自发性心室纤颤的基因基础和分子机制

 目的研究心脏钠离子通道基因SCN 5 A的突变是否能够引起自发性心室纤颤(IVF),以帮助IVF的基因诊断和合理治疗.方法用单链构型多态性(SSCP)和DNA序列分析法伴有IVF的6个小家系和2个散发的病人的血样,在已知离子通道基因,包括心脏钠离子通道基因SCN 5 A上进行了识别突变的研究.并通过测试突变通道和正常通道在卵母细胞中的电生理活动来判定突变对IVF发生机制的影响.结果在3个IVF家族中从SCN 5 A密码范围内识别了…个错义突变和一个读码突变.电生理研究显示含有错义突变的钠离子通道比正常通道从静止中恢复得更快,而读码突变使钠离子通道失去功能.结论我们的工作显示了伴有RBBB和ST段抬高的IVF是一种明显的综合征,并且心脏钠通道基因SCN 5 A与IVF的发生密切相关.     

软通道技术治疗慢性硬膜下血肿的探讨

目的观察软通道技术治疗慢性硬膜下血肿的疗效。方法采用软通道技术置管引流血肿。结果 48例均1次置管成功,无颅内出血、颅内感染、急性脑膨胀、张力性气颅及癫痫等并发症,46例治愈,2例效果不佳,考虑为血肿机化,行开颅手术治疗后治愈。结论软通道技术治疗慢性硬膜下血肿安全可靠,方法简便易行,并发症少,恢复快。     

尼莫地平对脑损伤后神经细胞钙通道和超微结构的改变

采用细胞内Ｃａ２＋荧光探针Ｆｕｒａ－２／ＡＭ检测大鼠脑损伤后神经元突触体胞浆中游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ），以研究神经细胞钙通道变化，并选用Ｃａ２＋通道阻断剂尼莫地平治疗，观察神经细胞Ｃａ２＋通道变化和超微结构的改变。结果表明，脑损伤后神经细胞钙通道开放，突触体胞浆中游离［Ｃａ２＋］ｉ在伤后０．５小时即已升高为１．０９±０．０８×１０－６Ｍ／Ｌ水平（Ｐ＜０．００１），伤后６、２４、４８和７２小时，［Ｃａ２＋］ｉ持续处于１０－６Ｍ／Ｌ水平以上。同时发现神经细胞Ｃａ２＋超载时，其超微结构损害。应用尼莫地平治疗后，神经细胞胞浆游离［Ｃａ２＋］ｉ明显下降，超微结构损害显著减轻。     

新疆巴州地区急性心肌梗死急诊绿色通道及血运重建治疗体系的临床应用

目的对经急诊绿色通道（急诊一导管室或CCU室）人院的AMI患者与经传统通道（门诊一病房一导管室或CCU室）人院的患者,比较血运重建及预后的优劣。方法选择2008年1月至2013年1月在新疆巴州人民医院就诊的AMI患者共105例。经急诊绿色通道人院的患者64例,与经传统通道入院的患者41例进行对照．探讨两组血运重建及预后的优劣。结果急诊绿色通道组血运重建的时间,PCI组为（98．6±6．26）min,溶栓组为（45．25±5．68）min,经传统通道PCI组为（142．6±7．76）min,溶栓组为（71．68±6．02）min,急诊绿色通道组的AMI患者相比较传统通道组,具有更少的梗死后心绞痛、再梗死、心力衰竭发生,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论通过急诊绿色通道转运AMI患者,具有更快的血运重建时间及更好的预后。     

钙激活Cl-通道阻断剂对哮喘气道黏液高分泌的抑制研究

 目的 观察小鼠钙激活Cl-通道阻断剂尼氟灭酸(Niflumic acid,NFA)对哮喘小鼠气道黏液高分泌的抑制作用.方法 将BABL/c小鼠随机分为哮喘组、吸入NFA预防组和正常对照组.AB-PAS特染法检测各组小鼠小支气管杯状细胞的数量及黏液分泌状况.RT-PCR法检测各组肺组织中黏蛋白MUC5AC mRNA和mClCA3 mRNA水平.结果 正常对照组小支气管只有少量散在分布的杯状细胞,管腔干净;而哮喘组出现大量簇状分布的杯状细胞,胞质内富含着色颗粒,管腔具有着色黏液;NFA预防组的杯状细胞数量与正常对照组相近.哮喘组的MUC5AC及mClCA3 mRNA水平均显著高于正常对照组;NFA预防组的MUC5AC mRNA水平与正常对照组接近,而mClCA3 mRNA水平稍高于正常对照组.结论 NFA能有效抑制哮喘小鼠气道杯状细胞数量的增加及黏蛋白的合成,这一效果是通过阻断mCLCA3活性和降低其表达水平来实现的.     

