柴胡疏肝丸对糖尿病合并抑郁大鼠行为学表现及认知功能的影响

目的探讨柴胡舒肝丸对糖尿病合并抑郁大鼠行为学表现及认知功能的影响。方法 SPF级SD大鼠80只,按照随机表法分为模型组、盐酸氟西汀组、柴胡疏肝丸组和正常组,各20只。模型组和正常组给予等剂量蒸馏水灌胃,每日1次;盐酸氟西汀组给予盐酸氟西汀胶囊1. 8 mg/kg灌胃,每日1次;柴胡疏肝丸组给予柴胡舒肝丸1 ml/100 g灌胃,每日1次。连续灌胃28 d。采用Western印迹检测海马JNK、Bax和Bcl-2蛋白表达,采用强迫游泳实验和Openfield测试大鼠行为学表现,采用Morris水迷宫测试系统进行测试大鼠认知功能。结果与模型组比较,盐酸氟西汀组和柴胡疏肝丸组Bax和JNK mRNA表达降低而Bcl-2mRNA表达升高(P0. 05);柴胡疏肝丸组Bax和JNK mRNA表达低于盐酸氟西汀组而Bcl-2 mRNA表达明显高于盐酸氟西汀组(P0. 05)。与模型组比较,盐酸氟西汀组和柴胡疏肝丸组Bax和JNK蛋白表达明显降低而Bcl-2蛋白表达明显升高(P0. 05);柴胡疏肝丸组Bax和JNK蛋白表达明显低于盐酸氟西汀组而Bcl-2蛋白表达明显高于盐酸氟西汀组(P0. 05)。与模型组比较,盐酸氟西汀组和柴胡疏肝丸组自主活动次数明显增加而不动时间明显减少(P0. 05);柴胡疏肝丸组自主活动次数明显多于盐酸氟西汀组而不动时间明显少于盐酸氟西汀组(P0. 05)。与模型组比较,盐酸氟西汀组和柴胡疏肝丸组中心区域停留和穿越目标区次数明显增加而逃避潜伏期明显缩短(P0. 05);柴胡疏肝丸组中心区域停留和穿越目标区次数明显多于盐酸氟西汀组而逃避潜伏期明显短于盐酸氟西汀组(P0. 05)。结论柴胡舒肝丸可改善糖尿病并发抑郁症大鼠行为学表现和认知功能,与抑制海马神经元凋亡相关。     

白藜芦醇对慢性脑低灌注大鼠认知功能损害的保护作用

目的 观察白藜芦醇对慢性脑低灌注大鼠认知功能损害的影响,并探讨白藜芦醇抗氧化机制在其中的作用.方法 采用永久性双侧颈总动脉结扎术(2VO)制备慢性脑低灌注大鼠模型,健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、2VO组、2VO+白藜芦醇组.通过Morris水迷宫观察大鼠的空间学习及记忆功能,免疫组化检测皮质及海马CA1区4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)和8-羟化脱氧鸟苷(8-hydroxy-2′-deoxyguanosine,8-OHdG)表达的变化,以反应脂质和DNA的氧化性损伤.结果 2VO组大鼠第3～5天逃逸潜伏期分别为(42.1±5.4)s、(36.4±4.4)s、(30.4±4.0)s,与假手术组大鼠(25.1±3.3)s、(12.4±3.3)s、(8.1±3.4)s相比,逃逸潜伏期明显延长(q=10.91、14.54、14.07,均P＜0.01),2VO组大鼠目标象限探索时间(12.9±2.5)s,明显少于假手术组(18.9±2.2)s(q=6.47,P＜0.01);2VO+白藜芦醇组大鼠第3～5天逃逸潜伏期分别为(29.5±4.0)s、(25.6±4.3)s、(19.8±4.2)s,与2VO组大鼠(42.1±5.4)s、(36.4±4.4)s、(30.4±4.0)s比较,逃逸潜伏期缩短(q=7.71、6.22、6.37,均P＜0.01),2VO+白藜芦醇组大鼠目标象限探索时间(16.5±1.8)s,比2VO组大鼠(12.9±2.5)s延长(q=3.83,P＜0.05).2VO组大鼠皮质与海马CA1区的8-OHdG平均积分光密度值(IOD)分别为265.1±9.0和37.8±5.0,与假手术组168.2±6.0和24.0±4.0相比均增加(q=31.89、7.48,均P＜0.01);2VO+白藜芦醇组与2VO组相比,皮质与海马CA1区的8-OHdG平均IOD均降低,分别为195.1±7.0和26.0±4.3(q=23.03、6.49,均P＜0.01).结论 白藜芦醇能减轻大鼠慢性脑低灌注所致的血管性认知功能损害,其作用可能与抑制慢性脑低灌注后的氧化性损伤有关.     

