不同剂量香烟烟雾提取物对阴茎海绵体NOS活性和Cx43蛋白的影响

目的:探讨不同剂量的香烟烟雾提取物对雄性大鼠勃起功能的影响,进一步研究吸烟导致ED的发病机制。方法:75只健康雄性SD大鼠(8周龄),随机分为5组(15只/组)。A组为对照组;B组为皮下注射二甲基亚砜(DMSO)组;C组为皮下注射香烟烟雾提取物(CSE)低剂量组;D组为皮下注射CSE中剂量组;E组为皮下注射CSE高剂量组。应用SD雄性大鼠建立皮下注射CSE模型60 d后,经皮下注射阿朴吗啡(APO)后观察大鼠阴茎勃起情况,处死大鼠取阴茎海绵体组织。一部分标本采用激光共聚焦扫描显微镜方法检测缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达;另一部分标本采用比色法测定大鼠阴茎海绵体组织中NOS活性。结果:不同剂量CSE组阴茎勃起次数、阴茎海绵体组织NOS活性和海绵体平滑肌中Cx43表达与DMSO组和对照组比较均明显减少(P<0.05)。实验组中,阴茎勃起次数、阴茎海绵体组织NOS活性和Cx43表达均随着CSE剂量的增加而减少。DMSO组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CSE使阴茎海绵体组织NOS活性明显降低、海绵体平滑肌中Cx43蛋白表达明显减少并且严重影响阴茎勃起功能,并且CSE剂量越大,其影响越明显。提示,Cx43蛋白表达下调、NOS活性降低可能是CSE导致ED的发病机制之一。     

人参皂甙对去势大鼠阴茎海绵体组织NO含量与细胞凋亡的影响

目的研究人参皂甙对去势大鼠阴茎海绵体组织细胞凋亡、NO含量的影响,探讨人参皂甙壮阳功效的可能机制。方法40只成年雄性大鼠随机分为去势组、对照组及不同剂量(25mg/kg、100mg/kg)人参皂甙组共4组,1周后取阴茎海绵体,放免法检测血清睾酮含量(ng/ml),全自动生化分析仪比色法测定海绵体NO含量(μg/g),末端脱氧核糖核酸转移酶介导的duTP缺口末端标记法测定细胞凋亡。结果对照组血清睾酮水平浓度为(1.51±0.86),在去势组、人参皂甙治疗组(25mg/kg、100/mg/kg)均未测到。去势组阴茎海绵体NO浓度(14.45±2.38)较对照组(39.8±3.28)显著降低(P<0.01),25mg/kg人参皂甙组阴茎海绵体NO水平(16.02±2.67)与去势组(14.45±2.38)接近(P>0.05),100mg/kg人参皂甙组NO水平(37.88±7.06)较去势组细胞凋亡数(14.45±2.38)明显升高(P<0.05),与对照组(39.8±3.28)接近(P>0.05)。大剂量100mg/kg人参皂甙组(12.51±1.81)较去势组(26.02±5.25)低(P<0.05)。25mg/kg人参皂甙组凋亡细胞积分光密度(27269.60±4920.42)与去势组比较(33931.50±2459.36)差异无统计学意义,大剂量100mg/kg人参皂甙组(18766.36±3040.42)较去势组(33931.54±2459.36)低,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论100mg/kg剂量的人参皂甙不能增加去势大鼠血清睾酮含量,但可以提高去势大鼠阴茎海绵体组织NO水平,减少海绵体细胞凋亡。人参皂甙对去势大鼠阴茎海绵体细胞凋亡的抑制作用可能与其增加NO水平有关。     

