HIF-1α和HIF-2α上调非小细胞肺癌中CCR7的表达

背景与目的CCR7与非小细胞肺癌的淋巴结转移密切相关,但CCR7的上调机制却不是很清楚。本研究通过观察趋化因子受体CCR7和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子2α(HIF-2α)在非小细胞肺癌组织中的表达及相互关系,探讨非小细胞肺癌CCR7上调机制。方法应用免疫组织化学染色(SP法)检测94例非小细胞肺癌组织中CCR7、HIF-1α和HIF-2α的表达,并联合运用RNAi技术沉默人肺腺癌A549细胞中HIF-1α、HIF-2α表达,采用RT-PCR和免疫荧光方法观察CCR7的变化情况,分析CCR7表达与HIF-1α、HIF-2α之间的关系。结果免疫组织化学结果显示:CCR7主要表达于癌细胞质和(或)胞膜,HIF-1α、HIF-2α主要表达于癌细胞核和(或)细胞质,非小细胞肺癌中CCR7、HIF-1α和HIF-2α的表达率分别为75.53%(71/94)、54.25%(51/94)和70.21%(66/94),χ2检验显示CCR7表达与非小细胞肺癌的临床病理分期(P<0.001)和淋巴结转移(P=0.001)有密切关系,而与年龄、性别、组织学类型无关(P>0.05)。此外,CCR7和HIF-1α、HIF-2α表达正相关(r=0.272,P<0.01)(r=0.225,P<0.05)。向A549细胞中转染HIF-1α、HIF-2α特异性siRNA,分别抑制HIF-1α、HIF-2α表达后发现CCR7的mRNA和蛋白水平均下调(P<0.05)。结论CCR7表达与非小细胞肺癌侵袭转移密切相关,CCR7在NSCLC中过表达受HIF-1α和HIF-2α调控。     

趋化因子受体CCR7在NSCLC与转移淋巴结中的表达关系及意义

背景与目的恶性肿瘤的靶向转移是近年来研究的热点,研究已经证实恶性肿瘤的转移是一种非随机的、有组织器官选择性的高度组织化的过程,本研究通过对趋化因子受体CCR7在非小细胞肺癌及其转移淋巴结中的表达状况进行分析,初步探讨趋化因子受体CCR7在非小细胞肺癌中的表达及其与淋巴结转移之间的关系和意义。方法用兔抗人CCR7抗体免疫组化染色检测肺腺癌17例,鳞癌17例,腺鳞癌12例,大细胞肺癌4例和转移淋巴结28例中CCR7的表达情况。阴性对照标本采用炎性假瘤5例,正常肺组织20例。结果判定在双盲法下进行,每张切片由两名病理医师分别判断。结果1.CCR7在癌组织和转移淋巴结中的表达高于正常肺组织(P<0.005);2.转移淋巴结中CCR7表达与癌组织中CCR7的表达相比无差异(P=0.177);3.CCR7在癌组织中的表达与淋巴结转移相关,淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P=0.016);4.随着临床分期的增加,CCR7表达有增高趋势(P=0.003)。结论CCR7蛋白主要在肺癌肿瘤细胞与转移淋巴结中表达,而在正常肺组织中未见表达,其表达水平可能与非小细胞肺癌淋巴转移有关。     

MMP-2和MMP-9在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的　观察非小细胞肺癌 (NSCLC)标本中基质金属蛋白酶MMP 2和MMP 9的表达 ,以探讨其在NSCLC中表达的意义 ,为临床的诊断、治疗和预后的判断提供参考。方法　用免疫组织化学方法 ,研究比较 40例NSCLC组织 ,3 2例癌旁组织和 10例正常或良性肺病组织中MMP 2和MMP 9的表达。结果　①NSCLC患者肿瘤组织中的MMP 2和MMP 9的阳性率 ( 90 %和 83 % )较癌旁组织 ( 2 2 %和 13 % )明显增高 (P<0 .0 1) ,而在癌旁组织和对照组织 (均为 0 )之间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;②肿瘤组织中MMP 2和MMP 9的阳性率在有淋巴结转移NSCLC患者中显著高于无淋巴转移者 (P <0 .0 1) ,腺癌组织显著高于鳞癌组织 (P<0 .0 5 ) ,低分化肿瘤显著高于中～高分化肿瘤 (P <0 .0 5 ) ,Ⅲ期肺癌显著高于Ⅰ～Ⅱ期肺癌 (P <0 .0 5 )。结论　在NSCLC组织中MMP 2和MMP 9表达明显高于癌旁组织和良性肺病组织 ,检测肺癌组织中MMP 2和MMP 9表达有助于判断肺癌转移、病期 ,预测患者预后。     

