骨髓间充质干细胞及在软骨组织工程中的研究进展

间充质干细胞 (ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ,ＭＳＣｓ)是指能在适宜的条件下分化再生骨、软骨、肌肉、韧带、肌腱、脂肪、骨髓基质等间充质组织的一类细胞 ,具有典型的干细胞特点 ,终身存在于骨髓和其他组织器官中 ,负责组织的修复和更新〔1,2〕。它们具有多向分化潜能和强大的增殖能力 ,并且易于从骨髓中分离及体外扩增纯化 ;因此 ,近年来在组织工程领域倍受重视 ,得到广泛研究。笔者仅就骨髓间充质干细胞的生物学特性及其在软骨组织工程中的研究进展作一综述。1　骨髓间充质干细胞的主要生物学特性　　骨髓中只含有少量间充…     

膀胱癌化疗中纤维连接蛋白介导的药物耐受研究

纤维连接蛋白 (ＦＮ)与肿瘤的浸润、生长、转移有密切的关系。Ｄａｍｉａｎｏ等[1]发现 ,多发性骨髓瘤细胞粘附于包被ＦＮ的培养板后 ,对化疗药物的敏感性降低 ,将其称为细胞粘附介导的药物耐受(ＣＡＭ ＤＲ)。我们的实验检测了膀胱肿瘤细胞与ＦＮ粘附后对化疗药物敏感性的变化。一、材料与方法1 实验材料 :膀胱癌细胞株Ｔ2 4购自中科院上海细胞所 ;ＭＴＴ、丝裂霉素Ｃ(ＭＭＣ)均购自美国Ｓｉｇｍａ公司 ;ＦＮ与小牛血清 (ＢＳＡ)购自美国ＧｉｂｃｏＢＲＬ公司 ;ＡＮＮＥＸＩＮⅤ试剂盒购自Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ公司。∑ 960型酶标仪、…     

Percoll法处理对人精子运动参数的影响

为观察来源于３种不同精液标本精子运动参数的差异及其Ｐｅｒｃｏｌｌ处理后的变化，本文对新收集的正常精液精子（Ｉ组）少精及弱精症精子（Ⅱ组）及正常精液冻融精子（Ⅲ组）各１０份，分别于Ｐｅｒｃｏｌｌ处理前后电子计算机精液分析仪（Ｃｏｍｐｕｔｅｒａｓｓｉｓｔｅｄｓｅｍｅｎａｎａｌｙｓｅｒ）进行运动特性分析，记录ＭＯＴ，ＶＳＬ，ＶＣＬ，ＬＩＮ，ＡＬＨ及ＶＡＰ６项参数，其结果进行统计学分析，Ｐｅｒｃｏｌｌ处理     

三氧化二砷对肝癌细胞株BEL-7404、SMMC-7721 和肝癌裸鼠移植瘤模型的作用

砒霜主要成分为三氧化二砷(Ａｓ2 Ｏ3) ,用于治疗急性早幼粒细胞白血病效果良好 ,且毒副作用较低[1] 。本研究旨在观察Ａｓ2 Ｏ3对人肝癌细胞株ＢＥＬ 740 4,ＳＭＭＣ 772 1和肝癌裸鼠移植瘤模型的影响 ,探讨Ａｓ2 Ｏ3对原发性肝癌的作用及其机制 ,现将结果报道如下。一、材料和方法1.药物和试剂 :0 .1%Ａｓ2 Ｏ3溶液购自哈尔滨医科大学第一附属医院 ;噻唑蓝 (ＭＴＴ)购自美国Ｓｉｇｍａ公司 ;细胞凋亡原位检测试剂盒为德国ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ公司产品。小鼠抗增殖细胞核抗原多克隆抗体为美国Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ公司产…     