NPPB对心室肌细胞容积敏感性氯通道的影响

目的　观察氯通道阻断剂对小鼠心室肌容积敏感性氯通道的影响。方法　采用急性分离的小鼠心 室肌细胞,低渗溶液激活容积敏感性氯通道电流,膜片钳全细胞记录法记录电流。结果　低渗溶液激活了一 个明显的容积敏感性氯通道电流,该电流具有明显的外向整流特征,能被5 硝基 2(3 苯丙胺) 苯甲酸可逆性 明显抑制,对内外向电流的抑制率几乎相等[(79.1±2.5)%比(77.1±2.2)%]。结论　小鼠心室肌细胞容积 敏感性氯通道电流具有外向整流性及时间依赖性失活特性,能被氯通道阻断剂所抑制,且该抑制作用具有一 定的电压依赖性。     

电压门控钾通道Kv1.5反义核酸对胃癌细胞SGC7901生长的抑制作用

目的构建电压门控钾通道Kv1．5分子的反义核酸(Kv1．5AS)的真核表达载体,建立Kv1．5AS转染的胃癌SGC7901细胞亚系,探讨Kv1．5分子对胃癌细胞生长的抑制作用。方法通过DNA重组技术,将Kv1．5全长eDNA片段从pBKKvl．5载体反向亚克隆至真核表达载体pcDNA3．1,构建表达Kv1．5反义核酸的重组载体pcDNA3．1-Kv1．5AS。借助脂质体将pcDNA3．1-Kv1．5AS转导入胃癌细胞SGC7901。通过MTT实验绘制细胞生长曲线,肿瘤细胞集落形成实验检测集落形成率,流式细胞仪进行细胞周期分析,并利用Western blot检测Kv1．5和CyclinD1蛋白在基因转染细胞中的表达。结果限制性酶切鉴定结果提示,重组载体peDNA3．1-Kvl．5AS构建成功。Western blot结果表明,转染pcDNA3．1-Kv1．5AS后,Kv1．5蛋白在SGC7901细胞中的表达显著降低。与转染空载体的对照细胞相比,转染Kv1．5AS表达载体后,SGC7901细胞生长变缓,集落形成率显著降低,细胞发生了G1期阻滞。Western blot结果证实,CydinD1蛋白在Kv1．5AS转染细胞中表达降低。结论电压门控钾通道Kv1．5反义核酸可抑制胃癌细胞SGC7901的生长。     

PTCD术中对比剂胰管逆流与共同管的关系探讨

目的　观察胆管造影中对比剂胰管逆流及胆胰共同管的长度 ,分析共同管长度与胰管逆流的关系。资料与方法　搜集因阻塞性黄疸行经皮肝穿胆管引流术 (PTCD)患者资料 ,观察伴有对比剂胰管逆流的阻塞性黄疸病因、胆胰共同管的长度 ,分析对比剂逆流与共同管的关系 ,与正常成年国人胆胰共同管长度的样本值作为对照。结果　 39例对比剂胰管逆流的患者 ,因胆管为原发疾病引起阻塞性黄疸 30例 ,共同管平均长度 (13.5± 3.6 )mm ,因外压性病变或胆管转移癌引发阻塞性黄疸 9例 ,共同管平均长度 (5 .2± 2 .1)mm ,前者明显长于后者 (P <0 .0 1)。所有患者共同管平均长度 (11.2± 1.3)mm ,明显长于正常人 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　胆胰共同管的长度与胆胰管逆流关系密切 ,胆胰共同管异常是诱发胆胰病变的危险因素     

维持性血液透析患者血管通道情况与抑郁的关系研究

目的观察长期维持性血液透析病人的抑郁状态,及其与患者血管通道情况的相关性。方法选择138例长期维持性血液透析治疗的病人,观察汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、汉密尔顿抑郁量表(HDMA)的积分及血管通道情况,进行统计分析。结果血管内瘘流量≤200 ml/min组的焦虑抑郁积分>220~250 ml/min、250 ml/min组,血管内瘘流量201~220 ml/min组的焦虑抑郁积分>250 ml/min组(P<0.05),有血管内瘘并发症组患者焦虑抑郁积分均大于无并发症组(P<0.05)。结论透析患者血管通道情况与焦虑抑郁状态有密切关联。     

