不同宿主来源的华支睾吸虫同工酶比较观察

目的:通过对不同宿主华支睾吸虫的同工酶研究,了解其在不同宿主中的变化情况.方法:应用浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶板状电泳(CG-PAGE)对50 d虫体的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、酯酶(EST)、过氧化物酶(PO)进行电泳观察,通过凝胶成像软件对酶(蛋白)带的迁移率、相对浓度分布、光密度等结果进行分析.结果:来自不同宿主(大鼠、犬、豚鼠、兔、猫)的虫体主要酶带特征基本相同,但次要酶带存在一定差异.结论:不同宿主的华支睾吸虫同工酶存在着一定的变化,实验结果为华支睾吸虫在不同宿主中的发育、生理、生化提供实验资料.     

华支睾吸虫与东方次睾吸虫的囊蚴分离脱囊及感染动物的观察

观察了华支睾吸虫与东方次睾吸虫的囊蚴分离、脱囊及感染动物。用含盐酸量不同的胃蛋白酶人工消化液分离鱼体内的吸虫囊蚴,发现含盐酸量高的人工消化液分离囊蚴的效果较好,表明胃蛋白酶在酸性条件下更能充分发挥其作用;同时脱囊试验提示,盐酸含量不同对囊蚴本身的的存活力并无直接影响。采用新鲜猪胆汁代替胆汁粉配制人工脱囊肠液,对分离后第9、29天的囊蚴进行脱囊试验,两种囊蚴经35℃30分钟、60分钟其脱囊率均为100％。     

人体5种小型吸虫病原形态观察

目的通过对东方次睾吸虫(Metorchisorientalis)、华支睾吸虫(Clonorchissinensis)、钩棘单睾吸虫(Haplorchispumilio)、扇棘单睾吸虫(Haplorchistaichui)和台湾棘带吸虫(Centrocestusformosanus)的形态观察,为鉴别这些人体寄生虫病病原提供科学依据。方法收集5种吸虫的成虫、虫卵、囊蚴,并进行形态、大小测量和寄生部位观察。结果东方次睾吸虫和华支睾吸虫成虫寄生部位完全相同,都是在胆管和胆囊内。其他3种则在小肠内。囊蚴寄生部位:除台湾棘带吸虫在鱼鳃外,其余4种均在鱼肉内。虫卵特征:5种吸虫除卵盖和外壳光洁度有些差别外,其余差别甚微。囊蚴特征:东方次睾吸虫囊壁很厚,而其他4种则很薄。其它特征:台湾棘带吸虫的排泄囊呈“工”字形,扇棘单睾吸虫生殖吸盘上的小棘呈杆状排列成葵扇状;而钩棘单睾吸虫则呈点状并围成一圈。成虫特征:华支睾吸虫最大,呈葵花仔状;东方次睾吸虫其次,呈叶片状;钩棘单睾吸虫和扇棘单睾吸虫居中,两者均呈鞋状;台湾棘带吸虫最小,呈酒瓶状。结论发现上述5种吸虫的成虫、虫卵及囊蚴时,必须根据各自形态、大小等特征,认真鉴别。     

东莞市淡水鱼华支睾吸虫感染情况调查

目的了解目前东莞地区淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染情况。方法在渔场和鱼塘采集鲩鱼110条和非洲鲫鱼217条,采用消化法检查淡水鱼肉中的华支睾吸虫囊蚴。结果鲩鱼华支睾吸虫囊蚴感染率约为82．72％,非洲鲫鱼未检出囊蚴。结论东莞地区鲩鱼中存在华支睾吸虫囊蚴感染,且感染率较高。     

肝片形吸虫和华枝睾吸虫的同工酶盘电泳研究

本文应用聚丙烯酰胺凝液盘电泳对肝片形吸虫和华枝睾吸虫成虫的苹果酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、酯酶和过氧化物酶进行了分离和研究。两种吸虫4种酶的同工酶电泳型在区带数和/或迁移率、活性上均不相同,显示两个虫种之间有明显差异。但两种吸虫的苹果酸脱氢酶和酯酶存在着位置相同的同工酶带,说明两种吸虫在遗传上有一定的联系。本研究显示两种吸虫同工酶型的差异为从分子水平上区分和鉴定它们提供了证据。     

