烟雾暴露大鼠氧化应激生精损害的中医药治疗实验研究

目的 研究补肾填精中药麒麟丸对烟雾暴露造成氧化应激所致大鼠睾丸、附睾与精子的抗氧化作用。方法 随机将60只雄性成年大鼠均分6组:空白组、模型组、五子衍宗丸组、麒麟丸低剂量组、麒麟丸中剂量组、麒麟丸高剂量组。除空白组外,每天上午烟雾暴露制备大鼠睾丸生殖毒性模型,下午灌胃给药,每周测量体质量,调整给药剂量,连续56d后,处死大鼠取样检测,取血清测定睾酮(T)水平;分别称取大鼠精囊腺、附睾、睾丸的质量并计算相应器官指数;留取附睾内精液,进行计算机辅助的精液分析(CASA)及精子DNA完整率分析;酶联法测定睾丸谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;睾丸附睾病理组织学检查。结果 模型组大鼠精子总活力[前向运动(PR)%+非前向运动(NP)%]显著下降,睾丸附睾匀浆MDA水平(28.0±3.2)显著升高,而SOD(13.2±2.0)、GSH-Px(21.1±8.3)明显降低,与空白组相比均有显著差异(P0.05);麒麟丸各剂量组大鼠精子浓度及总活力比空白组下降,但仍显著高于模型组(P0.05),MDA显著低于模型组(P0.05),SOD及GSH-Px显著高于模型组(P0.05);麒麟丸中、高剂量组大鼠精子正常形态率及各剂量组DNA完整率显著高于模型组(P0.05)。病理检查:与空白组相比,模型组呈生精功能减低改变。表现为睾丸生精小管萎缩,排列变稀疏,生精上皮变薄,生精细胞减少;附睾管腔内成熟精子变少;精囊腺管腔内分泌物减少,上皮乳头萎缩、数量减少。麒麟丸组与模型组相比,随着剂量增加,生精功能减低的例数逐渐减少,疗效与剂量间有依从关系。结论 补肾填精中药麒麟丸可通过提高抗氧化酶活性,抑制氧化应激的发生,起到抗氧化作用,同时可以修复烟雾暴露对睾丸、附睾、精囊腺造成的病理损伤,最终可以保护生精功能,提高精子浓度、总活力与正常形态率,降低精子DNA碎片率。     

非酶糖基化终末产物抑制大鼠睾丸Leydig细胞睾酮的生成

目的:研究非酶糖基化终末产物受体(RAGE)在大鼠睾丸Leydig细胞上的表达及非酶糖基化终末产物(AGEs)对大鼠睾丸Leydig细胞睾酮合成的抑制作用。方法:原代培养大鼠睾丸Leydig细胞,RT-PCR和免疫荧光技术检测RACE在大鼠Leydig细胞上表达,不同浓度AGEs处理Leydig细胞(25、50、100、200μg/ml),ELISA法测定睾酮分泌量。结果:RT-PCR和免疫荧光结果表明RAGE在大鼠睾丸Leydig细胞上表达,不同浓度AGEs处理后,人绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导的Leydig细胞睾酮合成量呈剂量浓度依赖性下降,与对照组相比,50、100、200μg/ml AGEs处理组差异显著(P0.01)。结论:大鼠Leydig细胞上存在RAGE受体,AGEs显著抑制原代培养大鼠Leydig细胞睾酮的分泌。     