性激素在前列腺增生发病机制中的作用

为了探讨性激素在良性前列腺增生中的作用 ,我们观察了不同浓度的雌二醇 (Ｅ2 )和双氢睾酮 (ＤＨＴ)对性激素结合球蛋白 (ＳＨＢＧ)预处理的前列腺细胞释放环一磷酸腺苷 (ｃＡＭＰ)的影响 ,报告如下。材料与方法　前列腺组织标本取自本院经膀胱前列腺摘除手术病例。细胞原代培养 :将新鲜前列腺组织修剪后 ,酶消化过夜。翌晨收集细胞悬浮于含10 %ＦＢＳ的无酚红ＲＰＭＩ 16 40培养液中培养 2ｄ。前列腺上皮、间质细胞培养[1] :将消化的前列腺细胞洗涤后 ,不连续Ｐｅｒｃｏｌｌ分离液梯度离心 ,分离出前列腺上皮细胞、间质细胞 ,分别接种于改…     

CHINESE JOURNAL OF GENERAL SURGERY Vol.1～ 6200 0 MEDICAL SUBJECT HEADING INDEX

ＡＡＢＤＯＭＩＮＡＬＣＯＭＰＡＲＴＭＥＮＴＳＹＮＤＲＯＭＥ/ｅｔｉｏｌ　ＭａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆＢｕｄｄ -Ｃｈｉａｒｉｓｙｎｄｒｏｍｅｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｗｉｔｈａｂｄｏｍｉｎａｌｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔｓｙｎ ｄｒｏｍｅ　ＬＵＸｉｕ -ｂｏ ,ＸＵＹａ -ｊｕａｎ ,ＭＡＸｉｕ -ｘｉａｎ ,ｅｔａｌ　 ( 2 ) :16 6 -16 8 ＡＣＵＴＥＤＩＳＥＡＳＥ　Ｔｈｅｃｕｒｒｅｎｔｓｔａｔｕｓｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｓｅｖｅｒｅａｃｕｔｅｐａｎｃｒｅ ａｔｉｔｉｓ　ＬＩＵＳｈｅｎｇ -ｘｏｎｇ ,ＤＯＵＬｉ-ｘｕｅ　 ( 4 ) :3…     

人脂肪组织源性多种系细胞应用于细胞治疗

自体多能干细胞在组织工程和基因治疗方面的应用潜力是巨大的 ,理论上有两种基本类型的干细胞具有这种潜力 :胚胎干细胞 (ＥＳＣｓ)和自体干细胞。但基于ＥＳＣｓ在细胞调控和伦理道德上的潜在性问题 ,其实用性受到限制。而自体中胚层干细胞 (ＭＳＣｓ)由于其天然性、免疫相容性好 ,应用时不存在伦理上的争议。起源于骨髓的自体干细胞能分化成脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞和成骨细胞 ,已成为未来组织工程技术理想的选择。但骨髓穿刺通常需要基础或脊髓麻醉 ,且只能得到少量的细胞 (大约 1ＭＳＣ/10 5基质支持细胞 ) ,需经体外大量扩增才能满…     

雌激素受体阴性乳癌细胞株中Cyclin D1和Ki-67表达与细胞凋亡的关系

本研究应用雌激素受体 (ＥＲ)阴性乳癌细胞株ＭＤＡ ＭＢ 435ｓ探讨在ＥＲ阴性乳癌细胞中ＣｙｃｌｉｎＤ1及Ｋｉ 67表达与细胞凋亡的关系。1　材料与方法1 .1　材料ＥＲ阴性乳癌细胞株ＭＤＡ ＭＢ 435购于中科院上海细胞生物研究所 ,凋亡检测试剂盒、ＣｙｃｌｉｎＤ1单抗及Ｋｉ 67单抗购于ＭａｘｉｍＢｉｏｔｅｃｈ公司 ,ＵＳＡ。1 .2　检测指标及方法1 .2 .1　细胞周期和凋亡率测定　将 2× 1 0 5个 /ｍｌ浓度的ＭＤＡ ＭＢ 435ｓ细胞接种于 2 4孔板中 ,再将 1 0 - 8ｍｏｌ/Ｌ的 1 ,2 5(ＯＨ) 2 Ｄ3加入 2 4孔板中 ,于 1、2、3、4、5天作流…     

