酶受体分析法测定3AO细胞LH/hCG 受体结合特性

建立培养细胞的酶受体分析法(enzyme receptor assay, ERA),应用ERA研究卵巢癌细胞株3AO的LH/hCG受体特性.采用过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)-人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, hCG)的酶标配体交联物, 与培养包被的3AO细胞在适当的条件下建立ERA, 并以人卵巢癌细胞株SKOV-3作为阴性对照, 测定3AO细胞膜上LH/hCG受体的竞争结合、特异性结合、饱和结合特性并计算受体的最大结合容量(Bmax)和解离常数(Kd).ERA测得3AO细胞LH/hCG受体的Bmax为3.65mmol/g蛋白, Kd为0.41nmol/L,未标记配体hCG抑制LH/hCG受体对酶标配体(HRP-hCG)特异结合的IC50为0.92μmol/L.结论: 竞争结合实验、特异性结合实验、饱和结合实验表明3AO细胞膜上存在高亲和力的LH/hCG受体.     

大疱性类天疱疮皮损中Th1/Th2趋化因子及其受体的表达

目的:研究Th1趋化因子CXCL9/MIG、CXCL10/IP-10、CXCL11/I-TAC和Th2型趋化因子CCL22/MDC及其受体CXCR3、CCR4在大疱性类天疱疮(BP)皮损中的表达。方法:应用免疫组化方法检测30例BP患者皮损及20例正常皮肤中CX-CL9、CXCL10、CXCL11、CCL22、CXCR3和CCR4的表达。结果:BP皮损中4种趋化因子及其受体的表达均高于正常皮肤。其中,Th1趋化因子CXCL9、CXCL10和CXCL11及其受体CXCR3的阳性率分别为50%(15/30)、46.7%(14/30)、46.7%(14/30)和53.3%(16/30),Th2趋化因子CCL22及其受体CCR4的阳性率分别为66.7%(20/30)、56.7%(17/30)。正常对照中CXCL9、CX-CL10、CXCL11及其受体CXCR3的阳性率分别为10.0%(2/20)、10.0%(2/20)、15.0%(3/20)和15.0%(3/20),CCL22及其受体CCR4的阳性率分别为20.0%(4/20)和25.0%(5/20)。结论:Th1趋化因子CXCL9、CXCL10、CXCL11和Th2趋化因子CCL22及其受体CXCR3和CCR4在BP皮损中表达升高,提示它们可能在BP的发病机制中起一定作用。     

子宫内膜异位症患者腹腔Th17细胞和Th17.1细胞检测及致炎活性分析

目的:鉴别和分离子宫内膜异位症患者腹腔冲洗液中的辅助性T细胞17(Th17)和辅助性T细胞17.1(Th17.1),并比较二者致炎活性。方法:收集中重型子宫内膜异位症患者的腹腔冲洗液,根据细胞表面趋化因子受体CC趋化因子受体6(CCR6)、CC趋化因子受体10 (CCR10)、CC趋化因子受体4(CCR4)、CXC趋化因子受体3(CXCR3)表达差异,利用流式细胞术鉴别不同的腹腔T细胞亚群,检测其白介素-17A(IL-17A)、干扰素-γ(IFN-γ)和T-bet转录因子(T-bet)的表达,同时结合实时定量逆转录聚合酶链反应检测RAR相关孤儿受体C (RORC)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(CSF2)、白介素1受体Ⅰ型(IL1R1)等基因的mRNA水平,鉴别Th17和Th17.1细胞,并比较其致炎活性的差异。结果:腹腔Th17细胞的表型为CD3⁺CD4⁺CCR6⁺CCR10^-CCR4⁺CXCR3^-/lo, Th17.1细...     