湖南永州市食用淡水鱼感染华枝睾吸虫囊蚴调查

目的调查湖南永州市城区食用淡水鱼华枝睾吸虫囊蚴感染情况,为制订肝吸虫病的防治措施提供参考依据。方法选取市区常见的6种食用淡水鱼,采用直接压片法检测各鱼种的囊蚴感染率和人工消化法检查各鱼种的囊蚴感染度,并将收集的囊蚴感染家兔进一步加以证实。结果共采集标本275份,其中鲫鱼82条,鳊鱼45条,鲤鱼38条,鲢鱼42条,草鱼32条,鳙鱼36条。6种主要食用淡水鱼均检出华枝睾吸虫囊蚴,其中鲫鱼检出率和感染度均居首位,分别为14.63%(11/82)和平均感染度为45.3个/g。结论永州市城区食用淡水鱼存在华枝睾吸虫囊蚴感染,对华枝睾吸虫防治应予关注。     

沙市市集贸市场淡水鱼华支睾吸虫囊蚴寄生情况调查

调查沙市集贸市场淡水鱼华支睾吸虫的感染情况,从麦穗鱼体内检出华支睾吸虫囊蚴,首次证实了该吸虫在本地淡水鱼中感染的存在。囊蚴土要分布在阳性鱼的背部肌肉内,经对兔、豚鼠、大白鼠及小白鼠的人工感染,以兔对该吸虫的敏感性最高。     

广州地区中华支睾吸虫等三种吸虫的DNA含量与同工酶分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了三种吸虫的苹果酸脱氢酶和脂酶同工酶酶谱,测量了其DNA相对含量。结果表明,三种吸虫DNA相对含量相差非常显著。DNA相对含量依次为布氏姜片吸虫20.78±2.56、鹿同盘吸虫19.58±2.46和中华支睾吸虫18.38±2.57。苹果酸脱氢酶三种吸虫均显示出一条酶带;酯酶则不相同,布氏姜片吸虫和鹿同盘吸虫有两条酶带,中华支睾吸虫只有一条酶带。     

消化液主要成分对影响两种次睾吸虫囊蚴体外脱囊的影响

用正交试验法,模拟吸虫囊蚴在宿主体内的脱囊过程,选用胃蛋白酶、胰蛋白酶和牛磺胆酸钠对东方次睾吸虫囊蚴和台湾次睾吸虫囊蚴进行体外脱囊试验,结果表明:在37℃条件下,囊蚴经胃蛋白酶(pH 为2)作用后.再经胰白酶(pH 为7.4)作用.其透明外壁被水解.说明其外壁的化学成分恰是这两种酶作用的底物。因囊蚴的外壁是囊内幼虫的主要保护层,故 pH 值、胃蛋白酶和胰蛋白酶是两种次睾吸虫囊蚴脱囊的主要影响因素。     

广州大学城及周边淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染调查

目的 了解广州大学城及周边淡水鱼华支睾吸虫囊蚴的感染情况.方法 2019年10月,在广州大学城及周边自然村及集镇购买鱼塘养殖的大型淡水鱼以及附近珠江水域野生的淡水鱼.用直接压片法、胃蛋白酶消化法及PCR法检查淡水鱼华支睾吸虫囊蚴的感染情况.结果 共检测9种淡水鱼364尾,华支睾吸虫囊蚴总感染率为8.24％(30/364...     

司前镇人体华支睾吸虫感染情况调查

目的了解和分析江门市新会区人体华支睾吸虫感染情况。方法抽取1989年曾经调查过的管理区,采用分层整群随机抽取3个自然村不同年龄、性别人群进行华支睾吸虫感染调查。采用改良加藤氏厚涂片法粪检查虫卵。结果华支睾吸虫感染率50.30%,明显高于13年前(X2=171.09,P<0.05),具有相当家庭聚集性,14岁以下感染率低于14岁以上(X2=21.559,P<0.05)。结论要加强对华支睾吸虫的防治,降低华支睾吸虫的感染率。     

肇庆地区淡水鱼感染华支睾吸虫囊蚴情况调查

目的了解目前肇庆地区常见食用淡水鱼感染华支睾吸虫囊蚴的情况。方法从肇庆所辖的四会市和端州区两地采集鲩鱼和鳙鱼样本,用胃蛋白酶消化法检查鱼肉中的华支睾吸虫囊蚴。结果共检查鲩鱼328尾,其华支睾吸虫的平均感染率约为48.78%,阳性鱼平均感染度约为4.66。共检查鳙鱼331尾,其华支睾吸虫的平均感染率约为37.46%,阳性鱼平均感染度约为2.94。结论肇庆地区的淡水鱼中存在一定程度的华支睾吸虫感染,其中鲩鱼的感染情况较鳙鱼严重。     