尤瑞克林对大鼠缺血-再灌注后缓激肽受体B1和B2表达的影响

目的观察不同剂量尤瑞克林对大脑中动脉闭塞(MCAO)的缺血-再灌注(I/R) SD大鼠缓激肽受体B1(B1R)、缓激肽受体B2(B2R)表达的影响。方法应用改良后Zea Longa线栓方法建立SD大鼠右侧MCAO模型,缺血2 h时拔栓模拟缺血-再灌注,将制备成功的25只SD大鼠按随机抽样法分为假手术组、I/R模型组(I/R+等渗盐水组)、尤瑞克林低剂量治疗组(I/R+LDP组)、尤瑞克林中等剂量治疗组(I/R+MDP组)、尤瑞克林高剂量治疗组(I/R+HDP组),每组5只,术后30 min首次给予尤瑞克林(I/R+LDP组:3. 50×10~(-3)PNAU/kg; I/R+MDP组:8. 75×10~(-3)PNAU/kg; I/R+HDP组:17. 50×10~(-3)PNAU/kg)或等渗盐水尾静脉注射,连续注射7 d、每日定时注射1次,7 d后取材,运用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测梗死灶边缘区域B1R、B2R的mRNA相对表达水平,血管性血友病因子(v WF)免疫荧光测定梗死边界区域微血管密度。结果 (1) B1R mRNA表达:与I/R+等渗盐水组比较,I/R+LDP组、I/R+MDP组、I/R+HDP组B1R的mRNA表达水平均上调[(0. 34±0. 05)、(0. 35±0. 04)、(0. 47±0. 03)比(0. 23±0. 05),均P 0. 05];与I/R+LDP组及I/R+MDP组比较,I/R+HDP组B1 R的mRNA表达水平均上调(均P 0. 05)。(2) B2R mRNA表达:与假手术组比较,I/R+等渗盐水组B2R的mRNA表达水平上调[(0. 33±0. 01)比(0. 23±0. 02),P 0. 05]。与I/R+等渗盐水组比较,I/R+LDP组、I/R+MDP组、I/R+HDP组B2R的mRNA表达水平均上调[分别为(0. 49±0. 02)、(0. 52±0. 04)、(0. 71±0. 03),均P 0. 05];与I/R+LDP组及I/R+MDP组比较,I/R+HDP组B2 R的mRNA表达水平均上调(均P 0. 05)。(3)微血管密度:与假手术组比较,I/R+等渗盐水组的微血管计数明显增多[(169±6)比(74±12),P 0. 01];与I/R+等渗盐水组比较,I/R+LDP组、I/R+MDP组、I/R+HDP组的微血管计数均明显增多[分别为(240±9)、(252±9)、(349±17),均P 0. 01];与I/R+LDP组及I/R+MDP组比较,I/R+HDP组微血管计数均明显增多(均P 0. 01)。结论一定剂量的尤瑞克林上调MCAO大鼠B1R、B2R表达,发挥促血管再生的作用,且高剂量的尤瑞克林对血管新生作用效果更为明显。     

氟西汀对脑卒中后抑郁大鼠学习记忆能力和氧化应激反应的影响

目的探讨氟西汀对脑卒中后抑郁大鼠学习记忆能力和氧化应激反应的影响。方法 SPF级SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、阳性对照组、试验组,每组10只。正常组给予等剂量生理盐水灌胃,每天1次;模型组于造模成功后给予等剂量生理盐水灌胃,每天1次;阳性对照组给予盐酸文拉法辛胶囊10 mg/kg灌胃,每天1次;试验组给予大鼠盐酸氟西汀胶囊10 mg/kg,每天1次。采用开野试验检测大鼠自主活动次数,采用Morris水迷宫试验检测大鼠逃避潜伏期和空间探索时间,采用比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果与正常组比较,模型组、阳性对照组和试验组大鼠自主活动次数明显降低(P0. 05);与模型组比较,阳性对照组和试验组大鼠自主活动次数明显增加(P0. 05);试验组大鼠自主活动次数明显多于阳性对照组(P0. 05),差异均有统计学意义。与正常组比较,模型组、阳性对照组和试验组大鼠逃避潜伏期明显延长(P0. 05);与模型组比较,阳性对照组和试验组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P0. 05);试验组大鼠逃避潜伏期明显低于阳性对照组(P0. 05),差异均有统计学意义。与正常组比较,模型组、阳性对照组和试验组大鼠空间探索时间明显降低(P0. 05);与模型组比较,阳性对照组和试验组大鼠空间探索时间明显延长(P0. 05);试验组大鼠空间探索时间明显长于阳性对照组(P0. 05)。与正常组比较,模型组、阳性对照组和试验组海马组织内SOD水平明显降低,而MDA水平明显升高(P0. 05);与模型组比较,阳性对照组和试验组海马组织内SOD水平明显升高,而MDA水平对照下降(P0. 05);试验组海马组织内SOD水平明显高于阳性对照组,而MDA水平低于阳性对照组(P0. 05),差异均有统计学意义。结论氟西汀可改善脑卒中后抑郁大鼠学习记忆能力,认为其机制可能与降低脑内MDA水平和增加SOD水平相关。     