晚期糖基化终产物及其受体对大鼠阴茎海绵体组织中内皮素-1活性的影响

目的:通过观察大鼠阴茎海绵体组织中晚期糖基化终产物(AGEs)及其受体(RAGE)的变化对内皮素1(ET-1)活性的影响,探讨AGEs在糖尿病性勃起功能障碍(DMED)发生发展中的作用。方法:成年雄性SD大鼠60只,随机取40只用于制作糖尿病模型,造模后共27只大鼠成模,将其分为两组:糖尿病(DM)组15只和糖尿病+氨基胍给药(DM+AG)组12只;另20只大鼠平分为两组:正常对照(NC)组和正常对照+氨基胍给药(NC+AG)组;两组氨基胍(AG)给药组大鼠造模后即在其饮水中按1g/L剂量加入AG。饲养8周后取各组大鼠阴茎海绵体组织,一部分用于免疫组化法观察分析AGEs及其受体的分布和表达,剩余部分匀浆后检测AGE-肽(AGE-P)含量和ET-1活性。结果:DM组阴茎海绵体组织中AGEs和RAGE的表达、AGE-P含量及ET-1活性明显高于正常对照组(P<0.05);正常对照组与NC+AG组间比较在各项指标上则无明显差异(P>0.05)。结论:糖尿病状态下AGEs与RAGE的结合效应可以引起大鼠阴茎海绵体组织中ET-1活性的增强,从而促进DMED的发生发展。     

麒麟丸对无精子症模型小鼠睾丸生精功能的影响

目的:探讨麒麟丸是否促进无精子症模型小鼠生精功能恢复,揭示其调控睾丸生精功能的机制。方法:取15只4周龄ICR雄性小鼠,随机分成模型组、麒麟丸低剂量组、麒麟丸高剂量组,每组5只。采用白消安建立无精子症小鼠模型。建模后麒麟丸组每天给予不同剂量麒麟丸灌胃给药[低剂量组和高剂量组分别为2 000、8 000 mg/(kg·d)],模型组予正常饮食处理,28 d后颈椎脱臼法处死小鼠。HE染色检测小鼠附睾和睾丸组织显微结构,Western印迹检测小鼠睾丸中各级生精细胞、支持细胞和间质细胞特异性标志物表达情况,免疫荧光染色检测睾丸内这些标志物的定位与表达情况。结果:模型组小鼠睾丸中各级生精细胞数量明显减少,大多数附睾管中未见精子; Johnsen评分(5. 2±0. 5)分。麒麟丸高剂量组小鼠生精小管腔内生精细胞排列紧密、层次分明,附睾管腔中见大量精子,未见非精子细胞成分; Johnsen评分(9. 4±0. 6)分。麒麟丸低剂量组小鼠睾丸中各级生精细胞数量相比较模型组有所提升,但是对比高剂量组仍明显减少,部分附睾管中可见精子; Johnsen评分(7. 6±0. 6)分。Johnsen评分模型组显著低于麒麟丸高、低剂量组(P 0. 01),而且麒麟丸高、低剂量组间也有统计学差异(P 0. 05)。Western印迹结果显示,支持细胞标志物GATA4、WT1、SCF、BMP4的表达水平模型组均显著低于麒麟丸高、低剂量组(P 0. 01),高剂量组显著高于低剂量组(P 0. 05或0. 01);精原干细胞和未分化精原细胞标志物UCHL1、STRA8、NGN3、PLZF 3组小鼠间无显著差异;精母细胞标志物DMC1、SYCP3模型组也均显著低于麒麟丸高、低剂量组(P 0. 05或P 0. 01),高剂量组显著高于低剂量组(P 0. 05或P 0. 01)。免疫荧光染色结果显示,SYCP3的表达与Western印迹结果一致; Ki67荧光信号分布在精原细胞,其荧光信号强度模型组低于麒麟丸高、低剂量组;精子顶体标志物PNA主要分布在生精小管内,模型组小鼠没有出现明显的点状信号,麒麟丸高、低剂量组可见大量的荧光信号。结论:麒麟丸可能是通过改善睾丸中支持细胞的功能,从而促进精原细胞进入减数分裂,增加精子的生成。     

