川、黔地区金钗石斛多糖的含量测定

目的:比较川、黔金钗石斛中有效成分多糖的含量,建立金钗石斛中多糖的含量测定方法。方法:采用水提醇沉法提取金钗石斛多糖,以葡萄糖为对照品,在紫外检测波长490nm处用苯酚-硫酸法测定不同产地金钗石斛中多糖的含量。结果:金钗石斛多糖的检测浓度在1.25～8.75μg·mL-1范围内与吸光度呈良好线性关系(r=0.9994)。贵州赤水金钗石斛的平均回收率为101.6%,RSD=1.9%(n=6),多糖含量为11.456%;四川合江金钗石斛的多糖含量为9.226%。结论:苯酚-硫酸法操作简便、可靠、准确、灵敏、稳定性好,适用于金钗石斛中多糖的含量测定。在川、黔地区金钗石斛多糖提取生产过程中,可优先选用贵州赤水金钗石斛。     

脉络宁注射液中石斛酚的含量测定

目的:建立脉络宁注射液中石斛酚的含量测定方法,以体现所用石斛的质量状况。方法:采用固相萃取小柱净化样品,反相高效液相色谱法分析,C18柱分离,以乙腈-0.05%三氟乙酸溶液(70:30)为流动相,流速1.0 mL.min-1,DAD检测,定量测定波长205 nm。结果:方法回收率98.6%,RSD=2.5%(n=6);重复性RSD=2.1%(n=6);检测限为2.58 ng(S/N=3),定量限为9.16 ng(S/N=10)。所测的79批脉络宁注射液中石斛酚含量在0.200～2.290μg.mL-1,均值0.993μg.mL-1,RSD=45.8%(n=79)。结论:所建立的测定方法准确、可行,可一定程度地反映所用石斛的质量状况。     

HPLC法测定有瓜石斛中原儿茶酸的含量

目的:建立有瓜石斛中原儿茶酸的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱(HPLC)法.色谱柱为Zorbax SB-Aq色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液;检测波长为220nm;流速为1.0mL·min-1;柱温为30℃. 结果:原儿茶酸达到基线分离,线性关系良好(r=1.0000);平均加样回收率为101.71%,RSD为2.48%(n=6). 12批市售样品含量在0.0374~0.203mg·g-1范围内,差异相对较大. 结论:该方法灵敏,可靠,可用作有瓜石斛药材的质量评价指标之一.     

紫外-可见分光光度法测定环草石斛中石斛多糖的含量

目的:建立测定环草石斛中石斛多糖含量的方法。方法:采用紫外-可见分光光度法,以D-无水葡萄糖为对照,检测波长为490nm。结果:D-无水葡萄糖的进样量在0～0.10440mg范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0.9997);平均加样回收率为98.09%,RSD=1.62%(n=6)。结论:本法操作简便、快捷、结果准确,可用于环草石斛中石斛多糖的含量测定。     

HPLC-CAD法测定3种药用石斛中3种糖类成分的含量

目的:建立测定3种药用石斛中3种单/双糖成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱-电喷雾式检测器法。色谱柱为Shodex Asahipak NH2P-504E,流动相为乙腈-水(75∶25,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL,数据采集频率为5 Hz,过滤常数为5 s,雾化器温度为35℃,气源为氮气,压力为4.012×105Pa。结果:果糖、D-无水葡萄糖、蔗糖检测质量浓度的线性范围分别为0.1562~1.8738 mg/mL(r=0.9995)、0.0127~0.1524 mg/mL(r=0.9997)、0.2776~3.3312 mg/mL(r=0.9998);定量限分别为0.00261、0.00424、0.00512 mg/mL,检测限分别为0.00078、0.00127、0.00154 mg/mL;精密度、稳定性、重复性、耐用性试验的RSD均小于3%,加样回收率分别95.98%~98.15%(RSD=0.83%,n=6)、95.64%~98.62%(RSD=1.10%,n=6)、97.53%~98.94%(RSD=0.53%,n=6);含量分别为0.28%~1.12%、0.02%~0.13%、0.76%~2.67%;总含量为1.38%~3.10%。3种石斛中糖类成分含量高低依次为蔗糖>果糖>D-无水葡萄糖,其中蔗糖含量及总含量高低依次均为霍山石斛>铜皮石斛>铁皮石斛,D-无水葡萄糖含量高低依次为霍山石斛>铁皮石斛>铜皮石斛,果糖含量高低依次为铜皮石斛>铁皮石斛>霍山石斛。结论:所建方法灵敏度高、重复性好、操作简单,可用于测定3种药用石斛中3种糖类成分的含量;3种药用石斛中糖类成分的含量存在差异。     

