人乙型肝炎病毒的三种最近描述的动物病毒模型

近年来发现的与人乙型肝炎病毒(HBV)在种系发生上有关,并属同科的动物病毒已有三种:土拨鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)及鸭乙型肝炎病毒(DHBV)。对HBV复制及其基因表现度的研究     

鸭乙肝病毒感染的中国鸭和人工感染的日本雏鸭的地衣红染色和病毒DNA

乙型肝炎病毒(HBV)属于一族具有共同超微结构和分子生物学特征的DNA病毒。这类病毒还包括土拨鼠肝炎病毒(WHV)、花金鼠(Ground Squirrel)肝炎病毒(GSHV)和鸭乙型肝炎病毒(DHBV)。这种双层病毒含有带部分双链的环状DNA(约3,000硷基对)和内源性DNA多聚酶。根据这些特点,可将其与已知的DNA病毒相区别。这种病毒主要感染肝脏,其中WHV感染引起的肝病还包括肝细胞癌。HBV族有两大抗原系统即表面抗原(HB_sAg)和核心抗原(HB_cAg)。已发现在WHV、GSHV和HBV之间有交叉抗原性,     

人类HDV由猩猩至土拨鼠感染的实验研究

应用感染D型肝炎病毒（HDV）的猩猩和人血清分别接种上拨鼠（Woodchuck）肝炎病毒（WHV）感染的和未感染的动物。所获结果显示，来自于猩猩和来自人的HDV，均能使携带有WHV的10只上拨鼠全部感染，而非携带有WHV的土拨鼠则不能感染，证明人类的HDV不仅可以由人至猩猩的感染，而且还可以由猩猩至上拨鼠的感染;人至猩猩的感染并未改变HDV从HBsAg为外壳复制，而猩猩至上拨鼠的感染则以WHV的表面抗原（WHAg）为外壳，在动物体内高效复制，由于感染WHV的土拨鼠肝纤维化期短且能在2～3年内形成肝细胞癌。这为研究HBV／HDV感染的慢性化，肝纤维化和肝细胞癌的发生，发展提供了难得的极有价值的材料。     

HBV动物模型研究进展

HBV感染动物模型是研究HBV致病机制、筛选新型有效抗HBV药物和治疗方法的重要工具,然而HBV感染具有高度组织特异性以及种属特异性,这给HBV感染动物模型的建立带来了困难。近年来,随着分子生物学、实验动物学、病毒学及免疫学等相关学科技术的进步,HBV感染或复制动物模型取得了明显进展。目前应用于HBV(包括与HBV具有相似特性的动物肝炎病毒)研究的动物模型主要包括黑猩猩、树鼩、土拨鼠及鸭HBV感染模型,HBV转基因小鼠、高压水动力注射介导的小鼠HBV复制模型和重组腺相关病毒载体介导的小鼠HBV复制模型,以及人源化人-鼠嵌合肝脏HBV感染模型,此外,钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白转基因小鼠感染模型是近年的研究热点。本文就上述HBV动物模型的研究进展进行综述。     

HBV感染西伯利亚旱獭实验观察

<正> 国内外的研究已证实旱獭可自然感染土拨鼠肝炎病毒(WHV),并发生急,慢性肝炎,甚至出现肝细胞癌。西伯利亚旱獭(Marmota Sibir lca)亦已证实有WHV的自然感染。为了研究旱獭对人的乙肝病毒(HBV)感染情况,为建立HBV的动物模型提供依据,我们于1985年春,以人HBsAg强阳性携带者血清对WHV阴性的西伯利亚旱獭进行皮下和静脉注射,用血清学和病理组织学方法来观察其感染情况。     

腺相关病毒Rep78蛋白抑制乙型肝炎病毒复制的体外研究

目的 研究腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)Rep78蛋白对乙型肝炎病毒(HBV)复制的抑制作用及机制.方法 将土拨鼠肝炎病毒(WHV)全基因组DNA从质粒中酶切回收,线状DNA重新连接呈环状.用脂质体Fugene 6体外转染至HepG2细胞,同时共同转染含有Rep78的质粒AAVdl52-91.5 d后收获细胞DNA,Southern blot检测WHV DNA复制.以含有HBV全长的质粒为模板,PCR法分别扩增出HBV-S、C和X基因全长.以凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测Rep78与HBV-S、C和X的结合.结果 Southern blot结果表明,AAV-Rep78可以明显抑制WHV病毒在HepG2细胞中的复制,并呈剂量依赖关系.EMSA结果显示,Rep78蛋白在体外能够与HBV-S、C和X的DNA结合,其中与HBV-C的结合最强而且有剂量依赖关系.此外,这种Rep78蛋白与HBV-C DNA结合可以被特异性的Rep78抗体阻滞,形成超结合带.结论 AAV-Rep78可以抑制HBV DNA的复制,其机制可能在于Rep78蛋白结合并抑制了HBV-C基因.     