泌乳素瘤性ED大鼠阴茎组织nNOS表达及超微结构变化的初步研究

目的:采用已烯雌酚(DES)诱导建立大鼠垂体泌乳素瘤勃起功能障(P-ED)模型,并研究泌乳素瘤ED大鼠阴茎n NOS表达及超微结构的变化。方法:取雄性Wistar大鼠,分为生理盐水对照组10只、花生油对照组10只及模型组20只。模型组腹腔内注射DES建立泌乳素瘤模型,8周后进行阿扑吗啡(APO)试验测定阴茎勃起功能筛选出P-ED大鼠模型。取垂体行病理学检查,并测定垂体质量、血清泌乳素(PRL)及睾酮(T)浓度。免疫组化法测定阴茎组织n NOS表达的变化,透射电镜观察阴茎海绵体组织超微结构变化。结果:APO试验共筛选出P-ED大鼠模型15只。与生理盐水及花生油对照组相比,注射DES 8周时大鼠垂体质量显著升高[(46.7±15.5)mg vs(11.7±2.4)、(12.4±2.3)mg,P均0.05)];血清PRL浓度显著升高[(1 744.9±304.5)ng/ml vs(11.5±2.4)、(10.6±1.9)ng/ml,P均0.01)];FT浓度降低[(1.54±0.46)ng/ml vs(3.11±1.08)、3.04±1.11)ng/ml,P均0.05)]。与生理盐水及花生油对照组相比,注射DES 8周时大鼠阴茎勃起次数显著减少(16.7%vs 100%、vs 87.5%,P0.05)。透射电镜下,8周时阴茎海绵体内皮细胞、平滑肌细胞等均有显著改变。与生理盐水及花生油对照组相比,P-ED组8周时阴茎组织n NOS表达平均光密度值(MOD)显著减少(0.024±0.011 vs 0.066±0.019、0.058±0.021,P均0.05)。结论:阴茎组织超微结构的变化及n NOS表达减少可能是泌乳素瘤大鼠发生ED的主要机制。     

甘露糖敏感性绿脓杆菌制剂诱导肝细胞癌凋亡的机制研究

目的 探讨甘露糖敏感性绿脓杆菌制剂(pseudomonasaeruginosa mannose sensitive hamemagglutination vaccine,PA-MSHA)诱导肝细胞癌凋亡的机制.方法 将具有肺转移潜能的人MHCC97L肝癌组织块种植于BALB/c nu/nu雄性裸鼠肝脏,建立转移性人肝癌裸鼠原位模型.荷瘤裸鼠随机分为对照组、PA-MSHA腹腔注射组及皮下注射组.各组均于种植后第3天开始用药,于种植后第6周末处死动物.ELISA法检测血清TNF-α、IL-4、IL-6、IFN-γ水平,分光光度法检测肿瘤组织裂解液中Cαspase 3、Caspase 8、Caspase 9的酶活性,Western Blot检测肿瘤组织内Fas和FasL蛋白水平.结果 对照组、PA-MSHA皮下注射组和腹腔注射组裸鼠血清TNF-α分别为(25.24±3.22) pg/ml、(25.50±4.55)pg/ml(P＞0.05)和(34.22±2.42)pg/ml(P＜0.01).三组血清IL-4、IL-6及IFN-γ水平无显著差异(P＞0.01).腹腔注射组肿瘤组织裂解液中Caspase 3、Caspase 8、Caspase 9的酶活性比对照组分别上调4.1倍、2.3倍和1.9倍(P＜0.01).与对照组比较,PAMSHA皮下注射组和腹腔注射组肝癌组织内Fas和FasL蛋白的表达显著增加.结论 PA-MSHA腹腔注射可通过上调TNF-α及Fas/FasL表达诱导肝细胞肝癌的凋亡,从而抑制其生长和转移.     

自身免疫性前列腺炎大鼠模型的建立

目的:使用前列腺蛋白提纯液建立自身免疫性前列腺炎大鼠模型。方法:选用36只Wistar大鼠,随机分为对照组、低浓度组和高浓度组,每组12只。对照组注射生理盐水,低浓度和高浓度组实验大鼠于0、14 d分别注射等剂量15 mg/ml及80 mg/ml浓度的前列腺蛋白提纯液,4周后处死大鼠,前列腺组织HE染色,取大鼠外周血检测血清炎症因子IL-8、IL-10,血清免疫球蛋白IgA、IgM,辅助性T细胞Th1/Th2等指标。结果:高浓度组有3只大鼠死亡,对照组与低浓度组均无死亡。前列腺大体观察对照组无明显变化,低浓度组大鼠前列腺体积增大,质地稍硬,高浓度组大鼠前列腺质地坚硬,与周围组织粘连。实验组病理切片显示前列腺组织腺体结构破坏,有炎性细胞浸润。大鼠血清IL-8指标低浓度组[(129.07±11.48)pg/ml]、高浓度组[(147.58±17.70)pg/ml]与对照组[(94.12±7.04)pg/ml]比明显升高(P0.05);大鼠血清IL-10指标低浓度组[(227.14±18.19)pg/ml]、高浓度组[(187.14±16.32)pg/ml]与对照组[(252.48±21.72)pg/ml]相比显著降低(P0.05)。大鼠血清IgA与对照组[(0.19±0.14)mg/ml]相比,低浓度组[(0.25±0.37)mg/ml]和高浓度组[(0.31±0.42)mg/ml]明显升高(P0.05);大鼠血清IgM指标低浓度组[(0.23±0.41)mg/ml]、高浓度组[(0.34±0.58)mg/ml]与对照组[(0.17±0.33)mg/ml]相比,显著升高(P0.05)。外周血辅助性T细胞Th1/Th2未见明显改变。结论:低、高浓度组大鼠造模均获成功。使用低浓度的前列腺蛋白提纯液造模的动物死亡率低,病理改变及血清炎症因子变化符合自身免疫性前列腺炎的表现,可作为制备自身免疫性前列腺炎的可靠模型浓度。     

