日本血吸虫病的免疫诊断现状与研究进展

简要概述了用于检测抗日本血吸虫抗体的理化纯化抗原、免疫纯化抗原、基因重组抗原和抗独特型抗体-内影像抗原等诊断用抗原和用针对日本血吸虫某一抗原组分的单克隆抗体检测日本血吸虫循环抗原的敏感性、特异性和实用性,及改变标记物、载体系统和标本类型等新的血清学诊断方法的研究进展.     

日本山梨县血吸虫病监测研究考察报告

日本山梨县血吸虫病监测研究考察报告湖北省血吸虫病防治研究所王在华，苏卓娃我们于１９９４年７月１２日～１０月１０日赴日本进行血吸虫病监测研修与考察。在日期间，除重点考察了富士川流域甲府盆地流行区，还考察了利根川流域千叶县与茨城县、广岛县芦田川流域的片山...     

不同的抗原和技术检查日本血吸虫病的实验研究

应用ＣＯＰＴ／ＬＥＡ、ＩＦＡＴ／ＡＷＦＳ和ＦＡＳＴ－ＥＬＩＳＡ／ＪＡＭＡ检测系统，用单盲法检查日本血吸虫病人３４４例，华支睾吸虫病人３８例、肺吸虫病人１０例、健康人９３例。ＣＯＰＴ／ＬＥＡ、ＩＦＡＴ／ＡＷＦＳ和ＦＡＳＴ－ＥＬＩＳＡ／ＪＡＭＡ对血吸虫病的敏感性依次为９３．９％、９９．４％和９９．７％；对其它寄生虫病和健康人的特异性诊次为１００％、８２．３％和３７．６％；它们的Ｙｏｕｄｅｎ‘ｓ指数依次     

新型乳胶凝集试验诊断日本血吸虫病的研究

利用适量血吸虫卵单克隆抗体致敏重氮基聚苯乙烯乳胶，制备出血吸虫卵单克隆抗体重氮乳胶诊断试验。实验室结果表明：重氮乳胶试剂敏感性高于相同抗体致敏传统聚苯乙烯乳胶制成的试剂。同一阳性标本经重氮乳胶试剂的检出效价明显高于传统乳胶试试的检测效价。重氮乳胶试剂具有良好的特异性和稳定性。实验室检测时间仅需３ｍｉｎ，是一种简便、快速、敏感和特异的方法。     

免疫印斑试验对兔日本血吸虫病疗效考核实验研究

采用以日本血吸虫成虫表膜31／32KG蛋白为抗原的免疫印斑试验（enzymeimmuno－transferblotting．EITB）对兔日本血吸虫病,经吡喹酮治疗后的疗效考核实验结果表明,该试验具有优于粪检、IHA、COPPT方法的特点,对疗效考核和诊断具有一定的价值。     

日本血吸虫病与肝癌死亡率的关系

为探讨日本血吸虫病与肝癌死亡率的关系，对江苏省原昆山县１９８４－１９８６年１５周岁以上有或无日本血吸虫病史人群中肝癌死亡病例的资料进行了回顾性定群研究。结果发现，无论男女，有日本血吸虫病史人群的肝癌死亡率显著高于无日本血吸虫病史人群，有晚期日本血吸虫病史人群的肝癌死亡率理高。     

湖滩地区日本血吸虫病传播模型的应用

应用湖滩地区日本血吸虫病传播模型模拟湖滩地区各种不同控制策略的近期和远期效果，并进行系统的成本效果分析。从理论上初步寻找到优化的综合防治措施，单纯化疗或灭螺的效果均不理想，单纯化疗虽然能使感染率快速下降，但停药后感染率会快速回升；单纯灭螺对降低感染率的作用极为缓慢。     

湖北省日本血吸虫病家庭聚集性研究

目的研究日本血吸虫病患病是否呈家庭聚集性。方法2001年湖北省日本血吸虫病抽样调查2210户家庭，其中有539例患有日本血吸虫病，分布在470个家庭。本研究针对该数据，采用负二项分布以及二项分布进行拟合，如果该数据服从负二项分布或不服从二项分布，则血吸虫病患病呈家庭聚集性。结果利用负二项分布和二项分布进行拟合，所得统计学检验P值分别为0．2801和0．0007，表明该数据服从负二项分布、不服从二项分布。结论血吸虫病患病呈家庭聚集性。     

