热休克蛋白70在胎膜早破孕妇羊膜腔感染中的早期诊断意义

目的探讨在胎膜早破的孕妇的热休克蛋白70(HSP 70)对合并羊膜腔感染的早期诊断意义。方法选择2011年9月-2013年3月住院分娩的胎膜早破孕妇40例,将20例足月和20例足月前胎膜早破孕妇,根据宫壁细胞细菌培养和涂片检查,阳性者进入足月胎膜早破合并羊膜腔感染高风险组(试验1组)或足月前胎膜早破合并羊膜腔感染高风险组(试验2组);阴性者进入足月胎膜早破无感染组(对照1组)或足月前胎膜早破无感染组(对照2组),提取孕妇血清和外周血单个核细胞(PBMCs),用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测血清和PBMCs中HSP 70含量。结果试验1和2组的PBMCs胞内HSP 70的表达明显增加,其平均值分别为(595.3±34.1)pg/ml和(583.6±52.8)pg/ml;而对照1和2组的PBMCs胞内HSP 70分别为(203.4±39.3)pg/ml和(191.5±28.8)pg/ml,试验1组与对照1组及试验2组与对照2组相比,PBMCs胞内HSP水平差异有统计学意义(P<0.05);血清中HSP 70在胎膜早破合并羊膜腔感染孕妇体内有增加,但其水平无PBMCs胞内HSP 70的表达高,试验1和2组的血清HSP 70分别为(301.4±60.1)pg/ml和(310.7±33.2)pg/ml,与对照1和2组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HSP70可作为早期、快速、准确预测胎膜早破孕妇合并羊膜腔感染的指标之一。     

乳腺癌患者外周血淋巴细胞热休克蛋白70表达水平及其意义

目的:探讨乳腺癌患者外周血淋巴细胞中热休克蛋白70(HSP70)表达水平及其临床意义。方法:用Westernblot方法检测45例乳腺癌患者、43例乳腺良性病变患者及43例正常对照组外周血淋巴细胞中HSP70的表达水平。结果:乳腺癌组、乳腺良性病变组外周血淋巴细胞中HSP70表达水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(t=2.173,P<0.05);HSP70表达水平在肿瘤直径>2 cm组高于≤2 cm组,差异有统计学意义(t=-2.781,P<0.01);HSP70与乳腺癌患者年龄、组织学分级、临床分期、是否有淋巴结转移及月经状况无关。结论:术前外周血淋巴细胞中HSP70的检测有一定意义,其表达水平有可能成为判断预后的参考指标。     

QT间期离散度与小儿川崎病心肌损伤的相关性分析

目的研究心电图QT间期离散度(QTd)和校正QT间期离散度(QTcd)与川崎病(KD)急性期患儿心肌损伤标志物的相关性及对心肌损伤的诊断价值。方法选取2017年10月至2019年10月期间台州市中心医院收治的急性期KD患儿53例和同期健康儿童50例为研究对象,均采用12导联心电图测量QTd和QTcd,同时采集KD患儿入院时外周静脉血并检测血清肌钙蛋白(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,以cTnI和CK-MB均高于正常值为诊断标准将患儿分为损伤组和正常组,比较两组QTd和QTcd。结果 KD患儿QTd和QTcd均明显高于健康儿童(t值分别为14.924、19.164,均P <0.05)。损伤组KD患儿血清cTnI和CK-MB水平明显高于正常组(t值分别为6.676、6.640,均P <0.05),心电图QTd和QTcd也明显高于正常组(t值分别为2.621、3.604,均P <0.05)。KD患儿QTd与血清cTnI和CK-MB水平均无明显相关性(r值分别为0.059、0.171,均P>0.05),QTcd与血清cTnI和CK-MB水平均呈明显正相关性(r值分别为0.413、0.490,均P <0.05)。心电图QTd和QTcd判断KD患儿急性期心肌损伤的曲线下面积(AUC)分别为0.639和0.819,灵敏度分别为47.06%和73.53%,特异度均为84.21%。结论急性期KD患儿QTd和QTcd明显延长,其中QTcd与血清cTnI和CK-MB水平具有明显正相关性,对心肌损伤诊断和严重程度评估均具有重要参考价值。     