麒麟丸对少弱精子症模型雄性大鼠生殖功能的保护作用研究

目的:研究麒麟丸对雷公藤多苷所致少弱精子症模型雄性大鼠的生殖功能保护作用。方法:取28只雄性SD大鼠,随机分成正常对照组、模型组、麒麟丸低、高剂量组,除正常对照组外,其他各组灌服雷公藤多苷40 mg/(kg·d),同时麒麟丸给药组同日给予不同剂量麒麟丸保护,低剂量组给予麒麟丸1.62 g/(kg·d),高剂量组给予麒麟丸3.24 g/(kg·d)。连续给药30 d后,处死大鼠,称重大鼠睾丸,计算睾丸脏器指数,检测附睾精子浓度、活动率,检测生殖激素水平,评估抗氧化指标,HE切片观察大鼠睾丸组织形态学改变。结果:实验结束后,麒麟丸低、高剂量组精子浓度分别为(14.57±3.95)×10~6/ml、(39.71±11.31)×10~6/ml,精子活力为(3.71±1.11)%、(4.29±1.80)%皆较模型组(4.71±1.25)×10~6/ml、(0.57±0.53)%有明显提高(P0.05);与模型组FSH(1.71±0.52)mIU/ml比较,麒麟丸低、高剂量组FSH下降,分别为(1.49±0.62)mIU/ml、(1.12±0.83)mIU/ml;fT水平较模型组升高(27.27±3.63)nmol/L、(32.80±2.51)nmol/L vs(22.81±2.75)nmol/L,SHBG水平升高(94.83±11.17)nmol/L、(88.05±9.21)nmol/L vs(56.74±8.29)nmol/L,差异皆有显著性(P0.05),但T水平无明显变化(P0.05)。与模型组比较,麒麟丸低、高剂量组SOD水平升高(277.14±15.84)U/ml、(299.60±20.83)U/ml vs(250.04±31.06)U/ml;ROS水平下降(397.61±62.71)IU/ml、(376.84±67.14)IU/ml vs(552.20±58.07)IU/ml(P0.05)。与模型组比较,低、高剂量组HE染色显示麒麟丸能增加少弱精子症大鼠睾丸生精小管内各级生精细胞层次和数量。结论:麒麟丸能明显提高少弱精子症大鼠精子质量,改善生殖激素水平,减轻氧化应激损伤,改善大鼠睾丸组织形态,对生殖系统有较好的保护作用。     

晚期糖基化终末产物及受体在实验性2型糖尿病大鼠种植体周围的变化及表达

目的 建立2型糖尿病大鼠动物模型,探讨晚期糖基化终末产物及其受体在实验性2型糖尿病大鼠种植体骨整合过程中的变化及表达.方法 45只3个月龄SD健康雄性大鼠,将大鼠随机分为糖尿病模型组25只和正常对照组20只.首先建立2型糖尿病大鼠模型,建模成功后将模型大鼠随机分为DM组和DM种植组,每组10只.将20只正常组大鼠随机分为正常对照组和正常种植组,每组10只.分别于正常种植组和DM种植组的胫骨近骺端植入纯钛种植体,植入10周后于下腔静脉采血,保存所采集标本,用RF-5301PC型荧光分光光度计测定血清中AGEs含量的变化.硬组织标本采用不带种植体脱钙切片,以正常组为对照,HE染色后用免疫组织化学方法检测种植体周围RAGE的表达.结果 10周后,DM种植组和DM组与正常对照组和正常种植组相比,血清中AGEs的变化差异有统计学意义（P ＜0.05）,正常种植组和DM种植组与正常对照组的种植体周围骨组织RAGE表达比较,差异均有统计学意义（P ＜0.05）;DM种植组与DM组比较,差异亦有统计学意义（P ＜0.05）.结论 种植体骨组织愈合过程中AGEs和RAGE相互作用是影响2型糖尿病种植体骨结合的机制之一.     