X蛋白在乙型肝炎病毒生命周期中作用的研究

X基因是一种仅存在于嗜肝乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)的基因,至今未在其它逆转录病毒和生物细胞中发现它。由于它的基因结构的特殊性及高度的保守性,提示其在HBV的生物学上具有重要的生物学意义,越来越多的证据表明,它是引起肝癌的直接病因,还广泛参与宿主细胞的基因表达、反式激活和细胞信号转导过程。 一、基因在HBV感染宿主细胞过程中具有不可或缺的作用 Chen等以土拨鼠HBV(WHV)质粒感染上拨鼠为模型,将质粒的X基因起始密码子ATG突变为TTG,去除X基蛋白表达,即对X基因表达的C末端突变,形成终止密码,使X蛋白C末端分别截除52、31、16或3个氨基酸,与野生型感染质粒进行对照,结果发现,除在C末端截除3个氨基酸的突变质粒外,其它各种突变均不能有效感染土拨鼠。Zoulim等应用不同的感染性质粒,独立进行了相似的实验,他们将WHV的     

microRNA在HBV感染和致病中的作用研究进展

[摘要]?微小RNA （microRNA, miRNA）在宿主-病毒相互作用中起关键调节作用，参与HBV感染、复制和HBV相关疾病的调节。细胞miRNA可以通过直接结合HBV转录物或通过靶向与HBV生命周期相关的细胞因子间接调节HBV转录和复制。反过来，HBV感染也可以影响宿主细胞内的miRNA水平。HBV和miRNA之间的相互作用在HBV复制和HBV相关疾病的发病机制中发挥重要作用。本文对miRNA与HBV的相互关系进行综述，为进一步探讨HBV感染致病的分子机制和开发新的抗HBV治疗策略提供参考。     

X基因——抗乙型肝炎病毒治疗的新靶点

X基因是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的四个基因之一.最近的研究表明,他不仅参与HBV感染宿主过程,还影响HBV病毒基因的复制和表达,直接或/和间接通过宿主的免疫反应或其他作用,导致HBV致病的系列病理过程,而且在HBV生命周期中具有非常重要的作用.降低或去除X基因转录,或者封闭X蛋白某些功能以及使X基因表达沉默均能显著抑制病毒复制水平.本文通过对X基因在HBV复制和基因表达中的作用以及针对X基因的干预对HBV复制和基因表达的影响的最新研究成果进行综述,提出X基因是乙肝抗病毒治疗的一个新靶点.     

乙肝病毒基因定量分析的临床意义及应用价值

近年来乙肝病毒(HBV)基因定量分析的价值受到越来越多研究者的重视。以前由于过分强调了HBV感染过强的细胞免疫应答介导肝细胞损伤,因而忽视了对病毒复制水平与致病性之间因果关系的研究。目前普遍认为,尽管HBV不直接破坏寄生细胞,但病毒的活跃复制是启动或激发肝脏组织炎症反应的因素。这表明确定感染者体内HBV复制状态,即从HBV基因定量角度作病情分析是十分有意义的。事实上真正引起人们关注HBV基因定量分析价值的重要原因是抗病毒药物与HBV基因水平之间有非常密切的关系。HBV基因定量分析还在转基因动物、基因治疗、蛋白疫苗和核酸疫苗、     

丙型肝炎病毒非结构蛋白与宿主细胞蛋白相互作用的研究进展

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是继乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)之后另一个导致慢性肝炎、肝硬化和肝癌的常见原因.目前HCV致病及致癌机制仍不清楚,也缺乏针对HCV有效的治疗方法及疫苗预防.肝炎病毒蛋白与受染细胞蛋白之间相互作用是肝炎发病机制研究的热点内容.近年研究...     

MMP2/MMP9介导的CD100剪切在促进肝内HBV特异性 CD8 T淋巴细胞应答和介导病毒的肝内清除中发挥关键作用

正HBV感染是危害人类健康的最严重的世界性健康问题之一,虽然预防性疫苗的普遍使用极大降低了新发感染的发生率,但是已经感染的患者进展为肝硬化或肝癌的发生率和病死率依然居高不下,并且目前还无有效的干预手段。现有的抗HBV治疗策略可有效控制病毒复制,但尚难以实现病毒的清除和疾病的治愈。病毒特异性CD8~+T淋巴细胞在清除HBV感染肝细胞过程中发挥关键作用,但迄今对HBV特异性CD8~+T淋巴细胞应答的启动机制仍知之甚少。     

用分子杂交方法研究鸭乙肝病毒感染和鸭肝病

嗜肝 DNA 病毒感染同肝炎、肝硬化和肝癌的相关关系是肝病学中的重大课题。除了 HBV 感染同人类肝病和肝癌的发生有关之外,一些动物嗜肝 DNA 病毒也有类似性。尽管 WHV、GSHV 和 DHBV 有类似于 HBV的形态、结构以及都能造成长期持续性感染,但 WHV 感染的土拔鼠和 GSHV 感染的金花鼠,两者的肝病病理学改变有显著差     