力竭运动对大鼠窦房结ATP-敏感型钾离子通道的影响

目的:探讨两周力竭运动对大鼠窦房结ATP-敏感型钾离子通道(KATP通道)亚基Kir6.2mRNA表达及通道电流密度的影响。方法:健康雄性SD大鼠180只,8周龄,体重(220±8)g,共分9组,每组20只,包括安静对照组(C组)1组、一次力竭组(O组)4组、反复力竭组(R组)4组。安静对照组不进行任何运动。反复力竭组大鼠尾部负重3%体重,每天进行1次力竭游泳,每次约2小时,每周6天,共运动2周。一次力竭组大鼠在正常喂养2周后进行一次力竭游泳运动,运动方案同反复力竭组。运动组大鼠分别于运动后即刻、4小时、12小时、24小时不同时相取材,一次力竭运动各组大鼠分别以O-0h、O-4h、O-12h、O-24h命名,反复力竭运动各组大鼠分别以R-0h、R-4h、R-12h、R-24h命名,应用实时荧光定量PCR技术测定KATP通道亚基Kir6.2 mRNA表达变化,应用细胞急性分离及全细胞膜片钳技术测定通道电流密度变化,以观察力竭游泳运动对大鼠窦房结细胞膜上KATP通道的影响。结果:反复力竭运动各组Kir6.2 mRNA表达显著高于对照组(P<0.01)。反复力竭各时相组KATP通道IK,ATP电流密度显著高于对照组及一次力竭组(P<0.01)。结论:反复力竭运动可引起窦房结细胞膜KATP通道亚基Kir6.2 mRNA表达及IK,ATP电流密度增加,这可能引起窦房结细胞舒张期自动除极及自律活动减慢,提示反复力竭运动对于KATP通道的影响可能成为运动引发窦房结功能障碍及运动性心律失常的离子通道机制之一。     

螺环类N型钙通道阻断剂的合成及其生物活性

目的：寻找具有高镇痛活性的小分子N型钙通道阻断剂。方法：以苄基哌啶酮、芳胺为起始原料,经水解、环合、氢化脱苄等多步反应合成系列化合物,并通过小鼠乙酸扭体模型和N型钙通道电流抑制实验评价化合物的镇痛活性和作用机制。结果：共合成并评价了47个化合物,其中10个化合物具有明显镇痛活性,1个化合物的镇痛活性明显高于阳性化合物。结论：所合成的以螺环为特征的系列化合物具有N型钙通道阻断活性,其中化合物405的电流抑制率为（85±2．7）％,且具有明显的镇痛活性,值得进一步研究。     

脑外伤后脑组织钙,磷含量变化及异搏停的保护作用

用原子吸收光谱法及比色法分别测定了大鼠脑挫伤后伤灶组织总钙（Ｃａｔ）、组织总磷（Ｐｔ）含量的动态变化，用Ｃａ＾２＋通道阻滞剂异搏停进行了治疗。结果表明：伤后２小时内即出现挫伤区的Ｃａ＾２＋内流以致Ｃａｔ增加，８小时达高峰并至少维持７天；Ｃａ＾２＋内流后可诱发组织细胞的继发性破坏以致Ｐｔ丢失。异搏停可以部分阻止Ｃａｔ增高及Ｐｔ降低，故对受损组织有一定保护作用。     

钙释放通道放射配基分析法的建立

目的用心肌匀浆建立心肌肌浆网钙释放通道检测方法，并观察其在高血压中的变化。方法用３Ｈ标记兰尼定（ｒｙａｎｏｄｉｎｅ），探索在大鼠心肌匀浆中建立钙释放通道放射配基分析的最佳条件，并对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）左室心肌钙释放通道进行饱和实验。结果①保温时间在０～６０分钟内，３Ｈｒｙａｎｏｄｉｎｅ与心肌钙释放通道结合量迅速增加，９０分钟达平衡；匀浆蛋白在０～４００μｇ，３Ｈｒｙａｎｏｄｉｎｅ结合量与蛋白质浓度呈直线关系；反应介质中游离钙浓度直接影响３Ｈｒｙａｎｏｄｉｎｅ的结合量。②ＳＨＲ及正常对照组（ＷＫＹ）标准饱和曲线及Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图显示，３Ｈｒｙａｎｏｄｉｎｅ的特异性结合高，呈单位点结合等特点，ＳＨＲ组最大结合量（Ｂｍａｘ）值明显高于ＷＫＹ组（Ｐ＜００１）。结论用３Ｈｒｙａｎｏｄｉｎｅ可在心肌匀浆中进行钙释放通道放射配基分析，且发现３ＨｒｙａｎｏｄｉｎｅＢｍａｘ升高与高血压左室肥厚密切相关。     