去除尼古丁和焦油的香烟烟雾提取物对大鼠血清睾酮和勃起功能的影响

目的:探讨去除尼古丁和焦油的香烟烟雾提取物(f CSE)对大鼠血清睾酮和阴茎勃起功能的影响及其机制。方法:30只SD雄性大鼠随机分为3组:对照组(每天皮下注射PBS 1.0 ml/300 g)、f CSE组(每天皮下注射f CSE 1.0 ml/300 g)及抗氧化组[每天皮下注射f CSE 1.0 ml/300 g+GSH(还原型谷胱甘肽)200 mg/kg]。8周后通过电刺激阴茎海绵体神经,测定阴茎海绵体内压峰值(MICP)、平均动脉压(MAP)、ICP/MAP、达到阴茎海绵体内压峰值的刺激时间Tmax及海绵体充盈率(CFR)等指标评估各组大鼠的勃起功能;放射免疫法检测血清睾酮(T)水平;取海绵体组织匀浆,测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及一氧化氮合酶(NOS)活性。Masson染色观察阴茎海绵体组织形态学变化。结果:与对照组[T(5.37±1.43)μg/L,NOS(2.90±0.27)U/mg,SOD(18.41±1.09)U/mg prot]相比,f CSE组[T(3.22±1.11)μg/L,NOS(1.67±0.18)U/mg,SOD(13.36±1.18)U/mg prot]明显降低;f CSE组勃起功能学指标[MICP(58.99±10.76)mm Hg、MICP/MAP(0.56±0.08)及CFR(0.89±0.44)]较对照组[MICP(85.92±6.36)mm Hg、MICP/MAP(0.86±0.09)及CFR(2.14±0.44)]明显下降,而Tmax[(29.90±5.78)vs(42.90±8.56)s]显著延长,并且T水平与CFR值呈正相关(r=0.364,P0.05);Masson染色提示f CSE组阴茎海绵体平滑肌组织/胶原纤维比值较对照组明显降低[(0.27±0.04)vs(0.98±0.12)]。而f CSE+GSH组功能学指标[MICP(77.95±7.71)mm Hg、MICP/MAP(0.77±0.09)及CFR(1.76±0.42)]较f CSE组明显改善,Tmax[(32.10±5.84)vs(42.90±8.56)s]缩短;Masson染色提示f CSE+GSH组阴茎海绵体平滑肌组织/胶原纤维比值较f CSE组有改善[(0.77±0.09)vs(0.27±0.04)],但仍低于对照组[(0.77±0.09)vs(0.98±0.12)]。结论:去除尼古丁和焦油的香烟烟雾提取物导致大鼠血清睾酮水平和阴茎勃起功能的下降与氧化应激损伤相关,抗氧化治疗能改善阴茎勃起功能,但是在保护阴茎组织结构方面有限。     

糖尿病大鼠阴茎海绵体细胞凋亡的实验研究

目的 观察糖尿病(DM)大鼠阴茎海绵体细胞凋亡,探讨DM性阴茎勃起功能障碍(ED)的发病机理。方法 本文通过四氧嘧啶(Alloxan,AXN)诱导的DM大鼠模型,饲养8周后处死动物并取阴茎海绵体。用琼脂糖凝胶电泳法进行DNA片段分析;用TUNEL法检测细胞凋亡。结果 DM组DNA片段分析出现凋亡特征性梯带。DM组较对照组勃起组织凋亡细胞数明显增多(P<0.01)。结论 DM大鼠阴茎海绵体凋亡细胞增加,细胞凋亡可能是DM性ED的发病机理。     