大鼠抵抗华支睾吸虫重复感染的实验研究

华支睾吸虫也称肝吸虫,成虫寄生在人和哺乳动物,引起人体华支睾吸虫病(肝吸虫病).本病广泛流行于东南亚,我国近年估计有1 000多万人感染肝吸虫[1],已经成为严重的公共卫生问题.一般认为人体感染后无保护性免疫,流行区人群常常发生再感染和重复感染[2].近来发现初次感染治愈的大鼠产生很强的抵抗再感染力 [3,4].但有文献报道初次感染后未治疗大鼠对重复感染无明显抵抗[4,5].为了弄清大鼠是否能抵抗华支睾吸虫重复感染,我们将100个华支睾吸虫囊蚴分2～5次感染大鼠,结果发现大鼠能抵抗华支睾吸虫重复感染.此外,我们还观察了不同初感染时间对重复感染的影响,发现初感染后1周抵抗力开始出现,第4周时达到高峰,重复感染虫体发育比迟缓,现将实验研究报告如下.     

华支睾吸虫重组蛋白应用于ABC-ELISA检测特异性循环抗体的研究

目的 评价重组蛋白在华支睾吸虫病诊断上的价值，探索以重组蛋白替代天然抗原用于ELISA等血清学方法诊断华支睾吸虫感染的可能性。方法 分别使用重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CysB)与华支睾吸虫成虫可溶性抗原(CAA)，以ABC-ELISA检测华支睾吸虫病、其它寄生虫感染及健康人血清特异性IgG．比较两种抗原用于检测的敏感性与特异性。结果 共检测了112份华支睾吸虫感染血清，使用重组抗原CysB与成虫粗抗原CAA的阳性检出率分别为92．9％(104／112)及94．6％(106／112)；分别检测健康人血清56例、日本血吸虫病血清20例及肺吸虫病血清10例．对于两种抗原，华支睾吸虫特异性IgG检测阴性率均相同．上述三类血清的阴性率分别为96．5％(54／56)、95％(19／20)及90％(9／10)。结论 华支睾吸虫重组蛋白CysB用于血清特异性抗体检测具有较高的敏感性及特异性，与成虫可溶性抗原(CAA)的诊断应用价值相近，有望成为应用于华支睾吸虫病诊断的替代抗原之一。     

血脂水平与华支睾吸虫致病性的初步研究

目的比较高血脂小鼠和正常血脂小鼠感染华支睾吸虫后的肝脏病理变化及炎症因子水平,以研究血脂水平对华支睾吸虫致病性的影响。方法通过向BALB/c小鼠投食高脂饲料建立高血脂小鼠模型,用相同囊蚴数感染高血脂小鼠和正常血脂小鼠,比较感染1个月后小鼠相关病理指标。通过Masson染色(Masson′s trichrome staining)判断肝胆纤维化程度,使用免疫组化和实时荧光定量PCR(qPCR)检测肝脏α-平滑肌蛋白(α-SMA)定位情况和转录水平,用流式细胞术检测小鼠脾细胞在刀豆素(ConA)刺激48 h培养上清中细胞因子表达水平。结果与正常血脂感染组小鼠相比,高血脂感染组小鼠出现较显著的肝胆管扩张、肝实质及汇管区出现大量的胶原纤维增生、小胆管增生等病变。高血脂感染组α-SMA转录水平升高,并在肝脏组织汇管区及增生的纤维间隔内表达。高脂感染组脾细胞培养上清中白介素6(IL-6)和IL-10表达水平比正常血脂小鼠高(P0.05),高脂感染组IFN-γ水平比高脂未感染组低(P0.05)。结论高血脂可能使华支睾吸虫感染所致的肝脏胶原纤维增生、胆管扩张更明显,血脂水平高低还可影响华支睾吸虫感染后宿主的免疫应答。     