川崎病患儿血清MMP-9、TIMP-1、TNF-α水平变化及其与冠状动脉损伤的关系

目的探讨基质金属蛋白酶-9(matix metalloproteinase-9,MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在川崎病(Kawasaki disease,KD)患儿血清中的变化及其在冠状动脉损伤中的作用。方法收集2014年10月—2016年1月在本院儿科住院的KD患儿38例,分为冠状动脉损伤(coronary artery lesion,CAL)组16例,无冠脉损伤(non-coronary artery lesion,NCAL)组22例,并以同期住院的普通发热患儿20例、门诊健康体检儿童20例作为对照组。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组MMP-9、TIMP-1和TNF-α的蛋白水平,应用心脏彩超检查KD患儿CAL情况。计量资料两组比较采用两独立样本t检验和配对t检验,多组间比较采用方差分析,两变量之间相关分析采用Pearson直线相关分析,P0.05为差异有统计学意义。结果与发热对照组和正常对照组比较,KD急性期血清MMP-9、TIMP-1、MMP-9/TIMP-1、TNF-α的水平显著升高,差异均有统计学意义(F=212.97、185.34、23.68、70.19,均P0.05);KD缓解期血清MMP-9、TIMP-1、MMP-9/TIMP-1、TNF-α水平与两对照组比较,差异均有统计学意义(F=108.92、87.51、10.81、36.28,均P0.05),且较急性期显著降低,差异均有统计学意义(t=10.47、19.25、24.63、13.83,均P0.05)。KD患儿急性期CAL组血清MMP-9、TIMP-1、MMP-9/TIMP-1、TNF-α的水平与NCAL组比较,差异均有统计学意义(t=2.49、5.58、5.99、2.41,均P0.05)。KD组急性期血清MMP-9水平与TIMP-1和TNF-α水平均呈正相关(r=0.49、0.67,均P0.05);CAL组急性期血清MMP-9/TIMP-1与左冠状动脉内径(left coronary artery diameter,LCA)/主动脉瓣环内径(aortic ring diameter ratio,AAO)呈正相关(r=0.62,P0.05),且血清MMP-9与LCA/AAO也有一定的相关性(r=0.55,P0.05)。结论 MMP-9、TIMP-1、TNF-α共同参与了KD血管炎的病理生理过程,联合检测血清水平可能对早期预测冠状动脉损害有重要价值。     

HSP70与HSP27在鼻咽癌中的表达及其临床病理研究

目的探讨HSP70与HSP27在鼻咽癌中的表达及临床意义,并分析其表达的相关性。方法用免疫组化S-P法分别检测HSP70与HSP27在60例鼻咽癌组织中的表达。结果⑴HSP70,HSP27在鼻咽癌组织中的阳性表达率分别为70%(42/60)、65%(39/60);⑵HSP27阳性和阴性患者的平均生存期和中位生存期存在显著性差异(P<0.05);⑶HSP70阳性表达在鼻咽癌不同临床时期存在显著差异(P<0.05);⑷HSP70和HSP27的表达一致率为75%(45/60),存在显著相关性(P<0.05)。结论HSP70表达与鼻咽癌临床分期相关,但可能并不直接反映预后;HSP27表达在鼻咽癌预后中有一定意义;以上两种基因的综合表达情况在鼻咽癌临床分期和预后预测中有一定意义。     

多囊卵巢综合征患者血清性激素结合球蛋白和热休克蛋白70的表达水平及意义

目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清性激素结合球蛋白(SHBG)和热休克蛋白70(HSP70)的表达水平及意义。方法 选取2018年1月—2020年10月在宁波市北仑区人民医院治疗的PCOS患者78例为PCOS组,同时选取在该院检查的健康志愿者80例为对照组,检测所有研究对象血清SHBG和HSP70水平。结果 PCOS组患者血清SHBG水平[(35.50±8.20)nmol/L]明显低于对照组[(76.62±9.03)nmol/L],差异有统计学意义(t=-29.943,P<0.05),HSP70水平[(0.30±0.10)ng/ml]明显高于对照组[(0.19±0.05)ng/ml],差异有统计学意义(t=8.778,P<0.05)。PCOS组肥胖患者血清SHBG水平[(29.81±6.72)nmol/L]明显低于非肥胖患者[(44.60±8.81)nmol/L],差异有统计学意义(t=-8.377,P<0.05),而HSP70水平[(0.33±0.09)ng/ml]明显高于非肥胖患者[(0.25±0.06)ng/ml],差异有统计学意义(t=4.302,P...     