金钗石斛茎和花中石斛碱的含量比较研究

目的：比较分析贵州赤水产金钗石斛茎和花中石斛碱的含量.方法：采用气相色谱内标法,色谱柱为OV-1毛细管柱（30 m×0.32 mm,0.33 μm）;柱温（程序升温）：初始温度为150℃,保持5 min,以10℃·min-1程序升温至250℃,保持15min;进样口温度为250℃,FID检测器温度为250℃;载气N2,分流比18：1;萘为内标,测定并比较金钗石斛茎和花中石斛碱的含量.结果：石斛碱在0.1～0.8 μg范围内线性关系良好,金钗石斛茎和花中石斛碱平均含量分别为0.63％和0.45％.结论：赤水产金钗石斛茎和花中石斛碱含量均符合《中国药典》2010年版含量限度要求,本研究为扩大金钗石斛的药用部位提供了依据.     

铁皮石斛中多糖和甘露糖含量测定方法的改进及与齿瓣石斛的比较研究

目的：改进铁皮石斛中多糖和甘露糖的含量测定方法并对铁皮石斛与齿瓣石斛中的多糖和甘露糖含量进行分析比较。方法：采用硫酸-苯酚法测定石斛中多糖的含量;采用高效液相色谱法测定石斛中甘露糖的含量。结果：多糖在2.54～12.87 mg· L-1范围线性关系良好（r＝0.9990）,平均回收率为99.02％,RSD为2.6％（n＝6）;甘露糖的平均回收率为101.5％,RSD为1.7％（n＝9）。6批铁皮石斛药材多糖平均含量为45.94％,甘露糖平均含量为32.33％;9批齿瓣石斛药材多糖平均含量为45.12％,甘露糖平均含量为37.88％。结论：所建方法操作比较简单,准确可靠,重现性好,可用于控制铁皮石斛的质量。铁皮石斛与齿瓣石斛多糖含量相当,齿瓣石斛甘露糖含量高于铁皮石斛。     

柱前衍生化HPLC法测定齿瓣石斛中总氨基酸的含量

目的:建立测定齿瓣石斛中总氨基酸含量的方法。方法:以2,4-二硝基氟苯为衍生试剂,与齿瓣石斛中氨基酸柱前衍生,采用高效液相色谱法测定其含量。色谱柱为SymmetryC1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相A为0.05mol·L-1醋酸钠-醋酸缓冲液(pH6.4)-1%N,N-二甲基甲酰胺,流动相B为乙腈-水(1:1,V/V),梯度洗脱,检测波长为360nm,柱温为30℃,进样量为20μL。结果:13种氨基酸的线性相关系数均>0.9990,平均加样回收率范围在99.34%～101.93%之间,RSD在0.54%～1.91%之间(n=6)。结论:本方法快速、简便、结果准确,可为齿瓣石斛的深入研究奠定基础。     

高效液相色谱-蒸发光散射法测定铁皮石斛中单糖和双糖

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)测定铁皮石斛药材中单糖和双糖的含量分析方法。方法色谱柱Shodex Asahipak NH2(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(78∶22),流速1.0 mL.min-1,柱温30℃;ELSD参数:漂移管温度为100℃,气体流量为1.60 L.min-1。结果果糖、葡萄糖和蔗糖分别在1.38～7.69μg(r=0.999 8),4.87～23.31μg(r=0.999 9),5.91～36.28μg(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系,加样回收率在95.20%～103.0%之间。结论该方法简便、准确、重复性好,适用于铁皮石斛中单糖和双糖的含量测定。     

不同种黄草石斛的HPLC指纹图谱研究

目的:采用HPLC-DAD-ELSD联用法对五种黄草石斛的指纹图谱进行对比研究。方法:采用DikmaC18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.5%冰乙酸水溶液梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1mL.min-1;DAD串联蒸发光散射检测器检测。结果:建立了五种黄草石斛的HPLC指纹图谱,并标定了8个指纹峰。相似度结果表明,各种石斛相似度较低,差别较大。结论:建立的指纹图谱方法稳定、可靠、重现性好,可直接了解石斛品种与化学成分变化的关系。     