丹参对大鼠心肌缺血再灌注损伤后心律失常的影响

目的探讨丹参对大鼠心肌缺血再灌注损伤后心律失常的影响。方法将45只大鼠随机分为假手术组、模型组和丹参组,每组15只。假手术组大鼠心脏仅穿结扎线不进行结扎;模型组和丹参组建立心肌缺血再灌注损伤模型,丹参组大鼠每天给予注射用丹参(250 mg/kg)腹腔注射,假手术组和模型组大鼠给予等量生理盐水腹腔注射,共14 d。记录各组大鼠心律失常情况,测定心肌梗死范围和心肌缺血范围,测定心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,测定血清白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果丹参组大鼠室性心动过速、心室纤颤、房室传导阻滞的发生率均低于模型组(P0. 05),丹参组心律失常出现时间长于模型组(P0. 05),心律失常持续时间短于模型组(P0. 05)。丹参组心肌梗死范围和心肌缺血范围均小于模型组(P0. 05)。模型组和丹参组大鼠心肌组织中MDA和LDH含量高于假手术组(P0. 05),丹参组大鼠心肌组织中MDA和LDH含量低于模型组(P0. 05),模型组和丹参组大鼠心肌组织中SOD含量低于假手术组(P0. 05),丹参组大鼠心肌组织中SOD含量高于模型组(P0. 05)。模型组和丹参组IL-6、IL-10、TNF-α水平均高于假手术组(P0. 05),丹参组IL-6、TNF-α水平均低于模型组(P0. 05),丹参组IL-10水平高于模型组(P0. 05)。结论丹参对大鼠心机缺血再灌注损伤后心律失常有保护作用,其机制可能与丹参可降低心肌组织中MDA和LDH含量、提高心肌组织中SOD含量、抑制炎症反应有关。     

长春西汀对慢性脑缺血大鼠神经功能保护机制的研究

目的探讨长春西汀对慢性脑缺血(CCH)大鼠的神经功能保护机制。方法选取健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为假手术组、模型组及长春西汀组,使用双侧颈总动脉永久性阻断法(2VO)建立慢性脑缺血模型,依据随机数字表法分为假手术组、模型组及长春西汀组,每组10只。长春西汀组于2VO术后24 h内给予长春西汀10 mg/kg腹腔内注射,假手术组、模型组给予等量生理盐水注射,共21 d。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组大鼠脑组织匀浆中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;使用免疫组化法检测大鼠海马区组织中勿动蛋白(Nogo-A)、少突胶质髓鞘糖蛋白(OMgp)、髓鞘相关糖蛋白(MAG)表达情况;采用免疫组化法检测各组大鼠海马CA1区脑源性神经生长因子(BDNF)及血管内皮生长因子(VEGF)表达。结果模型组及长春西汀组脑组织匀浆中IL-1β、TNF-α含量均高于假手术组(P0.05),IL-10含量均低于假手术组(P0.05);长春西汀组大鼠脑组织匀浆中IL-1β、TNF-α含量低于模型组(P0.05),IL-10含量则高于模型组(P0.05);假手术组及长春西汀组大鼠海马组织中Nogo-A、OMgp、MAG表达均低于模型组(P0.05);长春西汀组大鼠海马组织中Nogo-A、OMgp、MAG表达高于假手术组(P0.05);假手术组及长春西汀组大鼠海马CA1区BDNF及VEGF表达均高于模型组(P0.05);长春西汀组大鼠海马CA1区BDNF及VEGF表达低于假手术组(P0.05)。结论长春西汀通过抑制慢性脑缺血大鼠炎性反应及大脑海马区Nogo-A、OMgp、MAG的表达,促进大鼠海马CA1区BDNF及VEGF表达,从而发挥神经保护作用。     

尼莫地平对蛛网膜下腔出血大鼠海马CA1区自噬的影响

目的探讨尼莫地平对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠海马CA1区自噬的影响。方法雄性Sprague-Dawley大鼠48只,按随机数字表法分为Sham组(假手术组,12只)、SAH组(12只)、NMDP组(SAH+尼莫地平,12只)、3-MA组(SAH+尼莫地平+3-甲基腺嘌呤,12只)。颈内动脉刺破法制备SAH动物模型。NMDP组造模成功后30 min腹腔注射尼莫地平。3-MA组于造模前1 h腹腔注射3-MA,且造模后30 min腹腔注射尼莫地平。干预24 h后给予穿梭箱实验观察大鼠神经功能,随后取海马CA1区脑组织进行苏木素-伊红染色观察细胞形态,免疫组化及Western blotting观察自噬相关蛋白[Beclin-1及微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)]的表达。结果与Sham组比较,SAH组大鼠躲避反应次数减少[(17. 9±2. 6)次比(26. 3±2. 7)次],躲避反应时间延长[(10. 0±3. 3) s比(3. 5±1. 0) s],海马CA1区正常形态神经细胞数目减少[(72±28)个比(118±27)个,P 0. 05],Beclin-1及LC3-Ⅱ阳性细胞增多[分别为(39±9)个比(22±11)个、(39±12)个比(12±5)个],Beclin-1蛋白表达水平升高(0. 59±0. 12比0. 36±0. 03),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率上升(0. 51±0. 13比0. 20±0. 05),差异均有统计学意义(均P 0. 05);与SAH组比较,NMDP组大鼠躲避反应次数[(22. 3±2. 3)次]增多,躲避反应时间[(5. 0±1. 5) s]减少,海马CA1区正常神经细胞数目[(86±20)个]增多,Beclin-1及LC3-Ⅱ阳性细胞[分别为(50±11)、(48±11)个]增多,Beclin-1蛋白表达水平(0. 97±0. 24)增高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率(0. 87±0. 12)上升,差异均有统计学意义(均P 0. 05),而3-MA组大鼠各项差异均无统计学意义(均P0. 05)。结论尼莫地平可增强自噬的激活,减少海马CA1区神经细胞损伤,改善大鼠的神经功能。     