复方玄驹胶囊治疗自身免疫性前列腺炎大鼠的实验研究

目的:研究复方玄驹胶囊对自身免疫性前列腺炎大鼠的治疗效果。方法:健康Wistar大鼠60只,随机分为5组,对照组、低浓度蛋白免疫模型组、低浓度蛋白免疫+复方玄驹胶囊全方治疗组、高浓度蛋白免疫模型组、高浓度蛋白免疫+复方玄驹胶囊全方治疗组。除对照组外,其余4组用高低两种浓度(15 mg/ml及80 mg/ml)的同种大鼠前列腺匀浆蛋白提纯液进行注射造模。造模(30 d)成功后,对照组和模型组生理盐水[1 ml/(200 g·d)]灌胃,治疗组用生理盐水溶解的复方玄驹胶囊全方[0.068 g/(ml·d)]灌胃,随后分别于30、45、60 d分批处死大鼠。用ELISA法检测大鼠血清中的IL-8、IL-10及TNF-α的表达,并观察大鼠前列腺组织病理切片。结果:与模型组相比,经复方玄驹胶囊全方灌胃治疗的高浓度蛋白免疫大鼠血清中IL-8、TNF-α在造模45 d时由(148.54±17.23)pg/ml、(62.14±5.59)pg/ml下降到(100.77±11.08)pg/ml、(32.63±2.91)pg/ml(P0.05);60 d时由(143.69±17.28)pg/ml、(59.38±5.50)pg/ml降到(95.77±10.53)pg/ml、(29.63±2.66)pg/ml(P0.05)。低浓度组造模45 d时IL-8、TNF-α亦由(128.47±12.21)pg/ml、(40.43±3.64)pg/ml下降至(111.76±10.07)pg/ml、(35.44±3.17)pg/ml(P0.05),60 d时由(131.07±10.93)pg/ml、(43.34±3.91)pg/ml降至(97.46±8.75)pg/ml、(30.44±2.75)pg/ml(P0.05)。高浓度蛋白免疫的治疗组大鼠血清IL-10在造模45 d、60 d分别由(189.14±16.78)pg/ml、(184.14±15.89)pg/ml上升至(230.48±29.96)pg/ml、(248.48±31.03)pg/ml(P0.05),低浓度组由(223.14±17.87)pg/ml、(224.14±17.93)pg/ml升高至(231.42±23.18)pg/ml、(249.42±24.97)pg/ml(P0.05)。病理切片示对照组无明显变化;实验组病理切片显示大鼠前列腺组织腺体结构破坏,炎性细胞浸润;治疗组治疗15 d后光镜下观察病变逐步改善,腺腔增大,上皮细胞轻度增生,间质中无明显炎性细胞浸润,可见少量纤维组织。结论:复方玄驹胶囊能降低自身免疫性前列腺炎大鼠前列腺组织炎性改变,并有效改善炎性因子表达,对大鼠自身免疫性前列腺炎有一定疗效。     

细胞外信号调节激酶和蛋白激酶B在糖尿病大鼠阴茎海绵体的表达

目的 研究细胞外信号调节激酶(ERK1/2)和蛋白激酶B(PKB/Akt)在糖尿病大鼠阴茎海绵体中的表达,探讨糖尿病大鼠勃起功能障碍(ED)可能存在的发病机制.方法 20只8周龄雄性Wistar大鼠随机分成对照组(A组)和实验组(B组).实验组采用1%链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立I型糖尿病大鼠模型,对照组给予等量生理盐水腹腔注射,4周后采用免疫组化及RT-PCR技术检测ERK1/2和PKB/Akt在大鼠阴茎海绵体中的表达.结果 ERK1、ERK2的mRNA和ERK1/2蛋白的表达量在B组(0.7343±0.0820、0.7962±0.0730、0.1574±0.0350)较A组(0.3943±0.0900、0.4156±0.0590、0.1205±0.0360)显著升高,差异具统计学意义(P<0.05);PKB/Akt的mRNA和PKB/Akt蛋白的表达量在B组(0.9884±0.0460、0.1822±0.0470)与A组(0.9417±0.0540、0.1586±0.0220)差异无统计学意义(P>0.05).结论 ERK1/2和PKB/Akt在糖尿病大鼠阴茎海绵体中均有表达,糖尿病大鼠阴茎海绵体ERK1/2表达增强可能与糖尿病大鼠ED的发生有关.     

自发性高血压大鼠阴茎海绵体组织内皮型一氧化氮合酶的表达及意义

目的探讨自发性高血压大鼠(SHR)勃起功能的改变及其发病机制。方法20周龄雄性SHR大鼠及同系正常(WKY)大鼠各10只,夹尾法测量大鼠收缩压(SBP),皮下注射阿朴吗啡(APO)检测阴茎勃起功能,免疫组织化学染色和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定海绵体组织内eNOSmRNA的表达。结果SHR组及WKY组收缩压分别为(205.7±11.9)mmHg和(114.3±10.2)mmHg,阴茎勃起次数分别为(0.6±0.5)和(2.4±0.6),差异均具有显著性(P<0.01)。免疫组织化学染色显示eNOS蛋白在WKY大鼠阴茎海绵体组织中普遍表达,在SHR大鼠阴茎海绵体组织内的表达显著低于WKY大鼠(P<0.01)。RT-PCR结果与免疫组化结果相似。结论高血压严重影响阴茎勃起功能,海绵体组织内eNOS的降低可能是自发性高血压大鼠勃起功能下降的机制之一。     

