丹皮酚对雷西莫特诱导的巨噬细胞M1极化的影响

目的 观察丹皮酚是否能够影响巨噬细胞M1极化。方法 用Toll样受体7/8激动药雷西莫特(R848)刺激RAW264.7细胞建立M1型巨噬细胞模型。将细胞分为对照组、模型组、高剂量实验组。对照组细胞正常培养;模型组用2μg·mL^-1的R848处理24 h,高剂量实验组用2μg·mL^-1R848和30μmol·L^-1丹皮酚处理24 h。以酶联免疫吸附(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌水平;以流式细胞术检测CD80阳性表达的巨噬细胞比例;以实时荧光定量多聚核苷酸链反应(Q-PCR)检测TNF-α、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达水平;以蛋白质印迹法检测iNOS蛋白表达情况。结果 高剂量丹皮酚干预R848诱导的M1极化24 h后,对照组、模型组和高剂量实验组上清中TNF-α水平分别为(355.55±16.45)、(552.69±18.09)和(447.71±22.71)ng·L^-1;CD80阳性细胞比例分别为(16.29±0.50)%、(43.57±3.78)%和(36.0...     

醋酸棉酚和15甲基PGF_(2α)甲酯对大鼠子宫胞浆雌激素受体的影响

假孕大鼠口服醋酸棉酚40和80 mg/kg连续5天,平均每个子宫的胞浆蛋白和雌激素受体量明显减少。以每mg蛋白计,雌激素受体浓度同对照组差异不显著。幼大鼠口服醋酸棉酚40mg/kg连续8天,作饱和分析测得对照组和给药组K_d值分别为1.04×10~_(-10)和1.09×10_(-10)mol。最大受体结合数分别为432.0和358.8 fmol/子宫。实验发现棉酚在高浓度时对~3H-雌二醇同其受体的结合有抑制作用。15甲基PGF_(2α)甲酯对假孕大鼠子宫胞浆蛋白水平和雌激素受体均无明显影响。     

丹皮酚对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究丹皮酚对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞增殖的影响。方法高脂饮食法复制家兔动脉粥样硬化病理模型;HE染色并光镜观察主动脉病理学改变;MTT法分析体外培养的兔血管平滑肌细胞增殖水平;全自动生化分析仪测定主动脉组织中脂质含量;酶法测定SOD、MDA含量;放射免疫分析法测定IL-1β、TNF-α的含量;免疫组织化学法检测主动脉组织中PCNA的蛋白表达。结果丹皮酚(75、150 mg.kg-1)治疗给药(ig,6 wk)能减轻模型动物主动脉内膜增厚及泡沫细胞数量;使主动脉组织中脂质、脂质过氧化反应以及炎性细胞因子含量等方面得到显著改善;并能显著抑制主动脉组织中PCNA蛋白的表达强度;丹皮酚(100~300 mg.L-1)可明显抑制体外培养的血管平滑肌细胞增殖反应。结论丹皮酚对血管平滑肌细胞增殖有明显抑制作用,可能是其降脂、减轻脂质过氧化反应以及炎性细胞因子含量等协同作用结果,并可能通过抑制PCNA的表达而调控动脉粥样硬化病变中的血管平滑肌细胞增殖周期。     

醋酸棉酚和15甲基PGF2α甲酯对大鼠子宫胞浆雌激素受体的影响

假孕大鼠口服醋酸棉酚40和80 mg/kg连续5天,平均每个子宫的胞浆蛋白和雌激素受体量明显减少。以每mg蛋白计,雌激素受体浓度同对照组差异不显著。幼大鼠口服醋酸棉酚40mg/kg连续8天,作饱和分析测得对照组和给药组K_d值分别为1.04×10^-10和1.09×10^-10mol。最大受体结合数分别为432.0和358.8 fmol/子宫。实验发现棉酚在高浓度时对³H-雌二醇同其受体的结合有抑制作用。15甲基PGF_2α甲酯对假孕大鼠子宫胞浆蛋白水平和雌激素受体均无明显影响。     