右归丸对膝骨关节炎大鼠PI3K/Akt/NF-κB信号通路的影响

目的探讨右归丸对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B (protein kinase B,Akt)/核转录因子kappa B (nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路的影响。方法 SPF级SD大鼠60只,采用改良Hulth法复制膝骨关节炎大鼠模型,将大鼠分为假手术组,模型组,硫酸氨基葡萄糖组,右归丸高、中、低剂量组,每组10只,造模成功6周后给予药物干预,右归丸高、中、低剂量组按4. 8、2. 4、1. 2 g/kg灌胃治疗,硫酸氨基葡萄糖组给予硫酸氨基葡萄糖0. 17 g/kg灌胃治疗,假手术组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃,干预8周后股动脉采血处死大鼠。HE法观察各组大鼠软骨组织病理改变并进行Mankin评分,免疫组化法检测各组大鼠软骨组织基质金属蛋白酶-14 (matrix metalloproteinase-14,MMP-14)的蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测各组大鼠软骨组织白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)、MMP-14 mRNA的基因表达水平,Western blot法检测各组大鼠软骨组织PI3K、磷酸化Akt (phosphorylated protein kinase B,p Akt)、MMP-14和NF-κB的蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠Mankin评分(4. 92±0. 539)、IL-6 (4. 66±0. 02)、MMP-14 (2-ΔΔCt值5. 70±0. 02、评分结果 4. 27±0. 15、蛋白灰度值0. 89±0. 03)、PI3K蛋白灰度值(1. 19±0. 09)、p Akt蛋白灰度值(2. 48±0. 22)、NF-κB(蛋白灰度值2. 14±0. 17)等指标均明显升高(P0. 01)。与模型组相比,右归丸高剂量组大鼠Mankin评分(3. 05±0. 253)、右归丸中、高剂量组MMP-14 (2-ΔΔCt值3. 47±0. 05、1. 08±0. 01、评分结果 3. 07±0. 37、0. 76±0. 12、蛋白灰度值0. 59±0. 03、0. 28±0. 07)和p Akt (蛋白灰度值1. 51±0. 13,1. 30±0. 07)等指标均明显降低,右归丸各干预组IL-6 (2-ΔΔCt值2. 27±0. 09、1. 65±0. 05、1. 15±0. 04)、PI3K蛋白灰度值(0. 67±0. 11、0. 62±0. 11、0. 45±0. 05)和NF-κB蛋白灰度值(0. 73±0. 16、0. 65±0. 19、0. 62±0. 13)等指标均明显降低(P0. 05或P0. 01)。结论右归丸通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路中PI3K、p Akt、MMP-14和IL-6的表达达到治疗KOA的目的。     

舒肝颗粒对抑郁模型大鼠海马神经元凋亡、脑组织caspase-3蛋白及外周血中细胞因子水平的影响

目的探讨舒肝颗粒对抑郁模型大鼠海马神经元凋亡、脑组织caspase-3蛋白及外周血中细胞因子水平的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、舒肝组和氟西汀组,每组10只,慢性轻度不可预见性应激和孤养方式制备抑郁模型。结果 21 d后模型组、舒肝组和氟西汀组行为学指标明显低于对照组,而舒肝组和氟西汀组明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。模型组、舒肝组和氟西汀组海马神经元凋亡数和脑组织caspase-3蛋白表达明显高于对照组,而舒肝组和氟西汀组低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。模型组、舒肝组和氟西汀组外周血TNF-α、IL-2和IL-8水平明显高于对照组,而舒肝组和氟西汀组低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论舒肝颗粒可改善抑郁模型大鼠的行为学,修复神经元细胞损伤,降低脑组织caspase-3蛋白和外周血中细胞因子表达。     

抗抑郁药对胰腺癌移植瘤模型的进食及肿瘤生长的影响

目的 探讨米氮平和氟西汀对胰腺癌皮下移植瘤裸鼠进食量、体重和肿瘤生长的影响.方法 建立21只人胰腺癌细胞SW1990的裸鼠皮下移植瘤动物模型,按完全随机法分为对照组、米氮平组和氟西汀组,各7只.建模后1 d开始分别给各组生理盐水、米氮平10mg·kg-1·d-1和氟西汀1Omg·kg-1·d-1灌胃,每天1次,持续42 d.比较3组裸鼠进食量、体重和肿瘤体积的变化.结果 3组胰腺癌移植瘤体积无明显差异.第2周米氮平组进食量为(5.03±0.16)g,显著较其他2组多,第4周体重为(16.00±1.41)g,较其他2组下降少(P<0.05);氟西汀组从第3周起进食量较对照组显著减少,第6周的体重也较对照组显著下降(P<0.05).在第6周,对照组、米氮平组和氟西汀组的日进食量分别为(3.54±0.13)g、(4.19±0.16)g和(3.34±0.13)g,体重分别为(13.71±1.11)g、(14.86±1.68)g和(12.57±1.51)g.结论 米氮平在改善荷瘤裸鼠进食量和减缓体重下降方面优于氟西汀,但两者对肿瘤生长均无明显影响.     

