量是否受到环境影响，初步确定无菌异丙醇开瓶后有效期。方法  从3个批次无菌异丙醇中每个批次随机选取162瓶，每个批次分别放置在A级、D级无菌室，无级别库房各54瓶。喷瓶的喷嘴始终处于打开状态，每个工作日进行3次喷雾操作。在第0、1、7、14、21、30天，检测异丙醇溶液的外观性状；采用薄膜过滤法测定异丙醇溶液中微生物的污染情况；采用气相色谱法测定异丙醇含量，并用独立样本t检验方法进行统计学分析。结果  实验期间所有异丙醇溶液外观无变色、无沉淀、无悬浮物，气味无变化，未出现微生物污染；异丙醇含量为体积分数（69.98~70.17）%，达到标示含量。通过统计学分析，异丙醇含量差异无统计学意义（t值0.07~2.18，p值均＞0.05）。结论  异丙醇在A级、D级无菌室和无级别库房开瓶后使用时间建议不超过30 d。     

检测C群脑膜炎球菌结合疫苗中游离多糖含量的脱氧胆酸钠沉淀法的建立

 目的  建立检测C群脑膜炎球菌多糖-破伤风类毒素结合疫苗（group C  meningococcal polysaccharide -tetanus toxoid conjugate vaccine, CPS-TT）中游离多糖的脱氧胆酸钠沉淀法。 方法  在不同pH条件下用脱氧胆酸钠（sodium deoxycholate,DOC）对CPS和TT进行沉淀,确定可有效分离游离多糖和结合多糖的最适沉淀条件,并对该法进行验证。 结果  DOC沉淀法的最适pH为3.5,在此pH条件下用DOC沉淀法检测3批CPS-TT显示,上清TT含量平均为2.3%。DOC沉淀法具有较好的准确度和精密度,3批CPS-TT的批内变异系数均小于5%。 结论  DOC沉淀法可用于C群脑膜炎球菌结合疫苗的质量控制。     

乙型脑炎减毒活疫苗病毒滴定用BHK21细胞密度和代次的确认

 目的  确定乙型脑炎（乙脑）减毒活疫苗病毒滴定使用的BHK₂₁细胞的密度和代次范围。方法  抽取20批不同代次BHK21细胞在6孔细胞板内培养成单层,进行细胞计数,计算细胞密度,滴定同批次乙脑病毒滴度国家参考品。将BHK₂₁细胞从P95传代至P105,观察细胞形态及生长情况,与已用于检定的BHK21细胞（＜P95）对比。用P95~P105 BHK₂₁细胞重复6次滴定同批参考品,对滴度结果进行双因素方差分析,并与21细胞的病毒滴度检测结果进行趋势分析比较。结果  20批6孔板单层BHK21细胞密度均值1.55×10⁶  个/ml,差异较大（95%置信区间：7.89×10⁴～3.02×10⁶  个/ml）。病毒滴度结果均在规定范围内（6.48~7.12 lg蚀斑形成单位/ml,相对标准偏差<5%）,单层细胞密度对滴度结果无显著影响。P95~P105 BHK21细胞的生长情况及细胞形态与F=0.13,P=0.721 4）、不同细胞代次（F=1.17,P=0.337 6）及两者的交互作用（F=0.30,P=0.978 0）对检测结果的影响无统计学意义,试验结果与较低代次细胞（21细胞密度对滴度检测结果无显著影响。     

冻干b型流感嗜血杆菌结合疫苗强制降解的稳定性研究

目的  通过强制降解试验观察冻干b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b，Hib）结合疫苗在高温、高湿、强光照射下的稳定性，为疫苗生产工艺、包装材料和贮存条件的确定提供科学依据。 方法  分别采用40 ℃温度、（75±5）%相对湿度、（4 500 ±500）lx光照处理冻干Hib结合疫苗，取样进行疫苗的全部项目检测。 结果  疫苗经40 ℃处理10 d，水分由2.0%上升至2.9%，多糖分子大小（分配系数小于0.2的洗脱液回收率）由94%下降至85%，但仍分别符合≤3.0%和＞60%的质量标准；而高分子结合物含量由87%降至75%，不符合≥80%的质量标准。（75±5）%相对湿度和（4 500±500）lx光照处理10 d对疫苗的影响不明显，疫苗质量指标仍符合规定。结论  高温是影响冻干Hib结合疫苗稳定性的主要因素。     

