c-IAP1和bax蛋白在甲状腺癌中的表达与细胞凋亡

目的探讨甲状腺癌中c-IAP1和bax蛋白的表达及其与细胞凋亡的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测甲状腺肿瘤细胞中c-IAP1和bax蛋白的表达,用TUNEL法测定肿瘤细胞凋亡指数（AI）。结果20例甲状腺腺瘤中c-IAP1和bax阳性表达率分别为25.0%、60.0%,AI为0.33±0.21;47例甲状腺癌中c-IAP1和bax阳性表达率分别为87.2%、89.3%,AI为0.91±0.37。C-IAP1、bax和AI在腺瘤和癌组间比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。在甲状腺癌中,c-IAP1阳性组AI低于阴性组,bax阳性组AI高于阴性组。结论c-IAP1和bax可能与甲状腺癌的发生发展密切相关;c-IAP1高表达抑制了甲状腺癌细胞凋亡,bax高表达促进了甲状腺癌细胞凋亡。     

维吾尔族妇女宫颈癌组织中HSP90的表达及其与HPV16的相关性

目的探讨维吾尔族和汉族妇女中宫颈炎和宫颈癌组织中HSP90蛋白的表达和HPV16型感染的情况。方法采用免疫组织化学SP法和聚合酶链反应（PCR）技术检测66例宫颈炎组织和92例宫颈癌组织中HSP90蛋白的表达和HPV16的感染情况。结果HSP90蛋白在维、汉宫颈癌组织中的阳性率高于维、汉宫颈炎组织（77.17%,56.06%）（P<0.05）;HSP90蛋白的阳性率表达在维、汉宫颈癌组织间差异有统计学意义（P<0.05）,并且汉族高于维吾尔族（83.33%,74.19%）。在HPV16型感染的宫颈癌组织中维吾尔族阳性率（58.06%）高于汉族（16.67%）（P<0.05）。HPV16型感染在宫颈癌组织中的阳性率高于宫颈炎组织（44.56%,12.12%）(P<0.05）。维、汉宫颈癌组织中HSP90的表达与HPV16型感染呈正相关性（r=0.361, P<0.05）。结论通过对HSP90蛋白和HPV16联合检测,可能作为检查宫颈癌的标志物,提高宫颈癌的检出率     

siRNA对人食管癌EC9706细胞真核起始因子4E表达的影响

目的探讨siRNA对人食管癌EC9706细胞中eIF4E表达的影响。方法针对GeneBank中eIF4E基因的不同靶点,设计并合成两条特异siRNA及一条无义siRNA寡核苷酸模板,利用体外转录法合成siRNA,在脂质体介导下以150ng/μl、200ng/μl和250ng/μl三种浓度转染EC9706细胞,分别培养24h、48h、72h,同时设正常对照组。采用免疫细胞化学及原位杂交技术检测转染前后EC9706细胞中eIF4E蛋白和mRNA的表达;应用流式细胞技术检测转染前后EC9706细胞周期的变化情况。结果转染siRNA后细胞形态发生明显改变。不同浓度的两条特异siRNA转染细胞后,eIF4E蛋白及mRNA表达量均较正常对照组降低,并且具有显著的剂量依赖性（P<0.05）,但两转染组之间相比,差异无统计学意义（P>0.05）;无义siRNA未表现出对eIF4E基因表达的抑制效应（P>0.05）;两条特异siRNA转染组与无义siRNA转染组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。三种不同浓度siRNA转染细胞72h后与无义转染组及正常对照组相比,G₀/G₁期细胞比例显著增加,S期细胞比例相对减少,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论特异性siRNA能有效抑制人食管癌EC9706细胞中eIF4E基因的表达,抑制细胞增殖。     