慢性氟中毒大鼠脑组织细胞外调节蛋白激酶表达及大鼠学习记忆能力的变化

目的 观察慢性氟中毒大鼠脑组织中分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导系统细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)的表达与活性,及其与学习记忆能力改变之间的关系,从而进一步探讨氟中毒神经系统损害的发病机制.方法 72只SD大鼠按性别和体质量随机分为3组.每组24只.对照组:自由饮用自来水,含氟量低于0.5 mg/L;低剂量染氟组:饮水含氟量为5.0 mg/L;高剂量染氟组:饮水含氟量为50.0 mg/L.实验6个月后.取大鼠脑组织,用蛋白印迹方法检测细胞外ERK1/2的蛋白表达与活性;用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)方法测定ERK1/2的mRNA水平;用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力改变.结果 对照组、低、高剂量染氟组的ERK1/2蛋白水平分别为0.94±0.10、1.25±0.02、1.95±0.07,任意两组间比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);对照组、低、高剂量染氟组的phospho-ERK1/2蛋白水平分别为0.73±0.08、0.77±0.07、1.28±0.11,任意两组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05);低、高剂量染氟组的ERK1/2活化率[(68.4±3.8)%、(64.1±3.2)%]低于对照组[(82.3±10.7)%],组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05);在第2、3、5、6天,低剂量染氟组的大鼠逃避潜伏期[(46.0±8.0)、(24.0±2.7)、(8.9±5.3)、(7.4±4.1)s]长于对照组[(39.3±6.9)、(19.1±9.1)、(8.3±3.4)、(4.8±2.7)s],组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05),高剂量染氟组的大鼠逃避潜伏期[(36.9±16.8)、(37.7±12.9)、(19.7±7.6)、(12.2±5.7)s]也长于对照组(P＜0.05),第3、5、6天,高剂量染氟组的大鼠逃避潜伏期长于低剂量染氟组(P＜0.05);低剂量组、高剂量染氟组的大鼠第1次穿越平台位置时间[(1.17±0.75),(4.18±1.10)s]长干对照组[(5.89±0.56)s],组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05),低、高剂量染氟组的大鼠在原平台所在象限逗留时间[(17.05±4.25)、(18.20±4.57)s]短于对照组[(25.37±5.65)s],组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05);大鼠脑组织中ERK1/2的活化率与空间探索实验第1次到达平台区域时间呈正相关(r=0.364,P＜0.05).与第6天定向航行实验找到平台时间呈正相关(r=0.497,P＜0.05).结论 慢性氟中毒导致大鼠脑组织中ERK1/2蛋白表达水平及活性改变,与慢性氟中毒大鼠学习记忆能力的降低有一定关系.     

氟桂利嗪对高血压大鼠脑缺血再灌注后HSP70表达的影响

目的探讨高血压大鼠急性脑缺血再灌注后氟桂利嗪对热休克蛋白70(HSP70)表达的影响.方法将大鼠用双肾动脉狭窄术制成高血压大鼠模型,喂养2个月.随机分为氟桂利嗪组、缺血再灌注组和假手术组.除假手术组大鼠外,其他大鼠均制成大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,MCAO时间均为2小时,再灌注时间为1天.经免疫组化染色后用病理图像分析仪测出HSP70阳性细胞数,并计算阳性细胞率.比较三组HSP70阳性细胞率.结果氟桂利嗪组HSP70表达高于缺血再灌注组(P＜0.05).结论氟桂利嗪能促进HSP70表达,对缺血再灌注引起的受损脑组织起保护作用.     

异氟醚预处理通过上调海马 AMPA 受体GluR1亚基表达改善局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠学习记忆功能