甲醛溶液对Sabin株脊髓灰质炎病毒灭活效果研究

 目的  验证4%甲醛溶液使Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎（脊灰）病毒达到预期灭活效果所需要的时间。方法  用4%甲醛溶液对15批Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊灰病毒在(36.5±1) ℃ 环境进行灭活,同时以15批未加入4%甲醛溶液的病毒纯化液作为对照组,按照企业注册标准采用微量细胞病变法测定病毒滴度。为了消除4%甲醛溶液对Hep-2细胞的影响,取4%甲醛溶液接种Hep-2细胞作为实验组,同时设置Hep-2细胞为对照组,每天观察对比两组细胞形态。对同一个Hep-2细胞悬液的总细胞数和活细胞数采用传统手工计数和全自动细胞计数仪计数,并比较分析结果。结果  实验组随着灭活时间的延长病毒滴度呈下降趋势,在灭活到第4天起,3个型别样品均检测不到病毒滴度;对照组病毒滴度在每毫升9.1～10.6 lg半数细胞培养物感染量范围内,符合企业注册标准的要求。4%甲醛溶液对Hep-2细胞生长有抑制作用,在培养观察到第3天时细胞全部失去活力死亡;对照组细胞形态良好呈多边形长成致密单层,活细胞组t值为18.098,总细胞组t值为4.005,P值均＜0.05,差异有统计学意义。结论  脊灰病毒在第4天能被彻底灭活,在进行此实验时应先消除甲醛对细胞培养的影响,避免结果出现假病变现象,确保结果的准确性;应用全自动细胞计数能提高计数结果的精确度。     

替加氟温敏凝胶含量测定方法的建立

目的:建立以高效液相色谱法测定替加氟温敏凝胶含量的最佳方法。方法:通过对中国药典和参考文献中测定替加氟温敏凝胶含量的HPLC方法进行比较,并根据凝胶剂特点考察检测条件、样品处理方法,测定替加氟温敏凝胶含量,对各方法回收率进行考察,做出综合评价。 结果:在流动相为:0.02 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液-甲醇(60:40)的条件下,替加氟在2~15 μg·ml^-1范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均加样回收率为99.71%,精密度RSD低于2%,符合要求。3批样品中替加氟的平均含量为标示量的(99.90±0.78)%。结论:本检测方法简便、快速、结果准确、重复性好,可为替加氟温敏凝胶的质量控制提供分析依据。     

Effects of an isotonic oral rehydration solution, enriched with glutamine, on fluid and sodium absorption in patients with short-bowel syndrome

Aim : To compare the effects of a standard oral rehydration solution with a polymeric glucose isotonic solution enriched with glutamine on water and sodium absorption in the short bowel.
Methods : Six patients with high jejunostomy were tested in a random order on 2 consecutive days with the standard solution (20 g/L glucose, 94 mmol/L sodium, 292 mOsm/kg osmolality) and a solution containing maltodextrins (18 g/L Glucidex 12; hydrolysis of 18 g of Glucidex 12 yields 20 g glucose) enriched with 14.6 g/L of glutamine (94 mmol/L sodium, 282 mOsm/kg osmolality). Solutions were administered via a naso-gastric tube at a rate of 2 mL/min. Jejunal effluent for each solution was collected during an 8-h period, after a 14-h equilibrium period.
Results : The net 8-h fluid absorption was not significantly different between the standard solution and the solution with glutamine (333 ± 195 and 213 ± 251 mL, respectively (mean ± S.E.M.)). Net sodium absorption was higher for the standard solution than for the solution with glutamine (15 ± 15 vs. 2 ± 20 mmol, P  < 0.05). The rate of glucose absorption was not different between the solutions.
Conclusion : The replacement of glucose by maltodextrins and the addition of glutamine to the standard oral rehydration solution, without changing its sodium content or osmolality, results in a reduction of sodium absorption in the short-bowel syndrome.     