胃癌患者外周血人端粒酶逆转录酶mRNA表达及其临床意义

目的研究胃癌患者外周血人端粒酶逆转录酶（hTERT） mRNA的表达,并探讨其临床意义。方法应用TaqMan 实时定量RT-PCR法检测58例患者、20名健康对照者外周血hTERT mRNA的表达,随访2年。结果胃癌患者外周血hTERT mRNA阳性率为55.17%,显著高于健康对照组（P＜0.001）;hTERT mRNA表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移和临床分期相关,其中淋巴结转移和远处转移是影响hTERT mRNA 表达的独立因素;近期疗效无效的患者hTERT mRNA 的阳性率显著高于近期疗效有效的患者（P=0.003）。化疗前hTERT mRNA阳性与阴性患者的1年生存率分别是28.13%和76.92%。结论外周血hTERT mRNA可作为检测胃癌患者微转移的分子标志,定期监测有助于评估化疗疗效和预测预后。淋巴结转移和远处转移与hTERT mRNA 表达密切相关。     

S100A6基因对胃癌细胞生物学特性的影响

目的探讨S100A6基因对于胃癌细胞增殖状态、细胞周期、凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响。方法将S100A6基因插入载体pcDNA3.1构建PC-S100A6真核表达载体。以脂质体介导转染MKN45胃癌细胞建立稳定转染细胞系（MKN-S100A6）,而后使用流式细胞仪、生长曲线法、平板克隆形成实验法、细胞迁徙实验法等方法分析稳定表达株相关生物学特性与恶性表型的变化。同时设立空载体转染组和空白细胞组为对照。结果与转染pcDNA3.1空载体及空白MKN45胃癌细胞相比,转染PC-S100A6载体的稳定表达细胞株生长显著加快,前5 日细胞计数差异有统计学意义（P<0.05）,后两组之间亦无显著差异,细胞周期检测显示PC-S100A6转染组处于G₂ M期的细胞比例显著高于未处理的MKN45细胞和转染pcDNA3.1空载体的MKN45细胞（P<0.05）,而处于S期的细胞比例显著低于其他两组（P<0.05）,其他各期细胞比例差异均无统计学意义。流式细胞仪法检测细胞凋亡结果显示各组细胞的凋亡比例均为0.8%左右,统计学检验差异无统计学意义（P>0.05）。平板克隆形成实验结果显示PC-S100A6转染组平均克隆形成率显著高于其他两组（P<0.05）,细胞迁徙实验结果提示PC-S100A6转染组穿膜率显著高于其他两组（P<0.05）。结论S100A6基因可能具有促进细胞生长增殖及分裂作用,同时可影响细胞周期,增加处于分裂期细胞的比例,可能具有促进细胞分裂作用,但对细胞凋亡的影响作用较小。S100A6基因可能加强胃癌细胞侵袭转移能力。总之该基因对维持细胞恶性表型有一定意义。     

HGF和VEGFR-3在大肠癌中的表达及其在淋巴管生成和转移中的作用

目的观察肝细胞生长因子(HGF)和血管内皮生长因子受体3（VEGFR-3）在大肠癌组织中的表达,检测大肠癌组织中的微淋巴管密度(LMVD),探讨HGF和VEGFR-3 在大肠癌淋巴管生成及转移中的作用。方法应用免疫组织化学（SABC）法检测52例大肠癌、20例大肠息肉组织和20例健康对照组织中HGF和VEGFR-3的表达,并应用podoplanin标记淋巴管,检测各组组织中的淋巴管密度,结合大肠癌患者的临床病理资料,分析其相关性。结果(1)大肠癌组织中HGF和VEGFR 3均被染成棕褐色或棕黄色,阳性表达率分别为75%、67.3%,相对表达量分别为(0.36±0.07)、(0.41±0.10),均明显高于大肠息肉组[25%、30%; (0.24±0.06)、 (0.28±0.03）] 和正常大肠组织[15%、10%;(0.23±0.06)、(0.21±0.03）]的表达(P<0.01)。且微淋巴管密度(LMVD)也明显增多[(4.13±1.99) vs. (2.59±1.46) vs. (2.40±1.44),P<0.01]。(2)大肠癌组织中HGF、VEGFR 3的相对表达量,LMVD三者间呈两两正相关。39例HGF表达阳性的大肠癌,其LMVD明显大于HGF表达阴性者[(4.25±2.13) vs. (2.73±1.54),t=3.051,P=0.003];35例VEGFR-3表达阳性的大肠癌,其LMVD也明显大于VEGFR 3表达阴性者[(3.79±1.26) vs. (2.64±1.32),t=3.235,P=0.002]。(3)HGF、VEGFR 3和LMVD的表达与大肠癌患者年龄、性别以及肿瘤分化程度无关(P>0.05),但与Dukes分期(P=0.034,P=0.021,P=0.006)、淋巴管有无转移明显相关(P=0.015,P=0.012,P=0.001)。结论HGF与大肠癌的淋巴管生成及转移有一定的相关性,并可能通过VEGF-C、D/VEGFR-3 信号途径间接促进淋巴管增生,从而促进肿瘤细胞的淋巴转移。     