鸭乙型肝炎病毒性肝炎模型的研究

由于受HBV宿主范围(人和黑猩猩)的限制及缺乏HBV体外培养系统,乙型病毒性肝炎的研究受到了障碍。因此,人们开始寻找类似于HBV的其它动物肝炎病毒以用于研究。迄今,已发现该类家族的病毒有:土拔鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)、用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)。昆类病毒均能引起慢性感染,属于嗜肝DNA病毒(hepadnavirus)科。由于宿主动物易于获得,特别是感染DHBV鸭的动物模型,近年来已越来越多地被用于探讨HBV发病机理及筛选抗肝炎病毒药物的研究。作者根据可能影响建立DHBV鸭肝炎模型的各种因素作一综述。     

慢性乙型肝炎的抗病毒治疗

到目前为止,慢性乙型病毒性肝炎(慢乙肝)仍缺乏较理想的抗病毒药物。对慢性乙型肝炎病毒(HBV)的分子生物学及致病机理的深入研究表明,共价闭合环状DNA(cccDNA)在慢性HBV感染的过程中起关键作用,而慢性感染是病毒、肝细胞和机体免疫系统之间处于相互作用的动态过程。清除病毒的同时减轻或阻止肝损害,是减缓或防止慢乙肝病情发展的关键措施。目前,应用较多的抗病毒药物主要为干扰素和核苷类药物。1　干扰素(IFN)IFN的作用机制在于阻断HBV复制,但不能进入宿主细胞直接杀灭病毒,而是与细胞膜接触后使之产生一种抗病毒蛋白,从而发挥抗病…     

乙型肝炎的“治愈”之路

乙型肝炎流行范围广,是肝硬化、肝衰竭和肝癌的重要病因,严重威胁人类健康.因乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)特殊的复制过程中共价闭合环状DNA(covalent closed circular DNA,ccc DNA)的稳态调节和病毒特异性的免疫耐受,造成HBV慢性持续性感染,难以清除.现有的治疗大多只能抑制病毒复制,不能清除乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBs Ag)和HBV c c c D N A.乙型肝炎的"治愈"治疗是科学家一直努力的方向,其标志是HBs Ag的消失和肝细胞内HBV ccc DNA的清除.近年来,随着对HBV致病机制的深入研究和基因编辑技术的发展,乙型肝炎的"治愈"治疗已曙光初现.本文就乙型肝炎的"治愈"研究方面的进展进行简要综述.     

HBV小鼠动物模型的研发进展

HBV是导致肝硬化和肝细胞癌的主要原因。目前全球约有2.4亿HBV感染者,其中每年约100万人死于HBV所引起的肝脏疾病,是全球主要的公共卫生问题之一。然而HBV是宿主种属特异性极强的嗜肝病毒,只能在几种特定的动物中感染复制。因此,研究支持HBV感染的动物模型,对HBV感染和致病机制的认识,以及有效治疗方案的快速研发具有重要的作用。当前,HBV感染模型的不断升级有力推动了HBV的病毒学研究,特别是HBV小鼠模型的不断开发为HBV研究提供了便捷的研究工具,本文将对这一领域的研究作一综述。     

拉米夫定抗HBV临床应用研究进展

拉米夫定(3TC)是新型核甘类药物,能有效抑制HBV复制,改善肝功能和肝组织学,是高效、直接的抗HBV感染新药。现就拉米夫定抗HBV感染的临床应用研究进展作一简述。1 HBV携带者由于HBV携带者缺乏对HBV感染肝细胞的免疫杀伤作用,难以清除病毒,亦不能减轻病情,治疗意义不     

乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA

HBV共价闭合环状脱氧核糖核酸（cccDNA）是嗜肝 DNA病毒基因组的复制中间体,是嗜肝 DNA 病毒部分基因的mRNA和前基因组 RNA的合成模板,在 HBV感染初期即能检测到,且长期存在于细胞核中。其在 HBV 复制过程中起着关键的作用,它的长期存在也是乙型病毒性肝炎慢性化的主要原因之一。HBV cccDNA肝细胞中持续感染及抗病毒治疗复发之间的关系受到广泛的关注与肯定,现就 HBV cccDNA 常用检测方法及其临床意义作一综述。     

HBV cccDNA的体外细胞模型和实验小鼠模型

HBV慢性感染仍然是世界性公共健康问题。现有抗病毒药物能够有效抑制HBV复制,却无法使之完全治愈。共价闭合环状DNA(cccDNA)是HBV复制的原始模版,具有显著的稳定性,是HBV持续感染的分子基础,也是实现感染治愈的关键靶点。由于较低的细胞内拷贝数,以及缺乏灵敏可靠的检测方法,限制了对HBV cccDNA生物合成、代谢和调控等方面的相关研究。建立合适的cccDNA研究模型有助于了解这些生物学过程。综述了近年来HBV cccDNA细胞培养模型和实验小鼠模型等方面的主要进展,以期为进一步研究HBV病毒学和抗病毒药物研发提供帮助。