精氨酸酶1在肝细胞癌中的表达及其临床病理意义

目的 检测人类精氨酸酶1(ARG1)在肝细胞癌(HCC)中的表达,分析其与患者临床病理特征的关系.方法 利用高通量组织芯片技术和免疫组织化学方法评价167例HCC及癌旁肝组织中ARG1蛋白的表达情况,采用x2检验和Spearman秩相关分析ARG1蛋白表达与各临床病理特征间的关系.应用实时荧光定量PCR方法检测68例HCC及其癌旁肝组织中的ARG1 mRNA表达水平.结果 HCC中ARG1蛋白表达水平为3.540±3.702,明显低于癌旁肝组织(10.290±2.303;t=-22.421,P=0.000).ARG1表达与HCC分化程度、组织学分级、微血管侵犯、术前甲胎蛋白水平、术后复发有关(P值均＜0.05).68例HCC组织中ARG1 mRNA表达水平为0.0997(0.213),低于癌旁肝组织0.563(0.459);u=-6.544,P=0.000].结论 ARG1在HCC中低表达,其可能参与HCC发生发展.检测ARG1表达可能有助于HCC辅助诊断、评估分化程度及预后判断.     

长链非编码RNA RMRP和miR-34在肝细胞癌组织的表达及相关性

[目的]探讨长链非编码RNA(Long noncoding RNAs,Lnc RNA)线粒体RNA处理核糖核酸内切酶RNA组份(RNA component of mitochondrial RNA-processing endoribonuclease,RMRP)对肝细胞癌(HCC)细胞生物学行为的作用及与患者预后的关系。[方法]购得66例HCC组织和16例癌旁组织的cDNA芯片,采用实时荧光定量PCR(quantitative realtime PCR,qRT-PCR)法检测HCC组织中RMRP和微小RNA-34(microRNA-34,miR-34)的表达;分析RMRP表达与患者临床病理参数之间的关系;并分析RMRP表达与miR-34表达二者间的相关性。将SMMC-7721细胞系分为空白组(negative control,NC)、对照组(sh-vector)和实验组(sh-RMRP),分别为未感染慢病毒、只感染空载质粒及感染sh-RMRP-慢病毒(lentivirus,lenti),采用MTT实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力。[结果]RMRP在HCC组织中的表达明显高于癌旁组织(t=13.41,P0.05),且HCC组织中RMRP的表达与T分级、TNM分期及是否复发相关(P0.05);RMRP与miR-34表达呈明显负相关(r=-0.802,P0.05);细胞转染后培养12、24、48、72 h后,sh-RMRP组吸光度值(OD490值)明显低于NC组和sh-vector组(分别F=30.42,73.68,52.94,107.37,P0.05);sh-RMRP组克隆形成数明显低于NC组和sh-vector组(F=257.0,P0.05),RMRP高表达患者总体生存率明显低于RMRP低表达患者(P0.05)。[结论]LncRNA RMRP在HCC组织中呈高表达,提示HCC患者预后不良。     

肝癌组织IFITM3蛋白表达水平及其与肝细胞癌患者手术切除术后肝内肿瘤复发的相关性分析

目的探讨肝细胞癌(HCC)组织干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)表达水平及其临床意义。方法在我院接受根治性手术切除治疗的43例HCC患者,术中取癌组织和癌旁肝组织,分别采用Western blot法和免疫组化法检测组织IFITM3蛋白表达情况,比较肝内肿瘤复发与未复发患者癌组织IFITM3表达的差异。结果经Western blot法检测肝癌组织IFITM3表达水平为(1.2386±0.1901),显著高于癌旁组织的(0.9496±0.0995,t=8.832,P=0.000);免疫组化法检测显示肝癌组织IFITM3蛋白阳性率为72.1%(31/43),明显高于癌旁组织的14.0%(6/43,x~2=29.647,P=0.000);中分化肝癌组织IFITM3蛋白阳性率为90.9%(10/11),低分化肝癌组织为95.2%(20/21),均明显高于高分化组的9.1%(1/11)(x~2=14.727, P=0.000;x~2=23.748,P=0.000);术后复发组癌组织IFITM3蛋白阳性率为81.0%(17/21),未复发组为22.7%(5/22),两者比较差异具有统计学意义(x~2=14.578,P=0.000)。结论 HCC组织IFITM3蛋白呈高表达,且肝癌分化越差,IFITM3表达也越强,并可能与术后肿瘤复发有关。     