晚期糖基化终末产物通过Wnt/β-catenin信号通路调控足细胞自噬和迁移

目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导Wnt/β-catenin信号通路活化对足细胞自噬和迁移的影响。方法将小鼠永生化肾足细胞系分为牛血清白蛋白组(100mg/L BSA)、糖基化终末产物组(100 mg/L BSA-AGEs)和糖基化终末产物+DKK-1组(100mg/L BSA-AGEs+100 DKK-1 mg/L),以未加干涉的正常足细胞为对照组。Western blot检测足细胞β-catenin蛋白、自噬膜蛋白微管相关蛋白轻链3-II(LC3-Ⅱ)以及自噬底物p62蛋白表达水平,免疫荧光观察足细胞自噬情况,ELISA检测细胞上清液中Nephrin蛋白含量,划痕试验检测足细胞迁移能力。用AGEs和AGEs+RAGE(糖基化终末产物受体)中和抗体处理足细胞系,Western blot检测足细胞β-catenin蛋白的表达。结果与对照组相比,AGEs组p-β-catenin、p62表达升高(P0.05),LC3-Ⅱ表达降低(P0.05)。AGEs+DKK-1组p-β-catenin、p62蛋白表达较AGEs组降低,LC3-Ⅱ表达升高(P0.05),但与对照组比较差异无显著性(P0.05)。BSA组各指标与对照组均无显著性差异(P0.05)。免疫荧光检测发现AGEs组足细胞中LC3荧光强度较对照组明显减弱,AGEs+DKK-1组较AGEs组LC3荧光强度增强,BSA组与对照组比较差异无显著性(P0.05)。AGEs组细胞培养上清中Nephrin含量较对照组明显降低(P0.05),AGEs+DKK-1组较AGEs组升高(P0.05),但仍低于对照组(P0.05),BSA组与对照组差异无显著性(P0.05)。与对照组相比,AGEs组足细胞迁移能力降低(P0.05),AGEs+DKK-1组、BSA组与对照组比较,差异无显著性(P0.05)。AGEs+RAGE中和抗体处理的足细胞β-catenin蛋白水平较AGEs组显著降低(P0.05)。结论 AGEs通过RAGE激活Wnt/β-catenin信号通路,抑制足细胞自噬和迁移能力,可能是糖尿病患者足细胞损伤机制之一,在糖尿病肾病的发生和进展中发挥重要调控作用。     

金匮肾气丸对雄激素部分缺乏大鼠血清睾酮及Leydig细胞的影响

目的:探讨金匮肾气丸对雄激素部分缺乏模型大鼠的影响及可能作用机制.方法:50只15月龄SD大鼠随机分成5组:正常组,模型组,金匮肾气丸高、中、低剂量组.采用腹腔注射环磷酰胺20 mg/(kg·d)复制模型,金匮肾气丸连续灌胃28 d后,观察实验大鼠睾丸及附睾的湿重、血清睾酮及睾丸间质细胞变化.结果:金匮肾气丸各组可增加实验大鼠睾丸及附睾的脏器指数,提高血清睾酮水平,增加睾丸间质细胞数目.结论:金匮肾气丸治疗雄激素部分缺乏大鼠有效,其机制可能是通过提高睾酮水平,增加睾丸间质细胞数目.     

卵泡刺激素和干细胞因子对大鼠非梗阻性无精子症模型生精功能的影响

目的探讨卵泡刺激素(FSH)、干细胞因子(SCF)对Wistar大鼠非梗阻性无精子症(NOA)动物模型生精功能的影响。方法使用白消安15mg/kg单次腹腔注射制作Wistar大鼠NOA动物模型,抽样检查模型制造成功后。随机抽取72只大鼠分为两组:治疗组给予大鼠后腿肌肉注射FSH 250mU/次和SCF 150ng/次,每3d重复注射1次,共注射19次;对照组予以等量的生理盐水行大鼠后腿肌肉注射。治疗组和对照组均于用药后19d、38d和57d摘取一侧睾丸制成石蜡病理切片,采用Johnsen法评价其生精功能;取一侧附睾计数附睾尾精子数,每组每次12只。结果治疗组用药19d、38d和57d睾丸组织切片Johnsen评分均显著高于对照组(P均0.05);用药后19d和38d治疗组睾丸内曲细精管排列较对照组紧密、整齐;管腔内各级生精细胞数量亦多于对照组;用药后57d治疗组睾丸内曲细精管与正常睾丸基本一致,而同期对照组内有不少曲细精管局部呈现"空泡样"结构。用药后19d,两组附睾内均未见精子;用药38d时治疗组附睾内精子数[(77.55±55.18)个/ml]显著高于对照组[(41.05±29.20)个/ml](P0.05);用药57d时治疗组附睾内精子数[(122.13±80.67)个/ml]亦显著高于对照组[(58.50±26.15)个/ml](P0.05)。结论 FSH联合SCF肌注能够促进Wistar大鼠NOA模型生精功能的恢复。     