胰岛素治疗糖尿病大鼠阴茎勃起功能障碍的研究

目的 观察糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠胰岛素治疗后阴茎勃起功能的情况及阴茎海绵体细胞凋亡、Bcl-2和Bax的基因表达.方法 成年雄性Wistar大鼠50只.腹腔内注射链尿佐菌素(STZ)建立糖尿病动物模型,成模后8周根据阴茎勃起功能的情况,随机分成未行胰岛素治疗组(DM组)和胰岛素治疗组.胰岛素治疗组大鼠治疗16周后,处死并取阴茎海绵体,测血糖及糖化血红蛋白,用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,western blot方法检测阴茎组织Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 DM组大鼠阴茎勃起功能明显低于胰岛素组.胰岛素组血糖及糖化血红蛋白下降(P＜0.001),DM组大鼠较胰岛素治疗组大鼠阴茎海绵体凋亡细胞数明显增多,Bax表达增强,Bcl-2表达减弱.结论 DM大鼠胰岛素治疗后,阴茎海绵体细胞凋亡率减少,阴茎勃起功能改善,Bcl-2和Bax可能参与了DM大鼠阴茎海绵体细胞凋亡的基因调控.     

腺病毒介导PDE5A1反义核酸改善糖尿病兔阴茎勃起功能的实验研究

目的探讨腺病毒介导PDE5A1反义核酸对海绵体平滑肌PDE5基因表达的抑制作用及对兔阴茎勃起功能的影响.方法25只成年雄性新西兰兔随机分为5组1组为正常对照组,4组静脉注射四氧嘧啶建立糖尿病性勃起功能障碍(ED)动物模型,分别将携带反义基因腺病毒载体、携带β-半乳糖苷酶基因腺病毒载体(β-gal组)、空载体及0.9%NaCl转染模型组阴茎海绵体.转染后第7天,电刺激盆神经测定各组阴茎海绵体内压(NSICP),评价阴茎勃起功能,ELISA法测定海绵体组织cGMP浓度,Western blot法分析海绵体组织中β-gal表达水平.结果反义核酸组海绵体组织cGMP浓度(25.6±2.5)fmol/mg蛋白,明显高于β-gal组(8.8±0.9)fmol/mg蛋白、空载体组(8.3±1.1)fmol/mg蛋白和糖尿病对照组(7.4±0.8)fmol/mg蛋白,差异有统计学意义(P＜0.05);反义核酸组NSICP增加幅度(66.2±3.6)mmHg,明显高于β-gal组(38.2±2.5)mmHg、空载体组(35.2±2.2)mmHg及糖尿病对照组(36.6±2.7)mmHg,差异有统计学意义(P＜0.05);与正常对照组(65.2±3.2)mmHg比较差异无统计学意义(P＞0.05);β-gal组海绵体组织β-gal表达水平明显高于其他组.结论腺病毒介导PDE5A1反义基因能改善糖尿病兔阴茎勃起功能,PDE5A1可作为ED基因治疗的重要靶基因.     

糖尿病性阴茎勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体一氧化氮合酶活性的测定

目的　探讨糖尿病 (DM )性阴茎勃起功能障碍 (ED)的发病机理。　方法　SD大鼠注射链脲佐菌素建立DM动物模型后 ,注射阿朴吗啡观察 6周、8周及 12周大鼠阻茎勃起情况 ,筛选DM性ED大鼠模型 ,测定其阴茎海绵体组织一氧化氮合酶 (NOS)的活性。　结果　DM性ED大鼠阴茎海绵体组织NOS活性与对照组相比显著降低 (P <0 0 0 1或P <0 0 1) ,随DM病程延长 ,NOS活性明显下降 (P <0 0 1)。　结论　DM严重影响阴茎勃起功能 ,海绵体组织NOS活性降低可能是其发病机理之一。     