干细胞技术与组织损伤修复

干细胞是一类具有自我更新与多向分化能力的细胞 ,能够产生表型与基因型和自己完全相同的子细胞 ,同时还能分化为祖细胞 ,产生至少一种类型的高度分化的子细胞。根据干细胞的发生学来源 ,干细胞可以分为胚胎干细胞 (ＥＳ细胞 )和组织干细胞 (ｓｏｍａｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ)或成体干细胞。ＥＳ细胞是指由胚胎内细胞团 (ＩＣＭ)或原始生殖脊细胞 (ＰＧＳ)分离出来的多潜能细胞系。目前ＥＳ细胞有三个来源 :(1)由胚胎囊胚期的内细胞团中直接分离 ;(2 )分离终止妊娠的胎儿组织中原始胚胎生殖脊细胞 ;(3)利用体细胞核转移 (ＳＣ ＮＴ)技术 ,将…     

结直肠癌骨髓微转移检测的临床意义

我们应用免疫组织化学方法 ,联用细胞角蛋白 (ＣＫ )、膜上皮抗原 (ＥＭＡ)、癌胚抗原 (ＣＥＡ)单克隆抗体对结直肠癌骨髓微转移进行检测。一、材料和方法1.骨髓血标本 :结直肠癌患者 6 1例 ,其中男 2 9例 ,女 32例。高分化腺癌2 6例 ,中分化腺癌 30例 ,低分化和粘液腺癌 5例。ＤｕｋｅｓＡ期 2 4例 ,Ｂ期 2 6例 ,Ｃ期 11例。对照组男 2例 ,女 7例 ,其中结肠息肉 5例 ,胃溃疡 4例。术前 1周抽取骨髓血标本。2 .试剂 :免疫组织化学链霉卵白素 过氧化物酶标 (ＳＰ)试剂盒、ＣＫ、ＥＭＡ、ＣＥＡ单克隆抗体均购自美国Ｚｙｍｅｄ公司。3.骨髓血…     

γ刀照射对胶质瘤细胞p16基因蛋白水平表达的影响

我们针对体外培养的胶质瘤细胞 ,在亚细胞水平探讨了肿瘤细胞γ刀照射后的凋亡机理 ,为以后研究提供依据 ,现报道如下。一、材料与方法1.主要试剂及来源 :培养基及蛋白酶为美国Ｆｌｕｋａ公司产品。小牛血清为长春生物制品所生产。兔抗鼠 ｐ16多抗(ＮＨ 46)为美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司产品。链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶染色试剂盒 (ＳＰ90 0 0 )为北京中山公司产品。2 .细胞培养 :Ｃ6细胞为高度恶性的胶质瘤细胞 ,购自美国生物菌种存储中心 (ＴＡＣＣ ,Ｐｏｃｋｖｉ ,ＭＤ ) ,接种于 2 5ｃｍ2培养瓶中单层培养。培养基含 10 %热灭活小…     

膀胱癌多药耐药的流式细胞术分析

本实验旨在研究流式细胞术(ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ,ＦＣＭ)在膀胱癌细胞的多药耐药分析方面的作用,现报道如下。一、材料与方法1.试剂及仪器:ＤＭＥＭ、ＤＮＡ提取试剂盒ＤＮＡｚｏｌ、ＲＮＡ提取试剂盒Ｔｒｉｚｏｌ为Ｇｉｂｃｏ产品;秋水仙素、甲酰胺、ｐｏｌｙｂｒｅｎｅ为Ｓｉｇｍａ产品;缺口平移系统(ｎｉｃｋｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ)为Ｐｒｏｍｅｇａ产品,尼龙膜为ＺｅｔａＰｒｏｂｅ产品;鲑鱼精ＤＮＡ购自晶美生物公司;ＭＤＲ1ＰＣＲ引物Ｐ1:5′ＣＣＣＡＴＣＡＴＴＧＣＡＡＴＡＧＣＡＧＣ3′,Ｐ2:5′ＣＴＴＣＡＡＡＣＴＴＣＴＧ…     