胃癌组织三叶因子家族的表达与细胞增殖和凋亡的相关性

目的探讨三叶因子1（TFF1）、三叶因子2（TFF2）、三叶因子3（TFF3）在胃癌组织中的表达及其与细胞增殖、凋亡的相关性。方法检测40例胃癌组织、20例正常胃黏膜、30例肠上皮化生及24例不典型增生胃黏膜中TFF1、TFF2、TFF3和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达及其细胞凋亡情况。结果 TFF1、TFF2在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜、肠上皮化生胃黏膜及胃癌组织中均有表达,两者表达强度依次均呈递减趋势（均P＜0.05）。TFF3在正常胃黏膜没有表达,而在肠上皮化生胃黏膜、不典型增生胃黏膜和胃癌组织中均有表达,表达强度依次呈递增趋势（P＜0.05）。胃癌组织中 TFF1、TFF2表达与细胞增殖指数呈负相关 （r=-0.55,r=-0.38,均P＜0.05）,与细胞凋亡指数呈正相关（r=0.58,r=0.48,均P＜0.05）;TFF3的表达与细胞增殖指数呈正相关（r=0.55,P＜0.05）,与细胞凋亡指数呈负相关（r=-0.48,P＜0.05）。结论TFF可能通过影响胃癌细胞的增殖和凋亡,在胃癌发生、发展中起不同的作用。     

MUC1蛋白在胆囊癌中的表达及其意义

目的MUC1在胆囊癌组织中的表达及临床病理意义。方法采用免疫组织化学PV6000二步法检测MUC1在胆囊癌及癌旁组织中的表达情况,并结合临床病理资料进行分析。结果MUC1蛋白在胆囊癌组织表达率为51.7% (31/60),而在癌旁非癌组织中未见有阳性表达,两者表达差异具有统计学意义(P=0.000)。MUC1表达与胆囊癌分化程度相关,高分化组与低分化组之间在MUC1表达上差异有统计学意义(P<0.05),而与其他临床参数及预后无关(P>0.05)。结论MUC1在胆囊癌组织中阳性表达率增高,可能与胆囊癌发生发展有     

肿瘤细胞中的c-myc与p16启动子重新甲基化

目的 探讨基因启动子区重新甲基化对肿瘤细胞生长的影响,寻找肿瘤防治新靶点.方法 用S-腺苷甲硫氨酸使c-myc和P16启动子甲基化,MTT法测定肿瘤细胞生长状态;免疫荧光染色检测基因表达的变化.结果 药物处理后,c-myc表达显著降低(P<0.05),而p16表达无明显变化(P>0.05);肿瘤细胞的生长受到抑制.结论 SAM能够通过下调癌基因的表达来抑制肿瘤细胞的生长,提示其在肿瘤治疗方面的应用前景.     