抗G-蛋白偶联受体自身抗体与甲状腺毒症性心脏病的关系

目的:探讨AT1-受体、α1-肾上腺素能受体(α1-受体)和β1-肾上腺素能受体(β1-受体)自身抗体与甲状腺毒症性心脏病的关系。方法:237例甲亢患者中包括甲状腺毒症性心脏病(甲亢心组,n=46)及非甲状腺毒症性心脏病(非甲亢心组,n=191),后者中又分为甲亢治疗组(n=106)和甲亢恢复组(n=85)。另选41例体检健康者为正常对照组。以细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原,应用酶联免疫吸附测定技术,检测各组血清抗AT1、α1和β1-受体自身抗水平。结果:(1)237例甲亢患者抗AT1、α1和β1-受体自身抗体阳性率分别为31.65%(75/237)、27.85%(66/237)和23.63%(56/237),明显高于正常对照组的9.76%(4/41)、12.20%(5/41)和7.20%(3/41)(P均0.05);(2)甲亢心组抗AT1和α1-受体自身抗体阳性率分别为52.17%(24/46)和43.48%(20/46),明显高于非甲亢心组的26.70%(51/191)和24.08%(46/191)(P均0.05);而抗β1-受体自身抗体阳性率在两组间差异无统计学意义(P0.05)。(3)进一步分析表明,甲亢心组抗AT1和α1-受体自身抗体阳性率分别为52.17%(24/46)和43.48%(20/46),明显高于甲亢治疗组的30.19%(32/106)和23.58%(25/106)以及甲亢恢复组的22.35%(19/85)和24.71%(21/85)(P均0.05)。而抗β1-受体自身抗体在三组差异无统计学意义(P0.05)。结论:抗G蛋白偶联型AT1-受体、α1-受体和β1-受体自身抗体可能与甲状腺功能亢进症有关,且抗AT1和α1-受体自身抗体可能参与了甲状腺毒症性心脏病的病理生理过程。     

淫羊藿素通过雌激素受体和骨形态发生蛋白信号诱导MC3T3-E1 subclone 14细胞分化

目的: 观察淫羊藿素(ICT)对MC3T3-E1 subclone 14前体成骨细胞株增殖、分化的影响,以及雌激素受体(ER)和骨形态发生蛋白(BMP)信号在分化中的作用。方法: WST-8、BrdU法检测ICT对MC3T3-E1 subclone 14细胞活力和增殖的影响;ICI182780阻断ER受体信号后,检测ICT和noggin对MC3T3-E1 subclone 14细胞碱性磷酸酶(ALP)活性、I型胶原(Col I)和骨钙素(BGP)的影响;实时荧光PCR检测ICT对BMP-2、4、7 mRNA表达的影响;Western blotting检测ER受体信号阻断后,ICT对Smad1/5/8蛋白磷酸化的影响。结果: ICT(0.1 μmol/L、1 μmol/L)可以提高MC3T3-E1 subclone 14细胞ALP、Col I、BGP和矿化结节数量(P<0.01或P<0.05),表明ICT有促分化的作用,但对细胞活力和增殖指数无明显影响;阻断ER受体信号后,ICT促分化作用明显下降(P<0.01);ICT可以提高BMP-2、4 mRNA的表达(P<0.01),但对BMP-7 mRNA无作用(P>0.01);阻断ER信号后,ICT 促Smad1/5/8磷酸化明显减弱(P<0.01)。进一步阻断BMP/Smad信号可以抑制ICT促分化的作用(P<0.01)。结论: ICT可以通过ER受体激活BMP/Smad信号通路,进而促进MC3T3-E1 subclone 14细胞的分化。     

慢性应激抑郁模型大鼠脑内5-HT1A和5-HT2A受体的变化

为了在5-羟色胺受体水平研究抑郁症的机制和三环类抗抑郁药物(TCAs)阿米替林的药理学机理,将24只SD雄性大鼠随机均分为三组,即对照组、抑郁组、阿米替林治疗组.应用[3H]8-OH-DPAT、[3H]Ketanserin作为标记配基,采用放射性配体受体结合法,分别测定大鼠海马5-HT1A受体、大脑皮层5-HT2A受体结合.结果显示抑郁大鼠海马 [3H]8-OH-DPAT 特异性结合(18.78±5.62 fmol/mg prot),较正常对照组(26.12±5.52fmol/mg prot )明显下降(P＜0.05).抑郁大鼠大脑皮层[3H]Ketanserin特异性结合(112.58±4.21fmol/mg prot),较正常对照组(86.28±4.24fmol/mg prot)明显增加( P＜0.05).阿米替林治疗3周后,可使抑郁大鼠海马5-HT1A受体与大脑皮层5-HT2A受体结合恢复正常.提示 海马5-HT1A受体结合下降、大脑皮层5-HT2A受体结合增加可能与抑郁症病因有关;海马5-HT1A受体、大脑皮层5-HT2A受体是阿米替林发挥抗抑郁作用的环节.     