成年糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内雄激素受体的表达研究

目的:观察糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内是否存在雄激素受体(AR)的异常表达。方法:用链脲菌素(STZ)诱导成年大鼠糖尿病模型,实验分正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)及胰岛素治疗组(ID组),分别以Northern印迹及放射配基法检测睾丸、附睾和前列腺内AR的mRNA及蛋白质水平。结果:D和ID组血清睾酮水平低于C组(P<0.05);附睾内D和ID组AR的mRNA水平低于C组(P<0.05),睾丸和前列腺内D组AR的蛋白质水平低于C组(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内AR的表达降低,从而削弱了雄激素的生物利用度,这可能是导致患病大鼠性与生殖功能障碍的原因之一。     

淫羊藿次苷Ⅱ通过miR-20b/TXNIP通路改善糖尿病性内皮细胞功能的研究

目的:探讨淫羊藿次苷Ⅱ(ICA Ⅱ)通过调节miR-20b及其下游靶基因的表达,从而改善糖尿病性内皮细胞功能的研究。方法:利用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)建立高糖联合晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的糖尿病性内皮细胞功能障碍模型,分为对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)和ICA Ⅱ处理组(DM+ICA Ⅱ组),检...     

基于L-肉碱通路探讨灵归方对弱精子症大鼠生殖系统保护作用的实验研究

目的:探讨灵归方对奥硝唑(ORN)所致弱精子症大鼠生殖系统保护作用及其可能机制。方法:将40只体重200～230 g的雄性SD大鼠随机将其分为空白组、模型组、灵归方组、左卡尼汀组各10只。模型组:予400 mg/kg ORN灌胃;灵归方组:予灵归方浓缩液,按17.5 g生药/kg体重+400 mg/kg ORN灌胃;左卡尼汀组:予左卡尼汀100 mg/kg+400 mg/kg ORN灌胃;空白组:予等量0.5%羧甲基纤维素钠(CMC2Na);均1次/d,连续灌胃4周后,检测各组大鼠精液质量、附睾中L-肉碱的含量,大鼠附睾OCTN2 mRNA的表达并观察睾丸组织病理。结果:与模型组相比,各组精子浓度无统计学差异(P0.05),前向运动精子(PR)和前向+非前向运动(NP)精子百分率均高于模型组,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组相比,各组附睾的肉碱含量均提高,有统计学差异(P0.01)。灵归方组、左卡尼汀组OCTN2 mRNA表达量明显高于模型组,有统计学差异(P0.05)。睾丸病理观察结果发现,与空白组比较,模型组异常结构生精小管明显增多,排列不整齐,生精小管管腔缩小加重,管腔内精子及精子细胞数量减少,空腔型生精小管明显增多,生精小管内部各级生精细胞缺失,排列层次紊乱,上皮部分变性并出现空泡征;左卡尼汀组及灵归方组大鼠睾丸组织结构趋于正常,生精小管中各级生精细胞排列基本规整,生精小管结构基本正常。结论:①ORN可诱导大鼠产生弱精子症,且与降低附睾L-肉碱含量可能有关;②灵归方可以改善奥硝唑诱导的弱精子症大鼠精液活力;③灵归方可以改善ORN诱导睾丸的病理组织结构;④灵归方可以提高附睾中OCTN2 mRNA在附睾中的表达,其可能与提高附睾肉碱浓度有关。     

二苯乙烯苷通过上调肾小管上皮细胞Klotho表达治疗糖尿病肾病的研究

目的:观察二苯乙烯苷对糖尿病大鼠肾脏肾小管上皮细胞Klotho表达及肾脏损伤的影响,探讨其对肾脏的保护作用及机制。方法:链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病(DN)大鼠模型,予20 mg·kg-1·d-1二苯乙烯苷灌胃组24周,之后检测肾功能变化,肾小管Klotho表达水平。以腺病毒转染使大鼠原代肾小管上皮细胞(TEC)过表达Klotho,之后以晚期糖基化终末产物(AGEs)刺激后观察细胞凋亡及增殖情况。结果:DN组大鼠肾小管Klotho表达下降,肾功能明显降低,尿液HAVCR1及8-Ohd G分泌增多;而二苯乙烯苷治疗能明显抑制上述变化。AGEs刺激可使TEC增殖能力下降,细胞凋亡增多,而上调Klotho表达可纠正上述变化。结论:二苯乙烯苷可延缓DN进展,其机制可能与其上调Klotho表达有关。     