两种化疗方案在宫颈癌同步放化疗中的疗效及副反应对比分析

目的对宫颈癌同步放化疗中的两种化疗方案进行对比研究,探讨更佳化疗方案。方法将我院2004~2005年收治的238例行宫颈癌同步放化疗的患者随机分为BIP方案组(133例)和PF方案组(105例),对他们的2年生存率和毒副反应进行对比研究。结果BIP方案组2年生存率76.7%（102/133）,2年无进展生存率70.7%（94/133）;PF方案组2年生存率63.8%（67/105）,2年无进展生存率57.1%（60/105）。两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。近期毒副反应评价,BIP方案组Ⅲ~Ⅳ度骨髓抑制发生率显著高于PF方案组（P＜0.05）,远期毒副反应评价经比较差异无统计学意义。结论在宫颈癌同步放化疗的化疗方案中,BIP方案在生存率方面优于PF方案,但骨髓抑制较为严重,在远期毒副反应方面两种化疗方案差异无统计学意义。     

PKCα不能预测非小细胞肺癌的预后

目的研究蛋白激酶C-α（PKCα）在非小细胞肺癌（NSCLC）中所代表的临床意义。方法运用免疫组织化学法（IHC）检测51例NSCLC、21例癌旁和11例肺良性病变组织中PKCα的表达,并采用SPSS13.0软件进行相关统计分析。结果PKCα在NSCLC、癌旁和良性肺病变组织中阳性率分别为74.5%（38/51）、42.9%（9/21）和45.5%（5/11）,三组间差异存在统计学意义（P=0.019）,肿瘤组阳性率要高于癌旁组织（P=0.010）。PKCα蛋白表达与各临床参数间均无明确相关性（P＞0.05）。Kanplan Meier法提示不同表达状态的PKCα生存曲线和复发转移曲线没有差异（P＞0.05）。多因素Cox回归分析提示临床分期和复发转移状态为影响生存的因素,相对危险度（RR）分别为2.600和0.211。结论PKCα可能参与了NSCLC的发生发展,尚不能支持PKCα作为判断肿瘤预后和复发转移的指标。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在肝癌组织中的表达及意义

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）在肝癌中的表达状况及其意义。方法利用组织芯片技术构建肝癌组织芯片,采用免疫组织化学SP法检测49例肝癌组织及相应癌旁组织、6例正常肝组织中PPARγ蛋白的表达并分析其与分化程度等临床和病理指标的关系。结果49例肝癌标本中PPARγ表达阳性25例(51.02%) ,49例相应癌旁组织中15例阳性(30.61%) ,6例正常肝组织中未见表达(0% ),差异有统计学意义(P=0.016)。肝癌患者不同年龄、肿瘤大小、血清AFP水平、门/腔静脉癌栓有无、HBsAg感染与否的PPAR γ表达程度差异无统计学意义(P>0.05);不同分化程度的PPARγ表达程度差异有统计学意义(P<0.05)。结论PPARγ蛋白在肝癌组织中呈高表达,其表达与肝癌病理分化有密切关系,检测PPARγ蛋白对诊断肝癌、判断其恶性程度及预后均有一定参考价值。     

苦参碱提高白血病KG1a细胞对NK细胞杀伤敏感性及其机制

目的研究苦参碱（Matrine）作用前后白血病KG1a细胞对NK细胞杀伤细胞敏感性的变化,并初步探讨其机制。方法应用CCK-8法检测苦参碱对KG1a细胞50%抑制量IC₅₀值,以此量的苦参碱作用于KG1a细胞,LDH释放法检测作用前后对NK细胞的杀伤敏感性。RT-PCR检测KG1a细胞NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3)五种基因的表达,流式细胞仪检测作用前后KG1a细胞表面NKG2D配体和HLA-Ⅰ类分子表达变化。结果苦参碱作用前后在效靶比为5∶1、10∶1、20∶1时对NK细胞杀伤敏感性差异均有统计学意义(P＜0.05)。KG1a细胞在mRNA水平五种基因均表达,苦参碱作用前KG1a细胞表面NKG2D各配体几乎不表达,作用后各配体显著升高,与作用前相比差异有统计学意义(P＜0.05),HLA-Ⅰ类分子无明显变化(P＞0.05)。结论苦参碱能提高KG1a细胞对NK细胞的杀伤敏感性,其机制可能与苦参碱提高KG1a细胞表面NKG2D配体的表达有关。     