雌激素受体α和雌激素受体β的表达及其对乳腺癌预后的影响

雌激素是乳腺癌重要的有丝分裂刺激剂,这种促分裂作用是通过乳腺组织中的雌激素受体（estrogenreceptor,ER）介导的。ER是雌激素信号通路中的一个关键蛋白,属于核受体超家族成员,是一类重要的核转录因子,因其在生殖系统、骨组织、心血管和中枢神经系统中发挥着重要的生理作用,故成为治疗乳腺癌药物的作用靶标。     

补骨脂酚通过上调上皮雌激素受体β和下调间质芳香化酶抑制大鼠良性前列腺增生

目的探讨补骨脂酚(Ba)对良性前列腺增生(BPH)的抑制作用及其机制。方法培养人前列腺间质细胞系WPMY-1和BPH上皮细胞系BPH-1,用MTT法、实时定量PCR和Western印迹法检测Ba对细胞增殖和PCNA表达的影响;建立雌二醇/睾酮诱导的BPH大鼠模型,计算假手术组、模型组和Ba组中前列腺指数(PI),用HE染色比较各组前列腺的病理改变;用IHC法分析各组前列腺中PCNA和平滑肌细胞标志物ɑ-SMA的表达和分布。进一步用IHC、实时定量PCR和Western印迹法研究Ba对前列腺上皮中雌激素受体β(ERβ)、间质中芳香化酶表达的影响。转染ERβ或ERα的siRNA,通过双荧光素酶报告基因法测定Ba对雌激素反应元件(ERE)的转录活性是否通过ERβ介导。结果 Ba以剂量依赖的方式显著抑制WPMY-1和BPH-1细胞增殖和PCNA表达;BPH模型组大鼠前列腺增大;Ba可以明显降低PI值、降低间质中平滑肌层厚度,下调PCNA和α-SMA的表达。此外,Ba可以明显促进BPH-1细胞中ERβ的表达、抑制WPMY-1细胞中本底水平和PGE2诱导的芳香化酶表达,这与体内的变化一致。沉默ERβ而非ERα,可以阻断Ba诱导BPH-1中的ERE转录活性。结论 Ba通过上调前列腺上皮中ERβ表达、下调前列腺间质中芳香化酶表达,维持雌激素和雄激素的平衡,抑制BPH进程,提示:Ba是中药补骨脂抗BPH的重要物质基础,可成为抗BPH的候选药物。     

选择性雌激素受体调节药对雌激素受体α/β活性的诱导作用

目的：探讨选择性雌激素受体调节药(SERMs)对雌激素受体(ER)α/β活性的诱导作用。方法：通过基因转染方法将pSVhER和荧光素酶报道基因载体ER Etk Luc瞬时共转染至乳腺癌细胞株MDA MB 231，转染后的细胞分别用1 nmol·L 1 17β雌二醇(E2)、17αE2、雌酮、雷洛昔芬、4羟基 他莫昔芬(4OH TAM)和柠檬酸他莫昔芬处理细胞24 h，采用荧光素酶报道基因分析方法测定ERα/β活性。结果： 雷洛昔芬和他莫昔芬具有明显激活ERα活性作用，他莫昔芬对ERβ活性的诱导作用明显较ERα弱，雷洛西芬几乎不诱导ERβ活性。结论：SERMs主要是通过激活ERα发挥抗雌激素作用，而对ERβ的诱导作用明显较弱。     

丹皮酚对动脉粥样硬化大鼠脂质代谢和核因子-κB的影响

目的：探讨丹皮酚对动脉粥样硬化（AS）大鼠脂质代谢和核因子-κB（NF-κB）的影响。方法：采用高脂饲料喂养和维生素D3腹腔注射的方法建立大鼠AS模型,分为正常组、模型组、辛伐他汀组（10 mg·kg-1）、丹皮酚高剂量组和低剂量组（20,10 mg·kg-1）,每组8只。灌胃给药4周后,各组取血清,测定血脂水平;取主动脉切片,光镜下作病变分级评分,免疫组化法检测NF-κB的表达。结果：丹皮酚高剂量组能改善AS大鼠的主动脉病变,与模型组比较有统计学意义（P〈0.05）;丹皮酚高、低剂量组可明显降低AS大鼠血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平（P〈0.05或P〈0.01）;丹皮酚可下调主动脉NF-κB表达,高剂量组IOD值（1.96±0.55）和低剂量组IOD值（2.50±0.80）与模型组（3.65±1.14）比较,差异均有统计学意义（P〈0.05或0.01）。结论：丹皮酚治疗大鼠AS的作用机制与调节脂质代谢、下调主动脉NF-κB的表达有关。     