非小细胞肺癌患者血清MMP-9表达及siRNA靶向抑制A549细胞侵袭与转移的研究

目的:探讨非小细胞肺癌患者血清中MMP-9表达与肿瘤转移的关系;MMP-9siRNA对肺腺癌细胞系A549中MMP-9表达及细胞侵袭与转移抑制作用的影响。方法:ELISA法检测32例非小细胞肺癌(NSCLC)患者及20名健康者空腹血清MMP-9浓度,同时设计合成针对MMP-9的特异性siRNA,采用oligofectamine转染A549细胞,RT-PCR法检测转染细胞后MMP-9mRNA的表达,Transwell实验检测细胞侵袭情况。结果:NSCLC患者血清中MMP-9浓度〔(63.44±7.84)ng/mL〕比正常对照组〔(21.57±3.29)ng/mL〕明显升高(P<0.01),且浓度随病理分期增加而增强〔Ⅰ/Ⅱ:(45.40±5.30)ng/mL,Ⅲ/Ⅳ:(89.80±5.02)ng/mL,P<0.01〕,发生淋巴结转移的患者血清MMP-9浓度〔(82.26±5.09)ng/mL〕明显高于未发生淋巴结转移〔(35.92±4.68)ng/mL〕的患者P<0.01;RT-PCR法显示,转染MMP-9siRNA后,细胞中MMP-9mRNA表达较阴性对照组和空白组明显降低,P<0.05。RNA干扰MMP-9基因后A549细胞的侵袭能力也有明显下降,P<0.01。结论:MMP-9可作为NSCLC患者有无发生浸润转移的良好预测指标,靶向MMP-9的siRNA不仅能特异性的降低MMP-9mRNA及蛋白的表达,且能抑制人A549细胞的侵袭和迁移。     

抑制Src酪氨酸激酶对非小细胞肺癌细胞分泌MMP-2和MMP-9的影响

背景与目的 Src酪氨酸激酶和基质金属蛋白酶在肺癌的浸润和转移中发挥重要作用。本研究旨在探讨抑制Src酪氨酸激酶对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞分泌基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase9,MMP-9)以及NSCLC细胞侵袭浸润的影响。方法采用ELISA法检测NSCLC细胞(PC14PE6、H226、PC-9、A549)培养上清中MMP-2和MMP-9含量以及抑制Src酪氨酸激酶对NSCLC细胞分泌MMP-2和MMP-9的影响;Boyden chamber法检测抑制Src酪氨酸激酶对NSCLC细胞体外侵袭浸润的影响。结果 NSCLC细胞中PC14PE6和H226中MMP-2和MMP-9的水平较高,A549细胞中MMP-9的水平较低,而MMP-2和MMP-9在PC-9细胞中检测不到。Src酪氨酸激酶抑制剂对PC14PE6中的MMP-2水平以及PC14PE6、H226和A549细胞中的MMP-9水平呈剂量依赖性抑制关系。10μM Src酪氨酸激酶抑制剂使PC14PE6细胞中的MMP-2水平、H226细胞和A549细胞中的MMP-9水平降低50%以上。10μM Src酪氨酸激酶抑制剂对H226细胞中的MMP-2无明显抑制作用。Src酪氨酸激酶抑制剂对4种NSCLC细胞体外侵袭浸润的抑制程度略有差异,但均呈现明显的剂量依赖性抑制作用。3μM Src酪氨酸激酶抑制剂对PC14PE6、H226、A549和PC-9细胞体外侵袭浸润的抑制率分别为79.1%、68.09%、90.96%和96.98%(P<0.001)。结论通过抑制NSCLC细胞分泌MMP-2和MMP-9,抑制Src酪氨酸激酶可降低细胞的体外侵袭浸润能力。     

非小细胞肺癌中D2-40、CCR7的表达与淋巴结转移的关系

 目的探讨CCR7 及D2-40在非小细胞肺癌中的表达与淋巴结转移的关系。方法采用快捷免疫组织化学 Max Vision法检测104例非小细胞肺癌、10例非小细胞癌旁组织及5例正常肺组织CCR7和D2-40的表达,并 以D2-40标记淋巴管内皮细胞,计算微淋巴管密度(MLVD)。结果非小细胞肺癌与正常肺组织MLVD计数分别 为(7.81±2.22)、(4.20±1.07),非小细胞肺癌中MLVD明显增高（P<0.001）。非小细胞肺癌中47例淋巴 结阳性组与57例淋巴结阴性组MLVD计数分别为(8.39±2.35)、(7.33±2.00),淋巴结阳性组MLVD计数显著 高于淋巴结阴性组（P<0.001）。104例非小细胞肺癌CCR7阳性率为82.7%;癌旁肺组织CCR7阳性率为30% ;正常肺组织CCR7阳性率为20%。淋巴结阳性组与淋巴结阴性组CCR7阳性率分别为872%（41/47）、 61.4%（35/57）。χ2值为87.4,P值为0.03。CCR7阳性组MLVD（8.51±2.03）高于CCR7阴性组MLVD（6.01 ±1.59）,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。D2-40标记的MLVD与CCR7表达呈正相关（相关系数 r=0.597,P<0.000）。结论在非小细胞肺癌中,淋巴结阳性组CCR7高表达,与D2-40标记的MLVD正相关。 D2-40仅表达于淋巴管内皮细胞,且肿瘤细胞CCR7高表达属淋巴结转移早期事件,联合检测CCR7与D2-40有 望成为判断淋巴结转移更为有效的指标。并可能为今后治疗非小细胞肺癌及抑制淋 巴结转移提供有力的理论依据。     