原发性肝癌中FADD蛋白表达及其与细胞凋亡关系研究

研究Fas相关死区蛋白在肝癌中的表达 ,并探讨其与HCC中细胞凋亡的关系。免疫组织化学方法检测FADD蛋白表达 ,原位末端标记检测HCC细胞凋亡。 2 0例 (2 5 6 % )HCC表达FADD蛋白。与癌旁非癌肝组织相比(10 / 16 ,6 2 5 % ) ,HCC中FADD阳性率显著降低 (P <0 0 5 )。 36例分化中等良好的HCC中 ,12例 (33 3% )表达FADD ,略高于分化差的HCC中的阳性率 (8/ 4 2 ,19 0 % ) ,但差别没有显著性意义。Ⅰ /Ⅱ级HCC中 ,16例为FADD阳性 (16 / 4 2 ,38 1% ) ,而Ⅲ /Ⅳ级HCC中的阳性率仅为 11 1% ,差别有显著性意义 (P <0 0 5 )。所有标本中均可检测到凋亡的细胞 ,FADD蛋白中等至强阳性的HCC中 ,细胞凋亡程度较高 ,与FADD表达弱阳性或阴性的HCC相比 ,差别有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,而癌旁非癌肝组织中 ,FADD蛋白表达细胞凋亡程度无关 (P >0 0 5 )。FADD蛋白表达减少在HCC的发生中起重要作用 ,FADD蛋白表达强度与HCC细胞凋亡密切相关     

肾透明细胞癌组织中趋化因子CXC配体3的表达及意义

目的研究趋化因子CXC配体(L)3在肾透明细胞癌及癌旁组织的表达差异,探讨CXCL3表达与肾透明细胞癌临床病理参数的相关性。方法利用免疫组织化学染色方法检测肾脏组织芯片中CXCL3的表达。结果与肾透明细胞癌组织比较,癌旁组织CXCL3表达量显著提高(P=0.000);癌组织和癌旁组织肾透明细胞癌Ⅲ级组织CXCL3表达水平均显著高于Ⅱ级(P=0.044;P=0.037);CXCL3表达水平与肾透明细胞癌临床病理参数无相关性。结论 CXCL3表达水平与肾透明细胞癌临床分级呈正相关,其可能主要经旁分泌机制参与肾透明细胞癌进程。     

miR-1180在胃癌中的表达及其对胃癌增殖、凋亡的影响

目的研究miR-1180在胃腺癌组织及胃癌细胞系中的表达及其对胃癌细胞增殖、凋亡的影响,探讨miR-1180在胃癌中可能的作用机制。方法应用qRT-PCR检测58例胃腺癌及20例癌旁正常组织中miR-1180的表达,分析其表达与胃腺癌临床病理特征的关系。检测miR-1180在胃癌细胞系中的表达,慢病毒干扰技术下调SGC-7901中miR-1180的表达,检测下调后对SGC-7901增殖、凋亡及细胞周期的影响。结果与癌旁正常组织比较,58例胃腺癌组织中miR-1180的表达明显增加(t=16.463,P=0.000),miR-1180的表达与患者的肿瘤大小、TNM分期及淋巴结转移有关(P均<0.05)。miR-1180在胃癌细胞系中表达升高(P=0.000),下调SGC-7901中miR-1180的表达,可见细胞增殖减少(3113±74 vs 1673±51,P=0.000),凋亡增加(4.313±0.220 vs 7.717±0.125,P=0.000);细胞周期G 1期细胞明显增加(45.89±0.33 vs 60.44±0.390,P=0.000),S期细胞明显减少(35.523±0.354 vs 21.953±0.444,P=0.000),G 2期细胞变化不大(18.587±0.672 vs 17.603±0.731,P=0.162)。结论miR-1180的表达促进胃癌的进展,胃癌中miR-1180的高表达与预后不良有关。     

