脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1和Toll样受体4基因的表达及相关性

目的 探讨脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达变化及其相互关系.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制成脓毒症大鼠模型.将50只Wistar大鼠分成正常对照组(10只)和CLP组(40只),CLP组分别于CLP术后6、12、18、24 h各处死10只大鼠,应用实时聚合酶链反应检测肝脏组织HMGB1和TLR4 mRNA的表达.结果 正常对照组大鼠肝脏组织存在微量的HMGB1、TLR4 mRNA表达.脓毒症组大鼠CLP术后各时间点的HMGB1、TLR4 mRNA表达均显著高于正常对照组(P值均<0.01),CPL术后6 h HMGB1、TLR4 mRNA表达开始升高,至12 h达峰值,18 h后开始下降,各时间点间HMGB1、TLR4 mRNA表达的差异均有统计学意义(P值均<0.05).直线相关分析表明,脓毒症大鼠肝脏组织HMGB1 mRNA与TLR4 mRNA的表达呈正相关(r=0.90,P=0.04).结论 HMGB1可能通过TLR4进一步激活炎性细胞,引起下游炎性因子释放的瀑布效应.     

血清高迁移率族蛋白B1在糖尿病视网膜病变患者中的表达水平和临床意义

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在糖尿病视网膜病变(DR)患者血清中的表达及临床意义。方法选取糖尿病视网膜病变患者37例,其中增殖性糖尿病视网膜病变患者(PDR)12人,无视网膜病变糖尿病患者(NPDR)14人。无DR的糖尿病患者(DRO)患者11人,以及正常人9人。ELISA法检测血清HMGB1水平,分析各组HMGB1与Hb、血糖、血脂之间的关系。结果糖尿病患者的HMGB1水平均高于正常人,PDR组和NPDR组均显著高于DRO组(P<0.01),PDR组显著高于NPDR组(P<0.01)。HMGB1和HbAC1呈正相关(r=0.736,P<0.01),与空腹血糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、甘油三酯和总胆固醇无显著相关性。结论 HMGB1参与了DR的炎性反应,其升高可能与糖代谢异常有关。     

高迁移率族蛋白1及其受体在系统性红斑狼疮中的作用

高迁移率族蛋白1(HMGB1)是存在于真核细胞的一种非组蛋白核蛋白,在胞外HMGB1可作为警报素在固有与适应性免疫反应中起"预警作用"。系统性红斑狼疮(SLE)是影响多个器官功能的典型的自身免疫病,SLE患者的血清HMGB1水平提高,并且狼疮患者的皮损组织中也检测到HMGB1的表达增加。现就HMGB1的基本特征、胞外的生物学活性及在SLE免疫病理机制中的作用予以综述。     

血小板反应蛋白-1在氧诱导小鼠视网膜病变模型中的表达及意义

目的: 检测血小板反应蛋白-1 (thrombonspondin-1,TSP-1) 在氧诱导视网膜病变 (oxygen-induced retinopathy,OIR) 模型小鼠视网膜中的表达,探讨其在视网膜新生血管中的作用。方法: 随机选取7日龄C57BL/6J新生小鼠40只,分为模型组(n=20)及正常对照组(n=20)。模型组小鼠通过高氧诱导的方法建立OIR模型。于小鼠出生后第7,9,11天时两组各随机抽取5只小鼠,取视网膜组织采用RT-PCR法检测TSP-1 mRNA的表达水平; 并于小鼠出生后第11天时两组随机取5只小鼠,运用荧光造影视网膜铺片对视网膜新生血管进行形态学观察。结果: 出生后第11天时,正常组小鼠视网膜铺片显示视网膜血管分布呈均匀的网状结构,而模型组小鼠视盘周围可见大片无灌注区,视网膜大血管扩张,仅在周边见少量毛细血管分布,为典型的OIR早期表现。出生后第7天,模型组与对照组小鼠视网膜组织中TSP-1 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05); 出生后第9天,模型组小鼠视网膜组织中TSP-1 mRNA表达水平下降(P<0.05); 出生后第11天模型组小鼠视网膜组织中TSP-1 mRNA表达水平明显低于正常组(P<0.01),且较第9天模型组亦下降(P<0.05)。结论: 在新生小鼠OIR模型视网膜血管生长发育抑制期,视网膜组织中TSP-1 mRNA的表达逐渐下降,提示TSP-1可能作为负调节因子在早期参与视网膜新生血管的形成过程。     

