抗CD3McAb和rhGM—CSF对再障患者CFU—GM生长的体外影响的研究

用ＣＦＵ－ＧＭ单固体琼脂培养技术研究了抗ＣＤ３单克隆抗体（ＭｃＡｂ）和重组人集落刺激因子对再生障碍性贫血（ＡＡ）患者骨髓ＣＦＵ－ＧＭ体外生长进行研究。结果表明：１０μｇ／ｍｌ的抗ＣＤ３ＭｃＡｂ和０．１μｇ／ｍｌ的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ均可增加ＡＡ患者ＣＦＵ－ＧＭ的集落数,抗ＣＤ３ＭｃＡｂ作用较ｒｈＧＭ＝ＣＳＦ显著,且不同患者对抗ＣＤ３ＭｃＡｂ和ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的敏感性不同,对ＡＡ患者,临床治疗时,应先行     

ATG和抗CD_3McAb对再障患者CFU－GM生长的体外影响研究

用ＣＦＵ－ＧＭ半固体琼脂培养技术研究了抗人胸腺细胞球蛋白（ＡＴＧ）和抗ＣＤ３单克隆抗体（ＭｃＡｂ）对１８例再生障碍性贫血（ＡＡ）患者骨髓ＣＦＵ－ＧＭ体外生长的影响。结果表明，１．加入１６．７μｇ／ｍｌＡＴＧ或１：５０抗ＣＤ３ＭｃＡｂ，体外均可增加ＡＡ患者骨髓ＣＦＵ－ＧＭ的集落数（Ｐ＜０．０５），两者的作用无显著差异（Ｐ＞０．０５）。２．ＡＴＧ和抗ＣＤ３ＭｃＡｂ对ＡＡ患者干细胞缺乏型和免疫介导型的作用无显著差异（Ｐ＞０．０５）。用此项技术对ＡＡ患者作药敏试验，并加测外周血ＣＤ８＋、ＤＲ＋细胞比值，可作为选择免疫抑制疗法的参考。     

Journal of Tongji Medical University

ＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｏｎｇｊｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｏｎｇｊｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ￥／／ＥＤＩＴＯＲＩＮＣＨＩＥＦ：ＱＩＵＦａ－ｚｕ（裘法祖）ＡＳＳＯＣＩＡＴＥＣＨＩＥＦＥＤＩＴＯＲＳ：ＷＵＺｈｏｎｇ－ｂ...     

ATG和抗CD3McAb对再障患者CFU—GM生长的体外影响研究

用ＣＦＵ－ＧＭ半固体琼脂培养技术研究了抗人胸腺细胞球蛋白和抗ＣＤ３单克隆抗体对１８例再生障碍性贫血患者骨髓ＣＦＵ－ＧＭ体外生长的影响。结果表明，１．加入１６．７μｇ／ｍｌＡＴＧ或１：５０抗ＣＤ３ＭｃＡｂ，体外均可增加ＡＡ患者骨髓ＣＦＵ－ＧＭ的集落数，再者的作用无显著差异。     

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ＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｏｎｇｊｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＥＤＩＴＯＲＩＮＣＨＩＥＦ：ＱＩＵＦａ－ｚｕ（裘法祖）ＡＳＳＯＣＩＡＴＥＣＨＩＥＦＥＤＩＴＯＲＳ：ＷＵＺｈｏｎｇ－ｂｉ（武忠弼）ＬＩＧｕｏ－ｃｈｅｎｇ（李国成）ＥＤＩＴＯＲＩＡＬＢＯＡＲ...     