消退素RvE1对日本血吸虫病所致肝损伤的保护作用

目的 通过检测日本血吸虫病肝损伤模型小鼠肝功能指标及有关细胞因子的表达水平,研究消退素RyE1对小鼠日本血吸虫病肝损伤的保护作用及其机制.方法 30只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、治疗组(RvE1)共3组,每组10只,用日本血吸虫尾蚴皮肤敷贴法感染小鼠,构建日本血吸虫病肝损伤模型.感染5周后,模型对照组小鼠每天每只单次尾静脉注射N.S.,治疗组小鼠每天每只单次尾静脉注射100 ng RyE1,上述各组均连续给药至感染第10周末.感染10周后,观察其肝脏组织形态,测定肝脏系数,ELISA检测血清丙氨酸氨基转氨酶(ala-nine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性;采用Real-Time PCR或Western Blot检测TNF-α mRNA和蛋白的表达变化.结果 感染10周后,模型组中小鼠的肝脏系数、血清ALT和AST活性分别为(84.9±10.3) mg/g, (331.60±49.21) U/L, (368.74±72.76) U/L,与模型对照组比较,RvE1治疗组对小鼠肝损伤有明显的修复作用,能降低日本血吸虫病所致肝损伤小鼠的肝脏系数(68.6±5.1)、血清ALT (97.82±21.66) U/L和AST (156.19±38.81) U/L活性,两者差异有统计学意义(P＜0.01);RyE1治疗组小鼠肝组织中促炎介质TNF-α的mRNA和蛋白表达较模型对照组有明显降低.结论 给予外源性RvE1可以通过抗炎作用,有较好的保肝作用,拮抗日本血吸虫病所致肝损伤.     

新型吡喹酮薄膜衣片治疗日本血吸虫病的副反应及疗效研究

目的 了解新型吡喹酮薄膜衣片治疗日本血吸虫病的副反应状况及治疗效果.方法 在湖北、江西、安徽血吸虫病流行区选择6～65岁的常住居民进行问卷调查、间接血凝免疫诊断试剂筛查,血检阳性者进行改良加藤法检查以确诊.对血检阳性者及部分自愿服药的正常人共计509名给服吡喹酮并调查药物的味道,对460例服药前无副反应相关症状的化疗对象随访副反应情况,对104例粪检阳性者在化疗后3个月进行疗效考核.结果 84.7%(144/170)的被调查者认为新型吡喹酮薄膜衣片没有味道或者很轻,而吡喹酮素片对照组有92.9%(315/339)的被调查者认为药物味道较重.在化疗后1～2 h,新型吡喹酮薄膜衣片化疗组副反应率为20.30%(27/133),吡喹酮素片对照组副反应率为83.18%(272/327),两化疗组间副反应率具有统计学意义(χ2=164.316,P<0.05).其中新型吡喹酮薄膜衣片化疗组在神经肌肉系统、消化系统、心血管系统的副反应率分别为15.79%(21/133)、9.77%(13/133)、2.26%(3/133),而吡喹酮素片对照组在神经肌肉系统、消化系统、心血管系统的副反应率分别为81.65%(267/327)、49.24%(161/327)、12.84%(42/327),3个系统的副反应率在两化疗组间均具有统计学意义(χ2神经肌肉系统=175.188,χ2消化系统=62.601,χ2心血管系统12.010,P值均<0.05);吡喹酮薄膜衣片化疗组、素片对照组过敏反应发生率分别为2.26%(3/133)、0.92%(3/327),两者之间无统计学意义(χ2=1.315,P=0.235).化疗后第2天吡喹酮薄膜衣片化疗组和素片对照组的副反应率分别下降为3.01%(4/133)、38.53%(126/327),两组间存在统计学意义(χ2=58.852,P<0.05).在化疗后2周新型吡喹酮薄膜衣片化疗组、素片对照组的副反应率均已分别下降为0.75%(1/133)、0.61%(2/327),两组间已无统计学意义(χ2=0.029,P=0.642).化疗后3个月新型吡喹酮薄膜衣片化疗组、素片对照组的粪检阴转率分别为84.91%(45/51)、82.135%(42/53),两组间无统计学意义(χ2=1.536,P=0.215).结论 新型吡喹酮薄膜衣片降低了味道及化疗对象的副反应发生率,其疗效与吡喹酮素片对照组等效.在进一步扩大现场验证的基础上,可在血吸虫病流行区推广使用.     