子痫前期患者胎盘和母血中高迁移率族蛋白1及TLR4的表达

目的:探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1和Toll样受体(TLR)4与子痫前期的关系。方法:选取60例子痫前期患者(其中轻度30例,重度30例)作为研究对象,以30例正常晚孕妇女作为正常对照,采用RT-PCR及免疫组化法测定胎盘组织中HMGB1及TLR4mRNA和蛋白的表达,ELISA法测定母血血浆中HMGB1和TLR4蛋白水平。结果:HMGB1主要定位于滋养细胞的胞质中,TLR4主要定位于胎盘合体滋养细胞的胞膜及胞质中。3组胎盘组织中HMGB1、TLR4mRNA和蛋白的表达水平、母血中2种蛋白的水平差异均有统计学意义(F=79.143、35.155、6.030、10.080、12.493和11.856,P均<0.05);轻、重度子痫前期患者胎盘组织中HMGB1及TLR4mRNA和蛋白的表达水平、母血中HMGB1和TLR4蛋白水平均高于正常晚孕妇女(P<0.05),但轻、重度子痫前期组之间差异无统计学意义(P<0.05)。子痫前期患者胎盘组织中HMGB1与TLR4mRNA相对表达量、母血中2个蛋白的表达水平呈正相关(r分别为0.862和0.783,P<0.001),胎盘组织中2个蛋白的表达亦呈正相关(rs=0.825,P<0.001)。结论:HMGB1和TLR4表达增高与子痫前期发病密切相关,可能是子痫前期的发病机制之一。     

高迁移率族蛋白B1在免疫应答中作用的研究进展

高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是一种DNA结合蛋白,在细胞外有细胞因子功能,能启动免疫反应,引起细胞炎性效应。生理状态下,HMGB1有核结合蛋白的作用,释放进入细胞间隙后,则表现出晚期炎性因子作用。HMGB1的识别及跨膜信号转导需要一系列分子的参与,其受体主要是晚期糖基化终产物、Toll样受体等。HMGB1作为一个内源性分子,促进免疫反应和组织内稳态。     

高迁移率族蛋白B1在神经系统疾病中的研究进展

高迁移率族蛋白B1是一种在哺乳动物中广泛表达的非组蛋白染色体结合蛋白,并通过晚期糖基化终产物受体和TOLL样受体参与炎症反应过程,而大多数神经系统疾病的发病机制与自身免疫或免疫炎性损伤相关.本文就高迁移率族蛋白B1在神经系统疾病中的研究进展进行综述.     

狼疮肾炎小鼠肾组织高迁移率族蛋白B1、Toll样受体、水通道蛋白的表达以及三七注射液的干预机制

目的探讨狼疮肾炎小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体(TLR)、水通道蛋白(AQP)的表达情况,并分析三七注射液干预狼疮肾炎小鼠的可能机制。方法将15只狼疮肾炎小鼠随机分为模型组、三七组、HMGB1抗体组,各5只,分别给予腹腔注射生理盐水、三七注射液、HMG1/HMGB1单克隆抗体;另设置5只正常小鼠为正常对照组,给予腹腔注射生理盐水。给药6周后处死小鼠,检测小鼠肾组织HMGB1、TLR4、TLR7、TLR9、AQP1、AQP2、AQP3蛋白及mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组HMGB1、TLR4、TLR7、TLR9、AQP1、AQP2、AQP3蛋白及mRNA表达水平均升高(均P<0.05)。与模型组比较,三七组与HMGB1抗体组的HMGB1、TLR4、TLR7、TLR9、AQP1、AQP2、AQP3蛋白和mRNA表达水平均降低(均P<0.05)。结论 HMGB1/TLR信号调控AQP表达可能是狼疮肾炎的发生机制之一;三七注射液可能通过干预HMGB1/TLR信号调控AQP表达发挥治疗狼疮肾炎的作用。     

