胰岛素抵抗大鼠前列腺微血管新生的实验研究

目的探讨2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠前列腺微血管新生与良性前列腺增生症发生发展的关系。方法(1)正常对照组大鼠(Normal组,n=15):8~10周龄正常雄性Wistar大鼠;(2)单纯良性前列腺增生组大鼠(BPH组,n=15):手术去势后外源性给予高剂量雄激素;(3)胰岛素抵抗前列腺增生组大鼠(GK+BPH组,n=15):8~10周龄自发型非肥胖型2型糖尿病Wistar大鼠(GK大鼠),手术去势后外源性给予高剂量雄激素;(4)胰岛素抵抗前列腺增生血糖干预组大鼠(GK+BPH+PH组,n=15):8~10周龄GK大鼠手术去势后外源性给予高剂量雄激素,同时给予盐酸吡格列酮灌胃。光化学法检测大鼠空腹血糖水平;ELISA双抗体夹心法检测大鼠血清胰岛素水平及前列腺DHT含量;real-time PCR法检测大鼠前列腺VEGF、Ang-1、Ang-2 mRNA表达量;免疫组化S-P法检测前列腺组织CD31表达并根据阳性结果计数MVD。结果 (1)GK+BPH、GK+BPH+PH组空腹血糖水平及胰岛素抵抗指数高于Normal组及BPH组(P0.05);GK+BPH组指标高于GK+BPH+PH组(P0.05);Normal组及BPH组上述指标差异无统计学意义(P0.05)。BPH组、GK+BPH组、GK+BPH+PH组前列腺组织中DHT含量与Normal组相比明显增高(P0.05);GK+BPH组、GK+BPH+PH组高于BPH组,且GK+BPH组高于GK+BPH+PH组(P0.05);(2)各组前列腺组织中VEGF、Ang-1、Ang-2 m RNA表达量及MVD计数结果为GK+BPH组GK+BPH+PH组BPH组Normal组,组间差异有统计学意义(P0.05);(3)GK+BPH组、GK+BPH+PH组大鼠前列腺组织中DHT含量与胰岛素抵抗指数呈正相关(P0.05),相关性显著。结论 2型糖尿病伴胰岛素抵抗时,可通过增加前列腺组织DHT的含量从而上调VEGF、Ang-1、Ang-2的表达,促进前列腺组织局部血管新生以加速良性前列腺增生症的进展。     

非那雄胺对大鼠前列腺微血管的影响

目的　评价非那雄胺对大鼠前列腺微血管的影响并探讨其机制。方法　非那雄胺 4 0 mg/ (kg· d)喂饲雄性 SD大鼠 7d(B组 ) ,14 d(C组 ) ,HE染色观察采用墨汁灌注染色的大鼠前列腺微血管密度 (MVD)的改变 ,免疫组织化学 SP法检测大鼠前列腺组织中血管内皮生长因子 (VEGF)及内皮型一氧化氮合酶 (e NOS)的蛋白表达。结果　 B组、C组的 MVD较对照组 (A组 )分别下降了 35 .2 % ,5 6 % ;B组、C组的 VEGF的蛋白表达较 A组分别减少 31.7%及 6 2 .6 % ;e NOS的蛋白表达较 A组分别减少 15 .7%及 5 2 .5 %。结论　非那雄胺可抑制大鼠前列腺组织中 VEGF、e NOS的蛋白表达进而抑制前列腺的微血管生成     

血管抑制因子在前列腺癌及前列腺增生组织中的表达及意义

【目的】探讨前列腺增生（BPH）和前列腺癌（PCa）组织中血管增生抑制因子，如视网膜色素上皮细胞源因子（PEDF）、血管抑素（angiostatin）、内皮抑素endostatin的表达情况及其血管依赖性生长的分子机制。【方法】收集正常前列腺、前列腺增生和前列腺癌组织标本，RT—PCR技术检测样品中PEDF、angiostatin、endostatin的mRNA表达量，Western blot技术检测样品中PEDF蛋白的表达量。【结果】和正常前列腺组织相比，PEDF表达量在BPH中无明显变化（P〉0．05），在前列腺癌中普遍显著下降（P〈0．05）；良性前列腺增生组织中endostatin表达量较正常前列腺组织显著升高（P〈0．05），前列腺癌比正常前列腺显著升高（P〈0．05），而且前列腺癌组织较良性前列腺增生进一步显著增高（P〈0．05）；三种组织中均未检测到angiostatin的表达。【结论】良性前列腺增生及前列腺癌组织抑制因子表达变化可能和其血管依赖性生长相关；PEDF可能是前列腺组织最主要的血管增生内源性抑制因子。     