肝细胞癌中Ki-67和FasL的表达关系及临床意义

目的探究肝细胞癌(HCC)中Ki-67和FasL的表达关系及临床意义。方法收集2008年6月至2012年6月本院78例HCC组织及癌旁组织,同时取18例肝脏正常组织作为对照。SP免疫组化方法检测组织标本中Ki-67和FasL表达情况;结合临床资料分析Ki-67、FasL与HCC患者临床病理特征及预后的关系。结果 (1)SP免疫组化结果显示,Ki-67主要表达于HCC组织细胞核内,其在HCC组织中阳性表达率显著高于癌旁组织(χ~2=32.402,P=0.000)和正常组织(χ~2=53.820,P=0.000)。(2)FasL主要表达于HCC组织细胞质内,其在HCC组织中阳性表达率显著高于癌旁组织(χ~2=12.484,P=0.000)和正常组织(χ~2=19.309,P=0.000)。(3)Ki-67、FasL表达强度与HCC患者的病理分级、淋巴结是否转移有关(P0.05)。(4)至随访结束,全部患者的中位生存时间为50个月,术后1、3、5年累积生存率分别为82.05%、60.26%、47.44%。Ki-67高表达患者术后1、3、5年的累积生存率分别为75.51%、48.98%、38.78%;Ki-67低表达患者分别为93.10%、79.31%、62.07%;两者生存率差异有统计学意义(P0.05)。FasL高表达患者术后1、3、5年的累积生存率分别为71.88%、43.75%、31.25%;FasL低表达患者分别为89.13%、73.91%、58.70%;两者生存率差异有统计学意义(P0.05)。结论 Ki-67和FasL表达水平与HCC的发生、发展有关,可用来评估HCC患者的临床预后。     

RNA、lnc-EGFR对肝细胞癌免疫逃避调节的相关性

目的探讨RNA、表皮生长因子受体长链非编码RNA(lnc-EGFR)对肝细胞癌(HCC)免疫逃避调节的相关性。方法通过医院病理档案室随机选择保定市第一中心病医院2017年1月至2019年1月收集的HCC标本30份和癌旁正常组织30份,采用RT-PCR法检测各组织中RNA、lnc-EGFR表达水平;蛋白质印迹法检测HCC组织中化学因子和细胞免疫因子表达情况,并分析RNA、lnc-EGFR与其相关性;将HCC细胞株随机分为两组,分别为RNA、lnc-EGFR抑制组(n=15)与空白对照组(n=15),MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况与细胞周期分布情况。结果癌旁正常组织中RNA、lnc-EGFR表达水平分别为(0.46±0.12)和(0.62±0.15)低于HCC组织(0.22±0.06)和(0.14±0.05)(P<0.05)。HCC组织中CXCL12-CXCR4表达水平低于癌旁正常组织(P<0.05);HCC组织中CCL20-CCR6、CX3CLI-CX3CR1高于癌旁正常组织(P<0.05);HCC组织中细胞免疫因子IL-6、IL-10、TGF-β、TNF-α表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05);RNA、lnc-EGFR表达水平与CXCL12-CXCR4呈显著负相关(P<0.05),与CCL20-CCR6、CX3CLI-CX3CR1、IL-6、IL-10、TGF-β、TNF-α呈显著正相关关系(P<0.05);HCC、癌旁正常组织中细胞相对吸光度、细胞凋亡率、细胞周期占比均具有统计学差异(P<0.05)。结论RNA、lnc-EGFR在HCC组织中呈高表达水平,可通过上调组织中化学因子和细胞免疫因子水平来提高癌细胞免疫逃避调节水平,与HCC免疫逃避调节具有显著相关性。     