大鼠主动脉球囊成形术后尾加压素II受体的变化

目的 :观察大鼠主动脉球囊成形术后尾加压素II (UII)受体特征的变化及血管对UII收缩效应的改变。方法 :测定大鼠主动脉球囊损伤后 [12 5I]-UII配体结合及血管张力。结果 :球囊成形术后 3d、2 1d时 ,血管对UII的反应性增强 (P <0 0 5 ) ,主动脉UII受体最大结合 (Bmax)较对照组分别高 44 %及 36 % [(35 0 3± 2 41)pmol/gproteinand (33 2 6± 2 40 )pmol/gproteinvs(2 4 37± 3 2 0 )pmol/gprotein ,P <0 0 1],受体与配体解离常数 (Kd)无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :血管球囊损伤后UII受体发生上调 ,受体密度增加 ,血管对UII的反应性增强 ,表明UII可能在血管成形术后再狭窄过程中发挥重要作用。     

精氨酸加压素对大鼠下丘脑视前区AMPA受体GluR1-3蛋白表达的影响

目的研究精氨酸加压素(AVP)对大鼠下丘脑视前区(POA)α-氨基-3-羟基-5-甲基异恶唑-4-丙酸(AMPA)受体GluR1-3 mRNA和蛋白质表达的影响。方法腹腔注射AVP(10μg/kg)或AVP V1a受体抑制剂(30μg/kg)0.5 h后,用反转录实时荧光定量PCR和Western blot检测视前区AMPA受体亚基GluR1、GluR2和GluR3 mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,V1a受体抑制剂明显降低了GluR2 mRNA表达(P0.05);AVP能显著上调视前区AMPA受体亚基GluR1和GluR2蛋白水平(P0.01),减少GluR3蛋白表达(P0.01),但V1a受体抑制剂不能阻断这一作用。结论外源性AVP主要通过影响AMPA受体亚基蛋白表达来调制大鼠视前区AMPA受体介导的谷氨酸能突触传递。     

N和M1受体介导乙酰胆碱对大鼠尾核痛兴奋神经元放电的抑制作用

目的研究不同胆碱能受体及其亚型在乙酰胆碱(ACh)对大鼠尾核痛兴奋神经元(PEN)放电影响中的作用。方法以电脉冲刺激左侧坐骨神经作为伤害性刺激,用玻璃微电极细胞外记录神经元的放电变化,观察脑室注射ACh和M1、M3、M4以及N受体阻滞剂对尾核PEN电活动的影响。结果(1)脑室注射ACh(2g/L)可抑制大鼠尾核PEN的电活动,使PEN痛诱发放电频率减少,潜伏期延长;(2)ACh对PEN放电的抑制作用可被N受体阻滞剂筒箭毒碱(tubocurare,0.08g/L)和M1受体阻滞剂哌仑西平(pirenzepine,1g/L)所拮抗。(3)M3受体阻滞剂4-DAMP(1g/L)和M4受体阻滞剂托品酰胺(tropicamide,1g/L)不能拮抗ACh对PEN的抑制作用。结论ACh参与尾核镇痛作用可能主要是通过N受体和M1受体介导。     

胰岛素对牛胸主动脉内皮细胞血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的:评价胰岛素对培养的牛胸主动脉内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达的影响。方法: 取新生的小牛胸主动脉,做血管内皮细胞原代及传代培养,取4-6代培养细胞分组,应用不同浓度的胰岛素(30 mU/L、300 mU/L、3 000 mU/L)干预培养过程,48 h后应用免疫组化法测定内皮细胞VEGF及其受体(flt-1、flk-1/KDR)的表达水平。结果: 低浓度胰岛素组(30 mU/L、300 mU/L)内皮细胞VEGF表达明显高于不用胰岛素组(P<0.01);高浓度组(3 000 mU/L)内皮细胞VEGF表达明显低于不用胰岛素组(P＜0.05);各组内皮细胞VEGF受体(flt-1及flk-1/KDR)的表达无明显差异(P＞0.05)。结论: 低浓度胰岛素促进小牛主动脉血管内皮细胞VEGF表达;高浓度胰岛素可抑制血管内皮细胞VEGF表达;胰岛素对小牛主动脉血管内皮细胞VEGF受体(flt-1、flk-1/KDR)的表达无直接影响。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.