晚期糖基化终产物及其受体对大鼠阴茎海绵体组织中内皮素-1活性的影响

目的：通过观察大鼠阴茎海绵体组织中晚期糖基化终产物（AGEs）及其受体（RAGE）的变化对内皮素1（ET-1）活性的影响，探讨AGEs在糖尿病性勃起功能障碍（DMED）发生发展中的作用。方法：成年雄性SD大鼠60只，随机取40只用于制作糖尿病模型，造模后共27只大鼠成模，将其分为两组：糖尿病（DM）组15只和糖尿病＋氨基胍给药（DM＋AG）组12只；另20只大鼠平分为两组：正常对照（NC）组和正常对照＋氨基胍给药（NC＋AG）组；两组氨基胍（AG）给药组大鼠造模后即在其饮水中按1g／L剂量加入AG。饲养8周后取各组大鼠阴茎海绵体组织，一部分用于免疫组化法观察分析AGEs及其受体的分布和表达，剩余部分匀浆后检测AGE-肽（AGE-P）含量和ET-1活性。结果：DM组阴茎海绵体组织中AGEs和RAGE的表达、AGE-P含量及ET-1活性明显高于正常对照组（P〈0．05）；正常对照组与NC＋AG组间比较在各项指标上则无明显差异（P〉0．05）。结论：糖尿病状态下AGEs与RAGE的结合效应可以引起大鼠阴茎海绵体组织中ET-1活性的增强，从而促进DMED的发生发展。     

实验性精索静脉曲张对大鼠睾丸和附睾中血管内皮生长因子及其受体1表达的影响

目的:研究实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对青春期大鼠睾丸、附睾中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体fms样酪氨酸激酶(Flt-1)蛋白表达的影响。方法:建立青春期雄性SD大鼠ELV模型,采用免疫组化SP法检测VEGF和Flt-1在ELV组及假手术对照组睾丸、附睾组织中的表达变化。结果:VEGF和Flt-1蛋白在ELV组和对照组大鼠睾丸、附睾中均有表达,其定位和表达量具有细胞特异性和区域特异性。经图像分析和统计检测显示,ELV2周和4周组双侧睾丸和附睾中VEGF蛋白的表达与相应对照组比较均显著增加(P<0.01和P<0.05);ELV2周组双侧睾丸和附睾中Flt-1蛋白的表达与相应对照组比较也显著增加(P<0.01和P<0.01),但4周时在双侧睾丸和左侧附睾中Flt-1蛋白的表达显著下降(P<0.01和P<0.05),而右侧附睾未见明显差异(P>0.05)。结论:实验性精索静脉曲张可造成青春期大鼠睾丸、附睾中VEGF和Flt-1的表达量变化,该变化可能会影响精子的发生和成熟,因而可能是VC引起男性生育力下降甚至不育的原因之一。     

菟丝子黄酮对少弱精子症大鼠睾丸GM-CSF表达的影响

目的:探究菟丝子黄酮对少弱精子症大鼠睾丸GM-CSF表达的影响。方法:SD雄性大鼠30只,随机分为空白对照组、模型组和菟丝子黄酮组,每组各10只,菟丝子黄酮组和模型组腹腔注射环磷酰胺,建立少弱精子症模型。菟丝子黄酮组灌服菟丝子黄酮混悬液,空白对照组和模型组灌服等量生理盐水,连续4周。取附睾液进行精子计数及活动率测定,制作睾丸切片并分别在光镜和电镜下观察睾丸组织学变化及超微结构改变。用蛋白芯片检测各组大鼠睾丸GM-CSF的表达情况。结果:模型组大鼠与空白对照组、菟丝子黄酮组大鼠相比,附睾液精子数目降低(P0.01)且活动率下降(P0.01),睾丸形态学发生明显改变,生精小管变形,生精细胞数目减少且排列混乱。菟丝子黄酮组大鼠的睾丸组织结构正常,精子数目、活动率与空白对照组的差异无统计学意义。菟丝子黄酮组和空白对照组大鼠睾丸GM-CSF的表达量均低于蛋白芯片可测得的最小值故而未测得准确数值,模型组大鼠睾丸GM-CSF表达显著上升。结论:环磷酰胺所致少弱精子症大鼠睾丸GM-CSF表达增强,经过菟丝子黄酮干预后GM-CSF表达与空白对照组的差异无统计学意义。     

