感毒清口崩片对流感病毒FM1感染小鼠细胞因子水平的影响

目的:探讨感毒清口崩片对流感病毒FM1致小鼠病毒性肺炎的细胞免疫的作用。方法:以小鼠经鼻吸入流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1)复制小鼠病毒性肺炎模型,用感毒清口崩片灌胃治疗5天,并设利巴韦林、莲花清瘟对照及空白对照。采用酶联免疫法检测小鼠血清IFN-γ和IL-10;采用SABC免疫组织化学法检测流感病毒感染小鼠肺组织TNF-α的表达。结果:感毒清及利巴韦林组和莲花清瘟组均能使小鼠血清IFN-γ和IL-10含量升高;感毒清能显著降低FM1感染小鼠肺组织中TNF-α含量。结论:感毒清能增强细胞免疫,抑制过度的炎症反应,减轻肺损伤。     

连花清瘟胶囊对小鼠病毒感染后肺指数的影响

目的:观察连花清瘟胶囊对流感病毒FM1、副流感病毒仙台株感染小鼠肺指数的影响。方法:用流感病毒FM1、副流感病毒仙台株滴鼻感染小鼠建立模型,随机分为正常对照组、模型对照组、利巴韦林组、连花清瘟高、中、低剂量组,观察小鼠的一般情况、肺指数。结果:连花清瘟中剂量对流感病毒FM1、副流感病毒仙台株感染后小鼠的肺指数增高均有显著的降低作用(P<0.05,P<0.01);低剂量仅对流感病毒FM1感染后小鼠的肺指数有降低作用(P<0.05)。结论:连花清瘟胶囊对流感病毒FM1、副流感病毒仙台株感染小鼠的肺损害有抑制作用。     

升降散对流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠肺组织ICAM-1、NF-κBp65的影响

目的:观察升降散对亚甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠肺组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和核转录因子κB p65(NF-κB p65)表达的影响,探讨升降散抑制肺损伤的作用及配伍机制。方法:建立亚甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠肺炎模型,分别用二步法免疫组化、Western blot、RT-q PCR检测升降散全方、升降散拆方、升降散与麻杏甘石汤合方对小鼠肺组织ICAM-1、NF-κBp65蛋白及mRNA表达的影响。结果:三种检测方法结果基本一致,病毒性肺炎小鼠肺组织ICAM-1、NF-κBp65蛋白及mRNA表达增强,升降散全方(4.55g/kg)可以显著降低其表达,作用明显优于拆方组,同时也一定程度提升了麻杏甘石汤(5.46g/kg)组的抑制作用。结论:升降散全方开上与泄下协同配伍,能显著抑制病毒性肺炎小鼠肺组织ICAM-1、NF-κBp65的过度表达而减轻肺损伤,可以作为治疗病毒性肺炎的基本配伍用方。     

银翘散提取物对流感病毒性肺炎小鼠组织TLR4及NF-κB p65的影响

目的观察银翘散提取物对流感病毒性肺炎小鼠组织TLR4及NF-κB p65表达的影响。方法昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、银翘散组和利巴韦林组,每组10只,采用鼻腔接种甲型流感病毒FM1株诱导幼龄小鼠肺炎,于感染前1天,银翘散组灌服中药提取物,利巴韦林组腹腔注射利巴韦林注射液,正常组和模型组以等体积的生理盐水灌胃。观察各组小鼠的一般状态、肺组织形态学,各组小鼠感染5天后处死,采用免疫组化染色法检测各组小鼠肺组织NFB p65和TLR4的表达。结果与正常组相比,模型组小鼠肺组织中NF-κB p65、TLR4的表达显著增高(P0.05),银翘散组NF-κB p65、TLR4的表达较模型组明显降低(P0.05)。结论 NF-κB p65、TLR4表达降低,很可能是银翘散提取物治疗流感病毒性肺炎小鼠的机理。     

小儿清瘟解热颗粒体内外抗病毒作用及其机制分析

目的:观察小儿清瘟解热颗粒对甲型H1N1流感病毒感染小鼠的影响。观察小儿清瘟解热颗粒体外抗病毒作用。方法:ICR小鼠随机分为7组,分别为正常组、模型组、利巴韦林组(82.5 mg·kg-1),小儿感冒宁合剂组,小儿清瘟解热颗粒高、中、低剂量组(12.8,6.4,3.2 g·kg-1),每组10~12只,体内抗病毒方面,以甲型H1N1流感病毒滴鼻感染ICR小鼠造成肺炎模型,造模同时开始给予小儿清瘟解热颗粒12.8,6.4,3.2 g·kg-1ig,以利巴韦林为阳性药,观察肺部炎症,计算肺指数,死亡率和生命延长率,酶联免疫法检测血清中细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),一氧化氮(NO),γ干扰素(IFN-γ)的含量;体外抗病毒方面,采用CEP法观察病毒致细胞病变情况。结果:与模型组比较,小儿清瘟解热颗粒治疗性给药后能明显降低流感病毒FM1株感染后小鼠的肺指数,降低死亡率,延长平均存活天数;小儿清瘟解热颗粒中、低剂量组可明显升高感染小鼠血清中IFN-γ,NO含量(P0.05,P0.01)。体外抗病毒方面,小儿清瘟解热颗粒可明显抑制甲型H1N1流感病毒(FM1株,PR8株,brisbane/59/2007株),甲型H3N2型流感病毒(brisbane/10/2009株),乙型流感病毒(江西修水/32/2009株),副流感病毒1型(PIV-1),柯萨奇病毒B族2型(Cox B4)致细胞的病变作用。结论:小儿清瘟解热颗粒对甲型流感病毒感染小鼠造成的病毒性肺炎具有明显的治疗作用,对体外多种病毒也有一定程度的抑制作用。     