珠江三角洲不同地区淡水鱼华支睾吸虫感染情况

目的 了解目前珠江三角洲淡水鱼华支睾吸虫感染情况。方法 使用直接压片法和消化法对从顺德、南海、三水、广州和番禺等地采集的各种淡水鱼进行检查。结果 从上述5个地区采集的淡水鱼中均检出了华支睾吸虫囊蚴，其中来自三水小塘的淡水鱼感染最严重，广州地区的淡水鱼感染最轻。在不同鱼种中，以麦穗鱼感染率和感染度最高，主要食用鱼种如鲩鱼、大头鱼和非洲鲫鱼也有一定程度的感染。结论 广东珠江三角洲地区淡水鱼华支睾吸虫的感染较为普遍和严重．防治工作有待加强。     

顺德、番禺、清远、增城和花都五地淡水鱼华支睾吸虫感染情况的调查

目的为了解目前顺德、番禺、清远、增城和花都五地淡水鱼华支睾吸虫的感染情况。方法使用直接压片法和消化法对从上述5地采集的各种淡水鱼进行检查,并用分离的囊蚴感染大鼠。结果上述5个地区的淡水鱼均存在华支睾吸虫囊蚴的感染,其中以来自顺德的淡水鱼感染最严重。家养鱼种和一些野生鱼均有感染,其中以鲩鱼和鳙鱼以及一些野生小鱼感染率和感染度均较高。结论广东上述五地淡水鱼华支睾吸虫的感染较为普遍和严重。     

华支睾吸虫ICT和PCR检测方法的建立及其应用研究

目的建立华支睾吸虫的免疫胶体金(ICT)和实时荧光定量PCR检测体系,比较两者检测华支睾吸虫的效果。方法以华支睾吸虫成虫抗原包被胶体金,检测血液样本中的相应抗体,建立华支睾吸虫ICT检测方法;以华支睾吸虫18S r RNA基因作为靶基因,设计RT-PCR的特异性引物和探针,检测粪便样本中的核酸实时荧光定量PCR方法;以两种检测体系与商品化的酶联免疫(ELISA)检测试剂盒平行测定比较,考核检测体系的应用价值。结果对200份华支睾吸虫重点人群样本进行检测,ELISA法检出的华支睾吸虫Ig G抗体阳性例数为20例,阳性率为10.0%;ICT法为16例,阳性率为8.0%,灵敏度为80.0%,特异度为100.0%,符合率为98.0%,ICT和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ2=2.25,P0.05);RT-PCR法检出的粪便样本中华支睾吸虫核酸阳性例数为18例,阳性率为9.0%,灵敏度为90.0%,特异度为100.0%,符合率为99.0%,RT-PCR和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ2=0.05,P0.05)。说明ICT、RT-PCR两种检测方法与ELISA的测定结果比较一致。结论建立的ICT及RT-PCR两种检测方法特异性好、灵敏度高,两种检测方法均适用于华支睾吸虫现场的快速检测及定量分析。     

华支睾吸虫感染对野生型和Tlr2-/-C57BL/6J小鼠肝胆管损伤差异的研究

目的 观察C57BL/6J野生型、Tlr2-/-两种小鼠感染华支睾吸虫后肝脏的病理变化,探讨Toll样受体2(TLR2)对华支睾吸虫感染致胆管损伤的影响.方法 建立野生型、Tlr2-/-小鼠华支睾吸虫感染模型即每只小鼠灌胃45只华支睾吸虫囊蚴,对照组灌胃等量生理盐水.感染第4周安乐死法处死小鼠,采用比色法检测小鼠血清中...     

江门市新会区华支睾吸虫病流行现状调查与分析

目的 了解江门市新会区华支睾吸虫病的流行现状,确定华支睾吸虫病的高危人群,提供当地华支睾吸虫病感染因素的线索.方法 采用免疫酶联吸附法检测血清中华支睾吸虫特异性抗体;采用改良加藤氏法检测粪便虫卵;采用消化法检测淡水鱼中华支睾吸虫囊蚴;进行问卷调查华支睾吸虫感染相关的生活和行为方式;同时采用病例对照方法分析影响华支睾吸虫感染的相关流行因素.结果 共调查1 720人,华支睾吸虫平均感染率为18.14%,男性感染率高于女性(P<0.001).各年龄组均有感染,感染率差异有统计学意义(P<0.001).共调查常见淡水鱼6种共273尾,6种淡水鱼体内均查到华支睾吸虫囊蚴.病例对照研究显示,吃半熟鱼习惯及外出饮食等行为是最重要的危险因子.结论 新会区华支睾吸虫病流行范围广,感染率高,已经成为一个严重的公共卫生问题,应积极开展综合性防控工作.