抗CD_3McAb和rhGM-CSF对再障患者CFU-GM生长的体外影响的研究

用ＣＦＵＧＭ半固体琼脂培养技术研究了抗ＣＤ３单克隆抗体（ＭｃＡｂ）和重组人集落刺激因子（ｒｈＧＭＣＳＦ）对再生障碍性贫血（ＡＡ）患者骨髓ＣＦＵＧＭ体外生长进行研究。结果表明：１０μｇ／ｍｌ的抗ＣＤ３ＭｃＡｂ和０．１μｇ／ｍｌ的ｒｈＧＭＣＳＦ均可增加ＡＡ患者ＣＦＵＧＭ的集落数（Ｐ＜０．０１）,抗ＣＤ３ＭｃＡｂ作用较ｒｈＧＭＣＳＦ显著（Ｐ＜０．０１）,且不同患者对抗ＣＤ３ＭｃＡｂ和ｒｈＧＭＣＳＦ的敏感性不同。对ＡＡ患者,临床治疗时,应先行药敏试验,再根据其结果制定治疗方案     

抗CD3McAb诱导外周血单个核细胞活化增殖的观察

目的：观察抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖过程中的影响因素及抗ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）免疫学特性的变化。方法：采用ＭＴＴ法和苔盼蓝染色法，ＩＬ－２依赖细胞株（ＣＴＬＬ细胞）增殖实验、ＴＮＦ－α（双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法）试剂盒以及间接免疫荧光法检测ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性，ＩＬ－２，ＴＮＦ－α的产生及ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＩＬ－２Ｒ等的表达。结果：     

抗CD_3McAb诱导外周血单个核细胞活化增殖的观察

目的：观察抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖过程中的影响因素及抗ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）免疫学特性的变化。方法：采用ＭＴＴ法和苔盼蓝染色法、ＩＬ－２依赖细胞株（ＣＴＬＬ细胞）增殖实验、ＴＮＦ－α（双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法）试剂盒以及间接免疫荧光法分别检测ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性、内源性ＩＬ－２、ＴＮＦ－α的产生及ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＩＬ－２Ｒ等的表达。结果：抗ＣＤ３ＭｃＡｂ对ＨＰＢＭＣ有很强的丝裂原作用，该作用与其诱导浓度、时间及外源性ＩＬ－２的协同作用密切相关。ＣＤ３ＡＫ细胞可产生内源性ＩＬ－２、ＴＮＦ－α，ＩＬ－２Ｒ表达及ＣＤ８＋细胞百分率显著增多。结论：ＣＤ３ＡＫ细胞具有很强的增殖能力，但需要外源性ＩＬ－２的协同作用，增殖细胞以ＣＤ８＋细胞为主。     

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ＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｏｎｇｊｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＥＤＩＴＯＲＩＮＣＨＩＥＦ：ＱｉｕＦａｚｕ（裘法祖）ＡＳＳＯＣＩＡＴＥＣＨＩＥＦＥＤＩＴＯＲＳ：ＷＵＺｈｏｎｇ－ｂｉ（武忠弼）ＺＨＯＵＪｕｎ－ａｎ（周俊安）ＥＤＩＴＯＲＩＡＬＢＯＡＲＤ：...     

EXPRESSION OF TGF－β_1，PDGF AND IGF－1 mRNA IN LUNG OF BLEOMYCIN－A_5－INDUCED PULMONARY FIBROSIS IN RATS

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抗CD_3单克隆抗体HIT3aⅠ.制备和特异性鉴定

利用鼠—鼠杂交技术获得1个单克隆抗体(McAb)HIT3a。经免疫学、细胞化学和生物化学分析,证实HIT3a是抗入成熟T细胞表面CD_3抗原McAb,具有亲和力高、活性稳定、能激活T细胞、在补体存在下溶解T细胞等特性,是1个理想的可用于免疫学研究和临床治疗的CD_3类McAb。     

McAb共刺激PBLs淋巴细胞在培养体系中的状态及超微结构的 …

通过用抗ＣＤ３,ＣＤ２８＋ＣＤ８０ ＭｃＡｂ激活健康人的ＰＢＬｓ,并以ＰＨＡ,ＩＬ－２,ＰＢＬｓ为对照组;对各组不同时间段的淋巴细胞超微结构进行观察。结果提示：ＣＤ３及ＣＤ２８＋ＣＤ８０刺激淋巴细胞增殖外,也能使淋巴细胞活化,细胞表现为胞体增大,细胞器增多,具有粗大的绒毛和突出伪足,并可见单核细胞吞噬活跃。     