石斛中石斛多糖的提取工艺研究

目的研究石斛中石斛多糖的提取工艺。方法采用正交试验法进行优选，紫外分光光度法测定多糖含量。结果粉碎度、提取次数和加水量因素对石斛中石斛多糖的提取有显著性影响。结论石斛中石斛多糖的最佳提取工艺为将药材粉碎至粗粉，加水20倍量，提取4次，每次8h。     

HPLC法测定复方麝香草酚滴耳液中两种组份的含量

目的建立同时测定复方麝香草酚滴耳液中麝香草酚和水杨酸含量的方法。方法采用高效液相色谱法。色谱柱为Shim-pack VP-ODS(4.6×150mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(60∶40∶0.3),检测波长220nm,柱温30℃。结果水杨酸和麝香草酚分别在0.12~0.28mg.mL-1和0.06~0.14 mg.mL-1范围内线性关系良好,平均回收率分别为101.2%(RSD=0.57%)和100.1%(RSD=0.64%)。结论该方法可用于复方麝香草酚滴耳液的质量控制。     

铁皮石斛制剂的高效液相色谱定性鉴别

目的研究铁皮石斛制剂的高效液相色谱(HPLC)定性鉴别方法。方法以柚皮素为对照,色谱柱为Zorbax SB C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为A(甲醇)-B(0.2%H3PO4水溶液)梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为280 nm。结果比较10批次铁皮石斛制剂的HPLC图,选择柚皮素及相对保留时间比为1.11～1.14处色谱峰为参照,可用于铁皮石斛制剂的HPLC鉴别。结论该方法操作简单、专属性强,为铁皮石斛制剂的质量控制提供了可靠的定性鉴别方法。     

高效液相色谱法测定铁皮石斛中的5种核苷类物质含量

目的 建立高效液相色谱法检测铁皮石斛中5种核苷类物质的分析方法。方法 采用月旭C₁₈ Ultimate AQ-C₁₈(4.6×250 mm, 5μm)色谱柱；流动相为20 mmol·L^-1乙酸铵水溶液(A)-甲醇(B),梯度洗脱；流速：1.0 mL·min^-1,检测波长：260 nm,柱温：30℃,进样体积：20μL。结果 5种核苷类物质在各自线性范围内线性良好，加样回收率为97.24%～100.10%之间，RSD小于2.12%。结论 该方法操作简便、稳定可靠，可用于铁皮石斛中核苷类物质的测定。     

气相色谱法同时测定无极膏中5个挥发性有效成分的含量

目的:建立同时测定无极膏中合成樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯、冰片和麝香草酚5种主要成分含量的分析方法。方法:采用气相色谱法,色谱柱为聚乙二醇(PEG)-20M毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm×0.25μm),检测器为FID检测器,进样口温度为250℃,检测器温度为250℃。升温程序为初始温度150℃,保持5 min;10℃.min-1升温至200℃,保持8 min;再以20℃.min-1升温至240℃,保持25 min,分流比为10∶1。结果:合成樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯、冰片和麝香草酚浓度分别在1.4934～7.4672 mg.mL-1(r=0.9999),0.9304～4.6520 mg.mL-1(r=0.9999),0.9075～4.5376 mg.mL-1(r=0.9999),0.1387～0.6936 mg.mL-1(r=0.9999),0.0716～0.3580 mg.mL-1(r=0.9999)质量浓度范围内线性关系良好。平均回收率(n=9)分别为98.8%,99.4%,98.6%,99.6%,99.7%。结论:该方法灵敏、快速简便、准确,可有效地控制无极膏的质量。     

HPLC测定不同采收期球花石斛中酚类成分的含量

目的:比较不同采收期球花石斛叶酚类成分(联苄、菲和芴酮类成分)的含量变化,为球花石斛的合理采收及质量评价提供科学依据。方法:采用高效液相色潜法对不同采收期球化石斛中联苄类化合物石斛酚(gigantol)和杓唇石斛素(moscatil-in),菲类化合物 moscatin 及芴酮类化合物 dendroflorin、dengibsin 和 denchrysan A 的含量进行测定。色谱条件:色谱柱为 Beck-man Coulter ODS(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈和0,1%二氟醋酸水溶液,梯度洗脱[32%A(0～15 min),32%A→65%A(15～45 min),65%A→32%A(45～55 min)],流速:1.0 mL·min~(-1);检测波长280 nm;柱温25℃。结果:石斛酚、杓唇石斛素、moscatin、dendroflorin、dengibsin 和 denchrysan A 在测定的范围内均表现出良好的线性(r>0.9992);方法的回收率在95.8%～102.4%之间(RSD<2.8%)。结论:通过对同一年12个月不同采收期的球花石斛中联苄、菲和芴酮类成分的含量测定,证明方法灵敏,准确可靠,重复性好。总酚类成分的含量在4,5月份和10,11月份相对高于其他月份。     

