国人扩张型心肌病患者血清中抗心肌线粒体肽类抗体的研究

应用免疫转印技术,研究扩张型心肌病患者的抗心肌抗体,发现患者血清中存在抗心肌线粒体30kD多肽抗体,阳性率为52.38％;而对照组中的冠心病患者和正常人均为阴性。提示ADP/ATP载体可能是扩张型心肌病自身免疫应答的靶抗原分子。     

不同时期应用抗L3T4单抗治疗的自身免疫性心肌病小鼠免疫球蛋白G亚型分析

目的:探讨不同阶段应用抗L3T4单抗治疗自身免疫性心肌病对小鼠血清抗线粒体ADP/ATP载体抗体和免疫球蛋白G(IgG)亚型的影响。方法:将24只小鼠随机分为4组,每组6只。用含有人线粒体ADP/ATP载体肽的免疫液免疫近交系Balb/C小鼠建立类扩张型心肌病(DCM)模型(DCM组);以不含肽免疫液免疫小鼠作为对照组;在同时用含有ADP/ATP载体肽的免疫液的第0、1、2天连续3d以400μg抗L3T4单抗免疫小鼠获得早期治疗组;在给予ADP/ATP载体肽的免疫液第4个月初始连续3d给予抗L3T4单抗治疗获得中期治疗组。以ELISA法检测其血清中抗ADP/ATP载体抗体水平和IgG亚型(IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3)的变化;采用流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4 T细胞内γ干扰素(IFN-γ)/白细胞介素(IL)-4的表达。结果:早期治疗组与对照组小鼠抗ADP/ATP载体抗体检测均为阴性,而中期治疗组与DCM组抗体均为阳性。DCM组各亚类水平均较对照组明显升高;早期治疗组IgG1、IgG2b和IgG3的产生均受到抑制,其水平接近对照组;中期治疗组IgG1水平介于DCM组和早期治疗组之间,IgG2b和IgG3的生成与DCM组差异无统计学意义,但显著高于早期治疗组;而治疗组与DCM组IgG2a水平则差异无统计学意义。早期治疗组小鼠IFN-γ/IL-4百分含量与对照组相比差异无统计学意义,但明显低于DCM组;中期治疗组IFN-γ的百分含量较DCM组更高,IL-4的百分含量介于DCM组和早期治疗组之间。结论:抗L3T4单抗治疗能够抑制DCM小鼠血清中的抗ADP/ATP载体抗体及IgG1亚型的生成和Th2相关细胞因子IL-4的百分含量,且以早期治疗的效果更明显。     

扩张型心肌病患者抗心肌线粒体ADP/ATP载体抗体对心肌细胞毒性作用的观察

用20例扩张型心肌病患者血清中抗心肌线粒体ADP/ATP载体抗体进行心肌细胞毒性试验,发现18例患者血清引起心肌细胞毒性损害,且具有钙依赖性,异搏停明显地抑制这种细胞毒性反应,使细胞死亡率均值从71.61%±7.67%降到42.56%±6.54%(P<0.01),该细胞毒性反应与对照组比较具有显著性差异.本研究提示抗心肌线粒体ADP/ATP载体抗体作用于心肌细胞膜钙通道,引起细胞钙超负荷和细胞死亡,是扩张型心肌病的发病机理之一.     

扩张型心肌病抗心肌线粒体ADP/ATP载体自身抗体与Th细胞亚群分析

目的 :探讨扩张型心肌病 (DCM)的体液免疫学发病机制。方法 :借助免疫转印技术及流式细胞仪技术同步分析了 33例 DCM患者和 2 8例正常人的血清中抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体和 Th细胞亚群。结果 :DCM组 Th2 细胞在外周血淋巴细胞中占 (0 .5 3± 0 .2 3) % ,对照组 Th2 细胞占 (0 .2 2± 0 .18) % ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;DCM组抗心肌线粒体 ADP/ATP载体抗体的检出率 (6 0 .6 1% )明显高于对照组(2 1.43% ) (P <0 .0 1) ;DCM抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体 ,阳性组中 Th2 细胞在外周血淋巴细胞中占 (0 .6 7± 0 .31) % ,阴性组 Th2 细胞占 (0 .2 8± 0 .14) % ,两组比较差异有显著性 (P<0 .0 1)。结论 :DCM中 Th2细胞与抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体的产生有关 ,而且 Th2 细胞和抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体参与了 DCM的病理过程。体液免疫反应的异常在 DCM的发病机制中起着十分重要的作用。     

淋巴细胞转输对线粒体腺苷酸转位酶诱导的自身免疫性心肌病小鼠细胞因子的抑制作用

目的:研究淋巴细胞转输对线粒体腺苷酸转位酶(ANT)合成肽诱导的自身免疫性心肌病传染性耐受的小鼠Th1/Th2亚群及血清和心肌组织细胞因子的影响。方法:用ANT多肽多次免疫Balb/C小鼠得到心肌病组,单抗组小鼠在给予ADP/ATP肽免疫的第0、1和2天,同时接受尾静脉注射400μg抗L3T4单抗;第6个月末时,将单抗组小鼠的脾细胞取出转输到正常小鼠体内(转输组),此小鼠亦同时给予多肽免疫,方法同心肌病组。对照组以不含ANT的相同免疫进行假性免疫,时间和剂量同心肌病组。采用流式细胞术检测脾T细胞内细胞因子IFN-γ/IL-4的含量;以ELISA法检测其血清中IFN-γ、白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;实时荧光定量PCR法检测其心肌细胞因子mRNA表达。结果:转输组Th细胞IFN-γ、IL-4含量与对照组和单抗组接近且明显低于心肌病组;转输组小鼠血清IFN-γ和IL-2水平明显高于心肌病组而低于单抗组,IL-4和IL-6水平显著低于心肌病组;TNF-α水平在转输组则最高;心肌细胞因子mRNA的表达则转输组显著低于心肌病组,与对照组和单抗组相近。结论:淋巴细胞转输能够阻断心肌病诱导过程中绝大部分细胞因子的生成,与单抗早期干预的结果类似。     