ＯＧＰ 对低氧环境中小鼠ＢＭＳＣｓ 成脂分化影响的研究

目的　检测成骨生长肽(ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ ｇｒｏｗｔｈ ｐｅｐｔｉｄｅ?ＯＧＰ) 与低氧环境对小鼠骨髓间充质干细胞( ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ?ＢＭＳＣｓ)成脂肪分化的影响? 方法　实验随机分为４ 组:Ａ 组(常氧组)、Ｂ 组(１％Ｏ２ 组)、Ｃ 组(常氧＋ １０￣９ｍｏｌ/ Ｌ ＯＧＰ 组)、Ｄ 组(１％Ｏ２ ＋１０￣９ ｍｏｌ/ Ｌ ＯＧＰ 组)? ＥＬＩＳＡ 法定量检测低氧诱导因子１α(ｈｙｐｏｘｉａ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ １α?ＨＩＦ￣ １α)蛋白的表达?１４ ｄ 后?油红Ｏ 染色观察ＢＭＳＣｓ 脂滴形成情况?实时荧光定量ＰＣＲ 和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 检测成脂相关基因 ＰＰＡＲ￣γ 和Ｃ/ ＥＢＰα 的ｍＲＮＡ 和蛋白表达水平? 结果　与Ａ 组及Ｃ 组相比?Ｂ 组与Ｄ 组ＨＩＦ￣１α 表达明显上调(Ｐ<０?? ０１)?与 Ａ 组相比?Ｂ 组、Ｃ 组、Ｄ 组脂滴生成及ＰＰＡＲ￣γ 和Ｃ/ ＥＢＰα 的ｍＲＮＡ 和蛋白表达降低(Ｐ<０?? ０１)?与Ｂ 组及Ｃ 组相比?Ｄ 组中脂 滴生成及ＰＰＡＲ￣γ 和Ｃ/ ＥＢＰα 的信使ＲＮＡ 和蛋白表达下调(Ｐ<０?? ０１)? 结论　ＯＧＰ 及１％低氧环境均能抑制ＢＭＳＣｓ 成脂分 化?且二者抑制ＢＭＳＣｓ 成脂分化具有协同效应?     

Effect of dexamethasone by local treatment on cerebral edema and serum myelin basic protein after brain injury in rabbits

ＳＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ ,ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ,ＨｅｎａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ 45 0 0 5 2 ,Ｃｈｉｎａ (ＹａｎｇＢａｎｄＳｏｎｇＬＪ)ＡｌｂｅｒｔＥｉｎｓｔｅｉｎＣｏｌｌｅｇｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅｏｆＹｅｓｈｉｖｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,ＮｅｗＹｏｒｋ ,10 46 1(ＧｕａｎＦＸ)ＴｈｅＰｈｙｓｉｃｓＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅｎａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ 45 0 0 5 2 ,Ｃｈｉｎａ (Ｌｉ…     

肋骨骨髓树突状细胞的诱导及在肿瘤免疫治疗中的应用前景

树突状细胞 (ＤＣｓ)是专业性抗原递呈细胞 ,在肿瘤免疫中起重要作用。在临床实验研究中 ,大多利用患者外周血干细胞诱导扩增ＤＣｓ,我们从肾癌患者手术切除的肋骨骨髓中获得ＤＣｓ ,对诱导方法及ＤＣｓ特性鉴定报告如下。材料与方法　ＧＭ ＣＳＦ为美国先灵葆雅药厂产品 ;ＩＬ 4和ＴＮＦ α由军事医学科学院生物工程所惠赠 ;ＣＤ80、ＣＤ86和ＣＤ1ａ纯化单抗为Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ公司产品 ;标记抗体ＣＤ45、ＣＤ14、ＣＤ4、ＣＤ8、ＣＤ3、ＨＬＡ ＤＲ为Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ公司产品。树突细胞的获得和培养 :从肋骨冲出的细胞 ,经密度梯…     