金匮肾气丸拮抗环磷酰胺对大鼠生殖毒性的实验研究

目的 探讨金匮肾气丸对腹腔注射环磷酞胺(CTX)雄性SD大鼠生殖功能的影响.方法 取15月龄雄性SD大鼠40只,随机分成模型组和金匮肾气丸高、中、低剂量治疗组,每组均10只,每组大鼠均给予腹腔注射环磷酰胺混悬液(1ml/kg·d-1,qd)连续5d.模型组以蒸馏水灌胃,治疗组以金匮肾气丸混悬液高、中、低剂量灌胃,连续28d.末次给药24h后处死动物,测睾丸、附睾的湿重:观察精子密度、活力和活率.结果 用药后,金匮肾气丸组大鼠睾丸及附睾脏器系数与模型组相比显著提高(P＜0.01):与模型组比较,金匮肾气丸各组精子密度明显升高(P＜0.05);与模型组比较,高剂量组精子活力升高(P＜0.05),而中、低剂量组则差异无统计学意义,P＞0.05;与模型组比较,中、高剂量组精子活率明显升高(P＜0.05),其中,以高剂量组最为明显(P＜0.01),而低剂量组则差异无统计学意义.结论 金匮肾气丸可以提高环磷酞胺染毒大鼠的睾丸、附睾脏器系数,提高精子密度、活力和活率.金匮肾气丸可以有效拮抗环磷酞胺对SD大鼠的生殖毒性,保护其生殖功能.     

多菌灵对大鼠睾丸发育和生精功能影响的研究

目的:探讨多菌灵对雄性大鼠睾丸发育和生精功能的影响及其作用机制。方法:40只清洁级未成年Wistar雄性大鼠随机分为4组(对照组,低、中、高剂量组,每组10只),低、中、高剂量组经口灌胃不同浓度的多菌灵溶液(分别为20、100、200mg/kg体重),对照组给予吐温80溶液,1次/d,连续80d。染毒结束后,立即取睾丸和附睾,观察其形态。测定各组大鼠体重及右侧睾丸和附睾重量;取左侧附睾尾测定精子活率和精子数量;采用HE染色法、原位末端标记法(TUNEL)及免疫组化SABC法观察大鼠睾丸组织的病理学变化、细胞凋亡和Bcl-2/Bax表达情况。结果:中、高剂量组大鼠睾丸和附睾均明显萎缩、右侧睾丸和附睾重量减轻,左侧附睾尾精子活率和精子数量均低于对照组(P<0.01);中、高剂量组睾丸组织病理学检查可见明显异常;随多菌灵染毒浓度的增加,各剂量组生精细胞凋亡率逐渐升高,Bcl-2表达下降,Bax表达升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:多菌灵可影响雄性大鼠的睾丸发育和生精功能,可能与下调Bcl-2和上调Bax致细胞凋亡增加有关。     