目的：探讨异氟醚预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠学习记忆的影响及其可能机制。方法36只雄性成年Sprague-Daw ley大鼠,采用随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注组和异氟醚预处理组,每组12只。采用改良线栓法制作大脑中动脉闭塞（ middle cerebral artery occlusion, MCAO）脑缺血再灌注模型。异氟醚预处理组每天吸入1.5％异氟醚1 h,连续5 d,末次预处理后24 h制作MCAO模型。 MCAO后24 h时采用2,3,5-氯化二苯四氮唑染色检测脑梗死体积;MCAO后1、3、7和14 d时进行改良神经功能缺损程度评分（modified Neurological Severity Score, mNSS ）;MCAO后9 d时采用水迷宫实验评价大鼠学习记忆;14 d时采用蛋白质印迹法检测缺血侧海马组织谷氨酸受体1（glutamate receptor 1, GluR1）蛋白表达水平。结果假手术组大鼠未见明显梗死灶,异氟醚预处理组大鼠梗死体积较脑缺血再灌注组显著缩小[（26.383±3.128）％对（19.107±1.661）％;P<0.05]。假手术组未见神经功能缺损（0分）,异氟醚预处理组MCAO 后1、3、7和14 d时mNSS评分较缺血再灌注组均显著降低[1 d：（9.000±1.195）分对（11.500±1.414）分;3 d：（6.625±1.407）分对（6.625±1.407）分;7 d：（5.875±0.707）分对（7.375±1.407）分;14 d：（3.375±1.187）分对（5.125±1.246）分;P均＜0.05]。水迷宫实验显示,异氟醚预处理组MCAO 后1~5 d时逃避潜伏期分别为（95.992±15.734） s、（70.949±14.708） s、（39.660±7.413） s、（22.692±5.778） s和（14.906±4.336）s,显著短于缺血再灌注组的（103.008±11.654）s、（94.705±14.709）s、（65.716±10.155）s、（35.240±8.553）s和（22.890±10.381）s（P均<0.05）。异氟醚预处理组穿越平台次数和目标象限停留时间百分比为（4.556±1.333）次和（33.014±5.223）％,显著多于和高于脑缺血再灌注组的（2.889±1.536）次和（21.978±6.697）％（P均＜0.01）。假手术组、脑缺血再灌注组和异氟醚预处理组缺血侧海马GluR1蛋白水平分别为0.871±0.153、0.456±0.130和0.689±0.126,3组间存在显著性差异（ F=18.329,P<0.001）,异氟醚预处理组显著高于缺血再灌注组（ P<0.05）。结论异氟醚预处理可改善脑缺血再灌注大鼠的学习记忆,其机制可能与上调海马组织G luR1表达有关。     

燃煤污染型氟中毒大鼠学习记忆能力及胆碱酯酶活性改变

目的 观察燃煤污染型氟中毒大鼠学习记忆能力的变化,探讨其发生机制.方法 健康SD大鼠48只,按染氟剂量分为对照、低氟、高氟3组.低氟组、高氟组大鼠以燃煤型地方病氟中毒重病区燃煤烘烤的当地玉米为主要饲料,复制氟中毒大鼠模型,实验期为3、6个月,各8只大鼠.实验结束时用Morris水迷宫方法检测大鼠行为学变化,并用比色法测定脑组织乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶活性.结果 染氟剂量对逃避潜伏期时间、第7天穿过平台次数、逗留平台象限时间有明显影响(F值分别为29.29、6.47、6.50,P均<0.01):染氟时间对第7天穿过平台次数和逗留平台象限时间有明显影响(F值分别为16.11、45.59,P均<0.01);染氟剂量和时间对第7天穿过平台次数和逗留平台象限时间有交互作用(F值分别为4.67、5.68,P<0.05或<0.01).3个月时,高氟组大鼠逃避潜伏期时间[(14.71±4.85)s]较对照组[(9.28±4.22)s]明显增加(P<0.05);6个月时,低氟组、高氟组大鼠逃避潜伏期时间[(12.42±8.03)、(17.48±8.05)s]较对照组[(7.04±3.29)s]延长(P均<0.05),高氟组第7天穿过平台次数[(1.62±0.87)次]和逗留平台象限时间[(16.70±5.02)s]较对照组[(3.53±1.67)次、(23.33±5.35)s]降低(P均<0.05).染氟剂量对乙酰胆碱酯酶与丁酰胆碱酯酶活性均有明显影响(F值分别为12.83、13.27,P均<0.01);染氟时间对丁酰胆碱酯酶活性有明显影响(F=16.26,P<0.01).3个月时,低氟组丁酰胆碱酯酶活性[(0.55±0.12)kU/g]明显低于对照组[(0.73±0.10)kU/g,P<0.05],高氟组乙酰胆碱酯酶[(0.62±0.42)kU/g]和丁酰胆碱酯酶活性[(0.58±0.10)kU/g]均明显低于对照组[(1.41±0.52)、(0.73±0.10)kU/g,P均<0.05].胆碱酯酶活性与逃避潜伏期时间呈负相关(r=-0.68,P<0.01),胆碱酯酶活性与逗留平台象限时间呈正相关(r=0.57,P<0.01).结论 燃煤污染型慢性氟中毒大鼠学习记忆能力减退,可能与脑组织胆碱酯酶活性下降有关,二者间有量效关系.     