RP-HPLC法同时测定保济丸中厚朴酚、和厚朴酚、木香烃内酯及去氢木香内酯的含量

目的:建立RP-HPLC法同时测定保济丸中厚朴酚、和厚朴酚、木香烃内酯及去氢木香内酯的含量。方法:采用AgilentExtent-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(47∶53)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,柱温为35℃,检测波长为225 nm。结果:厚朴酚、和厚朴酚、木香烃内酯及去氢木香内酯的浓度分别在2.744～137.2μg.mL-1(r=0.9999),2.836～141.8μg.mL-1(r=0.9999),3.164～158.2μg.mL-1(r=0.9998)及3.148～157.4μg.mL-1(r=0.9999)范围内与峰面积线性关系良好;方法回收率(n=3)为96.3%～102.7%,RSD为0.2%～1.7%。结论:本方法简便、准确,重复性好,可用于同时测定保济丸中厚朴酚、和厚朴酚、木香烃内酯及去氢木香内酯的含量。     

HPLC法测定箭羽糖康片中山柰酚的含量

目的:建立测定箭羽糖康片中山柰酚含量的方法.方法:采用HPLC法,色谱柱Diamonsil-C18柱(250 mm × 4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸(33:67),流速0.8 mL·min-1,检测波长258 nm,柱温45℃.结果:山柰酚色谱峰与其他色谱峰分离良好,阴性样品无干扰.山柰酚在2.076～20.76μg·mL-1范围内呈良好线性关系(r=0.999 8),样品平均回收率为100.39%,RSD为0.52%.结论:本法简便、准确、重复性好,可用于箭羽糖康片中山柰酚的含量测定.     

铁皮石斛药材含量和检查项方法优化及不同产地品质的比较

目的 优化药典中甘露糖含量测定及甘露糖与葡萄糖面积比的色谱条件,同时比较浙江省不同产地铁皮石斛药材质量,为铁皮石斛适宜产地的选择提供依据。方法 以中国药典2010年版中铁皮石斛甘露糖含量测定方法为基础,对色谱条件进行优化,并用优化后的方法对不同产地铁皮石斛药材质量进行分析比较。结果 优化后的色谱条件：Diamonsil C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈(A)-0.02 mol·L^-1的乙酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~60 min,14%A;60~61 min,14%→25%A;61~69 min,25%;69~70 min,25%→14%A;70→80 min,14%A),流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为250?nm,柱温为30 ℃,进样量为10 μL。优化后的方法实现了PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)与甘露糖,PMP与样品杂质,盐酸氨基葡萄糖与样品杂质的基线分离。浙江省不同产地铁皮石斛药材在甘露糖含量及检查项比值上有一定的差异,其中富阳铁皮石斛的甘露糖含量最高,为40.8%,萧山铁皮石斛甘露糖与葡萄糖比值最高,为3.9。结论 该方法重复性好,结果准确可靠,可以用于铁皮石斛药材的质量控制。浙江省内不同产地的铁皮石斛质量存在一定的差异,其中建德最适宜人工栽培。     

石斛夜光丸中五味子的质量控制研究

目的:建立石斛夜光丸中五味子定性鉴别方法和掺伪检查方法，以控制石斛夜光丸中五味子的投料质量。方法:采用薄层色谱法对石斛夜光丸中五味子进行定性鉴别，以环己烷-乙酸乙酯(3∶2)为展开剂，在紫外光灯(254 nm)下检视。采用液相色谱-质谱联用法对安五酯素、五味子醇甲进行测定，计算安五脂素与五味子醇甲的含量比值，如比值>2.0,则存在以南五味子代替五味子投料的情况；色谱条件：采用Agilent Eclipse C₁₈(100 mm×2.1 mm, 1.8μm)色谱柱，柱温35℃,以乙腈(A)-10 mmol·L^-1乙酸铵溶液(B)为流动相，梯度洗脱，流速0.25 mL·min^-1,进样量1μL。结果:对收集的19家企业的91批石斛夜光丸进行了检测，其中1个企业的3个批次样品存在以南五味子代替五味子投料的情况，薄层色谱鉴别方法和液相色谱-质谱联用掺伪检查方法的检测结果一致。结论:本方法准确、可靠，可作为石斛夜光丸中五味子质量控制的检测方法。