缬沙坦对豚鼠心房肌细胞电生理的影响

 目的 从心肌细胞电生理的角度探讨血管紧张素Ⅱ受体阻断药(ARB)类药物抗房颤的可能机制.方法 采用全细胞膜片钳技术的电流钳方法记录单细胞动作电位,采用全细胞膜片钳技术的电压钳方法记录心房肌细胞的延迟整流钾电流(Ik).观察ARB类药物缬沙坦对豚鼠心房肌细胞动作电位及离子通道电流的影响.结果 缬沙坦100 μM可延长心房肌细胞动作电位时程,尤其是APD50从(52.2±6.5) ms延长至(58.6±7.8 ms,P<0.01),APD90从(94.0±11.7) ms延长至(105.3±14.0 ms,P<0.01),而对RMP、APA无显著影响.缬沙坦100 μM明显抑制心房肌细胞IK的峰值电流,从5.33±0.13(pA/pF)减小至4.49±0.48(pA/pF)(P<0.05),并呈电压依赖性.结论 高浓度缬沙坦延长心房肌细胞动作电位时程、APD50及APD90.缬沙坦抑制心房肌细胞延迟外向钾电流,可能是引起其动作电位时程延长的一个重要因素.缬沙坦延长心房肌动作电位时程,可能在房颤的转复及房颤转复后窦性心律的维持中有价值.     

钙拮抗剂尼莫地平救治重型颅脑损伤的临床研究

观察了钙拮抗剂尼莫地平对重型颅脑损伤的治疗作用。尼莫地平治疗组３４６例，常规治疗对照组１４２例，结果表明，尼莫地平治疗组颅内压升高幅度较小，ＣＴ动态扫描脑水肿明显减轻，临床恢复良好率达８０．１％，病死率明显下降，仅为１８．２％。并就尼莫地平救治重型颅脑损伤的作用及有关机制等进行了讨论。     

钾通道阻断剂四乙铵对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究钾通道阻断剂四乙铵(TEA)对卵巢癌细胞(SKOV3)凋亡的影响.方法 将浓度为2×104/ml的卵巢癌细胞分别设对照组和不同浓度(1、5、10、20mmol/L)TEA组.将TEA作用于卵巢癌细胞,用MTT法检测细胞活性,采用Hoechest33258染色检测细胞凋亡,同时通过碘化丙啶(PI)染色,采用流式细胞仪检测细胞凋亡比率.结果 在TEA浓度为1、5、10、20mmol/L时,对SKOV3细胞增殖的抑制率分别为8.61%、18.86%、46.63%和65.22%,表明TEA对SKOV3细胞的增殖有抑制作用并呈现明显的剂量依赖性,当TEA浓度=5mmol/L时,对SKOV3细胞增殖的抑制效应明显;Hoechst33258染色结果显示,TEA能诱导SKOV3细胞凋亡;流式细胞仪检测结果表明,SKOV3细胞经TEA浓度为1、5、10、20mmol/L处理后48h,其细胞凋亡率分别为9.23%、21.57%、54.22%和71.06%,与对照组(2.08%)比较,差异有显著性(P＜0.01),提示TEA可诱导SKOV3细胞凋亡,且TEA促进SKOV3细胞凋亡作用具有一定的剂量依赖性.结论 钾通道对SKOV3细胞增殖具有重要调控作用,钾通道阻断剂TEA阻断钾通道后可促进细胞凋亡.     