Survivin的表达与非小细胞肺癌生物学特征及预后的关系

目的探讨凋亡抑制基因Survivin的表达与非小细胞肺癌(NSCLC)生物学特征及临床预后的关系。方法应用免疫组化检测了70例NSCLC中Survivin的表达,并选取30例癌旁组织作为对照,比较Survivin的表达与NSCLC患者生物学特征及预后的关系。结果Survivin在NSCLC中的阳性表达率为74.3%,而癌旁组织无1例表达,Survivin的表达与肺癌患者年龄、性别、病理类型、分化程度无关(P0.05),与临床分期有关(P=0.008);Survivin表达阳性者生存时间明显低于阴性表达者(P=0.000),COX回归显示Survivin与NSCLC患者预后有关(P=0.001)。结论Survivin与NSCLC的发生发展有关,过度表达提示预后不良,Survivin有望成为肺癌诊断和基因治疗的新靶点。     

异黏蛋白和Wnt5b在乙型肝炎相关性肝细胞癌组织中的表达和意义

目的探究异黏蛋白(MTDH)和Wnt5b在乙型肝炎相关性肝细胞癌(HCC)组织中的表达以及临床意义。方法收集124例于2010年3月至2015年9月确诊为乙型肝炎相关性HCC患者的肿瘤组织和癌旁组织,免疫组织化学法检测MTDH和Wnt5b在HCC组织和癌旁组织中表达情况,从基因层面检测它们在两种组织中的表达,并分析其与临床病理之间的关系。结果乙型肝炎相关性HCC组织中MTDH和Wnt5b的阳性表达率分别为68.55%和57.26%,癌旁组织中两者的阳性表达率分别为26.61%和22.58%,MTDH和Wnt5b在乙型肝炎相关性HCC组织中的表达明显升高,差异有统计学意义(P0.05);MTDH和Wnt5b在乙型肝炎相关性HCC组织中的表达呈正相关(r=0.502,P0.05);MTDH和Wnt5b在乙型肝炎相关性HCC组织中的表达水平与TNM分期(P=0.036)、BCLC分期(P=0.005)、淋巴结转移(P=0.026)、是否复发(P=0.005)有明显的相关性;MTDH和Wnt5b低表达组的术后生存时间均明显高于MTDH和Wnt5b高表达组,差异均存在统计学意义(P均0.000 1)。结论MTDH和Wnt5b在乙型肝炎相关性HCC组织中高表达,高表达的患者预后较差。     

肝癌组织IFITM3蛋白表达水平及其与肝细胞癌患者手术切除术后肝内肿瘤复发的相关性分析*

目的 探讨肝细胞癌（HCC）组织干扰素诱导跨膜蛋白 3（IFITM3）表达水平及其临床意义。方法 在我院接受根治性手术切除治疗的43例HCC患者,术中取癌组织和癌旁肝组织,分别采用Western blot法和免疫组化法检测组织IFITM3蛋白表达情况,比较肝内肿瘤复发与未复发患者癌组织IFITM3表达的差异。结果 经Western blot法检测肝癌组织IFITM3表达水平为（1.2386±0.1901）,显著高于癌旁组织的（0.9496±0.0995,t=8.832,P=0.000）;免疫组化法检测显示肝癌组织IFITM3蛋白阳性率为72.1%（31/43）,明显高于癌旁组织的14.0%（6/43,x²=29.647,P=0.000）;中分化肝癌组织IFITM3蛋白阳性率为90.9%（10/11）,低分化肝癌组织为95.2%（20/21）,均明显高于高分化组的9.1%（1/11）（x²=14.727, P=0.000;x²=23.748,P=0.000）;术后复发组癌组织IFITM3蛋白阳性率为81.0%（17/21）,未复发组为22.7%（5/22）,两者比较差异具有统计学意义（x²=14.578,P=0.000）。结论 HCC组织IFITM3蛋白呈高表达,且肝癌分化越差,IFITM3表达也越强,并可能与术后肿瘤复发有关。     