吸烟对大鼠局灶性脑缺血后Caspase-3表达及细胞凋亡的影响

目的探讨吸烟对Wistar大鼠局灶性脑缺血半暗带区半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达活性变化及细胞凋亡的影响。方法将经过筛选的60只健康雄性Wistar大鼠,按照随机平均原则分为四组:假手术组、缺血组、吸烟组以及吸烟+缺血组,其中缺血对照组和假手术组的Wistar大鼠不吸烟,吸烟组和吸烟+缺血组的Wistar大鼠给予连续吸烟12 w的干预措施,具体为20支/d。12 w后,缺血组和吸烟+缺血组采用Zea Longa法制作局灶性脑缺血大鼠模型(MCAO)。四氮唑红(TTC)染色确定脑缺血半暗带位置,原位细胞凋亡检测(TUNEL)法检测细胞凋亡,Western印迹观察Caspase-3表达和活性。结果 TTC染色证实缺血半暗带位于大脑矢状裂至外侧裂上1/3的皮质组织;假手术组、缺血组、吸烟组以及吸烟+缺血组的凋亡细胞数分别为2.13±0.17、17.07±2.92、20.65±3.26、44.92±4.67;Caspase-3前体及其切割片段含量相对灰度值为前体(0、23.36±3.21、31.72±2.96、70.15±4.85)、切割片段(0、10.35±1.39、17.93±2.31、36.27±5.24)。与假手术组相比,吸烟组、缺血对照组和吸烟+缺血组缺血半暗带内凋亡细胞数、Caspase-3表达及活性均明显增加(P<0.05),且吸烟+缺血组二者表达明显增强,高于缺血对照组和吸烟组(P<0.05)。结论吸烟可加重脑缺血损伤诱导的细胞凋亡,具有加速神经细胞坏死作用,其作用机制可能与增强Caspase-3表达及活性相关。     

黄芪多糖对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的研究黄芪多糖对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及可能机制。方法选取健康成年SD大鼠24只,随机分为假手术组(8只)、缺血再灌注损伤组(8只,模型组)与黄芪多糖50 mg/ml灌注液治疗组(8只)。结扎大鼠左冠状前降支制备心肌缺血再灌注模型。测定三组心肌损伤指标肌酸激酶(CK)、心肌钙蛋白-Ⅰ(TNI),比较三组超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化脂质(LPO)、氧自由基(OFR),并应用多导生理记录仪观察三组大鼠缺血前与再灌注25 min后主动脉压(AP),将左室内压信号放大10倍,读取左室舒张末期压(LVEDP),计算每搏量(SV)、心脏指数(CI)、每搏指数(SI)与等容舒张期心室内压下降的时间常数(T值)。结果模型组与治疗组CK、TNI均显著高于假手术组;治疗组显著低于模型组。模型组与治疗组SOD均显著低于假手术组,治疗组显著高于模型组;模型组与治疗组LPO、OFR均显著高于假手术组(P0. 05);治疗组显著低于模型组。缺血前三组心脏功能指标差异均无统计学意义(P0. 05),再灌注25 min后假手术组各个心脏功能指标除LVEDP外均与缺血前相比差异无统计学意义(P0. 05);模型组与治疗组AP、SV、CI、SI均显著低于假手术组,而T值显著高于假手术组;治疗组AP、SV、CI、SI均显著高于模型组,LVDEP、T值显著低于模型组(P0. 05)。结论黄芪多糖具有显著改善大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用,其机制可能与抗氧自由基、降低心肌钙含量以及减轻心肌舒张功能受损有关。     

乙醇对脑缺血再灌注大鼠海马凋亡诱导因子和胱天蛋白酶-3表达的影响

目的 探讨乙醇对脑缺血再灌注大鼠海马区凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)和胱天蛋白酶-3表达的影响.方法 68只健康成年雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组(4只)、生理盐水对照组以及小剂量(1.0 g/kg)、中剂量(1.5 g/kg)和大剂量(2.0g/kg)乙醇组,生理盐水对照组和各剂量乙醇组再分别按干预时间点分为缺血再灌注0h、1h、2h和3h亚组(每组4只).采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.各剂量乙醇组和生理盐水对照组在缺血2h再灌注0h、1h、2h和3h时腹腔注射相应剂量乙醇或等体积生理盐水.脑缺血2h再灌注24 h时采用行为学评分评价大鼠神经功能缺损.采用免疫组织化学法检测脑缺血2h再灌注24h时缺血侧海马区AIF和胱天蛋白酶-3表达.结果 行为学评价显示,假手术组神经功能缺损评分均为0分;不同剂量乙醇组神经功能缺损评分均显著性低于相同干预时间点的生理盐水对照组(P均=0.000),且不同剂量乙醇组相同干预时间点之间均存在显著性差异(P均=0.000),大剂量乙醇组均最低;相同剂量乙醇组不同干预时间点之间无显著性差异(P均＞0.05).免疫组织化学显示,假手术组AIF和胱天蛋白酶-3阳性细胞数量分别为(17.21 ±2.86)个和(20.60 ±4.39)个,均显著性少于缺血再灌注0h时的生理盐水对照组和各剂量乙醇组(P均=0.000);不同剂量乙醇组海马区AIF和胱天蛋白酶-3阳性细胞数量均显著性少于相同干预时间点的生理盐水对照组(P均=0.000),且不同剂量乙醇组相同干预时间点之间均存在显著性差异(P均=0.000),大剂量乙醇组均最少;相同剂量乙醇组不同干预时间点之间均无显著性差异(P均＞0.05).结论 乙醇对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织具有保护作用,其机制可能与抑制AIF和胱天蛋白酶-3表达有关.     

