In Vitro Comparison of the Antiproliferative Effects of Rhenium-186 and Rhenium-188 on Human Aortic Endothelial Cells

Purpose  

Rhenium-186 (¹⁸⁶Re) and rhenium-188 (¹⁸⁸Re) are promising radionuclides for the inhibition of restenosis after percutaneous transluminal angioplasty or other vascular interventions. Until now the maximal dose tolerance of endothelial cells has not been clearly known.     

Meclofenamic Acid for Inhibition of Human Vascular Smooth Muscle Cell Proliferation and Migration: An In Vitro Study

Purpose: The aim of the study was to examine the effects of meclofenamic acid on proliferation, clonogenic activity, migratory ability, cell cycle distribution and p44/42 MAPK (mitogen activated protein kinase) expression in serum-stimulated human aortic smooth muscle cells (haSMCs). Methods: haSMCs were treated with meclofenamic acid in three different concentrations (10 mM, 100 mM, 200 mM) for 4 days. Then meclofenamic acid-free culture medium was supplemented until day 20. Growth kinetics were assessed. Cell cycle analysis was performed by flow cytometry. Clonogenic activity was evaluated with colony formation assays. Migratory ability was investigated by stimulation with platelet-derived growth factor (PDGF-BB) in 24-well plates with 8 mm pores membrane inserts. p44/42 MAPK was detected by Western blot technique. Results: Meclofenamic acid inihibited the proliferation, clonogenic activity and migratory ability of haSMCs in a dose-dependent manner. Cell cycle analysis revealed a G2/M-phase block. The p44/42 MAPK was significantly reduced. Conclusion: Meclofenamic acid inhibits the proliferation and migration of haSMCs. If a sufficient dose of meclofenamic acid can be applied systemically or by local drug delivery it could be a valuable substance to prevent restenosis after angioplasty.     

牛磺酸抑制激光血管成形术后体外培养的平滑肌细胞增殖和癌基因c-fos、c-myc的表达

本文在兔腹主动脉粥样硬化模型上，行激光血管成形术（ｌａｓｅｒａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ，ＬＡ），用体外培养的血管平滑肌（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）３Ｈ－ＴｄＲ掺入和癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达的测定，观察了牛磺酸对血管损伤后腹主动脉ＶＳＭＣ增殖的影响。结果显示：牛磺酸（３×１０－６～５×１０－３ｍｏｌ／Ｌ）能抑制体外培养ＶＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ掺入，呈剂量依赖关系，５×１０－３ｍｏｌ／Ｌ抑制血清诱导ＶＳＭＣ中的ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ基因表达。     

Impact of Rhenium-188, Gemcitabine,and 5-Fluorouracil on Cholangiocellular Carcinoma Cells: An In Vitro Study

The purpose of this study was to compare the beneficial effects of radioactive stents and radioactive stents plus additional chemotherapy in the palliative treatment of cholangiocellular carcinomas. Cholangiocellular carcinoma cells (TFK-1 cells) were treated either with 8 Gy (RTB group) or 16 Gy (RTA group) ¹⁸⁸Re or with ¹⁸⁸Re irradiation (8 Gy) combined with either gemcitabine (8 Gy/Gem) or 5-fluorouracil (8 Gy/5-FU) at a dosage of 20 μg/ml medium for 4 days and subsequently compared with an untreated control group. Proliferation kinetics were assessed on days 4, 7, 11, 18, 25, and 32. Colony formation assays were performed on days 7, 18, and 32 and cell cycle distribution was examined on days 4, 7, 11, 15, 25, and 39. Cell proliferation kinetics showed the lowest cell numbers in the 8 Gy/5-FU group (control, 15,390,000; RTA group, 8,394,000; RTB group, 5,609,000; 8 Gy/Gem group, 423,000; and 8 Gy/5-FU group, 297,667). In contrast, clonogenic activity on day 32 was lower in the 8 Gy/Gem group (control, 29.3 colonies; RTB group, 23.1 colonies; 8 Gy/5-FU group, 21.5 colonies; 8 Gy/Gem, 3.3 colonies; and even augmented in the RTA group, with 37.7 colonies). Cell cycle distribution showed similar curves for all groups on slightly different levels except for the 8 Gy/5-FU group, which showed a relatively augmented percentage of cells on day 7 in the G2 M cycle phase and on day 4 in the S phase. In conclusion, irradiation (8 Gy) with ¹⁸⁸Re administered, e.g., via coated stents, combined with Gem could be a valid option for the treatment of CCCs.     