肝细胞癌组织COPB2基因水平变化及其临床意义探讨

目的 探讨肝细胞癌(HCC)组织衣被蛋白复合体亚基β2(coatomer protein complex subunit beta 2,COPB2)基因水平变化及其临床意义。方法 在113例HCC患者,采取肝癌切除术治疗,取癌组织和癌旁肝组织,采用RT-PCR法检测COPB2 mRNA水平,采用Western blot法和免疫组化法检测COPB2蛋白表达水平。建立多变量COX比例风险回归模型分析影响HCC患者预后的独立危险因素。结果 HCC组织和癌旁肝组织COPB2基因mRNA水平分别为1.32±0.40和0.47±0.14,差异具有统计学意义(P=0.013),两者COPB2蛋白相对表达水平分别为1.35±0.56和0.44±0.12,也具有显著性统计学差异(P=0.035);本组癌组织COPB2蛋白高表达45例(39.8%),低表达或阴性68例(60.2%);有无HBV感染、术前血清AFP水平、不同肿瘤结节数目、肿瘤分化程度和有无血管浸润患者癌组织COPB2蛋白表达强度不同(P＜0.05);本组113例患者死亡68例(59.8%),生存时间为(1047.0±167.7) d,中位生存时间1046 d;COPB2蛋白高表达组平均生存时间为(747.3±116.3) d,中位生存时间为610 d,COPB2蛋白低表达组平均生存时间为(1673.7±213.5) d,中位生存时间为1462 d(P=0.001);多因素Cox比例风险回归模型分析结果显示,术前血清AFP水平、血管浸润、肿瘤结节数目和肝癌组织COPB2表达水平是影响 HCC患者总生存时间的独立影响因素(P<0.05)。结论 HCC患者癌组织COPB2过表达可能预示不良预后,该基因及其蛋白表达可能与肿瘤细胞侵袭转移密切相关,COPB2可能成为预警HCC患者不良预后的一个新的分子标志物并可能成为潜在的治疗靶点。     

Cell proliferation, apoptosis and the related regulators p27, p53 expression in hepatocellular carcinoma

AIM: To investigate the expression of cell apoptosis, proliferation and the related regulators p27,p53 in hepatocellular carcinoma (HCC). METHODS: The expression of p27, p53, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and apoptosis in 47 HCC specimens and 42 surrounding non-cancerous tissues were detected by the immunohistochemistry and terminal deoxy-nudeotidyl transferase-mediated nick end labeling (TUNEL) technique. Meanwhile, the clinical significance of them was analyzed combining with the clinicopathological factors and follow-up data. RESULTS: (1) The average proliferating index and apoptotic index in HCC were significantly higher than that in adjacent liver tissues. The proliferating index was associated with extrahepatic metastasis. The apoptotic index was significantly lower in TNM stage Ⅰ-Ⅱ than in stage Ⅲ-Ⅳ. The proliferating index of groups with p53-/p27+ was significantly lower than that in group with p53+/p27- (P= 0.030); (2) The level of p27 in the cytoplasmic fraction was higher in non-tumoral liver tissues and was associated with clinical stage; (3) Survival analysis showed advanced stage (P=0.031) and with extrahepatic metastasis (P = 0.045) was significantly associated with shorter survival. In addition, the prognosis of patients with p53-/p27+ was longer than that of patients with p53+/p27- (P= 0.0356). CONCLUSION: The p53 mutation and decreased p27 expression might be involved in the imbalance of proliferation and apoptosis in HCC. Cytoplasmic displacement might lead to the inactivation of p27 protein in HCC cells and acts early during carcinogenesis of HCC. The combined examination of p27, and p53 expression allows reliable estimation of prognosis for patients with primary hepatic carcinoma.     

Expression and clinical significance of TAp73α, p53, PCNA and apoptosis in hepatocellular carcinoma