槲皮素抑制HSP70表达的体外研究

目的探讨不同浓度槲皮素抑制正常细胞和肿瘤细胞热休克蛋白70(HSP70)的表达规律,寻找槲皮素抑制HSP70表达的最佳浓度,为研究HSP70的功能提供一种可行的方法。方法加入槲皮素至终浓度为50,100,150,200μmol/L,继续37℃培养6 h后,置42℃水浴受热1 h,于37℃恢复培养2 h,收获细胞。设立37℃培养组(正常对照)、42℃培养组(阳性对照)和0.1%DMSO组(溶剂对照)。分别处理肿瘤细胞株A549细胞和正常细胞株2BS细胞,用Western-blot检测细胞HSP70的表达水平。结果在A549细胞和2BS细胞中,随着槲皮素浓度的增加,HSP70表达逐渐降低。与正常对照组相比,阳性对照组和溶剂对照组的HSP70水平表达增高,差异有统计学意义(P<0.01)。在A549细胞中,当槲皮素浓度达到50μmol/L时,HSP70表达开始下调,但与阳性对照组相比,差异没有统计学意义(P>0.05);当槲皮素浓度达到100μmol/L时,与阳性对照组相比,HSP70表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);当槲皮素浓度达到150,200μmol/L时,与阳性对照组相比,A549细胞HSP70表达降低更加明显(P<0.01);150μmol/L组和200μmol/L组相比,HSP70水平差异无统计学意义(P>0.05)。在2BS细胞中,当槲皮素浓度达到50μmol/L时,HSP70表达开始下调,与阳性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);当槲皮素浓度达到100,150,200μmol/L时,与阳性对照组相比,HSP70水平也有显著性降低(P<0.01);150μmol/L组和200μmol/L组相比,HSP70水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论槲皮素可以抑制肿瘤细胞和正常细胞HSP70的表达,150μmol/L的槲皮素处理A549和2BS细胞,抑制HSP70表达的效果最佳。     

锰对大鼠大脑热休克蛋白27、70 mRNA表达的影响

[目的]探讨锰染毒条件下大鼠大脑热休克蛋白27(HSP27)和70(HSP70)的变化规律。[方法]健康2月龄雄性SD大鼠50只,随机分为5组:生理盐水对照组和Mn2+染毒2.5、5.0、10.0、20.0mg/kg组(分别以A、B、C、D和E组表示)。每只大鼠每天腹腔注射染毒0.5mL,连续30d,处死大鼠后采用等离子体原子发射光谱(ICP-AES)测定脑组织锰含量。通过实时荧光定量PCR(QT-PCR)检测大鼠亚慢性锰染毒后脑组织中HSP27和HSP70mRNA的相对表达水平。[结果]不同剂量组脑组织中的锰含量与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,B、C、D、E组HSP27mRNA的相对表达量增加,分别为对照组的2.00、5.51、8.78和6.61倍;HSP70mRNA的相对表达量也增加,分别是对照组的1.68、10.27、22.88和2.20倍。[结论]锰可以调节大鼠脑组织HSP27和HSP70表达的变化。     

CRP和VEGF在川崎病患儿血清中的表达和临床意义

目的:动态研究川崎病(KD)患儿血清中C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在小儿川崎病血管损伤中的作用机制,寻找其与冠状动脉(简称冠脉)损伤之间直接关系的依据。方法:应用酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫乳胶比浊法检测47例川崎病患儿、19例发热疾病患儿(对照组)血清中的CRP和VEGF水平,并将KD患儿分为急性期、亚急性期、恢复期;有冠脉损伤(CAL)组和无冠脉损伤(NCAL)组。结果:KD患儿急性期、亚急性期和恢复期的CRP、VEGF水平均高于发热组,两组间差异有统计学意义(P<0.01);CAL组CRP、VEGF水平明显高于NCAL,差异有统计学意义(P<0.01)。CRP的高峰期在急性期,VEGF的高峰期在亚急性期。结论:CRP和VEGF水平在KD患儿组急性期和亚急性期升高,可能在川崎病患儿血管损伤的病理生理发生机制中发挥重要作用。CRP和VEGF具有预示KD患儿CAL潜在的可能性。     