MK886在人结肠癌裸鼠模型中的抗血管生成作用

目的通过动物体内实验研究5脂氧合酶活化蛋白（FLAP）抑制剂MK886对人结肠癌的抗血管形成作用,从而进一步探讨其抗肿瘤机制。方法将皮下接种HT-29人结肠癌细胞后建立人结肠癌模型的15只裸鼠随机分为三组,治疗组以MK886溶解在二甲基亚砜中投药;两对照组分别为投以二甲基亚砜和空白对照组。治疗一月后处死裸鼠并取瘤,用免疫组化方法检测各组肿瘤微血管密度,并比较结果。结果15只裸鼠全部成瘤,且实验过程中无一裸鼠死亡;免疫组化检测肿瘤微血管密度结果显示,两对照组肿瘤微血管密度差异无统计学意义（P>0.05）,而治疗组肿瘤微血管密度显著低于两对照组（P<0.05）。结论MK886可通过抑制肿瘤微血管形成抑制人结肠癌的生长。     

贲门腺癌中RASSF1A基因的甲基化状态及表达

 目的 研究贲门腺癌（gastric cardiac adenocarcinoma,GCA）中RASSF1A基因的甲基化状态及其蛋白表达情况。 方法 分别应用甲基化特异性PCR（MSP）、RT-PCR及免疫组织化学SP法检测贲门癌组织及相应癌旁组织的RASSF1A甲基化情况和mRNA水平及蛋白表达情况。 结果 92例贲门癌组织中有54例发生了甲基化,甲基化率为58.7%,显著高于癌旁正常组织（P<0.01）。Ⅲ期和Ⅳ期贲门癌患者中RASSF1A基因发生甲基化的比率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者（P<0.05）。92例贲门癌组织中有43例RASSF1A基因蛋白表达阴性,与相应癌旁正常组织相比有显著性差异（P<0.01）。Ⅲ期和Ⅳ期贲门癌RASSF1A基因蛋白表达显著低于Ⅰ期和Ⅱ期患者（P<0.05）。发生甲基化的贲门癌组织中RASSF1A的mRNA水平的表达显著低于未发生甲基化的贲门癌组织（P<0.01）。 结论 RASSF1A基因启动子区发生甲基化导致的基因沉默可能是贲门腺癌发生的机制之一。     

低氧对白血病细胞株Raji细胞侵袭转移能力的影响

目的研究低氧对白血病细胞株Raji细胞侵袭转移能力的影响。方法Raji细胞体外常规培养,用体积分数为1%、3%、5%的氧分别处理Raji细胞24h,以常氧培养Raji细胞为对照组,通过细胞黏附实验检测细胞黏附力,细胞迁移实验检测细胞运动力,肿瘤细胞体外侵袭实验检测细胞侵袭力,RT-PCR检测细胞VEGF、MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,Western Blot检测细胞HIF 1α蛋白的表达。结果与对照组相比,3%、5%的氧均能增强Raji细胞黏附力、运动力和侵袭力(P<0.05或P<0.01),而且还能上调Raji细胞HIF-1α蛋白、HIF-1α mRNA、VEGF mRNA、MMP 9 mRNA的表达(P<0.01),各组MMP 2 mRNA均无明显表达;而1%氧与对照组相比各检测指标无明显变化(P>0.05)。结论适度低氧可增强白血病细胞株Raji细胞侵袭转移能力,其机制可能是通过HIF-1α上调VEGF、MMP-9表达实现的。     