新型雌激素哌嗪雌酚酮对雌激素受体表达的影响及其对靶基因的转录激活作用

目的探讨哌嗪雌酚酮对雌激素受体表达的影响及其对靶基因ERE的转录激活作用。方法小鼠去卵巢后,每天灌服不同剂量的哌嗪雌酚酮(0.5、1、2mg.kg-1)以及雌酚酮(0.71mg.kg-1),连续42d,采用免疫组织化学的方法观察哌嗪雌酚酮对去卵巢小鼠子宫中两种雌激素受体(ERα和ERβ)蛋白表达的影响;采用Tfx-50脂质体共转染目的基因和报告基因于MCF-7细胞株,探讨哌嗪雌酚酮对ERE的转录激活作用。结果与去卵巢模型组比较,哌嗪雌酚酮各剂量组能够上调子宫组织中两种雌激素受体亚型的表达(有剂量依赖性),对ERα亚型作用明显于ERβ;哌嗪雌酚酮能够激活雌激素受体的经典信号途径,与等摩尔剂量的雌酚酮相比仅表现出弱雌激素活性。结论哌嗪雌酚酮能够上调子宫组织中ERs的表达;与雌酚酮比较,其对靶基因ERE的转录激活作用非常微弱。     

丹皮酚的药理作用研究进展

<正>丹皮酚(Paeonol,Pae)又称牡丹酚,分离自中药牡丹、芍药的干燥根皮和徐长卿的根或全草,是一种具有广泛生物活性的物质。其化学名称为2-羟基-4-甲氧基苯乙酮,分子式为C9H10O3,相对分子质量为166.18。丹皮酚药理活性广泛,且具有半衰期短、不良反应少等优势,具有广泛的应用前景。本文对其药理学最新进展作一综述。     

乳腺癌中BACH 1、HO-1的表达及丹皮酚的调控研究

目的：探讨乳腺癌(breast cancer, BC)患者癌组织中转录因子BTB-CNC同源体1(BTB and CNC homology, BACH 1)、血红素环氧化酶1(hemoxygenas-1,HO-1)的表达及与乳腺癌临床特征的相关性,进一步研究丹皮酚(paeonol, Pae)对BACH 1、HO-1的表达调控。方法：免疫组织化学方法检测乳腺癌组织与癌旁组织中BACH 1、HO-1分子的表达,分析BACH 1、HO-1表达与患者临床病理因素之间的关系;体外培养人MDA-MB-468乳腺癌细胞,给予丹皮酚处理48 h,通过CCK-8、Transwell检测细胞的增殖、迁移,Western blot检测BACH 1、HO-1的表达。结果：与非癌组织相比,BACH 1在乳腺癌组织中低表达,与TNM分级显著相关(P<0.05)。HO-1高表达与肿瘤分级显著相关(P<0.05)。CCK-8、Transwell结果显示丹皮酚抑制细胞增殖并减少肿瘤细胞迁移。Western blot结果显示丹皮酚60 mg/L使BACH 1表达上调,HO-1表达下降。结论：BACH 1、HO...     