血管抑制因子在前列腺癌及前列腺增生组织中的表达及意义

 【目的】探讨前列腺增生（BPH）和前列腺癌（PCa）组织中血管增生抑制因子，如视网膜色素上皮细胞源因子（PEDF）、血管抑素（angiostatin）、内皮抑素endostatin的表达情况及其血管依赖性生长的分子机制。【方法】收集正常前列腺、前列腺增生和前列腺癌组织标本，RT—PCR技术检测样品中PEDF、angiostatin、endostatin的mRNA表达量，Western blot技术检测样品中PEDF蛋白的表达量。【结果】和正常前列腺组织相比，PEDF表达量在BPH中无明显变化（P〉0．05），在前列腺癌中普遍显著下降（P〈0．05）；良性前列腺增生组织中endostatin表达量较正常前列腺组织显著升高（P〈0．05），前列腺癌比正常前列腺显著升高（P〈0．05），而且前列腺癌组织较良性前列腺增生进一步显著增高（P〈0．05）；三种组织中均未检测到angiostatin的表达。【结论】良性前列腺增生及前列腺癌组织抑制因子表达变化可能和其血管依赖性生长相关；PEDF可能是前列腺组织最主要的血管增生内源性抑制因子。     

COX-2和VEGF在前列腺癌中的表达及其与肿瘤血管生成关系的研究

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在前列腺癌(PCa)中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法:30例前列腺癌组织,按Gleason评分,将≥7分者列为高Gleason评分组(n=16);<7分者列为低Gleason评分组(n=14)。良性前列腺增生(BPH)20例,BPH并高级前列腺上皮内瘤(PIN)12例。正常前列腺组织(NP)10例。应用免疫组化方法检测各组织中COX-2、VEGF的表达水平及其微血管密度(MVD)。结果:PCa、PIN中COX-2、VEGF的阳性表达率及MVD值高于BPH及NP(P均<0.05),高Gleason评分组中COX-2、VEGF的阳性表达率(81.3%、93.8%)及MVD值(63.4±1.80)高于低Gleason评分组(阳性表达率为42.9%、64.3%,MVD值为51.7±1.56,P均<0.05)。COX-2与VEGF之间呈正相关(r=0.630,P<0.05),COX-2阳性组及VEGF阳性组MVD值(69.3±3.91、72.6±3.63)均高于COX-2阴性组及VEGF阴性组(43.9±2.51、40.6±2.84,P<0.05)。结论:COX-2、VEGF在前列腺癌中均为高表达,且与肿瘤的Gleason评分密切相关,COX-2与VEGF的表达可能有协同作用,共同促进肿瘤血管生成,增加微血管密度。     

非那雄胺片联合龙血竭胶囊对前列腺增生组织微血管密度及血管内皮生长因子的影响

目的评价非那雄胺片联合龙血竭胶囊对前列腺增生组织微血管密度及血管内皮生长因子的影响。方法60例前列腺增生患者随机分为观察组和对照组两组,每组均30例。均进行TURP。术前,观察组：口服非那雄胺片及龙血竭胶囊。对照组：口服维生素C片。结果观察组术中失血量及切除1gBPH失血量均少于对照组,差异有有统计学意义（P〈0．01）。观察组前列腺增生症患者的MVD数少于对照组,差异有有统计学意义（P〈0．01）。观察组前列腺增生症患者的VEGF表达数少于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论TURP术前口服非那雄胺片和龙血竭胶囊能减少术中出血．与该治疗方式能减少前列腺增生组织中的微血管密度及VEGF的表达有关。     

良性前列腺增生症的药物治疗

良性前列腺增生症(BPH)可能因细胞凋亡减少而形成。绝大多数细胞凋亡均需通过半光天冬酶(caspase)这一类特异酶。BPH的发生与新生血管形成(anglogenesis)有关,血管内皮素可能控制器官的体积。内抑制素(endostatin)及血管抑制素(angiostatin)可抑制新生血管的形成,故可用以治疗肿瘤及BPH。药物治疗应作为BPH的第一线治疗,联合应用5α-还原酶抑制剂非那雄胺(finasteride)及α_(1A)-AR阻断剂可增加BPH细胞凋亡。     

前列腺增生症与前列腺癌微血管密度计数的比较

目的测定正常前列腺（NP）、前列腺增生症（BPH）、前列腺癌（Pc）三者中及前列腺癌不同病理分级、临床分期中微血管密度计数，比较微血管密度计数在它们中的差别。方法应用链霉菌素抗生物蛋白-过氧化酶方法，用CD34单克隆抗体对正常前列腺、前列腺增生症、前列腺癌行免疫组织化学染色，采用Weinder方法对CD34标记的微血管密度进行定量计数。结果微血管密度在正常前列腺、前列腺增生症、前列腺癌三组中计数分别为15．10±2．33、27．63±3．67、60．20±15．53；微血管密度在PC高、中、低分化细胞病理学分级三组中的计数分别为44．30±3．90、56．10±4．61、81．47±5．90；微血管密度在前列腺癌临床分期A、B、C、D期四组中的计数分别为48．67±7．2、54．79±10．81、72．00±16．31、65．73±15．44，各组差异均具有显著性（P〈0．01）。结论微血管密度计数在前列腺癌高于前列腺增生症、前列腺增生症高于正常前列腺，微血管密度计数在前列腺癌随着细胞病理学分级的降低和临床分期的升高而增加。     

