护肾固精方对大鼠系膜细胞增殖周期的影响

目的探讨中药复方护肾固精方对大鼠系膜细胞(MC)生物学行为的影响。方法采用体外培养大鼠MC和血清药理学方法,分为护肾固精方血清组、脂多糖(LPS)病理组及正常对照组,将不同浓度的作用物加入MC共同培养,培养后的MC制成单细胞悬液,经流式细胞仪检测后,计算出细胞周期中的G0/G1期、S期、G2/M期各时期的百分比及S期抑制百分比、细胞PI。结果不同浓度的作用物对MC增殖周期有不同影响。LPS血清能明显刺激MC增殖,表现为G0/G1期细胞百分比减以及S期细胞增加;细胞的S期抑制百分比明显下降,而细胞的PI则显著增高;中、高浓度的中药血清明显抑制MC增殖,表现为G0/G1期细胞百分比增加及S期细胞减以,细胞的S期抑制百分比明显增加,而细胞的PI则显著降低。并且使大量MC阻滞在G0/G1期,能诱导MC发生凋亡。结论护肾固精方治疗系膜增殖性肾炎等肾小球疾病的作用机理之一,可能与抑制MC增殖和促其细胞凋亡有关。     

宁肾颗粒对LPS诱导大鼠系膜细胞增殖及凋亡的影响

目的：本研究旨在探讨宁肾颗粒对脂多糖（LPS）诱导大鼠系膜细胞（MCs）增殖及凋亡的影响。方法：采用MTT法、细胞流式技术、Western bolt法检测不同剂量宁肾颗粒中药血清对LPS诱导大鼠系膜细胞增殖、凋亡及血小板源生长因子-BB（PDGF-BB）蛋白表达的作用。结果：含药血清能抑制LPS诱导大鼠MCs增殖、促进MCs凋亡,下调PDGF-BB蛋白的过度表达。结论：宁肾颗粒可抑制LPS诱导的MCs异常增殖、促进MCs凋亡,其分子机制可能与抑制PDGF-BB蛋白的过度表达有关。     

虫草肾茶胶囊对肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：研究虫草肾茶胶囊对体外高糖环境下系膜细胞（HMC）增殖的影响,探讨其在糖尿病肾病（DN）防治中的意义。方法：将常规培养的人肾小球系膜细胞分为正常对照组、高糖组、虫草肾茶胶囊高、中、低剂量组及福辛普利组,分别于相应处理后24h,48h和72h收集细胞,用4-甲偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖。结果：高糖有刺激HMC增殖的效应,48h上增殖最明显,而在72h时呈下降趋势。虫草肾茶胶囊及福辛普利两种药物血清对高糖刺激下的系膜细胞增殖有明显的抑制作用,其中虫草肾茶胶囊血清对HMC的抑制作用优于福辛普利血清。且随着虫草肾茶胶囊浓度、作用时间的增加作用更明显,呈一定的时间、剂量依赖性关系。结论：高糖可促进HMC增殖,虫草肾茶胶囊能明显抑制高糖条件下HMC增殖,从而发挥预防肾小球纤维化及硬化的发生、发展,进而延缓DN的进展。     

保肾冲剂血清对人系膜细胞增殖及分泌IL-1β的影响

目的 探讨保肾冲剂含药血清对人膜细胞（MC）增及分泌炎性介质的作用。方法 应用血清药理学方法，观察不同浓度保肾冲剂含药血清对体外培养的人肾小球系膜细胞增殖及分泌IL－1β水平的影响。结果 3种浓度含药血清均能在一定程度上对抗LPS诱导的MC增殖及IL－1β蛋白质产量的增加，这种对抗作用呈现出一定的剂量依赖性。结论 保肾冲剂血清能抑制MC增殖并能干预活化MC分泌细胞因子。     

紫草素对人卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究紫草素对人卵巢癌SKOV3细胞的影响,并对其机制进行初步研究。方法:以不同浓度的紫草素干预人卵巢癌SKOV3细胞,采用MTT法观察紫草素对肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术检测经紫草素干预48 h后SKOV3细胞的凋亡情况和细胞周期,并以Western blot法测定Bax及Bcl-2蛋白表达。结果:紫草素(0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0μg/ml)经过24 h,48 h及72 h对肿瘤细胞增殖的抑制率分别为6.90%,12.11%,20.82%,30.20%,41.69%,56.81%;7.28%,12.16%,20.18%,40.81%,51.23%,70.51%;10.50%,15.90%,28.16%,46.86%,59.01%,78.58%,呈剂量依赖性和时间依赖性的关系。流式细胞术检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,其凋亡率分别为20.58%,35.10%及51.26%,G0/G1期细胞的比例分别62.10%,63.91%及83.86%。Western blotting检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,Bcl-2蛋白水平表达随紫草素浓度递增减少,而Bax蛋白水平随紫草素浓度递增而递增。结论:紫草素可抑制人卵巢癌细胞SKOV-3的体外增殖并诱导其凋亡,其机制可能为上调Bax表达和下调Bcl-2表达有关。     