低强度激光照射诱导大鼠胸主动脉金属硫蛋白的生成

目的：观察低强度红激光照射对大鼠脑主动脉金属硫蛋白（metallothionein,MT)生成的影响，探讨激光照射的细胞保护机制。方法：取24只大鼠的胸主动脉，将其制成厚度为0．5mm的薄片，置于含10％胎牛血清Krebs-Henseleit液6孔培养板，经95％O2－5％CO2、37℃孵育。设对照组及3个实验组，对照组不照射激光，3个实验组分别以功率密度为3、6和12J／cm^2的632nm波长的激光照射。采用竞争性RT－PCR法测定胸主动脉内MT的mRNA水平变化，以^109Cd牛血红蛋白饱和法测定MT的含量。结果：3个实验组MT1 mRNA水平分别比对照组增加175％（P＞0.05)、418．6％（P＜0．05）和668．2％（P＜0．01）；MT2 mRNA水平分别比对照组增加163．9（P＞0．05）、615％、（P＜0．01）和1087％（P＜0．01）；相应的MT蛋白含量分别比对照组增加142．8％（P＜0．05）、170．8％（P＜0．05）和142．1％（P＜0．05）。     

SCPP降解产物对血管内皮细胞迁移、增殖和F-肌动蛋白重组的影响

目的 研究骨组织工程支架材料掺锶聚磷酸钙(strontium-doped calcium polyphosphate, SCPP)的降解产物(degradation products, DPs)对血管形成密切相关的内皮细胞迁移、增殖和肌动蛋白微丝(F-actin)重组的影响,探索其对骨组织工程血管化的作用.方法 在聚磷酸钙(calcium polyphosphate, CPP)制备过程中掺锶制备SCPP多孔支架材料.生理盐水为降解介质,等离子体发射光谱检测降解液中DPs及浓度.用降解液处理脐静脉内皮细胞株ECV-304,噻唑蓝法和Millicell小室法分别检测细胞增殖和迁移.标记F-actin,荧光显微镜下观察.结果 与CPP和生理盐水组比较.结果 掺锶前后,孔隙率分别为(65±5)%和(64±5)%.SCPP各天降解液中Sr浓度为1.222～1.808 mg/L,约为CPP组的20～40倍,但Ca和P较低.SCPP组细胞增殖和迁移数显著高于CPP组和生理盐水,细胞中F-actin重组形成应力纤维数量明显增多.结论 SCPP的降解液能明显促进ECV-304的增殖.Sr是影响增殖的关键因素,SCPP降解液还能促进ECV-304的迁移,引起F-actin重组,形成与细胞迁移密切相关的应力纤维可能是促进迁移的原因之一.SCPP用作骨组织工程支架可能促进血管形成.     

鸢尾苷元抗血管平滑肌细胞增殖及抗动脉粥样硬化机制的研究

目的观察鸢尾苷元对氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞增殖及其单核细胞趋化蛋白-1和细胞间黏附因子-1表达的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法采用体外培养大鼠血管平滑肌细胞,加入氧化低密度脂蛋白100μg/ml建立血管平滑肌细胞增殖模型,加入不同剂量的鸢尾苷元,通过噻唑蓝比色法观察血管平滑肌细胞增殖率,并采用逆转录-聚合酶链反应方法检测血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1和细胞间黏附因子-1mRNA的表达情况。结果鸢尾苷元对氧化低密度脂蛋白所致的血管平滑肌细胞增殖具有明显的抑制作用,并显著抑制氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1和细胞间黏附因子-1mRNA的过度表达。结论鸢尾苷元抗血管平滑肌细胞增殖和抑制氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1和细胞间黏附因子-1的过度表达,可能是其抗动脉粥样硬化的重要作用机制之一。     