晚期骨关节炎患者关节软骨细胞中HIF-1α和VEGF的表达

目的 研究低氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在晚期骨关节炎(OA)患者关节软骨细胞中的表达,初步探讨HIF-1α在OA发病机制中的作用.方法 选取18例晚期膝骨关节炎(KOA)接受全膝关节置换术患者的膝关节软骨组织标本,根据取材部位分为KOA负重区组(磨损较重的股骨内髁)和KOA相对非负重区组(磨损较轻的股骨外髁);另选取5例因股骨近端或股骨干肿瘤而截肢患者的正常膝关节软骨组织标本作为对照.HE和SaFRanin O染色下进行Mankin整体评分比较各组关节软骨组织退变程度;免疫组织化学染色检测关节软骨细胞HIF-1α和VEGF表达,比较各组HIF-1α和VEGF阳性细胞计数.结果 KOA负重区组Mankin整体评分为(12.36±0.84),显著高于KOA相对非负重区组的(7.23±0.32)和对照组的(0.88±0.15)(P＜0.05).免疫组织化学染色显示,KOA负重区组关节软骨细胞HIF-1α和VEGF阳性细胞计数分别为4.81±0.62和5.67±0.32,均显著高于KOA相对非负重区组和对照组(分别为2.37±0.68、4.87±0.33和0.78±0.14、2.02±0.45)(P＜0.05).结论 晚期OA患者关节软骨细胞中HIF-1α和VEGF蛋白表达明显增加.提示上调靶基因VEGF表达是HIF-1α在OA发病中可能的调节机制.     

高血压对良性前列腺增生组织中血管新生影响的研究

目的探讨原发性高血压对良性前列腺增生(BPH)组织中血管新生的影响。方法应用免疫组织化学方法检测了50例单纯BPH和50例BPH并发高血压患者的前列腺组织中CD34抗原及血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并计算微血管密度(MVD)。结果BPH并发高血压组MVD明显高于单纯BPH组(P<0.01)。BPH并发高血压组内,高血压病程≥15年组MVD明显大于高血压病程<15年组(P<0.05);高血压病程与前列腺容积有明显相关性。BPH并发高血压组VEGF在前列腺间质中的阳性表达率显著高于单纯BPH组(P<0.05)。BPH并发高血压组前列腺组织的MVD与间质中VEGF表达呈显著正相关(r=0.11,P<0.05)。结论高血压与前列腺间质中VEGF的表达升高密切相关。VEGF的表达升高可以诱导血管新生,因此可以促进并发高血压患者BPH的临床进展。     

基因转染内皮抑素与阿霉素协同作用对小鼠肝癌细胞的影响

目的 探讨内皮抑素作为一种抑制血管生成的蛋白,能否与阿霉素协同作用治疗肝细胞癌(HCC).方法 构建内皮抑素表达质粒和在BALB/c裸鼠皮下建立HepG2人肝细胞肝癌动物模型,用阿霉素和生长抑素表达质粒基因转染治疗.结果 构建的内皮抑素表达质粒在体内、外均可稳定表达.内皮抑素蛋白与阿霉素协同抑制肿瘤和血管内皮细胞的增殖.内皮抑素基因治疗及阿霉素均可抑制裸鼠皮下肿瘤的生长及新生血管的生成,并且呈现协同作用.内皮抑素基因转染下调了缺氧诱导因子(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,而阿霉素仅能下调VEGF的表达.内皮抑素及阿霉素协同下调VEGF的表达.结论 内皮抑素及阿霉素联合作用对抑制HCC治疗有确切效果,内皮抑素可提高阿霉素对肝癌细胞生长的抑制.     