结直肠癌组织MMP-7、MMP-9表达与腹腔微转移的相关性研究

目的：探讨MMP-7、MMP-9在结直肠癌腹腔微转移中的作用以及相关性。方法：收集98例结直肠癌患者手术中腹腔冲洗液,进行CEA、CK20免疫细胞化学染色确定腹腔微转移。使用组织阵列仪制作组织芯片,进行免疫组化染色（SP）,检测MMP-7、MMP-9在结直肠癌组织中的表达情况,分析其与腹腔微转移的关系。结果：CEA、CK20联合检测腹腔微转移率为32.7%（32/98）。MMP-7、MMP-9在伴有腹腔微转移的结直肠癌中阳性表达率分别为93.75%和96.88%,明显高于无腹腔微转移结直肠癌表达率72.73%和68.18%（P〈0.05,P〈0.01）。结论：MMP-7、MMP-9可能在结直肠癌腹腔微转移的发生过程中起重要作用。     

结直肠癌组织MMP-7、MMP-9表达与腹腔微转移的相关性研究

目的:探讨MMP-7、MMP-9在结直肠癌腹腔微转移中的作用以及相关性。方法:收集98例结直肠癌患者手术中腹腔冲洗液,进行CEA、CK20免疫细胞化学染色确定腹腔微转移。使用组织阵列仪制作组织芯片,进行免疫组化染色(SP),检测MMP-7、MMP-9在结直肠癌组织中的表达情况,分析其与腹腔微转移的关系。结果:CEA、CK20联合检测腹腔微转移率为32.7%(32/98)。MMP-7、MMP-9在伴有腹腔微转移的结直肠癌中阳性表达率分别为93.75%和96.88%,明显高于无腹腔微转移结直肠癌表达率72.73%和68.18%(P<0.05,P<0.01)。结论:MMP-7、MMP-9可能在结直肠癌腹腔微转移的发生过程中起重要作用。     

缺氧对肺癌细胞CCR7表达及其侵袭力的影响

背景与目的缺氧可通过多种机制促进肿瘤的侵袭和转移,但缺氧与CCR7的关系目前未见报道。本研究探讨缺氧对人肺癌细胞趋化因子受体CCR7(Chemokine receptor7)表达及其侵袭能力的影响。方法将A549细胞分为常氧组和缺氧组,分别置于常氧(37℃,5%CO2,21%O2)和低氧(37℃,5%CO2,1%O2)条件下培养4h、12h、24h,应用RT-PCR和Westernblotting方法对CCR7mRNA和蛋白表达水平进行检测;同时采用Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力的变化。结果RT-PCR和Western blotting结果显示:人肺腺癌A549细胞有CCR7表达,随着培养时间的延长,常氧及缺氧状态下A549细胞CCR7相对表达量依次升高,此外,不同时间点的常氧组与缺氧组CCR7mRNA和蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(P<0.01);Transwell侵袭实验结果表明,缺氧组侵袭细胞数与常氧组相比明显增加,差异有统计学意义(t=0.006,P<0.01),加入CCR7抗体后细胞侵袭力降低(t=0.09,P<0.01)。结论缺氧可显著上调A549细胞CCR7表达及其侵袭能力,其侵袭力的增加可能与CCR7表达水平增高有密切关系。     

非小细胞肺癌MMP-9、TIMP-1的表达与转移预后的相关性研究

目的 研究NSCLC中MMP-9、TIMP-1的表达,探索其与淋巴结转移及预后的关系.方法 采用组织芯片技术,结合免疫组化法检测113例NSCLC和20例肺炎性假瘤中MMP-9、TIMP-1的表达.结果 MMP-9、TIMP-1的表达在不同年龄、性别、是否吸烟、原发肿瘤大小、病理类型及分化程度间的差异无统计学意义;而在淋巴结转移、TNM分期和生存期差异有统计学意义(P<0.05).结论 MMP-9、TIMP-1的表达与NSCLC淋巴结转移、临床分期和预后密切相关,可作为判断NSCLC转移和预后的指标.     