参精固本丸对大鼠睾丸氧化应激损伤后生精功能的修复

目的:探讨补肾活血中药参精固本丸对氯化镉造模的氧化应激损伤大鼠睾丸、附睾、精子的抗氧化及生精功能修复作用。方法:将SPF级Wistar大鼠随机分为6组,每组12只,分别为正常对照组、模型对照组、五子衍宗丸组、参精固本丸高剂量组、参精固本丸中剂量组、参精固本丸低剂量组。除正常对照组外,各组腹腔注射氯化镉1 mg/kg,24 h后各组分别灌胃给药,每天1次,共给药56 d。模型对照组和正常对照组予等体积生理盐水灌胃,参精固本丸高、中、低剂量组分别予以8倍等效剂量(11.2 g/kg)、4倍等效剂量(5.6 g/kg)、2倍等效剂量(2.8 g/kg)参精固本丸溶液灌胃,五子衍宗丸组予以4倍等效剂量(4.5 g/kg)五子衍宗丸溶液灌胃。56 d后,处死实验动物,分别称取大鼠精囊、附睾、睾丸的质量并计算相应脏器系数,大鼠睾丸、附睾、精囊行病理组织学检测。留取附睾内精液,测定大鼠附睾精子浓度、活力、正常形态精子百分率。同时测定大鼠睾丸组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,血清睾酮(T)水平。结果:①参精固本丸高、中、低剂量组睾丸系数分别为(0.403±0.090)、(0.357±0.150)、(0.348±0.140)g/100 g,精囊系数分别为(0.347±0.115)、(0.336±0.090)、(0.320±0.065)g/100 g,高剂量组附睾系数为(0.156±0.030)g/100 g,均显著高于模型对照组[(0.237±0.098)、(0.241±0.118)、(0.099±0.088)g/100 g](P0.05或P0.01);②高、中、低剂量组精子浓度分别为(58.1±32.2)、(36.0±36.2)、(31.9±32.7)×10~6/ml,显著高于模型对照组[(10.5±17.7)×10~6/ml](P0.05或P0.01);高、中剂量组精子总活力分别为(26.5±15.5)%、(18.9±8.2)%,高、中剂量组正常形态精子百分率分别为(85.3±23.3)%、(65.8±28.1)%,均显著高于模型对照组[(9.5±13.0)%、(36.2±40.2)%](P0.05或P0.01);③参精固本丸高、中剂量组睾丸的GSH-PX水平分别为(5.70±1.73)、(5.42±2.35) U/mg prot,SOD水平分别为(52.7±14.6)、(51.3±14.7) U/mg prot,均显著高于模型对照组[(3.62±2.22)、(41.3±8.8)U/mgprot](P0.05或P0.01);高、中、低剂量组睾丸MDA水平分别为(0.41±0.29)、(0.44±0.19)、(0.47±0.20) nmol/mgprot,显著低于模型对照组[(0.69±0.28) nmol/mgprot](P0.05或P0.01);高、中、低剂量组大鼠血清T水平分别为(3.62±0.96)、(3.48±1.33)、(3.24±0.83)nmol/L,显著高于模型对照组[(2.56±0.75) nmol/L](P0.05或P0.01);④模型对照组全部生精小管均发生凝固性坏死并钙化,生精细胞及支持细胞消失,精囊管腔内分泌物减少,上皮乳头萎缩;附睾萎缩,管腔缩小,管腔内未见精子。与模型对照组相比,随着剂量增加,参精固本丸组具有生精功能的生精小管面积逐渐增加,精囊上皮恢复为高柱状,附睾管管腔逐渐增大,管腔内精子逐渐增多,疗效与剂量间有依从关系,参精固本丸高、中剂量组疗效明显好于五子衍宗丸组。结论:参精固本丸可以拮抗氧化应激损伤,提高实验大鼠睾丸抗氧化物酶、血清T水平、精液质量,修复睾丸、附睾、精囊组织病理损伤,改善生精功能。     

复方苍术汤对糖尿病大鼠肾脏非酶糖基化终末产物的影响

目的观察中药复方苍术汤对糖尿病大鼠肾脏非酶糖基化终末产物（AGEs）的影响。方法小剂量链脲佐菌素（STZ）注射加高糖高脂喂养建立糖尿病大鼠模型,给予复方苍术汤喂养8周,观察各组大鼠肾组织AGEs含量、肾重指数和空腹血糖的变化。结果复方苍术汤组大鼠的肾组织AGEs含量、肾重指数、血糖均较模型组降低（P〈0.01）。结论复方苍术汤降低糖尿病大鼠肾脏组织AGEs水平,其作用机制可能与降低血糖有关。