肾康注射液对肾小球系膜细胞增殖的影响

为了探讨中药肾康注射液（ＳＫ）对肾小球系膜细胞增殖的影响,笔者采用人的肾小球系膜细胞进行体外培养,用氚标记的胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法观察其增殖情况。结果：不同肾康注射液剂量组＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率无明显低于对照组,提示肾康注射液可明显抑制人肾小球系膜细胞增殖。     

紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的研究紫草素(Shikonin)对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养Ishikawa细胞,设空白对照组、紫草素0.3μg/m L组、紫草素0.5μg/m L组、紫草素0.7μg/m L组和顺铂40μg/m L组,每组设10个复孔。各组给予相应干预48 h后,采用MTT比色法测定细胞增殖抑制率,Flow Cytometry法检测细胞周期和细胞凋亡状况并计算细胞凋亡率,RT-PCR法检测细胞中bcl-2 mRNA、bax mRNA表达情况并计算bax/bcl-2比值,Western blotting法检测细胞中Caspase-3蛋白表达情况并进行半定量分析。结果与空白对照组相比,紫草素0.5μg/m L组、紫草素0.7μg/m L组和顺铂40μg/m L组Ishikawa细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、bax mRNA表达量及bax/bcl-2比值、Caspase-3蛋白表达量均显著升高(P均0.05),而G2/M期细胞比例及bcl-2 mRNA表达量均显著降低(P均0.05);且紫草素0.7μg/m L组Ishikawa细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、bax/bcl-2比值和Caspase-3蛋白表达量均明显高于顺铂40μg/m L组(P均0.05),bcl-2 mRNA表达量明显低于顺铂40μg/m L组(P均0.05)。结论紫草素具有抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖并促进其凋亡的作用,机制可能与紫草素调节凋亡相关基因和蛋白表达有关。     

肾康注射液对脂多糖诱导肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：探讨中药肾康注射液（SK）对脂多糖（LPS）诱导肾小球系膜细胞增殖的影响。方法：采用人肾小球系膜细胞进行体外培养,用氚标记的胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR)掺入法观察其增殖情况。结果：不同肾康注射液剂量组^3H-TdR掺入率均明显低于对照组。结论：肾康注射液可明显抑制脂多糖诱导的人肾小球系膜细胞增殖。     

保肾片诱导人肾脏系膜细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨对慢性肾衰治疗有效的中药复方保肾片对人肾脏系膜细胞是否具有诱导凋亡作用。方法 :以健康志愿者服用保肾片 ,取含药人血清加入系膜细胞体外培养体系中 ,应用倒置显微镜、光镜、透射电镜及流式细胞仪观察研究保肾片对系膜细胞的诱导凋亡现象。结果 :含中药保肾片的血清组 ,与正常人血清对照组相比 ,能诱导系膜细胞发生凋亡。结论 :保肾片延缓慢性肾衰进展的作用机理之一与诱导系膜细胞发生凋亡有关。     

糖肾康含药血清对高糖诱导小鼠肾小球系膜细胞增殖及周期的影响

目的:观察糖肾康含药血清对高糖诱导小鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖及周期的影响,阐明作用机制。方法:30只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖肾康4.6g/kg组、糖肾康13.8g/kg组、糖肾康41.4g/kg组和罗格列酮0.36mg/kg组5组,分别灌胃等体积生理盐水、糖肾康生药4.6g/kg、13.8g/kg、41.4g/kg和罗格列酮0.36mg/kg,1次/d,连续灌胃7d后腹主动脉取血制备含药血清;小鼠肾小球系膜细胞在高糖(30mmol/L葡萄糖)诱导下经含药血清治疗,分为正常血清组、高糖对照组、10%罗格列酮0.36mg/kg含药血清组、10%糖肾康4.6g/kg、13.8g/kg、41.4g/kg含药血清组,治疗24h、48h、72h和96h后,采用MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,划痕标记荧光染料示踪技术检测细胞间隙连接通讯功能(GJIC),RTq-PCR技术检测Cx43、DAG、IP3和PKC的mRNA的表达。结果:(1)与高糖对照组比较,10%糖肾康13.8g/kg、41.4g/kg含药血清组A值在24h、48h、72h和96h各时间段均明显下降,且糖肾康各剂量含药血清组A值从72h开始下降程度优于10%罗格列酮0.36mg/kg含药血清组。(2)与高糖对照组比较,含药血清治疗到72h时,G0/G1期细胞百分比升高,S期百分比降低,细胞增殖指数明显降低;与10%罗格列酮0.36mg/kg含药血清组比较,10%糖肾康41.4g/kg含药血清组效果更优。(3)与高糖对照组比较,10%罗格列酮0.36mg/kg含药血清组和10%糖肾康13.8g/kg、41.4g/kg含药血清组均能改善肾小球系膜细胞的细胞间隙连接通讯功能,10%糖肾康41.4g/kg含药血清组最优。(4)与高糖对照组比较,10%罗格列酮0.36mg/kg含药血清组和10%糖肾康13.8g/kg、41.4g/kg含药血清均能降低DAG、IP3、PKC的mRNA,升高CX43mRNA,10%糖肾康41.4g/kg含药血清组最优。结论:糖肾康能够抑制高糖环境下肾小球系膜细胞增生,调节细胞周期,改善细胞间隙连接通讯功能功能,促进增殖细胞凋亡,治疗早期糖尿病肾病,其可能机制是糖肾康阻断了DAG/PKC信号通路,增加了Cx43表达,改善了细胞间隙连接通讯功能。     