通痹灵总碱对大鼠机体细胞免疫的调节作用

目的 研究通痹灵（TBL）的有效部位总生物碱对生物增殖及T淋巴细胞转铁蛋白受体（CD71）的影响,探讨通痹灵调节细胞免疫的作用机理。方法 培养大鼠淋巴细胞，刀豆蛋白（ConA)刺激72h，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测通痹灵总碱对淋巴细胞增殖的影响；佛波醇酯（PDB）或ConA刺激48h ,流式细胞术检测T淋巴细胞CD71的表达率。结果 不同浓度的TBL总碱可明显抑制ConA刺激下的淋巴细胞增殖；不同浓度的TBL总碱对PDB和ConA激活的T淋巴细胞CD71表达均有明显的下调作用，而且呈明显的量效关系，对ConA刺激下的CD71表达抑制要强于PDB。结论 TBL总碱可抑制异常增殖的T淋巴细胞，其作用机制可能是通过抑制转铁蛋白受体来实现的。     

两种状态抗CD_3单抗诱导人T淋巴细胞活化增殖的初步观察

目的：观察并比较粘附状态抗ＣＤ３单抗和游离状态抗ＣＤ３单抗诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖的能力。方法：采用３Ｈ－ＴｄＲ掺入淋巴细胞增殖试验、苔盼蓝拒染法、间接免疫荧光染色法以及ＣＴＬＬ细胞ＩＬ－２检测法，分别检测人外周血单个核细胞，经两种状态抗ＣＤ３单抗刺激后，其增殖活性、外源性ＩＬ－２的协同作用、内源性ＩＬ－２释放以及ＩＬ－２Ｒ表达等生物免疫学指标。结果：粘附状态抗ＣＤ３单抗刺激ＨＰＢＭＣ，其增殖活性、活细胞总数以及增殖活性维持的时间均高于游离状态抗ＣＤ３单抗，且前者不依赖外源性ＩＬ－２；粘附状态抗ＣＤ３单抗诱导ＨＰＢＭＣ释放内源性ＩＬ－２以及细胞表面ＩＬ－２Ｒ表达的能力也强于游离状态抗ＣＤ３单抗。结论：粘附状态抗ＣＤ３单抗比游离状态抗ＣＤ３单抗具有更强的诱导人Ｔ淋巴细胞活化增殖能力。     

Preparation and antigenic characterization of rat monoclonal antibodies againts Hantavirus

ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄａｎｔｉｇｅｎｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｒａｔｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｇａｉｎｔｓＨａｎｔａｖｉｒｕｓ￥ＸｕＨａｉｆｅｎｇ（徐海峰）；ＬｉｕＹｕａｎ（刘原）；ＬｉａｎｇＺｈｅ（梁喆）；ＭｉＬ...     

抗人精子单克隆抗体的制备和特性鉴定

用杂交瘤技术制备了12株稳定地分泌抗人精子单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用间接免疫荧光法观察这些抗体分别结合到精子不同部位,有7个抗体使精子产生头—头凝集或尾—尾凝集,有4个抗体使精子制动,只有1个抗体与淋巴细胞有交叉反应。测定了10个单克隆抗体的免疫球蛋白亚类,7个属于IgG,13个属于IgM。     

人脐血T细胞活化的某些可视化特征

目的 探讨人脐血T淋巴细胞活化的可视化特征.方法 将人脐血T细胞在RPM11640完全培养摹中培养,分成两组:实验组加入抗CD3McAb(10 ms/L)和适当浓度的PHA活化;对照组不加CD3McAb和PHA.测定细胞活率,倒置显微镜下观察T细胞活化的特征;制备细胞超薄切片,透射电镜下观察分析并摄影.结果 活化T细胞形态良好,分裂象细胞多数不规则,胞核清晰,体积明显增大;生长旺盛的细胞区域可见到细胞集落.透射电镜下活化T细胞的染色质凝集,核仁数多而明显;典型的活化细胞巾有较多空泡(特征性可视化结构).结论 人脐血T淋巴细胞活化的主要特征是细胞体积增大;染色质凝集,胞质中可出现空泡;形成细胞集落.     