TACE联合应用内皮抑素对兔VX2肝癌VEGF表达的影响

目的研究兔VX2肝癌经导管肝动脉栓塞化疗术（TACE）联合应用内皮抑素（ES）后残瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况及意义。方法建立兔肝移植瘤模型，随机分为对照组（NS，n=10），TACE组（Lipidol＋ADM，n=10）和抗血管生成组（Lipidol＋ADM＋ES，n=10），TACE术后1周取出病理标本，利用免疫组织化学染色和半定量RT-PCR的方法，分别从蛋白和分子水平对残瘤组织VEGF的表达进行检测。结果VEGF蛋白的平均光密度值：对照组为0．130±0．038，TACE组为0．200±0．049，抗血管生成组为0．120±0．047，TACE组与对照组和抗血管生成组之间比较均具有明显差异性（P〈0．01）；VEGF165 mRNA的相对吸光度值：对照组为0．850±0．056，TACE组为1．100±0．087，抗血管生成组为0．720±0．065，TACE组表达水平最高，与其余两组比较差异非常明显（P〈0．01）。结论TACE联合应用内皮抑素治疗与单纯化疗栓塞相比可以明显降低肿瘤VEGF的表达，联合治疗可能影响肝癌的复发和转移。     

UA患者血清血管生成因子的改变研究

目的探究不稳定性心绞痛（UA）患者血清中血管生成因子质量浓度的变化。方法选取2011年1月至2013年9月在本院心血管内科确诊并接受治疗的不稳定型心绞痛患者60例为实验组,根据葡萄糖耐量试验（OGTY）结果再分为糖尿病组（A组,n=20）和非糖尿病组（B组,n=40）。对照组为在本院体检的健康人,共30例。收集血清,然后使用蛋白芯片检测血清中血管内皮生长因子（VEGF）、血管形成蛋白-1（angiopoietin-1）、血管形成蛋白-2（angiopoietin-2）、血管生成素（angio—genin）、血管抑素（angiostatin）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和血小板衍生生长因子BB（PDGF-BB）质量浓度,并比较各组间的上述指标差异。结果在UA患者血清中VEGF[（325．2±210．1）pg／ml]和angiopoietin-2[（3031．3±1865．5）Pg／ml]质量浓度较对照组显著增高（P＜0．05）,而angiopoietin-1、angiogenin、angiostatin、bFGF和PDGF—BB的两组之间比较差异无统计学意义（P＞0．05）。糖尿病组与非糖尿病组间的7项主要血清血管生成因子浓度差异无统计学意义（P＞0．05）。结论UA患者血清中血管内皮生长因子、血管形成蛋白-2浓度明显增高,糖尿病并不影响这种变化。     

十全大补汤对小鼠原发性肝癌的生长及血管生成的影响

目的：研究十全大补汤对小鼠原发性肝癌生长以及其血管生成的影响。方法通过小鼠肝癌细胞CT-26接种小鼠,构建荷兰裸鼠原发性肝肿瘤模型,随机分为对照组和研究组,其中对照组给予生理盐水治疗,研究组给予十全大补汤治疗。治疗10 d后取小鼠血液分析其中小鼠血清中血管内皮生长因子、血管抑素和内皮抑素水平,并测量2组小鼠的肿瘤大小和质量,免疫组织化检测转移瘤微血管密度及细胞增殖。结果与对照组相比,研究组小鼠血清中血管内皮生长因子表达降低（P<0.05）,血管抑素和内皮抑素表达上调（P<0.05）,肿瘤组织Ki 67明显降低（P<0.05）,转移瘤微血管密度明显降低（P<0.05）,并且研究组小鼠的肿瘤质量和尺寸均小于对照组（P<0.05）。结论十全大补汤能够抑制小鼠原发性肝癌肿瘤的生长,扰乱小鼠血清内血管内皮生长因子、血管抑素和内皮抑素的表达水平,抑制肿瘤血管的生成,对原发性肝癌小鼠的治疗具有一定的临床价值。     

碱性成纤维细胞生长因子在前列腺增生组织中表达的临床意义

目的　探讨碱性成纤维细胞生长因子 (b -FGF)在前列腺增生组织中表达的临床意见。方法　采用斑点杂交技术和免疫组化染色测定 4 0例正常前列腺 (NP)、38例前列腺增生症 (BPH )组织中b -FGF的表达情况。结果　BPH组织中b -FGF的表达明显高于NP组织 (P <0 0 1 )。b -FGF表达升高的程度与BPH的分度无明显关系。结论　b -FGF可能为BPH组织自身分泌 ,与其发生发展过程密切相关     

VEGF/KDR在前列腺癌中的表达及其与肿瘤Gleason评分之间关系的研究

目的探讨血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和KDR在前列腺癌(pros-tate cancer,PCa)中的表达及其与肿瘤Gleason评分之间的关系。方法20例前列腺癌组织[按Gleason评分,将≥7分者列为高Gleason评分组(n=12);<7分者列为低Gleason评分组(n=8)]、良性前列腺增生(benign prosta-tic hyperplasia,BHP)15例,正常前列腺组织(normal prostate,NP)中VEGF、KDR的表达水平。结果PCa中VEGF、KDR阳性表达率高于BPH及NP(P均<0.05),高Gleason评分组中VEGF、KDR阳性表达率(83.3%,91.7%)高于低Gleason评分组(37.5%、62.5%,P<0.05)。结论VEGF、KDR在前列腺癌中均为高表达,且与肿瘤的Gleason评分密切有关。