血清GP73、HSP27联合AFP检测在HBV相关早期肝细胞癌诊断的价值

目的 探讨高尔基蛋白73(GP73)、热休克蛋白27(HSP27)联合甲胎蛋白(AFP)检测在乙型肝炎相关性早期肝细胞癌诊断中的价值。 方法 选择50例HBV相关早期肝细胞癌患者、50例乙肝肝硬化患者和30名健康人,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测GP73、HSP27水平,电化学发光法检测AFP含量。实时荧光定量PCR方法测定肝癌患者的HBV-DNA水平。 结果 早期肝癌组患者血清GP73、HSP27、AFP水平分别为(266.37±98.41)ng/ml、(847.18±211.72)pg/ml、(368.56±65.32)ng/ml,明显高于肝硬化组[(60.23±32.30)ng/ml、(338.46±114.3)pg/ml、(26.22±8.58)ng/ml]、以及对照组[(23.32±11.08)ng/ml、(73.39±38.54)pg/ml、(7.15±3.32)ng/ml],差异有统计学意义(均P<0.01);早期肝癌组患者血清AFP、GP73、HSP27单项检测阳性率分别为75%、82%、74%,及AFP+GP73+HSP27联合检测的阳性率为86%,均明显高于肝硬化组(分别为48%、37.5%、18%、32%)及健康对照组(分别为3%、6%、0、0)(均P<0.01),其中AFP+GP73+HSP27联合检测阳性率最高(P<0.01);AFP、GP73及HSP27与HBV-DNA的相关性为0.076、0.119、0.176(P>0.05)。 结论 GP73、HSP27与AFP联合检测可作为诊断肝细胞癌的重要指标,为早期发现及治疗提供依据,它们与HBVDNA情况无关。     

Glutamine and heat shock protein expression

The most basic mechanism of cellular protection involves the expression of a highly conserved family of essential proteins, known as heat shock or stress proteins (HSPs). The expression of these proteins after a sublethal insult can induce "stress tolerance" and protect against a subsequent stress that otherwise would be lethal. Experimental data have shown that preinduction of the heat stress response can provide marked protection against many forms of cellular injury, including ischemia and reperfusion, lung injury, and shock. However, induction of HSPs to improve outcome in human disease has not been exploited because laboratory induction agents are themselves toxic and not clinically relevant. Many researchers have found that glutamine (GLN), a conditionally essential amino acid, can enhance stress-induced HSP expression in vitro and improve cell survival against a variety of stressful stimuli. Further, recent data from me and my colleagues indicate that a single dose of intravenous GLN can enhance HSP expression, decrease end-organ injury, and enhance survival from septic shock in the intact rat. Thus GLN, which is beneficial in many settings of critical illness and injury, may be a clinically applicable enhancer of HSP expression. These results indicate that GLN could be used to enhance HSP expression and attenuate end-organ injury in situations when a major clinical stress is anticipated, such as before major surgical procedures (e.g., cardiac, vascular, and transplantation) or in the critically ill.     

热休克蛋白在卵巢癌中的研究进展

热休克蛋白(HSP)是一组广泛存在于生物细胞中高度保守的蛋白质分子。由于HSP在应激反应时表达增加,故又称为应激蛋白。目前研究结果发现,HSP在多种肿瘤的发生、发展中起着重要作用。卵巢癌作为女性生殖系统常见的3大恶性肿瘤之一,其发生、发展及耐药性与HSP也存在密切关系。笔者拟通过对HSP的生物学特性及其与卵巢癌的发生、发展、化疗耐药性及治疗等方面的关系进行阐述,为卵巢癌的治疗提供依据。     

热休克蛋白Hsp70在抗原呈递过程中的作用

目的研究热休克蛋白Hsp70家族在抗原呈递中的作用，探讨其与肿瘤免疫反应的关系。方法利用反义RNA技术，将反义Hsp70、反义Hsc70、B7表达质粒导入肿瘤细胞B16中，24h后检测细胞中热休克蛋白表达水平。利用混合淋巴细胞培养，检测T淋巴细胞增殖能力。结果在黑色素瘤细胞B16中转染pLXSN—antihsp70、pLXSN—antihsc70及2者共转染，转染反义质粒能够抑制B16细胞中Hsp70／Hsc70的表达，导致Hsp70表达下调。其刺激T淋巴细胞增殖能力均大幅下降。而将pLXSNmB7转染入B16细胞中，其刺激T细胞增殖的能力均有所上升。转染pLXSNmB7后，B16细胞中Hsp70／Hsc70的表达量有所提高。结论抑制各热休克蛋白Hsp70家族的表达能够导致T细胞增值数降低。在肿瘤细胞中导入B7分子能够提高Hsp70的表达水平，从而提高其抗原呈递的能力。     

铅作业工人热应激蛋白70水平的分析

目的 研究职业铅接触人群热应激蛋白70（HSP70）水平的变化与空气中铅浓度和血铅等因素的关系,探讨HSP70作为职业铅接触生物标志物的可能性.方法 以72名铅接触工人为暴露组,41名不接触铅等职业有害因素的工人为对照组,对两组人群进行职业接触、体检及健康调查;按照GB/T 16010-1995标准对车间空气中铅烟、铅尘浓度进行监测;用ELISA方法检测暴露组工人血清中HSP70水平,用原子吸收光谱法检测血铅水平;用多元线性回归对HSP70水平及血铅水平进行多因素分析.结果 空气中铅浓度及铅接触量均对机体内HSP70水平及血铅水平有影响,血清中HSP70的水平与血铅水平呈正相关关系（r=0.501,P＜0.01）.结论 血清中HSP的水平对职业铅接触的相关因素敏感,有可能作为职业铅接触人群的敏感性健康检测指标.     