替莫唑胺治疗复发性胶质瘤的疗效分析

目的观察并评价替莫唑胺对复发性胶质瘤的临床疗效。方法35例复发性胶质瘤患者,14例首次使用替莫唑胺治疗（F组）,10例再次或多次使用替莫唑胺治疗（R组）,11例从未使用（N组）,定期临床随访、分析所有纳入病例的治疗反应。结果疗效评价指标包括完全缓解(complete response,CR),部分缓解(partial response,PR),稳定(stable disease,SD),进展(progressive disease,PD)及肿瘤进展时间（time of tumor progression, TTP）,半年肿瘤无进展数比和半年生存数比。其中F组的PR+SD较R组与N组高且差异有统计学意义（P<0.05）,F组的半年生存例数比为13/15,显著高于R组的5/10（P<0.05）和N组的4/11（P<0.01）。结论替莫唑胺化疗对初次用药的复发性胶质瘤有效,但对再次使用替莫唑胺治疗组中的病例疗效不明显。     

MMP-7及uPA在卵巢浆液性囊腺癌中的表达和意义

目的探讨基质金属蛋白酶-7（MMP-7）蛋白和uPA蛋白在正常卵巢组织和卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及与卵巢浆液性囊腺癌浸润转移的关系。方法应用免疫组化法检测40例卵巢浆液性囊腺癌,12例卵巢浆液性囊腺瘤和10例正常卵巢组织中MMP-7 和uPA的表达情况。结果MMP-7蛋白和uPA蛋白在正常卵巢组织中无阳性表达。MMP-7在卵巢浆液性囊腺瘤和卵巢浆液性囊腺癌中表达的阳性率差别有统计学意义(16.7% vs67.5%,χ²=9.670,P=0.002<0.05)。uPA在卵巢浆液性囊腺癌和卵巢浆液性囊腺瘤的表达率分别是72.5%和33.3%（χ²=6.107,P=0.013<0.05）,两者之间差异有统计学意义。MMP 7和uPA的阳性表达率与患者年龄无显著相关性(P=0.554>0.05和P=0.077>0.05); 随卵巢浆液性囊腺癌病理分级、FIGO分期增高、盆腔浸润、腹膜淋巴转移,MMP 7和uPA表达明显增强（P<0.05）且MMP-7 与uPA表达之间存在正相关(r_s=0.573,P<0.05)。结论MMP-7 和uPA在卵巢浆液性肿瘤的发生发展中起了重要作用,且两者相互激活,共同促进卵巢浆液性囊腺癌的浸润和转移。     

食管鳞癌中VEGF165b、HIF-1α的表达及临床意义

目的检测食管鳞癌组织中VEGF_165b和HIF-1α的表达及与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测143例食管鳞状细胞癌组织中VEGF_165b和HIF-1α的表达。结果VEGF_165b和HIF-1α在食管鳞癌组织中的阳性表达率分别为13.3%和43.4%;VEGF_165b阳性表达率与HIF-1α阳性表达率呈负相关关系（P=0.035）。HIF-1α阳性表达率与饮酒程度、分期、纵隔淋巴结转移及肿瘤的分化程度呈正相关（P＜0.05）。结论VEGF_165b和HIF-1α在食管癌的发生发展和淋巴转移中起重要的作用,VEGF_165b的表达与HIF-1α存在相关性,饮酒是食管癌的重要危险因素。VEGF_165b可能成为治疗的靶点。     

人肺癌组织中鸟苷酸解离抑制因子-2的表达和意义

目的研究鸟苷酸解离抑制因子-2（LyGDI）在肺癌组织中的表达及临床意义。方法用蛋白免疫印迹法（WB）和免疫组织化学法检测分析肺癌、癌旁组织和正常肺组织中的LyGDI蛋白表达。结果46份配对组织标本中,LyGDI在35份肺癌组织中的表达明显高于癌旁组织和正常组织,11份表达差异不明显[R=76.1%（有差异例数/总例数）];肺癌组织中的SCLC与NSCLC表达差异无统计学意义（P＞0.05）。在SCLC中,鳞癌与腺癌也没有显著差异,而淋巴结转移组织差异有统计学意义（P＜0.05）。结论肺癌组织中LyGDI蛋白的表达与淋巴结转移存在相关性,与临床病理类型无相关性。LyGDI可能与肺癌的发生、发展有关。