高迁移率族蛋白-1在小鼠狼疮性肾炎中的表达

目的:研究新型细胞因子高迁移率族蛋白-1(HMGB-1)在小鼠狼疮性肾炎中的表达情况,探讨其可能的作用机制。方法:对肾组织进行常规病理检查、免疫病理检查和超微结构检查,以评价小鼠肾脏病理学损害程度;用酶联免疫吸附剂测定法检测鼠血清抗双链DNA(dsDNA)抗体滴度;用逆转录-聚合酶链反应法检测小鼠肾脏高迁移率族蛋白-1和单核细胞趋化因子-1表达水平。结果:MRL/lpr小鼠血清抗dsDNA抗体的滴度随着年龄的增加而上升,明显高于同龄C57BL/6J小鼠;随着年龄的增加,MRL/lpr小鼠肾脏组织病理损害加重,主要表现为急性和亚急性增生性肾小球肾炎;MRL/lpr小鼠肾脏中,HMGB-1 mRNA的表达明显高于同龄C57BL/6J小鼠,和MCP-1mRNA的表达量成正相关。结论:异常升高的HMGB-1可能参与MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎形成。     

高迁移率族蛋白B1在香烟诱导的慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺部的表达

目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠及断烟后大鼠肺部的表达。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组、COPD组及断烟组,每组10只。采用烟熏法建立COPD大鼠模型,HE染色观察支气管肺组织病理形态学改变,免疫组化法检测HMGB1的表达。结果 COPD组和断烟组肺平均内衬间隔显著高于正常对照组(P<0.05),而COPD组和断烟组比较差异无统计学意义;免疫组化染色可见HMGB1主要分布于支气管及肺泡上皮细胞,3组间平均积分光密度(AIOD)比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论单纯被动吸烟可复制COPD模型,HMGB1可能与COPD的发病有关。     

慢性阻塞性肺疾病患者支气管肺泡灌洗液中HMGB1的表达及意义

目的：通过测定慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者的支气管肺泡灌洗液（BALF）中高迁移率族蛋白B1（HMGB1）的含量并分析 HMGB1和气流受限的关系,初步探讨 HMGB1在COPD发病机制中的作用。方法将研究对象分为COPD组（COPD稳定期20例）和对照组（上气道咳嗽综合征20例）,均行支气管镜检查并行支气管肺泡灌洗术,检测并比较两组BALF中的细胞总数、中性粒细胞百分比;用ELISA法测定并比较两组 HMGB1、白细胞介素‐1β（IL‐1β）及肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）的含量,分析COPD组 HMGB1和IL‐1β、TNF‐α间的关系及 HMGB1和肺功能（FEV1％预计值）的关系。结果在BALF中,COPD组细胞总数、中性粒细胞百分比高于对照组（P＜0．01）;COPD组HMGB1、IL‐1β、TNF‐α的含量高于对照组（P＜0．01、P＜0．05、P＜0．01）,COPD组 HMGB1的含量和IL‐1β、TNF‐α呈正相关（r＝0．79,P＜0．01及 r＝0．48,P＜0．05）;COPD组 HMGB1和肺功能值（吸入支气管舒张剂后FEV1％预计值）呈负相关（r＝－0．70,P＜0．01）。结论 HMGB1参与和促进COPD气道炎症的发生、发展,BALF中HMGB1水平和COPD严重程度相关。     

高迁移率蛋白B1免疫调控机制研究

目的 初步探讨高迁移率蛋白（HMG）B1与活化T细胞核因子（NFAT）2的结合区域.方法 首先构建HMGB1真核表达质粒,然后确定HMGB1分段位置,分别构建HMGB1的A box区域与B box区域真核表达质粒,以及NFAT2的真核表达质粒.通过蛋白纯化及体外翻译技术得到纯化蛋白,最后进行GST沉降实验,观察HMGB1区域蛋白与NFAT2蛋白的结合情况.结果 在谷胱甘肽转移酶-沉降实验中,可检测到HMGB1 B box融合蛋白与NFAT2结合的阳性条带,不能检测到HMGB1 A box融合蛋白与NFAT2结合的阳性条带.结论 HMGB1可通过B段区域与NFAT2发生相互作用.     