白色念珠菌hsp60基因克隆

目的:克隆白色念珠菌hsp60基因。方法:通过RT-PCR技术扩增白色念珠菌hsp60基因片段,纯化后与pMD18-T载体连接,转化并通过Amp、x-Gal、IPTG进行蓝白筛选,白色克隆提取质粒,SacⅠ和HindⅢ双酶切及PCR鉴定,基因测序。结果:RT-PCR扩增得到1701bp片断,重组质粒pMD18-T-hsp60双酶切后在2692bp和1701bp处可见到酶切片段,测序结果与GenBank中白色念珠菌hsp60基因比较,同原性达99%。结论:成功克隆白色念珠菌hsp60基因,为进一步研究其免疫保护机制及制备白色念珠菌疫苗奠定基础。     

Microbial heat shock protein 70 stimulatory properties have different TLR requirements

Members of the HSP70 family have acquired special significance in immunity. Among other receptors, toll like receptor (TLR)-2 and TLR-4 have been suggested to be involved in HSP70-mediated signalling. We have previously shown that recombinant HSP70 from Trypanosoma cruzi and from Plasmodium falciparum function as adjuvants. In the present study, we have extended the study with other microbial HSPs (mHSPs) and considered of interest to assess the influence of TLR-2 and TLR-4 in mHSP-promoted responses. To test this, we evaluated the adjuvant effect of various mHSP molecules in TLR-2(-/-), TLR-4(-/-) and MyD88(-/-) mice. We show that all the mHSPs tested are strong adjuvants and induced IL-12 production by bone marrow macrophages. However, even within the same family, mHSPs induced different types of immune responses. Furthermore, the mHSPs tested, possess different requirements for signaling through TLRs. Interestingly, Tc70 was found to induce in vivo and in vitro responses in both TLR-2(-/-) and TLR-4(-/-) mice. Possible implications of our findings are taken up in the discussion section.     

热休克蛋白70-Hom基因多态性与长寿家族史关系的初步研究

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)-Hom基因多态性与广西巴马人群长寿家族的相关性。方法于2010年7月,选取广西巴马县长寿人群后代101例(22~83岁)为有长寿家族史组,南丹县无长寿家族史的健康人群176例(20~82岁)为无长寿家族史组。对研究对象进行问卷调查和体格检查,采用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术对HSP70-Hom基因rs2227956位点进行基因分型。结果有长寿家族史组和无长寿家族史组人群HSP70-Hom基因rs2227956位点基因型和等位基因频率分布差异具有统计学意义(P0.05)。经多因素logistic回归分析后,TT、CT基因型携带者(ORTT=5.161,95%CI:1.300~20.489;ORCT=2.245,95%CI:1.032~4.883)和高密度脂蛋白胆固醇升高者(OR=6.924,95%CI:2.484~19.301)有长寿家族史的比例较高,体质指数偏高者有长寿家族史的比例较低(OR=0.271,95%CI:0.092~0.796)。结论本研究初步认为有家族性长寿史者可能携带HSP70-Hom基因rs2227956位点的TT、CT基因型,且高密度脂蛋白胆固醇较高,体质指数偏低。     

硝酸铅诱导大鼠肝组织及L-02细胞热应激蛋白70基因表达的研究

目的 研究铅诱导热应激蛋白70(HSP70)基因表达的变化.方法 以5、10、20μmol/L硝酸铅染毒胚胎肝细胞株L-02细胞,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增技术观察HSP70 mRNA表达的变化.将Wistar大鼠以180、60、20mg/kg3个剂量染毒硝酸铅,并设正常对照组,每组16只,雌雄各半,连续染毒28 d;运用RT-PCR扩增技术观察肝组织HSP70 mRNA表达的变化,并用原子吸收光谱法检测动物肝脏铅含量.结果 在L-02细胞未出现明显细胞毒作用的20μmol/L染铅组HSPT0基因表达明显上调.大鼠肝组织HSP70 mRNA表达与硝酸铅浓度呈剂量-反应关系,180、60 mg/kg染铅组HSP70 mRNA表达明显增加,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);20 mg/kg染铅组与对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).各染铅组大鼠肝脏铅含量较对照组明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 硝酸铅能够诱导大鼠肝组织及L-02细胞HSP70 mRNA表达明显增强.