基于FastICA和通道间相关的表面肌电信号分解研究

目的为了对神经肌肉疾病进行相关的研究和临床上诊断治疗,探索新的和有效的表面肌电(surface EMG,sEMG)信号分解方法。方法首先用FastICA求解混矩阵,然后对测量信号矩阵进行变换,再用通道间相关性分解s EMG信号。结果经过仿真和真实信号进行测试,分解信噪比为0 d B的第一组信号时,以平均95.6%的准确率分解出20个运动单元(motor unit,MU);分解信噪比为20 d B,且参与发放的MU更多,发放频率更高的第二组信号时,以平均98.4%的准确率分解出29个MU;分解真实信号时,得到的平均MU个数为14.2,并用"二源法"进行评测,两组中分解出相同MU的比例为80%,且相同MU发放时刻的平均重合率为95.1%。结论这种结合Fast ICA和通道间相关的方法能以较高的准确率实现s EMG信号的有效分解。     

哮喘气道上皮杯状细胞合成GM-CSF及其调控机制的研究

目的 观察哮喘小鼠气道上皮杯状细胞合成粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的能力,探讨钙激活Cl^-通道(CLCA)在合成中的调控作用。方法 取成年雄性BALB／c小鼠,采用卵蛋白致敏法制备哮喘模型。AB-PAS特染法检测哮喘小鼠小支气管杯状细胞的分布;同一解剖部位采用免疫组化染色法检测GM-CSF的表达。体外培养人气道黏液上皮细胞系NCI-H292,采用含人hCLCA1的重组质粒pIRKS2-EGFP／hcLCA1转染该细胞。筛选到稳定表达hCLCA1的细胞后,免疫组化法及RT-PCR法检测该细胞GM-CSF的表达、转录水平。设非转染细胞和CLCA阻断剂NFA干预的转染细胞为两个对照组。结果 哮喘小鼠气道杯状细胞GM-CSF免疫组化染色为阳性。转染hCLCA1细胞的GM-CSF表达与转录水平明显高于两个对照组;NFA能抑制转染细胞GM-CSF的表达和转录。结论 哮喘气道上皮杯状细胞能合成GM-CSF,特定CLCA表达升高是促进GM-CSF合成的机制之一。     

氟桂利嗪,倍他司汀对膜迷路积水豚鼠蜗内电位及Ca^2＋浓度的影响

４５只豚鼠随机分为３组，造成膜迷路积水的模型，对照组右耳作空白对照，两用药组的豚鼠分别于造模后第１天口服大剂量氟桂利嗪（１０ｍｇ／ｋｇ，１／日）及倍他司汀（１０ｍｇ／ｍｇ，２／日）３０天，发现在造模３０天后，实验对照组听性脑干反应（ＡＢＲ）阈值增高，向术侧摆动试验眼震（ＳＰＶＮ）频数下降，蜗内电位（ＥＰ）下降，内淋巴Ｃａ＾２＋浓度增高，ＥＴ和Ｃａ＾２＋呈负相关，氟桂利嗪和倍他司汀均能显著抑制前庭性     

粉防己碱对微波辐射致纹状体损伤的治疗作用及机制探讨

目的研究粉防己碱(TET)对微波辐射致纹状体损伤的治疗作用及其机制。方法以40只C57BL/6N小鼠为实验对象,采用随机数表法将小鼠分为空白对照组(C)、辐射对照组(R)、TET组(TET)和TET+辐射组(TET+R),每组10只。接受辐射小鼠采用2.856 GHz、8 mW/cm2微波全身辐射15 min,建立微波辐射纹状体损伤的动物模型。接受TET给药小鼠给予腹腔注射TET(60 mg/kg),1次/d,连续3 d。采用紫外分光光度法验证TET结构。利用旷场实验,检测小鼠焦虑情绪。通过光镜和透射电镜观察纹状体组织病理学和超微结构变化。采用实时荧光定量聚合酶联反应(qPCR)检测各组小鼠纹状体电压门控钙通道(VGCC)亚型基因表达改变。结果微波辐射后,小鼠探索中央区域时间、路程均较辐射前明显降低(t=4.60、5.18,P<0.01),TET给药后显著改善(F=1.43、4.37,P<0.05)。辐射后7 d,可见纹状体部分神经元核固缩、深染,以苍白球区(GP)较为明显。部分神经元凋亡,胶质细胞线粒体肿胀、空化,突触间隙模糊,血管周隙增宽。TET给药后上述病变均明显改善。微波辐射及TET给药对纹状体VGCC各亚型基因表达均无显著影响(P>0.05)。结论TET对微波辐射致小鼠焦虑样行为及纹状体组织结构损伤均具有一定治疗作用,其作用机制与纹状体VGCC基因表达无关。