三株抗人B淋巴细胞表面抗原单克隆抗体的研制及初步鉴定

用慢性Ｂ淋巴细胞白血病患者外周血白血病细胞免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，以Ｂ淋巴细胞杂交瘤技术产生了三种单克隆抗体，分别命名为ＳＭＵ＿（１０）、ＳＭＵ＿（１１）ＳＭＵ＿（１２）。初步鉴定的结果表明，（１）ＳＭＵ＿（１０）、ＳＭＵ＿（１１）是抗成熟阶段Ｂ细胞及浆细胞的单抗，二者的特性及反应谱相类似；（２）ＳＭＵ＿（１２）是一非系限性单抗，与成熟Ｔ细胞、分化后期的Ｂ细胞及部分粒单细胞反应；（３）ＳＭＵ＿（１０）、ＳＭＵ＿（１１）、ＳＭＵ＿（１２）可较好地判明白血病细胞的来源及Ｂ细胞的分化阶段，在白血病的免疫学分型中具有实用价值；（４）三株单抗是新的抗Ｂ细胞特异性单抗。     

凉血解毒方对Jurkat T淋巴细胞增生、活化及细胞因子分泌的影响

目的研究凉血解毒方含药血清对模拟银屑病病理状态的T淋巴细胞增生、活化及释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,为阐明凉血解毒类中药治疗银屑病血热证的作用机制和临床治疗提供实验依据。方法选用Jurkat E6-1T淋巴细胞株为研究材料,以不同剂量的凉血活血胶囊药物粉末灌服大鼠,制备大鼠含药血清。将含药血清预先与细胞孵育3h,用多克隆刺激剂佛波醇酯(phorbol12,13-dibutyrate,PDB)活化T淋巴细胞。采用CCK-8比色法检测含药血清对活化及正常的T淋巴细胞增生的影响;采用流式细胞术观察药物对T淋巴细胞早期活化标志分子CD69表达的影响;采用酶联免疫夹心法(ELISA)检测药物对T淋巴细胞所释放TNF-α含量的影响。结果低、中、高3种剂量的凉血解毒方含药血清均可使活化的T淋巴细胞数量明显下降,且排除药物毒性作用。不同剂量的药物均可显著降低T淋巴细胞早期活化标志分子CD69的表达,不同浓度的药物均可抑制T细胞分泌TNF-α。结论临床用于治疗银屑病的常用有效方剂凉血解毒方能显著抑制T淋巴细胞增生、活化及炎性反应细胞因子的释放。     

肠道病毒71型特异性单克隆抗体的制备及其在病毒鉴定中的应用

目的：建立肠道病毒71型（ EV71）特异性检测的免疫荧光方法用于病毒分离培养后的EV71鉴定,为EV71生物学特征研究和疫苗株的筛选奠定基础。方法：以EV71 VP1为免疫原制备单克隆抗体,用经测序鉴定的肠道病毒毒株建立EV71特异性免疫荧光方法;将不同地区收集的手足口病患儿的临床标本进行病毒分离,利用EV71特异性单抗进行分离培养后的病毒鉴定。结果：制备获得2株单抗,经鉴定其中1株3 E12为EV71特异性单抗;以此单抗建立的免疫荧光方法对EV71感染细胞呈阳性反应,而与柯萨基病毒A16和埃可病毒6等非EV71肠道病毒不反应。从104份手足口病临床标本中共分离到35株病毒,产生肠道病毒典型的细胞病变;用3E12特异性单抗免疫荧光鉴定分离病毒,其中29株为EV71,与RT-PCR验证结果完全一致。结论：成功制备获得EV71特异性单克隆抗体,以此单抗建立的EV71特异性免疫荧光方法敏感性高、特异性强,可用于分离培养EV71的鉴定。