中药益坎胶囊对动脉性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

目的:探讨中药益坎胶囊对动脉性勃起功能障碍(ED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响,以揭示益坎胶囊治疗ED的机制。方法:选取SD大鼠50只,其中10只设为正常组,另40只通过结扎双髂内动脉造成动脉性ED模型。造模后将其中10只设为模型对照组,其余30只灌胃给予ED治疗中药益坎胶囊,浓度分别为1.88、0.94、0.47 g/kg。给药1个月后,经腹腔注射阿朴吗啡,观察大鼠呵欠次数和阴茎勃起次数;切取大鼠的阴茎组织标本,通过免疫组化法观测海绵体平滑肌细胞收缩型性标志物碱性调宁蛋白(calponin 1)和合成型标志物骨桥蛋白(OPN)的表达,实验组结果与正常组和对照组进行比较。结果:注射阿朴吗啡后,正常组大鼠勃起次数为(4.48±1.25)次,模型对照组为(1.63±0.22)次,两组比较,差异有统计学意义(P0.01);给药后,中药益坎胶囊高、中、低剂量组大鼠勃起次数有明显改善[高剂量:(3.05±1.37)次;中剂量:(2.98±0.16)次;低剂量:(1.75±0.40)次]。免疫组化结果显示,模型对照组大鼠海绵体平滑肌细胞calponin 1表达减少,而OPN表达增多,与正常组相比差异有统计学意义(P0.05);与模型对照组相比,给药后,中药益坎胶囊高、中、低剂量组大鼠海绵体平滑肌细胞calponin 1表达增多,OPN表达减少。结论:中药益坎胶囊能改善动脉性ED大鼠的勃起功能,抑制海绵体平滑肌细胞表型由收缩型向合成型转化。     

养精胶囊对老年大鼠阴茎海绵体P-Erk1和P-Akt1表达的影响

目的:通过观察养精胶囊对老年大鼠阴茎海绵体中P-Erk1和P-Akt1表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法:将40只24月龄老年雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组20只。用药前实验组和对照组各取10只用于eNOS表达测定。实验组(n=10)给予养精胶囊[0.5 g/(kg.d)]灌胃,对照组(n=10)给予等剂量的生理盐水灌胃。4周后,处死所有大鼠,留取大鼠阴茎海绵体组织,HE染色,采用RT-PCR和免疫组化方法检测eNOS、P-Erk1及P-Akt1在阴茎海绵体组织中的表达。结果:HE染色结果显示实验组老年大鼠阴茎海绵体组织血管较对照组明显充盈,管径明显增大。免疫组化结果显示,对照组大鼠阴茎海绵体组织中eNOS的表达干预前(19.35±1.50)和干预后(18.15±1.98)无显著性差异(P>0.05);实验组老年大鼠阴茎海绵体组织中eNOS的表达干预后(24.10±2.40)较干预前(18.80±2.04)显著增强(P<0.05);而干预后老年大鼠阴茎海绵体组织中eNOS的表达,实验组较对照组明显增强(P<0.05);大鼠阴茎海绵体组织中P-Erk1的表达,实验组明显低于对照组(实验组P-Erk1表达量为0.71±0.13,对照组P-Erk1的表达量为0.83±0.17,P<0.01)。而在同等内参GAPDH条件下,两组大鼠间P-Akt1的表达强度未见明显差异(实验组P-Akt1的表达量为0.58±0.17,对照组P-Akt1的表达量为0.48±0.13,P>0.05)。结论:P-Erk1和P-Akt1在老年大鼠阴茎海绵体组织中均有表达,养精胶囊能改善老年大鼠勃起功能,作用机制可能与阴茎海绵体中P-Erk1的低表达相关。     

伊木萨克片对糖尿病性ED大鼠阴茎组织中eNoS和nNoS的影响

目的 研究维药伊木萨克片对DM性ED大鼠阴茎海绵体组织中eNOS和nNOS蛋白表达水平的影响.方法 取雄性SD大鼠70只,从中随机取10只为正常对照组,余60只以链脲佐菌素诱导建立DM模型后,行阿朴吗啡阴茎勃起实验筛选DM性ED模型,发生ED者随机分为DM性ED组、伊木萨克片组、胰岛素组、伊木萨克片 胰岛素(联用)组,未成DM者为STZ组.各组给药6周后,采用免疫组化SP法检测各组大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS含量.结果 DM性ED组大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达水平显著低于正常对照组(P＜0.01);伊木萨克片组、胰岛素组及联用组大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达水平均显著高于DM性ED组(P＜0.01),但伊木萨克片组与胰岛素组显著低于联用组(P＜0.01, P＜0.01;P＜0.05,P＜0.01);STZ组与正常对照组之间的差异则无统计学意义(P＞0.05).结论 维药伊木萨克片可以显著提高DM性ED大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达水平,并提示在胰岛素控制血糖的基础上效果可能更佳.     