防己茯苓汤加减对TNF-α诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及PAI-1含量的影响

目的观察防己茯苓汤加减方是否具有干预肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导后肾小球系膜细胞增殖的作用及对纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的影响。从而为临床运用此方治疗慢性肾脏病提供实验依据。方法采用大鼠肾小球系膜细胞培养进行体外研究,用TNF-α刺激系膜细胞增殖,再加入不同浓度防己茯苓汤加减方提取液对细胞进行干预,用MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,用ELISA法测定细胞培养液中肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的含量。结果加入防己茯苓汤加减方提取液后,系膜细胞的增殖程度受到显著抑制(P<0.05),流式细胞仪DNA图示S期细胞数显著减少(P<0.05)。细胞培养液中PAI-1的表达受到抑制(P<0.05)。结论防己茯苓汤加减方对TNF-α诱导后肾小球系膜细胞的增殖具有抑制作用,并可影响肾小球系膜细胞PAI-1的表达,进而调整细胞外基质(ECM)的合成与降解。     

葛根素对大鼠肾小球系膜细胞体外增殖抑制作用及其机制

 目的 探讨不同浓度葛根素对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响及其作用机制。方法 采用体外细胞培养技术,采用MTT检测不同浓度葛根素对大鼠肾小球系膜细胞增殖的量效和时效关系。分别采用RT-PCR和ELISA,检测不同浓度葛根素作用大鼠肾小球系膜细胞后,结缔组织生长因子mRNA和蛋白表达水平的变化。结果 葛根素可抑制大鼠GMCs增殖（P<0.05）,该增殖抑制作用呈浓度依赖模式。不同浓度葛根素作用于大鼠GMCs后,结缔组织生长因子mRNA和蛋白表达水平均随药物浓度增加而逐渐减弱（P<0.05）。结论 葛根素对大鼠肾小球系膜细胞增殖有明显的抑制作用,其作用机制可能与下调结缔组织生长因子基因转录和表达水平有关。     

滋肾通络方含药血清对高糖诱导的大鼠系膜细胞增殖的影响

目的：从细胞水平观察滋肾通络方含药血清对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(Glomerular Mesangial Cells,GMCs)增殖的影响,探讨其在糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)防治中的可能机制。方法：体外培养培养大鼠肾小球系膜细胞株,利用噻唑蓝(3-［4,5-dimethylthylthiazol-2-yl］-2,5 diphenyltetrazolium broide,MTT)比色法动态观察各组含药血清作用下各组GMC不同时间点的增殖情况。结果：与正常组相比,高糖+LPS能明显刺激体外培养的GMC增殖,而与模型组相比,滋肾通络方含药血清能明显抑制GMC增殖。结论：高糖+LPS可促进GMC增殖,滋肾通络方含药血清能明显抑制高糖+LPS条件下GMC增殖,从而发挥预防和治疗肾小球硬化,进而延缓DN的进展。     