高盐对血管内皮生长因子受体-3+巨噬细胞表型及功能的影响

目的 观察高盐对血管内皮生长因子受体（VEGFR）-3+巨噬细胞表型、淋巴管内皮细胞特性及功能的影响。方法 利用流式分选将小鼠RAW264.7巨噬细胞中VEGFR-3+亚群分选出来,分为Control组、低盐组（LS组,20mmol/L NaCl）和高盐组（HS组,40 mmol/L NaCl）。利用CCK-8法观察不同组VEGFR-3+细胞活性;Real-time PCR检测NaCl干预后VEGFR-3+巨噬细胞表型变化及淋巴管内皮细胞标志物mRNA表达水平;Transwell实验检测各组细胞的迁移功能,流式细胞术检测不同组细胞的吞噬能力。结果 与Control组相比,高盐干预可以使VEGFR-3+巨噬细胞的白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α、CC类趋化因子配体（CCL）2、血管内皮生长因子（VEGF）-C及张力应答性增强子结合蛋白（TonEBP）mRNA表达水平上调（P＜0.05）;HS组在高盐干预24、48 h后细胞活性均显著低于LS组（P＜0.05）;同时,HS组细胞迁移能力及细胞的吞噬能力与Control组相比显著增强,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 高盐可使VEGFR-3+巨噬细胞向M1型巨噬细胞偏移并表现出促淋巴管生成的特性,其迁移及吞噬能力显著增强,为进一步研究该亚群与淋巴管生成及心血管疾病的关系提供了依据。     

益母草碱抑制NLRP3炎症小体过度激活调控巨噬细胞M1/M2表型分化

目的 研究益母草碱对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞免疫应答影响及相关机制.方法 分离小鼠腹腔巨噬细胞,用脂多糖和益母草碱预处理24 h,MMT法检测巨噬细胞活性;Griess法检测NO释放量;ELISA法检测IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α的释放量;RT-PCR法检测NLRP3、ASC、caspase...     

黄连解毒汤通过调控巨噬细胞极化防治动脉粥样硬化的机制

目的:研究黄连解毒汤对动脉粥样硬化(AS)模型小鼠M1、M2型巨噬细胞极化的调控作用,初步阐明其防治AS的机制.方法:将60只雄性ApoE-/-小鼠随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组[阳性对照,5 mg/(kg·d)]和黄连解毒汤低、中、高剂量组[5、10、20 mg/(kg·d),以生药总量计],每组10只.除空...     

丹皮酚对佐剂性关节炎大鼠IL-1β、TNF-α的影响

目的:对患有类风湿性关节炎(RA)的实验大鼠应用丹皮酚,并检测治疗后实验大鼠IL-1β、TNF-α水平,得出丹皮酚对RA的作用,探讨丹皮酚针对RA的作用机制.方法:采用弗式完全佐剂的实验方法,制备佐剂性类风湿性关节炎(AA)的大鼠模型,一周后对实验大鼠应用低剂量丹皮酚(8mg/kg)、以及高剂量丹皮酚(32mg/kg)每日1次,一共应用21d.治疗后,应用了丹皮酚的RA大鼠对足肿胀有一定的抑制作用,采用ELISA方法,得出RA实验大鼠IL-1β、TNF-α的水平.结果:和正常组比较,模型组在造模15d后立即出现了后肢的足肿胀,关节炎指数升高(P＜0.05);实验显示丹皮酚很明显使实验大鼠的对侧足的肿胀时间延后,并减轻RA实验大鼠足的肿胀度(P＜0.05),并且高剂量丹皮酚可以减少IL-1β、TNF-α水平(P＜0.05).结论:对患有RA的实验大鼠应用丹皮酚可以降低IL-1β和TNF-α的水平,提示丹皮酚可以抑制RA的发展.     

丹皮酚通过抑制NF-κB信号通路诱导Tca8113细胞凋亡

目的 研究丹皮酚对核因子κB（NF-κB）信号通路的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制。方法 将丹皮酚以不同浓度及不同时间作用于人舌鳞癌Tca8113细胞,应用MTT法观察不同浓度丹皮酚在不同作用时间下对Tca8113细胞增殖的抑制作用,Hoechst 33342荧光染色及流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2,以及NF-κB信号通路组分中IκBα和p-IκBα的表达情况,并采用凝胶电泳迁移率检测（EMSA）对NF-κB活性进行测定。结果 经丹皮酚作用后,Tca8113细胞生长受到明显抑制,并呈明显的时间、剂量依赖效应关系。丹皮酚有明显诱导Tca8113细胞凋亡的作用,Western Blot 以及EMSA检测结果显示,丹皮酚上调Tca8113细胞中Bax与IκBα的表达,下调Bcl-2的表达,并能下调IκBα磷酸化及NF κB活性。结论 丹皮酚能够抑制NF-κB信号转导通路,进而抑制Tca8113细胞的增殖并诱导其凋亡。     