免疫转印法检测扩张型心肌病患者抗β－受体抗体的探讨

应用免疫转印法检测２０例扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者血清中抗心肌β－肾上腺素能受体抗体。结果：抗心肌细胞膜６７ｋＤ肽（β－受体）抗体在１１例ＤＣＭ患者血清中被检出，而对照组均为阴性（Ｐ＜０．０１），检测的特异性１００％，敏感性５５％。提示免疫转印法检测抗心肌β－受体抗体，对扩张型心肌病具有临床诊断价值。     

肠病毒感染及抗ADP/ATP载体抗体在病毒性心脏病发病中的意义

目的 :探讨肠病毒感染与抗二磷酸腺苷 /三磷酸腺苷 (ADP/ ATP)载体抗体在病毒性心脏病发病中的意义。方法 :应用逆转录聚合酶链式反应 (RT- PCR)和免疫转印法对临床诊断为病毒性心肌炎 (VMC)和扩张型心肌病 (DCM)患者进行肠病毒核糖核酸 (RNA)及抗 ADP/ ATP载体抗体的检测。结果 :RT- PCR方法检测肠病毒 RNA,VMC组 (n =74) 4 2例 (56.8% )阳性 ,DCM组 (n=2 6) 1 1例 (42 .3% )阳性。与健康组 (n =30 )比较具有显著性差异 (分别 P <0 .0 1 ,P <0 .0 5) ;肠病毒感染与 DCM患者心脏功能降低有明显相关性。免疫转印法检测 VMC(n =34)和 DCM(n =2 6)患者血清抗 ADP/ ATP载体抗体 ,VMC组 2 3例 (67.6% )阳性 ,DCM组 1 2例 (46.2 % )阳性 ,而健康组均为阴性 ;抗 ADP/ ATP载体抗体和肠病毒 RNA的检出相关 (r=0 .442 )。结论 :肠病毒RNA和抗 ADP/ ATP载体抗体在病毒性心脏病患者中检出具有相关性 ,对临床上出现前驱感染和心脏症状的患者 ,及时进行肠病毒 RNA、CVB- Ig M、抗 ADP/ ATP载体抗体的检测 ,有助于 VMC和 DCM的早期诊断。     

扩张型心肌病的早期干预

扩张型心肌病 ( DCM)的主要病因是病毒持续感染和自身免疫反应。在 DCM早期可以检测出抗心肌自身抗体 ,抗体介导心肌细胞损伤机制已基本阐明 ,阻止抗心肌抗体介导心肌损伤已成为早期治疗 DCM的有效方法之一。根据分子模仿理论 ,发现 ADP/ ATP载体蛋白与柯萨奇 B3 -病毒外壳蛋白存在同源性 ,酶联免疫吸附试验证实抗 ADP/ ATP载体 2 7- 36肽抗体可以与来源于柯萨奇 B3 病毒 1 2 1 8- 1 2 2 8肽发生免疫反应 ;鼠肝炎病毒、人类巨细胞病毒与 β1-肾上腺素能受体之间具有相同的抗原决定簇 ,还发现抗ADP/ ATP载体抗体可以与钙通道蛋白…     

TNF-α和IL-6血清检测在儿童急性病毒性心肌炎诊断中的价值

目的探讨急性病毒性心肌炎患儿血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白介素-6（IL-6）水平变化及其临床价值。方法应用放射免疫法（RIA）和酶联免疫法（EIISA）,检测53例急性病毒性心肌炎患儿及20名健康儿童血清中TNF—α及IL-6含量。结果心肌炎组血清TNF—α和IL-6水平分别为（526．7±32．9）mg／L和（3．23±0．53）mg/L,而健康组分别为（383．1±27．5）mg／L和（1．63±0．22）mg／L,二者相比差异有统计学意义（P〈0．05）;临床治愈后,心肌炎组TNF—α及IL-6分别降至（407．3±34．4）mg／L和（1．97±0．29）mg／L,与正常组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论检测TNF—α及IL-6血清水平及其变化,有助于判断急性病毒性心肌炎患儿病情及心肌损害程度。     

胃癌患者血清TNF—α、IL-6、IL-8水平变化及意义

目的观察胃癌患者血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-6、IL-8的水平变化,并探讨其临床意义。方法采用ELISA法测定60例胃癌（胃癌组）、25例胃良性病变患者（良性组）血清TNF-α、IL-6、IL-8,并与25例健康者（正常组）作对照。结果胃癌组血清TNF-α、IL-6、IL-8水平明显高于良性组和正常组（P〈0．05）,且TNF—α、IL-6、IL-8水平随着胃癌临床病理分期的增加而升高（P〈0．05）。肿瘤根治手术后患者血清TNF—α、IL-6、IL-8水平较术前明显降低（P〈0．05）;良性组血清TNF—α、IL-6、IL-8水平与正常组近似（P〉0．05）。结论胃癌患者血清TNF—α、IL-6、IL-8水平增高;检测胃癌患者血清TNF—α、IL-6、IL-8有助于病情判断和估计预后。