Use of circulating cathodic antigen strips for the diagnosis of urinary schistosomiasis

Rapid diagnostic tests are needed for the implementation and monitoring of national schistosomiasis control programmes. The field applicability of the circulating cathodic antigen (CCA) urine reagent strip for the diagnosis of Schistosoma haematobium infection was evaluated among 265 pre- and primary schoolchildren aged 2-19 years in a rural area of Zimbabwe. The CCA strip was compared with egg detection before and six weeks after treatment with praziquantel. Pre-treatment prevalence (overall 40.4%) and intensity of infection, as determined by egg counts, increased with age. CCA and parasitological results were significantly correlated (P<0.001), although concordance was slight (kappa=0.21). Discordant results were mainly attributable to CCA-positive, egg-negative individuals. Correlations and levels of agreement improved significantly with age (P<0.001, kappa=0.40) and intensity of infection (P<0.001). Praziquantel treatment led to 'cure' in 90.9% and 70.5% of children as measured by the egg detection and CCA methods, respectively. An arbitrary gold standard was constructed that included both CCA and egg detection results. Using this standard, the sensitivities of the CCA test were 88.2% and 95.8%, respectively, for pre- and post-treatment results. The improved version that is field applicable now has an acceptable role in the field diagnosis of S. haematobium.     

简捷—酶联免疫吸附试验检测血吸虫抗体试剂盒的应用研究

目的 证实简捷－酶联免疫吸附试验剂盒检测血吸虫病的特异率，灵敏度，交叉反应及现场应用价值。方法 采用该试剂盒检测正常人，急性，慢性，晚期血吸虫病，其他吸虫病人，以及血吸虫病不同汉地程度的居民。结果 该试剂盒的交叉反应为３３．７％，肝吸虫病为５．７％，姜片虫病无交叉反应。检测血吸虫病的阳性预测值，阴性预测值及诊断效率均在９５．０％以上。在血吸虫病轻，中，重度流行区的阳性检出率均显著地高于病原学检查。     

湖北省日本血吸虫病抗体检测试剂盒的质量评价

目的对湖北省研制的日本血吸虫病间接血凝试验(IHA)试剂盒的敏感性、特异性、稳定性等指标进行综合评价。方法利用已建立的日本血吸虫病人血清库和其它寄生虫阳性血清制备测试用质控血清,分别对IHA试剂盒的敏感性、特异性、稳定性等相关指标进行综合评价。结果 IHA试剂盒敏感性、特异性较高,分别为97.33%和97.00%,约登指数为0.94;与肺吸虫、华支睾吸虫、旋毛虫、囊虫病人血清的交叉反应率分别为6.67%、6.67%、33.33%和6.67%。正常保存条件下,试剂盒有效期内的稳定性良好。结论湖北省生产的血吸虫病间接血凝(IHA)试剂盒敏感性、特异性、稳定性均较好,适用于疫区大规模病人筛查。     

Development of a new assay for the diagnosis of schistosomiasis, using cercarial antigens

We have developed a new ELISA for detection of anti-schistosome antibodies using an extract from Schistosoma mansoni cercariae. We evaluated the new assay on serum samples sent to the Hospital for Tropical Diseases, Department of Clinical Parasitology, London, UK, by comparing it with our routinely used S. mansoni soluble egg antigen (SEA) assay. We also evaluated the new assay for cross-reactivity with a number of helminth and other infections. We demonstrate that the cercarial antigen assay is equivalent to the SEA assay for serodiagnosis of schistosomiasis in a non-endemic setting. The cercarial antigen preparation is more easily produced than SEA, and for this reason this assay may be preferred for routine clinical use and may be amenable to scaling up. Further assessment is needed before it can be recommended for use in an endemic area, as chronic disease and co-infection with other helminths are likely to be under-represented in our sample set.     