基于网络药理学及实验验证探讨丹皮酚抑制血管内皮细胞间质转化的作用机制

目的 结合网络药理学与体外实验验证探讨丹皮酚抑制血管内皮细胞间质转化（EndMT）的关键靶点及作用机制。方法 通过PharmMapper、HERB、SymMap、ChEMBL、SwissTargetPredicition数据库获取丹皮酚的作用靶点;从GeneCards数据库中检索与EndMT相关的靶标,将两者进行交集分析与可视化;将交集靶点基因上传至STRING数据库联用Cytoscape3.8.2软件构建蛋白相互作用（PPI）网络并筛选核心靶点基因,并进行基因本体论（GO）功能富集和京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析。采用Autodock Vina软件对丹皮酚与核心靶点基因进行分子对接验证。体外实验将HUVECs细胞分为空白组、模型[转化生长因子β1(TGF-β1)]组、丹皮酚低、中、高剂量组（30、60、120μmol/L）,通过蛋白质印迹法（Western blotting）筛选TGF-β1诱导EndMT最佳浓度并通过酶联免疫吸附测定（ELISA）检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白表达量。结果 共筛选出丹皮酚作用靶点414个...     

龟板对脊髓损伤后脊髓雌激素α受体及其基因表达的影响

目的 :观察龟板对脊髓损伤后脊髓雌激素α受体 (ER -α)及其基因表达的影响。方法 :以改良的Allen法建立大鼠脊髓损伤模型 ,随机分为对照组、模型组和龟板治疗组 ,用免疫组织化学和原位杂交方法检测脊髓中ER -α及其mRNA的表达。结果 :模型组中脊髓ER -α受体及其mRNA的阳性细胞数与对照组比较显著减少 ;治疗组中ER -α及其mRNA的阳性细胞数与模型组比较显著增加。结论 :龟板可增加脊髓损伤后脊髓ER -α及其基因的表达。     

丹皮酚对急性微循环障碍大鼠血管内皮细胞分泌的ET-1和NO的调控

目的研究丹皮酚对血管内皮的保护作用及机制。方法主要通过体内实验研究,用肾上腺素和冰水复制大鼠的血管内皮损伤模型,用CD34标记血管内皮细胞,观察丹皮酚对血管内皮形态学的影响,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)。结果肾上腺素和冰水造成大鼠血管内皮损伤,主要表现为管腔扩张,血栓形成,内皮细胞收缩,脱落,而丹皮酚给予组能够明显抑制血栓形成,防止内皮细胞脱落。造模后血清中ET-1分泌增加,而NO分泌明显减少。丹皮酚能够抑制ET-1的分泌而促进NO的分泌。结论丹皮酚具有血管内皮保护作用,可以预防物理造成的血管内皮的损伤,主要通过调节ET-1和NO的平衡。     

葛根素对小鼠长骨雌激素受体α(ERα)表达的影响

目的:研究葛根素对长骨骺板雌激素受体亚型ERα分布及含量的影响,并与内源性雌激素作用相比较,探讨葛根素对骨的作用机制。方法:取16 d胎龄雌性小鼠前肢尺骨,置于BGJb培养基中,葛根素(10-6,10-5和10-4 mol·L-1)和雌二醇(10-6 mol·L-1)作用48 h后固定脱钙,HE染色,光镜下计数骨干破骨细胞数及肥大区软骨细胞数;免疫组织化学染色,光镜下观察阳性细胞定位,图像分析系统下测定免疫反应阳性细胞数和阳性细胞面积。结果:葛根素组及雌二醇组与空白对照组相比软骨均增粗、变长,静止区、增殖区和肥大区细胞数目增多,骨化区破骨细胞数量减少。空白对照组骺板肥大区有ERα免疫反应阳性的软骨细胞,表达较弱,静止区、增殖区几乎没有表达。经葛根素或10-6 mol·L-1的雌二醇作用48 h后,与空白对照组相比,肥大区表达明显增强,静止区、增殖区也均有ERα表达,葛根素作用明显弱于雌二醇。结论:葛根素能够促进软骨内成骨,其作用可能与其上调ERα的表达有关。