CXCR7在肿瘤侵袭和转移中的研究

趋化因子在细胞的转化和黏附中发挥重要作用.现已证实CXCR7与趋化因子CXCL12和CXCL11有高亲和力,而且趋化因子受体CXCR7激活后,可通过调节细胞外基质(ECM)、上皮-间质转化(EMT)及其他信号转导通路等影响肿瘤的侵袭和转移.因此,深入研究趋化因子受体CXCR7与肿瘤侵袭和转移的分子机制有望为肿瘤治疗提供更有效的理论基础.     

MMP-9与趋化因子受体7在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨MMP-9与趋化因子受体7(chemokine receptor 7,CCR7)在乳腺癌中的表达及临床意义.方法 选取乳腺癌患者65例为观察组,采用免疫组织化学染色方法检测乳腺癌患者的乳腺组织及正常乳腺组织中MMP-9与CCR7的表达情况,并分析二者的相关性及其与临床病理特征的关系.结果 MMP-9与CCR-...     

趋化因子受体与肿瘤转移

目前认为肿瘤细胞转移和淋巴细胞迁移具有相似机制,但趋化因子及其受体参与肿瘤转移的机制尚未完全阐明。由于其在肿瘤细胞器官选择性转移中的重要作用,趋化因子受体有希望成为肿瘤治疗的靶标并具有预后价值。现综述趋化因子受体与肿瘤侵袭和转移的研究进展。     

趋化因子受体与肿瘤转移

目前认为肿瘤细胞转移和淋巴细胞迁移具有相似机制,但趋化因子及其受体参与肿瘤转移的机制尚未完全阐明。由于其在肿瘤细胞器官选择性转移中的重要作用,趋化因子受体有希望成为肿瘤治疗的靶标并具有预后价值。现综述趋化因子受体与肿瘤侵袭和转移的研究进展。     

Chemokine expression in tumor-to-tumor metastasis

Chemokines play an important role in cancer metastasis by modulating the directional cell movement and migration of tumor cells. The most commonly overexpressed chemokine receptor in human cancer is CXCR4. Once activated by its ligand CXCL12 (stromal cell-derived factor-1 ligand/SDF1), CXCR4 stimulates several key migratory, proliferative and survival signaling cellular pathways. CXCR4 is expressed in small-cell lung carcinoma (SCLC) cells and other tumors. To further characterize the role of chemokines in tumor-to-tumor metastasis, we analyzed the tissue expression of CXCR4 and CXCL12 in the surgical specimen of a patient with this phenomenon. We performed immunohistochemical analysis for the expression of CXCR4 and CXCL12 in metastatic tumor tissue of a 69-year-old Caucasian male with extensive SCLC metastatic to a renal oncocytoma. The oncocytoma tissue harboring SCLC showed CXCL12 expression, but not CXCR4. A high expression of the two molecules was found in a normal renal parenchymal control. Our results suggest that CXCR4 and CXCL12 plays a role in this condition, but their expression may be affected by the microenvironment of the harboring malignancy. Further characterization of these phenomena is needed to shed light on the biological mechanisms of tumor metastasis.     

趋化因子受体CXCR7及其与肿瘤的关系

CXCR7是继CXCR4之后发现的趋化因子CXCL12的新受体.目前研究表明,CXCL12/CXCR7生物轴对多种肿瘤的发展有重要影响,与CXCL12/CXCR4生物轴的作用有一定相似性.CXCR7广泛表达于多种肿瘤组织及肿瘤细胞,在肿瘤细胞的生长增殖、黏附迁徙中起重要作用.抑制CXCR7表达或阻断其信号传导通路可能为肿瘤治疗提供新策略.     

Chemokine and chemokine receptor related to cancer metastasis

The relationship has become clear between the expression of chemokine/chemokine receptors on cancer cells and the invasion, metastasis and peritoneal dissemination. Many cancer cells express chemokine receptors which are not expressed on the surface of normal tissues. Recently, it has been reported that overexpression of CXCR4/CXCL12 is related with metastasis to lung, liver, lymph nodes and bone marrow, while the overexpression of CCR7/CCL21 is mainly related with lymph node metastasis. We performed a comparative analysis of differential gene expressions related to chemokines/chemokine receptors, and cytokines in established gastric cancer cell lines by cDNA microarray. Upregulated chemokine genes were CCL21, CCL5, CXCL14, CCL2, CXCL1, CXCL8, CXCL7 and CXCL12, which the downregulated chemokines genes were MIP-1alpha and TECK. The upregulated gene of chemokine receptors was CCR-6. In the cancer microenvironment, cancer cells readily formed edematous and inflammatory conditions, easily metastasizing to other organs with the suppression of dendritic cells. The chemokines/chemokine receptors will hopefully become the new targets for cancer therapies for the regulation of metastasis.