检测结直肠癌骨髓微转移的临床意义

本研究运用免疫组织化学方法 ,联用细胞角蛋白 (ＣＫ)、膜上皮抗原 (ＥＭＡ)、癌胚抗原 (ＣＥＡ)单克隆抗体对结直肠癌骨髓微转移进行检测 ,具有重要的临床应用价值。一、材料和方法1.骨髓血标本 :结直肠癌患者 6 1例 ,男 2 9例 ,女 32例。平均年龄 :5 6 3岁。高分化腺癌 2 6例 ,中分化腺癌 30例 ,低分化和粘液腺癌 5例。ＤｕｋｅｓＡ期 2 4例 ,Ｂ期 2 6例 ,Ｃ期 11例。对照组男 2例 ,女 7例 ,其中结肠息肉 5例 ,胃溃疡 4例。术前 1周抽取骨髓血标本。2 .试剂 :免疫组织化学ＳＰ试剂盒、ＣＫ、ＥＭＡ、ＣＥＡ单克隆抗体均购自美国ＺＹＭＥ…     

Early changes of arginine vasopressin and angiotensin II in patients with acute cerebral injury

ＡＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｍｅｒｇｅｎｃｙ ,ＳｉｒＲｕｎＲｕｎＳｈａｗＨｏｓｐｉｔａｌ,ＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ ,ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｈａｎｇｚｈｏｕ 310 0 16 ,Ｃｈｉｎａ(ＨｕａｎｇＷＤ ,ＷｕＳＤ ,ＪｉｎＺＦａｎｄＢａｏＤＧ)ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｍｅｒｇｅｎｃｙ ,ＦｉｒｓｔＡｆｆｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ,ＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ ,ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｈａｎｇｚｈｏｕ 310 0 0 3 ,Ｃｈｉｎａ(ＹａｎｇＹＭ)ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｓｕｒｇ…     

Treatment of recurrent traumatic carotid cavernous fistula via endovascular embo lism technique

ＥＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ,1ｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ,ＨａｒｂｉｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ,Ｈａｒｂｉｎ150001,Ｃｈｉｎａ(ＳｈｉＺＳ,ＬｉｎＣＨ,ＣｈｕＭａｎｄＺｈａｎｇＸＤ)ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ,1ｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ,ＳｕｎＹａｔｓｅｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ,Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ,Ｃｈｉｎａ(ＨｕａｎｇＺＳ,ＱｉＴＷ)ｎｄｏｖａｓｃｕｌａｒｅｍｂｏｌｉｓｍｔｅｃｈｎｉｑｕｅｈａｓ…     

Misdiagnosis of eosinophilic ulcer of oral mucosa as squamous cell carcinoma in old patients

ＥＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ,ＳｔｏｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌＨｏｓｐｉｔａｌ,ＴｉａｎｊｉｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ,Ｔｉａｎｊｉｎ300070,Ｃｈｉｎａ(ＧａｏＳ,ＬｉｕＮ,ＬｉＣＦ,ＬｉＳＬａｎｄＤｕＪ)ｏｓｉｎｏｐｈｉｌｉｃｕｌｃｅｒｏｆｏｒａｌｍｕｃｏｓａ(ＥＵＯＭ)ｉｓａｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｅａｒａｎｃｅ,ｗｈｉｃｈａｐｐｅａｒｓｔｏｂｅｆｒｅｑｕｅｎｔｌｙｕｎｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄｏｒｍｉｓｄｉａｇｎｏｓｅｄｕｓｕａｌｌｙａｓｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌ…     

微载体培养L02人肝细胞应用于生物人工肝的初步研究

Ｌ0 2人肝细胞株组织学来源为人正常肝组织 ,具备一定正常肝细胞的生物功能。我们将高密度微载体培养的Ｌ0 2人肝细胞聚集体加入中空纤维生物反应器 ,构建简易体外生物人工肝装置并进行初步的应用研究。一、材料与方法1.材料 :Ｌ0 2人肝细胞株购于中国科学院上海细胞生物学研究所 ;Ｃｙｔｏｄｅｘ3微载体为Ｐｈａｒｍａｓｉａ公司产品 ;聚羟乙基异丁烯酸 (Ｐｏｌｙ ＨＥＭＡ )及ＤＭＥＭ、ＨａｍｓＦ12培养基均为Ｓｉｇｍａ公司产品。2 .Ｌ0 2人肝细胞的微载体培养 :( 1)取 1.4ｇＣｙｔｏｄｅｘ 3,水化处理[1] ;( 2 ) 12 %Ｐｏｌｙ ＨＥＭＡ…