特女贞苷对高糖刺激的肾小球系膜细胞凋亡的保护作用

目的: 研究特女贞苷对高糖刺激的小鼠肾小球系膜细胞凋亡的保护作用。方法: 体外培养小鼠肾小球系膜细胞,采用MTT法观察特女贞苷对细胞活力的影响(n=6),选择安全浓度。高糖刺激肾小球系膜细胞模拟糖尿病肾病模型,以100,50,25 μmol·L^-1特女贞苷对肾小球系膜细胞作用48 h,采用流式细胞术检测细胞凋亡率(n=10),以Western blot法进一步考察特女贞苷对肾小球系膜细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase 3),B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响(n=3)。结果: 高糖刺激肾小球系膜细胞凋亡率明显增加,蛋白水平caspase 3表达上调,Bcl-2/Bax明显下降(P<0.05)。100,50,25 μmol·L^-1特女贞苷均能显著抑制高糖刺激的肾小球系膜细胞凋亡和下调cleaved-caspase 3蛋白表达,明显上调Bcl-2/Bax(P<0.01,P<0.05),作用呈浓度依赖。结论: 特女贞苷对高糖刺激的肾小球系膜细胞凋亡具有明显的保护作用,这可能与其上调Bcl-2/Bax和抑制caspase 3激活有关。     

川芎嗪对人胎肾小球系膜细胞增殖的影响及其机理探讨

在人胎肾小球系膜细胞培养体系中加入川芎嗪后能抑制ＭＣ生长数量。川芎嗪０．６ｍｍｏｌ，１．２ｍｍｏｌ加入ＭＣ培养系６天后，ＭＣ数量分别为：３７５８０±３４７５，２７３５０±３４１８，明显低于对照组７１８５０±５１０８（Ｐ＜０．０５）；ＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ摄取量对照组为３５７５±３０６，加入川芎嗪０．６ｍｍｏｌ，１．２ｍｍｏｌ后分别为１０１７±２０，５８３±２７１（Ｐ＜０．０１）；加入川芎嗪１ｍｍｏｌ于     

葛根素对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：探讨葛根素对大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）增殖的影响。方法：体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分空白对照组和葛根素组。葛根素组采用MTT法,观察12h、24h、48h和72h后GMcs的增殖水平。结果：随着葛根素浓度的提高及作用时间的延长,GMCs细胞的生长抑制率呈现上升趋势。结论：葛根素能抑制GMCs增殖,并与药物的浓度和作用时间呈明显正相关。     

尿血Ⅰ号方对SD大鼠肾小球系膜细胞增殖影响的实验研究

目的：观察尿血Ⅰ号方对体外培养的系膜细胞（Mesangial cell,MsC）增殖的抑制作用。方法：用SD大鼠30只,随机分成正常组、雷公藤多甙片组、尿血Ⅰ号方高、中、低剂量组,提取动物血清;采用MTT法测定OD值,并求出抑制率（%）,观察各组在48 h、72 h对MsC增殖的影响。结果：作用48 h后,雷公藤多甙片组、尿血Ⅰ号方高、中、低剂量组与正常血清组比较有显著差异（P＆lt;0.05~0.01）;雷公藤多甙片组与尿血Ⅰ号方高剂量组比较无显著差异（P＆gt;0.05）;尿血Ⅰ号方高剂量组较中、低剂量组有显著差异（P＆lt;0.05）。作用72 h后,雷公藤多甙片组、尿血Ⅰ号方高、中、低剂量组与正常血清组比较有显著差异（P＆lt;0.01）,但与48 h比较对细胞生长的抑制作用有减弱的趋势。结论：尿血Ⅰ号方能够抑制MsC的增殖。     

肾衰宁对体外培养的肾小球系膜细胞增殖及其分泌细胞因子白细胞介素-1的影响

目的：探讨肾衰宁对系膜细胞增殖及其分泌细胞因子白细胞介素－１（ＩＬ １）的影响。方法：采用血清药理学方法，提取动物的含药血清作用于体外培养的人系膜细胞（ＨＭＣ）体系，观察具有益气固本、化瘀泻浊作用的中药肾衰宁对ＨＭＣ增殖及其分泌细胞因子ＩＬ １的影响。结果：肾衰宁具有抑制ＨＭＣ增殖及其分泌细胞因子ＩＬ １的作用，该抑制作用具有一定的量效关系。结论：ＨＭＣ是肾衰宁发挥治疗作用的重要靶细胞，这可能是该方防治慢性肾功能衰竭的机制之一。     

肾衰宁对体外培养的肾小球系膜细胞增殖及其分泌细胞因 …

目的：探讨肾衰宁对系膜细胞增主其分泌细胞因子白细胞介素－１（ＩＬ－１）的影响。方法：采用血清药理学方法,提取动物的含药血清作用于体外培养的人细胞（ＨＭＣ）体系,观察具有益气固本、化瘀泻浊作用的中药肾衰宁对ＨＭＣ增殖及其分泌细胞因子ＩＬ－２的影响。结果：肾衰宁具有抑制ＨＭＣ增殖及其分泌细胞因子ＩＬ－１的作用,该抑制作用具有一定的量效关系。结论：ＨＭＣ是肾衰宁发挥治疗作用的重要靶细胞,这可能是该方防治