AIM: To study the prognostic role of TAp73α, p53, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and apoptosis inpatients with hepatocellular carcinoma (HCC) atter surgical tumor ablation.METHODS: Forty-seven human resected HCC tissues and 42 adjacent non-cancerous tissues were studied with 10 normal liver tissues as control group. TAp73α, p53, and PCNA were detected with Elivision immunohistochemistry.Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-mediatedd-UTP-biotin nick-end labeling (TUNEL) method wasused to detect the apoptosis cells. All clinical and pathological materials were analyzed by SPSS10.0statistical package.RESULTS: TAp73α overexpressed in HCC tissues (36.2%) when compared with adjacent non-cancerous tissues (2.38%, P＜0.005) and normal liver tissues (0, P＜0.01).Mutant type p53 (mt-p53) overexpressed in HCC tissues (38.3%) when contracted with adjacent non-cancerous tissues (16.7%, P＜0.05) and normal liver tissues (0, P＜0.01). Proliferation index (PI) level in HCC tissues was significantly higher than that in adjacent non-cancerous tissues (30.34%±4.46% vs 27.88%±5.89%, t, P= 0.028). Apoptosis index (AI) level in HCC tissues was higher than that in adjacent non-cancerous tissues (8.62%±2.28% vs 7.38%±2.61%, t, P = 0.019). Expression of TAp73α was associated with lymph node metastasis and mt-p53, with r = 0.407 and 0.265, respectively. Expression of mtp53 was associated with Edmondson's stage and AFP, with r = 0.295 and -0.357, respectively. In Kaplan-Meier univariant analysis, TAp73α, AFP, TNM stage, portal vein invasion, liver membrane invasion and HBsAg correlated with prognosis (log rank, P = 0.039, 0.012, 0.002, 0.000,0.014, 0.007, respectively). Multivariant Cox regression analysis showed that TAp73α, AFP, TNM stage, portal vein invasion, liver membrane invasion and age were independent factors of prognosis. CONCLUSION: These results suggest that TAp73α can be used as a prognostic indicator of patients with HCC undergoing surgical tumor ablation. AFP, TNM, portal vein invasion, liver membrane invasion and age also have a potency of predicting the prognosis of HCC.     

CD34与CD117在人肝癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究肝细胞肝癌组织中CD34与CD117的表达情况,探讨其与临床病理的关系及其对肝细胞肝癌(HCC)患者预后的评价.方法 应用免疫组织化学PV-9000二步法检测55例HCC组织标本中CD34和CD117的表达,并与临床病理学指标和术后无瘤生存期进行比较分析,对照组为肝硬化组织10例,正常肝组织6例.采用SPSS16.0统计分析软件对CD34和CD117表达结果及与临床病理参数的关系进行Fisher精确检验,Pearson χ2检验,Kaplan-Meier生存分析,Log-Rank检验,Cox回归模型分析等检验.结果 CD34在HCC组、肝硬化组和正常肝组织组表达阳性率分别为65.4%、20.0%和16.7%,HCC组织中的阳性率大于肝硬化组织(P=0.012)及正常肝组织组(P=0.031),差异有统计学意义.但正常肝组织组与肝硬化组比较,差异无统计学意义.CD34表达在HCC组中与脉管瘤栓、中瘤分化程度有密切相关性,χ2值分别为4.000和11.008,P值分别为0.046和0.001.CD117在HCC组、肝硬化组和正常肝组织组表达阳性率分别为47.3%、10%和0,HCC组阳性率大于肝硬化组(P=0.037)及正常肝组织(P=0.033),差异无统计学意义.但正常肝组织与肝硬化组比较,差异无统计学意义.CD117表达在HCC组中与肿瘤分化程度、肿瘤分期有相关性,χ2值分别为5.115和15.459,P值分别为0.024和0.000.HCC组CD34阳性组及CD34阴性组的中位无瘤生存时间分别为17个月和19个月,CD34阳性组较CD34阴性组无瘤生存时间缩短,χ2=4.105,P=0.043,差异有统计学意义.CD117阳性组及CD117阴性组的中位无瘤生存时间分别为12个月和19个月,CD117阳性组的无瘤生存时间较CD117阴性组也明显缩短,χ2=28.023,P=0.000,差异有统计学意义.COX多因素分析显示CD117表达、血清甲胎蛋白水平及肿瘤大小是HCC患者术后2年无瘤生存时间的独立预后因素.结论 CD34与CD117可能在HCC发生、发展过程中具有重要作用,有望成为判断预后的指标.     