补肾助阳方对植物雌激素致勃起功能下降干预的实验研究

目的:研究补肾助阳方(养精胶囊)对大鼠阴茎勃起功能的影响机制。方法:成年雄性SD大鼠56只,随机分为7组,分别为空白对照组、大豆黄酮组、十一酸睾酮组、西地那非组及养精胶囊(高/中/低)剂量组。空白对照组给予生理盐水灌胃,其余各组100 mg/(kg·d)大豆黄酮灌胃30d。随后各实验组在给予大豆黄酮灌胃的同时,养精胶囊(高/中/低)剂量组分别给予1.26、0.63、0.315 mg/k/d剂量的养精胶囊组方,十一酸睾酮组给予4mg/(kg·d)剂量的十一酸睾酮,西地那非组给予2.5 mg/(kg·d)剂量的西地那非。分别在实验第0、30、60天观察各组大鼠阿扑吗啡诱导的自发勃起反应,记录勃起次数及勃起潜伏期,测定大鼠血清睾酮、黄体生成素水平,并观察大鼠阴茎海绵体组织切片。结果:实验第30天时,所有实验组大鼠阿扑吗啡诱导的勃起次数明显下降,勃起潜伏期延长,有统计学意义(P0.05)。第60天时,大豆黄酮组(1.39±0.42 vs 2.67±0.33)和大豆黄酮及低剂量养精胶囊组(1.33±0.49 vs 2.83±0.61)大鼠阿扑吗啡诱导的勃起次数明显下降(P0.05);阿扑吗啡诱导的大鼠勃起潜伏期只有大豆黄酮组[(16.33±3.11)min vs(8.50±0.93)min]和大豆黄酮及低剂量养精胶囊组[(15.50±3.21)min vs(8.63±1.54)min]明显延长(P0.05),其余各组变化不明显。实验第30天时,所有实验组大鼠血清睾酮、黄体生成素均有显著下降(P0.05)。实验第60d时,大豆黄酮组[(5.34±0.89)ng/ml vs(1.24±0.30)ng/ml]和大豆黄酮及低剂量养精胶囊组[(5.28±1.12)ng/ml vs(2.07±0.76)ng/ml]血清睾酮变化有统计学意义(P0.05)。两组的黄体生成素由(3.62±0.37)ng/ml、(3.79±0.28)ng/ml变为(2.09±0.12)ng/ml、(2.17±0.33)ng/ml,显著下降(P0.05)。切片结果显示对照组大鼠阴茎海绵体内海绵窦数目多,血管清晰可见。大豆黄酮加睾酮组、大豆黄酮加西地那非组和大豆黄酮加中、高剂量养精胶囊组大鼠海绵体与正常对照组相比,海绵窦数目减少。大豆黄酮组和大豆黄酮加低剂量养精胶囊组大鼠海绵体内海绵窦明显减少,血管少见。结论:使用高剂量养精胶囊治疗后,大鼠阴茎勃起功能恢复,对由植物雌激素引起的勃起功能下降有良好疗效。     

大鼠骨髓间充质干细胞对细菌性前列腺炎抑制作用的研究

目的 :研究外源性骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大肠埃希菌致大鼠前列腺炎的抑制作用。方法:贴壁选择法分离、培养、扩增BMSCs。将SD大鼠50只随机分为急性细菌性前列腺炎(ABP)组、ABP+BMSCs组、慢性细菌性前列腺炎(CBP)组、CBP+BMSCs组和正常对照组,每组10只。在小动物超声引导下向大鼠前列腺两侧叶内注射大肠埃希菌建立前列腺炎症模型,注入细菌1~14 d为急性炎症期,4~12周为慢性炎症期,对照组注入等量PBS。然后将BMSCs注入ABP+BMSCs组和CBP+BMSCs组大鼠前列腺内,观察移植BMSCs2周后大鼠前列腺病理学变化并做炎症评分,RT-PCR扩增前列腺组织中炎症因子IL-1β、TNF-αmRNA,ELISA检测IL-1β、TNF-α蛋白含量,统计分析各组表达差异。结果:前列腺组织病理学提示炎症组前列腺组织呈典型炎症病理变化,腺管结构改变,间质水肿,炎细胞浸润,纤维组织增生,而BMSCs治疗组大鼠前列腺炎症明显减轻。PCR和ELISA分析显示ABP组IL-1βmRNA(0.829±0.121)、蛋白(271.75±90.59)pg/ml和TNF-αmRNA(0.913±0.094)、蛋白(105.78±19.05)pg/ml含量均显著高于对照组[(0.342±0.087)、(45.76±17.99)pg/ml]、[(0.247±0.054)、(19.42±7.75)pg/ml](P均0.01)及BMSCs治疗组[(0.433±0.072)、(51.34±22.13)pg/ml]、[(0.313±0.076)、(28.38±8.78)pg/ml](P0.01);CBP组IL-1βmRNA(0.975±0.114)、蛋白(265.31±71.34)pg/ml和TNF-αmRNA(0.886±0.084)、蛋白(107.45±26.11)pg/ml含量也均显著高于对照组及BMSCs治疗组[(0.396±0.064)、(56.37±21.22)pg/ml]、[(0.417±0.068)、(29.21±10.22)pg/ml](P均0.01)。结论:注入BMSCs能够减轻大肠埃希菌引起的前列腺炎症反应,其作用可能与减少炎细胞浸润,降低IL-1β、TNF-α水平有关。     