前列腺癌根治术后HMGB1表达的意义

目的调查HMGB1在人类前列腺癌细胞链中的表达及对前列腺癌根治术预后的影响。方法通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测前列腺癌细胞株DU-145、PC-3以及LNCaP和正常前列腺细胞株RWPE-1中HMGB1的mRNA和蛋白表达水平。免疫组化法测定168例前列腺癌患者标本中的HM GB1蛋白表达水平。比较前列腺癌患者中HMGB1表达阳性和阴性组间的临床指标。探讨HMGB1蛋白的表达是否可以预测前列腺癌根治术后患者生化复发的危险性。结果三个前列腺癌细胞株DU-145、PC-3以及LNCaP与正常前列腺细胞株RWPE-1相比较,HM GB1的mRNA和蛋白表达水平都较高。前列腺癌根治术后患者的HM GB1蛋白表达阳性比率为60.1%（101/168）。标本中HMGB1蛋白表达阳性与患者的病理分期、Gleason评分、术前PSA和生化复发等因素相关。前列腺癌患者中HMGB1蛋白表达阳性相比于阴性其无生化复发生存时间较短（23.1 months vs.15.6 months）（P〈0.001）。HM GB1蛋白表达可以预测前列腺癌根治术后患者无生化复发的生存时间（hazard ratio=2.348,95%CI=1.373,6.361,P=0.001）。结论前列腺癌细胞株中HMGB1的mRNA和蛋白表达水平都较高,可能和前列腺癌的发病有关,可能作为一种新的瘤标预测前列腺癌根治术后生化复发的危险性。     

活体人主动脉组织高迁移率族蛋白B1的表达及其与动脉粥样硬化发病机制的关系

目的 探讨活体人主动脉组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）的表达与动脉粥样硬化发病机制的关系。方法 36例冠状动脉旁路移植术（CABG）主动脉打孔时废弃的主动脉组织为研究组,12名活体肾移植供体者的动脉组织为对照组。两组患者的样本均应用免疫组化法检测动脉组织HMGB1表达;研究组患者术前测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、脂蛋白(a)［Lp(a)］、载脂蛋白AⅠ（ApoAⅠ）、载脂蛋白B（ApoB）、高敏C-反应蛋白（hs-CRP）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、间接胆红素（IBIL）水平;采用冠状动脉造影、颈动脉超声检测冠状动脉及颈动脉的病变。结果 研究组主动脉组织HMGB1显著表达,而对照组动脉组织HMGB1无表达。研究组患者血清TC、TG、LDL-C、Lp(a)、ApoB、non-HDL-C、VLDL-C、hs-CRP测定值较参考值显著升高（P均＜0.01）,而血清HDL-C、ApoAⅠ、TBIL、DBIL、IBIL测定值较参考值明显降低（P均＜0.01）;冠状动脉重度狭窄发生率为86.1%;颈动脉超声检测显示内膜中层厚度均＞1.2mm。结论 活体人主动脉组织HMGB1表达显著,表明动脉粥样硬化炎性反应明显;利用CABG主动脉打孔时废弃的主动脉组织为样本,为研究动脉粥样硬化发病机制及干预靶点提供了新的方法和途径。     

氢气吸入对重度脓毒症小鼠血清高迁移率族蛋白B1水平的影响

目的:观察重度脓毒症小鼠吸入氢气后的存活情况及其血清高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)的水平,探讨氢气对脓毒症动物器官功能保护作用的分子学机制.方法:采用盲肠结扎穿孔术诱导的小鼠重度脓毒症模型.248只小鼠随机分为4组:假手术组、假手术+氢气吸入组、重度脓毒症组和重度脓毒症+氢气吸入组.氢气治疗分别为盲肠结扎穿孔术或假手术后1 h和6 h吸入2%氢气1 h.观察各组小鼠不同时间点生存率和血清HMGB1水平的变化.结果:重度脓毒症小鼠的7 d生存率为0%(P<0.05),且不同时间点血清HMBG1明显升高(P<0.05);氢气治疗可使重度脓毒症动物的7 d生存率升高至60%(P < 0.05),且使血清HMBG1的水平明显降低(P < 0.05).结论:氢气吸入能降低重度脓毒症小鼠血清的HMGB1水平并提高其生存率.