Caspase-9和Survivin在肝细胞癌患者癌组织中的表达

目的：探讨Survivin和caspase-9在肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）患者癌组织中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法2013年1月至2013年5月住院治疗的HCC患者53例,应用免疫组织化学方法分析Survivin和caspase-9蛋白在HCC组织中的表达,对应的癌旁正常肝组织作为对照。结果Survivin蛋白表达在HCC组织中阳性率为66．04％（35/53）,明显高于正常肝组织的7．55％（4/53）。相反,caspase-9蛋白表达在HCC组织中阳性率仅为35．85％（19/53）,显著低于正常肝组织的64．15％（51/53）,差异具有统计学意义（P＜0．05）。T期、N期、M期患者HCC组织中Survivin蛋白表达阳性率呈现不断攀升趋势,而caspase-9蛋白表达阳性率则呈逐渐下降趋势。结论Survivin在HCC组织中高表达,并有可能通过抑制caspase-9蛋白来抑制组织细胞的凋亡。     

Expressions of inducible nitric oxide synthase and matrix metalloproteinase-9 and their effects on angiogenesis and progression of hepatocellular carcinoma

AIM: To determine the expressions of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in hepatocellular carcinoma (HCC) and to investigate the relationship between iNOS and MMP-9 expression and their effects on angiogenesis and progression of HCC. METHODS: In this study, we examined iNOS, MMP-9, and CD34 expression in specimens surgically removed from 32 HCC patients and 7 normal liver tissues by immunohistochemical staining. Meanwhile, microvessel density (MVD) was determined as a marker of angiogenesis by counting CD34-positive cells. RESULTS: The positive rates of iNOS and MMP-9 expression were 71.88% (23/32) and 78.13% (25/32) in HCC. MMP-9 expression was significantly correlated with tumor size, capsule status, TNM stage, and risk of HCC recurrence (P= 0.032, P= 0.033, P= 0.007, and P= 0.001, respectively). There was also a significant relationship between iNOS expression and capsule status and risk of HCC recurrence (P= 0.049 and P= 0.004, respectively), but no correlation between iNOS expression and tumor size and TNM stage. There was a positive association between MVD and TNM stage and risk of HCC recurrence (P= 0.037 and P= 0.000, respectively). The count of MVD was significantly different in different iNOS and MMP-9 immunoreactivity groups (F= 17.713 and 17.097, P= 0.000 and P= 0.000, respectively). The examination of Spearman's rank correlation coefficient showed that there was a significant positive correlation between MVD and iNOS, MMP-9 immunoreactivity (r= 0.754 and 0.751, P= 0.000 and A=0.000, respectively). There was also a significant association between MMP-9 and iNOS expression in HCC (P= 0.010). CONCLUSION: Nitric oxide (NO) produced by iNOS could modulate MMP-9 production and therefore contribute to tumor cell angiogenesis and invasion and metastasis in HCC. The strong expression of iNOS and MMP-9 in HCC may be helpful in evaluating the recurrence of HCC, predicting poor prognosis. For patients with strong expression of MMP-9 and iNOS, the optimal treatment scheme needs to be selected.     

RNA干扰DNA甲基转移酶1对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察以DNA甲基转移酶1(DNA methy transferas 1,DNMT1)基因为靶基因的RNA干扰对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖及凋亡的影响.方法 设计、合成针对DNMT1基因的siRNA和阴性对照siRNA(N-siRNA).实验分为空白对照组、脂质体组(仅予脂质体)、N-siRNA组(转染30 nmol N-siRNA)、siRNA组(转染30 nmol siRNA).siRNA转染48 h后,实时PCR法检测DNMT1 mRNA水平;WST-8法检测细胞增殖;流式细胞技术检测细胞凋亡.结果 siRNA组DNMT1 mRNA的抑制率为(86.0±4.3)%,明显高于N-siRNA组的(40.1±2.2)%和空白对照组的0(P＜0.01);细胞存活率为(47.6±5.6)%,明显低于N-siRNA组的(68.1±4.1)%和空白对照组的100%(P＜0.01);细胞凋亡率为(14.94±2.89)%,明显高于空白对照组的(7.51±1.12)%、脂质体组的(7.06±0.39)%、N-siRNA组的(8.84±1.44)%(均P＜0.01).结论 siRNA能特异、有效地抑制人胰腺癌PaTu8988细胞DNMT1mRNA的表达,同时抑制细胞增殖、促进细胞凋亡.