曲霉抗原双抗体夹心ELISA法特异性检测

目的 用2组曲霉单克隆抗体(mAbs)建立特异性识别不同种类曲霉抗原的检测方法。方法 采用天然烟曲霉抗原免疫,获得广谱针对曲霉抗原的单克隆抗体;采用重组烟曲霉抗原获得特异性针对烟曲霉抗原的单克隆抗体,用间接免疫荧光鉴定,并分别建立2种双抗体夹心ELISA法,对19种常见的环境和临床分离曲霉株、马尔尼菲氏青霉菌及念珠菌培养液进行检测。结果 间接免疫荧光显示,用天然烟曲霉抗原免疫获得的单克隆抗体(mAbs-1)可广谱识别多种曲霉分离株,而重组烟曲霉抗原获得的单克降抗体(mAbs-2)仅能特异性结合临床和环境分离的烟曲霉抗原。用mAbs-1建立的双抗体夹心ELISA法可检测19种常见曲霉株培养液;用特异性针对烟曲霉抗原单克降抗体(mAbs-2)建立的双抗体夹心ELISA法可特异性检测临床和环境分离株烟曲霉培养液;与其他曲霉株无交叉反应;2种双抗体夹心ELISA法与马尔尼菲氏青霉菌及念珠菌培养液均无交叉反应。结论 2种曲霉单克降抗体双抗体夹心ELISA法,除可广谱检测环境和临床分离曲霉株,还可以区分烟曲霉与其他曲霉,可作为监测环境、农产品、食品中的曲霉污染和早期诊断曲霉病的新技术手段。     

流感病毒M1单克隆抗体的制备及其生物学特征

目的 制备针对流感病毒基质蛋白M1的单克隆抗体(mAb),为研究流感病毒检测试剂盒提供实验材料.方法 以纯化的M1蛋白为免疫原,免疫Balb/c小鼠,将其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,筛选出分泌抗M1 mAb的杂交瘤细胞,注射小鼠腹腔获得M1 mAb,并用辣根过氧化物酶(HRP)标记M1 mAb.通过Western印迹法、ELISA、细胞感染免疫染色实验检测所获M1 mAb的作用和特性.结果 获得能稳定分泌抗流感病毒基质蛋白M1的杂交瘤细胞系,纯化腹水得到M1 mAb和HRP-M1 mAb.Western印迹法结果显示,M1 mAb和HRP-M1 mAb能与M1抗原及H1N1、H3N2亚型流感病毒的M1蛋白反应,是针对M1蛋白的mAb;利用ELISA方法研究M1 mAb和HRP-M1 mAb对M1抗原及流感病毒的检测作用,结果显示它们能检测H1N1和H3N2亚型的甲型流感病毒,而HRP-M1 mAb的检测能力比M1 mAb强;细胞免疫染色实验显示,M1 mAb能结合H1N1和H3N2亚型病毒感染的细胞.结论 针对M1蛋白的M1 mAb和HRP-M1 mAb已制备成功.它们能检测H1N1和H3N2亚型甲型流感病毒,有望应用于流感病毒诊断以及鉴别诊断试剂盒的研发.     

米酵菌酸单克隆抗体细胞株的建立

继制备米酵菌酸（ＢＡ）多克隆抗体以后，作者成功地运用免疫杂交瘤技术，获得了能分泌抗米酵菌酸的单克隆抗体细胞株１Ｆ７和２Ｈ９，其腹水效价可达１０－６，对ＢＡ的５０％有效抑制浓度为１０－４，两株细胞分泌抗体的亚型均为ＩｇＧ１型，纯化后获得ＢＡ－ＭｃＡｂ的ＩｇＧ浓度为１１ｇ／Ｌ     

A monoclonal antibody for the specific diagnosis of plague

A stable mouse-cell hybridoma was obtained that secretes an IgA monoclonal antibody reactive with the fraction 1 (F1) envelope antigen of Yersinia pestis. Titres of the antibody typically ranged from 1:32 768 to 1:65 536 in mouse ascitic fluids.