血管钠肽对低氧性肺动脉高压和肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：研究血管钠肽（VNP）对慢性低氧性肺动脉高压（HPH）大鼠的治疗作用和肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖的影响,并与C型钠尿肽（CNP）和心房钠尿肽（ANP）作比较。方法：采用整体静脉给药、离体血管灌流和PASMC培养等方法,测定肺血流动力学参数、离体肺动脉的等长张力和PASMC增殖的变化。结果：（1）VNP、CNP和ANP都能有效降低HPH大鼠的平均肺动脉压（mPAP),P＜0．05－0．01,除CNP外,VNP和ANP并能明显降低肺血管阻力（PVR）,P＜0．05－0．01,其中VNP降低mPAP和PVR的作用明显大于CNP和ANP。（2）VNP对离体肺支 浓度依赖性舒张作用,该作用不受内皮细胞的影响;但在浴槽内预先加入格列苯脲或普萘洛尔可显著降低肺动脉对VNP和CNP的最大舒张反应（Rmax),P＜0．05－0．01,而对ANP却无明显影响 。（3）VNP能明显抑制低氧介导的PASMC的增殖及DNA合成,其作用明显大于CNP和ANP。结论：VNP对HPH具有显著的治疗作用,它是一个新型、强效、非内皮依赖性的血管松弛多肽和细胞增殖负调控因子。     

Lethal and Mutagenic Effects of 252Cf Radiation in Cultured Human Cells

Summary

HeLa MR cells were exposed to radiation emitted from a man-made spontaneously fissioning isotope, californium-252. The neutron to gamma-ray ratio in the radiation dose was measured to be 2·0. The extrapolation number of the dose-survival curve was 1·3 and the Do was 200 cGy. A dose-dependent increase in mutation to 6-TG^r (6-thioguanine resistant) was observed. The relative biological effectiveness (r.b.e.) for cell killing of the neutrons from ²⁵²Cf, calculated relative to high-dose-rate X-rays, was 2·6 at 50 per cent survival. The r.b.e. for mutation induction was 2·7 at a mutation frequency of 5 × 10^?5 per surviving cell.     

Ranibizumab 抑制 huvec细胞增殖和迁移的实验研究

目的 探讨Ranibizumab对huvec细胞增殖和迁移的影响,了解其抑制血管生成的途径.方法 采用MTF比色法,观察不同浓度的Ranibizumab对huvec细胞增殖的影响,Transwell小室检测Ranibizumab对huvec细胞迁移的影响.结果 MTY比色法显示,Ranibizumab对huvec细胞增殖具有抑制作用,随着浓度的增加,Ranibizumab对huvec细胞增殖抑制作用也增强;Ranibizumab浓度为0.01、0.1、1mg·ml-1时迁移至TransweH小室膜下的huvec细胞数分别为(112.68±10.03)、(58.17±6.52)、(31.67±4.84)(P＜0.01).结论 Ranibizumab能够抑制huvec细胞的增殖和迁移,这可能是其抑制血管生成的途径之一.     

腺病毒介导的P21WAF1/CIP1基因诱导血管平滑肌细胞凋亡

目的：应用重组腺病毒载体介导的P21^WAF1/CIP1基因转染血管平滑肌细胞（VSMC），探讨P21^WAF1/CIP1基因对平滑肌细胞凋亡的诱导作用。材料与方法：P21^WAF1/CIP1的重组病毒载体转染体外培养的猪主动脉平滑肌细胞，应用RT－PCR检测外源性P21^WAF1/CIP1基因的表达，并通过细胞形态、原位细胞凋亡分析、流式细胞仪和细胞生长曲线等方法观察P21诱导VSMC凋亡，抑制VSMC增殖的情况。结果：P21^WAF1/CIP1基因的重组腺病毒载体可以有效地转入平滑肌细胞中，诱导平滑肌细胞凋亡，并能显著地抑制平滑肌细胞增殖。结论：外源性P21^WAF1/CIP1基因转移可以诱导平滑肌细胞凋亡，显著地抑制平滑肌细胞增殖。     

培养细胞辐射效应的分析

奥村宽(Yutaka Okumura)副教授1964年毕业于名古屋大学理学部(物理学).毕业后至1975年在爱知肿瘤中心研究所实验放射学系工作,曾于1968年,1975年先后到美国有关研究所医用物理系和荷兰放射生物研究所学习,工作.自1976至今在长畸大学医学部原子病研究所辐射生物物理系工作,任副教授.从事研究受照后肿癌细胞动力学和辐射与高温对肿瘤细胞的复合效应等工作.本文是作者1981年10月19日在北京中华医学会礼堂报告的讲稿.     