续断饮片标准汤剂质量评价研究

目的： 制备续断饮片标准汤剂,并建立质量控制方法。方法： 制备了15批续断饮片标准汤剂,以川续断皂苷Ⅵ作为检测指标,计算出膏率、含量和转移率,并建立UPLC特征图谱分析方法。结果： 通过对15批续断饮片标准汤剂进行检测,出膏率范围为29.05%~39.06%,川续断皂苷Ⅵ的含量范围为36.14~84.41 mg·g^-1,转移率的范围为29.10%~49.12%。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）软件进行分析和相似度评价,标定了17个共有峰,并指认绿原酸、咖啡酸、马钱苷和川续断皂苷Ⅵ 4个色谱峰,通过和对照图谱比对,相似度均高于0.92。结论： 建立的续断饮片标准汤剂的质量评价方法准确、稳定、重复性良好,可以续断配方颗粒的质量控制提供参照。     

功能性氧化石墨烯-β-环糊精/阿司匹林复合物的制备和质量评价及其抗凝血性

目的：合成新型的功能性氧化石墨烯-β-环糊精/阿司匹林（GO-DEX-β-CD/ASA）复合物,并对其进行质量评价和抗凝血性研究。方法：利用电子扫描显微镜（SEM）和X-线衍射仪（XRD）对其形貌进行表征;对生成物的包封率、回收率以及精密度进行评价,以离心法测定GO-DEX-β-CD/ASA复合物的包封率;通过溶血试验和复钙试验评价其血液相容性。结果：GO-DEX-β-CD/ASA复合物的平均回收率（n=3）为（100.3±0.32）%,包封率（n=5）为（76.08±1.06）%,溶血率低于5%,符合生物医学材料的标准。结论：GO-DEX-β-CD/ASA复合物制备工艺可行,质量控制方法简便可靠,具有良好的血液相容性。     

UPLC-MS/MS法同时检测大鼠血浆中参芪扶正注射液主要成分的含量及其药动学

目的：建立超高效液相-三重四极杆质谱联用（UPLC-MS/MS）法同时测定大鼠血浆中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D葡萄糖苷和党参炔苷的浓度,研究参芪扶正注射液在大鼠体内的药动学。方法：血浆样品加入适量内标,50%甲醇-乙腈沉淀蛋白,离心后取上清进样。采用ACE Excel 1.7 C₁₈柱（50 mm×2.1 mm,2.1 μm）,柱温：40℃,流速：0.6 mL·min^-1,流动相由0.1%甲酸水和0.1%甲酸-乙腈组成,采用梯度洗脱,分析时间2.5 min。质谱采用ESI源,正离子检测。大鼠尾静脉注射参芪扶正注射液浓缩液,眼眶采血测定血浆中药物浓度,药动学参数以DAS 3.0软件处理。结果：黄芪甲苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D葡萄糖苷、党参炔苷的浓度分别在5~2 000 ng·mL^-1、2~800 ng·mL^-1、10~4 000 ng·mL^-1内均呈良好线性关系（R ≥ 0.991 5）;日内、日间精密度良好,RSD均小于13.3%（n=6）;提取回收率均在79.0%~97.1%之间,RSD均小于11.4%（n=6）。药动学结果表明,黄芪甲苷、党参炔苷和毛蕊异黄酮-7-O-β-D葡萄糖苷在大鼠体内的AUC_0-t分别为（38.84±17.20）、（23.11±6.84）、（5.32±0.36）μg·min·L^-1,t_1/2分别为（56.44±28.25）、（47.48±9.54）、（10.01±4.42）min,CL分别为（0.15±0.06）、（1.18±0.47）、（0.47±0.11）mL·min^-1·kg^-1。结论：本法简便、快速、灵敏度高、专属性好,可用于参芪扶正口服液大鼠血浆中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D葡萄糖苷和党参炔苷的含量测定及药动学研究。