血清抗精子抗体阳性对青春期雄性大鼠睾丸组织及睾丸生殖细胞中Fas/Fas-L凋亡途径的影响

目的:通过人工免疫雄性大鼠获得抗精子抗体(AsAb)介导的血清AsAb阳性的免疫性不育大鼠动物模型,观察AsAb对青春期大鼠睾丸组织及睾丸生殖细胞中Fas/Fas-L凋亡途径的影响。方法:5周龄(青春期)雄性Wistar大鼠30只,其中10只处死,取精子制备精子悬液免疫大鼠,余20只动物随机分为实验组(10只)和对照组(10只),4周后摘取睾丸。光镜观察睾丸组织改变,免疫组化法检测Fas、Fas-L和Caspase-3蛋白的表达。结果:实验组睾丸组织切片呈凋亡样改变,实验组Fas、Fas-L及Caspase-3蛋白的OD值(176.97±4.58,187.52±7.76,157.65±7.38)较对照组(161.87±5.37,150.27±8.65,120.37±6.76)显著增高(P<0.01)。结论:同种精子免疫大鼠,可成功制作AsAb介导的免疫性不育模型;AsAb影响雄性大鼠的生育力,其机制可能与Fas/Fas-L凋亡途径中Fas、Fas-L和Caspase-3蛋白的表达升高有关。     

HHcy ED大鼠血浆内Hcy的含量对阴茎海绵体CO/HO-2影响的研究

目的:研究高同型半胱氨酸血症(HHcy)勃起功能障碍大鼠体内一氧化碳/血红素加氧酶2(CO/HO-2)体系的变化。方法:雄性4周龄Wistar大鼠40只,体重280～310 g,正常喂养1周后,随机分为正常对照组(A组,10只),余30只给予3%蛋氨酸饲料4周后,测定尾静脉血Hcy,将Hcy>16.0μmol/L的大鼠确定为HHcy,由此确定造模成功。将模型组随机均分为B组(HHcy大鼠模型组,继续给予3%蛋氨酸饲料喂养),C组(HHcy盐酸甜菜碱治疗组,每天继续给予3%蛋氨酸饲料喂养,下午定时给予60 mg/kg甜菜碱,0.3 ml生理盐水溶液灌胃)和D组[每日给与锌卟啉IX腹腔内注射45μmol/(kg.d)],4周后处死大鼠提取标本血检测Hcy含量、阴茎海绵体中Hcy的含量及阴茎组织CO测定。分别于4周和8周2个时间点进行阿朴吗啡实验。结果:比较4组大鼠血浆Hcy浓度、阴茎勃起次数、阴茎海绵体组织CO浓度及阴茎组织血管中HO-2阳性细胞数量的检测结果,与A组[(12.55±0.82)μmol/L、(1.88±0.05)次、(10.55±1.73)μmol/L、6 059±1 257]比较,B组[(25.01±0.94)μmol/L、(0.70±0.05)次、(9.51±1.52)μmol/L、2 595±514]血浆中Hcy水平显著上升(P<0.05),阴茎勃起次数、CO的含量与HO-2阳性细胞均下降(P<0.05或P<0.01),并且Hcy与阴茎勃起次数呈负相关性(P<0.01);C组[(14.37±0.47)μmol/L、(1.18±0.08)次、(10.36±1.56)μmol/L、6 295±1 156]与B组比较,阴茎海绵体内Hcy含量下降,而CO与HO-2含量明显升高,阴茎勃起次数明显升高,有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:阴茎海绵体中的CO含量及阴茎海绵体HO-2表达减低可能是导致HHcy大鼠勃起功能障碍的原因之一。甜菜碱降低血浆Hcy浓度,增加阴茎海绵体中CO含量,是治疗HHcy勃起功能障碍的机制之一。