乙醛对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的　研究乙醛对肝星状细胞(hepaticstellatecell,HSC)增殖、细胞周期、细胞周期蛋白cyclinD1及细胞外信号调节激酶(Extracellularsignal-regulatedkinase,ERK)磷酸化蛋白表达的影响。方法　体外培养HSC株;以MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,RT -PCR方法检测HSC内CyclinD1mRNA表达,Westernblot检测乙醛刺激后HSC内ERK活性的变化。结果　HSC被乙醛刺激后,细胞增殖、细胞由G1→S期转化增多、细胞周期蛋白Cy clinD1mRNA表达增加、磷酸化ERK(p -ERK)水平增高。与空白对照组比较,统计学分析有显著差异(P <0 .0 5 )。结论　乙醛刺激HSC后引起HSC增殖与ERK信号传导通路活化有关。     

回转器模拟失重对大鼠心肌细胞H9c2形态、骨架和增殖能力的影响

目的 探讨模拟失重对大鼠心肌细胞系-H9c2细胞的细胞形态、细胞骨架和增殖能力的影响.方法 采用双向多样本回转器(2D-RWVs)模拟失重,在30 r/min转速下分别培养2,4,6和8d,用图像处理分析软件(Image J)测量分析模拟失重后细胞面积的改变,激光共聚焦荧光显微镜观察细胞骨架的变化,采用细胞计数法测量细...     

盐酸埃他卡林对正常大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流的影响

目的　观察盐酸埃他卡林 (Iptakalimhydrochloride ,Ipt)对大鼠动脉平滑肌细胞钾电流的作用。方法　用胶原酶I消化、分离大鼠肺内动脉平滑肌细胞 ,用全细胞记录 (wholecellrecording)技术记录细胞钾电流 ,通过浴槽内给药 ,观察药物对钾电流的影响。结果　以给药前记录钾电流为 10 0 % ,在给予盐酸埃他卡林 1.0、10 0 .0 μmol·L-1后 ,1min记录的钾电流幅度分别为(114 .9± 3.8) % (n =8)和 (114 .0± 3.5 ) % (n =5 ) ,与溶媒对照组 (87.0± 3.5 ) % (n =8)相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 1)。在相同条件下给予吡那地尔 (Pinacidil) 1.0 μmol·L-1后 ,钾电流幅度为 (93.6± 4 .1) % (n =8) ,与溶媒对照组相比无显著性差异(P >0 .0 5 ) ;但当吡那地尔浓度增加到 10 0 .0 μmol·L-1时 ,钾电流幅度为 (12 8.1± 13.3) % (n =4 ) ,与溶媒对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　Ipt对动脉平滑肌细胞钾电流有增强作用。     

510.6nm激光照射对兔在体血管平滑肌细胞超微结构的影响

目的 观察510.6 am激光照射兔在体腹主动脉壁24h后,血管平滑肌细胞超微结构的变化及其与激光剂量的关系.方法 新西兰白兔12只,由股动脉导入柱状光纤至腹主动脉,在血管腔内进行分段激光照射,根据光照剂量分为6组.1～5组的光剂量分别为100mW/cm2×500 s、100mW/cm2×1000 s、150mW/cm2×l 000 s、200mW/cm2×500 s、200 mW/cm2×1000s;第6组为对照组,不照射激光.照光后24 h处死动物,取照射段血管组织,观察血管平滑肌细胞的超微结构的改变.结果 兔腹主动脉经功率密度为100 mW/cm2或150 mW/cm2的激光照射后,血管平滑肌细胞出现以细胞凋亡为主要特征的形态结构改变,其损伤部位以线粒体为主.功率密度为200 mW/cm2的激光照射后,血管平滑肌细胞以坏死为主.激光照射后兔血管平滑肌细胞的上述形态变化主要与激光功率密度和照射时间有关.结论 功率密度为100 mW/cm2或150 mW/cm2的510.6 nm激光照射后24 h在体兔血管平滑肌细胞出现凋亡.