慢性氯化钴处理对Caspase-3凋亡基因在糖尿病大鼠心肌梗死区表达的影响

目的:探讨慢性氯化钴处理对GK糖尿病大鼠血糖及心肌细胞凋亡的影响。方法:应用体重200~250g的雄性GK糖尿病大鼠及其对照雄性Wistar大鼠,制作大鼠在体心梗模型,制作前测量血糖,手术成功后大鼠被分为六组:Wistar假手术组、Wistar心梗组、Wistar心梗+氯化钴组、GK假手术组、GK心梗组和GK心梗+氯化钴组,每组至少存活6只。3周后,测量血糖,剪取心脏,检测缺血坏死区Caspase-3凋亡基因的表达。结果:(1)术后3周,与GK假手术组及心梗组相比,GK心梗+氯化钴处理组血糖降低[(27.73±2.58)mmol/L、(27.87±3.18)mmol/L比(16.3±2.15)mmol/L],P均<0.05;(2)与GK心梗组相比,GK心梗+氯化钴处理组Caspase-3光密度值[(0.84±0.03)比(0.70±0.03)]及mRNA表达[(0.64±0.03)比(0.52±0.03)]显著减少,P均<0.05;(3)Wistar心梗组和Wistar心梗+氯化钴组血糖、Caspase-3光密度值及mRNA表达未见明显差异(P均>0.05)。结论:慢性氯化钴处理可降低GK糖尿病大鼠血糖,减少Caspase-3凋亡基因在缺血坏死区的表达。     

氟西汀对抑郁模型大鼠肠道菌群代谢多样性的影响

背景:研究表明肠道菌群与抑郁的发生、发展密切相关,经典抗抑郁药氟西汀对肠道菌群的调控机制尚不明确.目的:探讨氟西汀调控抑郁模型大鼠肠道菌群结构和代谢多样性的机制.方法:将30只SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组,采用慢性不可预知温和应激(CUMS)联合孤养建立抑郁大鼠模型,氟西汀组给予盐酸氟西汀分散片3.17 m...     

亚低温通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路对肝缺血再灌注损伤大鼠模型的保护作用

目的探讨亚低温预处理肝缺血再灌注损伤(HIRI)大鼠模型的保护作用机理。方法将40只SD大鼠分为4组:假手术(Sham)组、HIRI组、亚低温处理(MH)组和MH+LY294002处理(MH+LY)组,每组10只,分别于肝缺血再灌注3、6、12、24 h后收集大鼠的血清及肝组织标本。采用Western Blot检测大鼠肝组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt,Ser308)蛋白的表达水平。采用TUNEL法和Western Blot检测分析肝组织中细胞凋亡和凋亡相关蛋白的表达水平。采用ELISA试剂盒检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。采用全自动生化分析仪检测大鼠血清ALT、AST活性。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果 HIRI组p-PI3K、p-Akt的相对表达水平明显低于Sham组,差异均有统计学意义(q值分别为5. 217、5. 456,P值均0. 01);经亚低温处理后大鼠肝组织中p-PI3K、p-Akt的相对表达水平明显高于HIRI组,差异均有统计学意义(q值分别为10. 434、14. 116,P值均0. 01)。HIRI组、MH组和MH+LY组大鼠再灌注后3、6、12、24 h的血清AST、ALT活性明显高于Sham组,差异均有统计学意义(P值均0. 001)。TUNEL染色结果显示,HIRI组大鼠的细胞凋亡百分比[(42. 25±3. 50)%]明显高于Sham组[(3. 21±0. 5)%],差异均有统计学意义(q=10. 187,P 0. 01);相比于HIRI组,MH组明显下调了细胞凋亡百分比(12. 42±1. 3)%,差异有统计学意义(q=7. 784,P 0. 01),且HIRI组与MH+LY组的细胞凋亡百分比[(38. 19±2. 8)%]比较差异无统计学意义(q=1. 059,P 0. 05)。Western Blot检测结果显示,与Sham组相比,HIRI组中抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显下调,差异有统计学意义(q=2. 101,P 0. 05),促凋亡蛋白Bax、fas和fasl表达明显上调,差异均有统计学意义(q值分别为11. 016、4. 735、10. 201,P值均0. 01),亚低温处理之后可明显下调HIRI对凋亡相关蛋白的调控作用。氧化指标检测结果显示,HIRI组、MH组和MH+LY组大鼠肝组织中SOD、GSH-Px的表达水平均明显低于Sham组,差异均有统计学意义(P值均0. 05),而MDA在HIRI组、MH组和MH+LY组大鼠肝组织中的表达水平均明显高于Sham组,差异均有统计学意义(P值均0. 05); MH组大鼠肝组织中SOD、GSH-Px的表达水平明显高于HIRI组,差异均有统计学意义(q值分别为2. 894、2. 731,P值均0. 05),但MDA的表达水平明显低于HIRI组,差异有统计学意义(q=5. 888,P 0. 05)。此外,亚低温+LY294002处理明显下调了MH组对肝组织中SOD、MDA和GSH-Px表达的调控作用,差异均有统计学意义(q值分别为2. 999、2. 944、2. 620,P值均0. 05)。结论亚低温对HIRI大鼠具有保护作用,其机制可能是通过激活PI3K/Akt通路发挥下调肝细胞凋亡和增强体内抗氧化作用。