连花清瘟胶囊对流感病毒感染小鼠肺组织γ-IFN的影响

目的：观察连花清瘟胶囊对流感病毒FM1感染小鼠肺组织γ-干扰素（γ-IFN）的影响。方法：滴鼻感染建立模型,随机分为6组（正常对照组,模型对照组,利巴韦林组,连花清瘟胶囊大剂量、中剂量、低剂量组）。采用双抗体夹心ABCELISA法检测流感病毒FM1感染小鼠肺组织γ-IFN含量。结果：与模型对照组相比,各药物组γ-IFN含量均有不同程度的升高,其中连花清瘟胶囊大剂量组（P〈0.05）;连花清瘟胶囊低剂量组（P〈0.01）;连花清瘟胶囊中剂量组（P〈0.001）。结论：连花清瘟胶囊能提高流感病毒感染小鼠肺中γ-IFN的水平。     

双表法对流感病毒感染小鼠肺组织MyD88及NF-κB P65mRNA表达的影响

目的探讨双表法对流感病毒感染小鼠肺组织MyD88及NF-κB P65mRNA表达的影响,探讨双表法的作用机制。方法将120只昆明种小鼠随机分为12组:模型组10只;正常组10只;利巴韦林对照组10只;解表药(银翘散)高、中、低剂量组各10只;固表药(玉屏风散)高、中、低剂量组各10只;双表法(银翘散+玉屏风散)高、中、低剂量组各10只。动物造模后正常组和模型组均以等体积的生理盐水灌胃,各中药治疗组分别予固表法(玉屏风散提取物)、解表法(银翘散提取物)、双表法(玉屏风散+银翘散)、利巴韦林灌胃给药。采用RT-PCR法检测MyD88及NF-κB P65mRNA表达情况。结果正常组和模型组肺组织中均可检测到MyD88mRNA及NF-κB P65mRNA的表达,但模型组明显高于正常组(P0.05)。双表法高剂量组MyD88mRNA及NF-κB P65mRNA表达最低,与双表法中低剂量组、解表法各剂量组、固表法各剂量组、利巴韦林组比较均有显著性差异(P均0.05)。结论流感病毒感染小鼠时激活了MyD88/NF-κB P65信号通路,双表法能较好地抑制MyD88mRNA及NF-κB P65mRNA的表达。     

连花清瘟胶囊防治流感病毒FM1感染小鼠的实验研究

目的:探讨连花清瘟胶囊对流感病毒感染小鼠肺部炎性损伤的影响.方法:将小鼠随机分为正常对照组、模型组、连花清瘟低、中、高剂量组、利巴韦林组,以流感病毒甲型鼠肺适应株(FM1)滴鼻感染小鼠建立病毒性肺炎模型.观察连花清瘟胶囊对小鼠的一般情况、肺/脾脂数、肺组织炎性病理改变和病毒致小鼠死亡率的影响,并采用ELISA法检测小鼠肺组织炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的变化.结果:连花清瘟低、中剂量对流感病毒FM1株感染后的小鼠有如下作用:①肺指数均显著降低(P<0.05);②减轻肺组织炎性病变;③改善感染小鼠的临床症状,减少14 d内小鼠的死亡数,并能延长其平均存活时间(P<0.05);④能显著降低小鼠肺组织中TNF-α、IL-1β和IL-6含量(P<0.05).但实验各组小鼠脾指数无明显差异(P>0.05).结论:连花清瘟胶囊可通过调节炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达水平,平衡机体免疫状态以减轻FM1流感病毒引起的小鼠肺部炎性损伤.     

银翘散对IV感染小鼠肺组织中TLR7/Myd88/NF-кB信号表达的影响

目的:研究银翘散对甲型流感病毒诱导的肺炎小鼠肺组织中TLR-7介导的MyD88依赖性信号传导通路的调控机制。方法:将48只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、利巴韦林组,银翘散低、中、高剂量组(20、10、5 g·kg·d-1)。除正常组外,建立流感病毒FM1鼠肺适应株滴鼻感染的小鼠流感病毒性肺炎模型。感染后1 h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃,药物组分别予以各药物治疗,连续3 d。以苏木素-伊红染色(HE染色)法观察病理改变;RT-PCR检测肺组织TLR-7、髓样分化因子88(MyD88)、核因子(NF-κB p65)mRNA水平。结果:银翘散20、10 g·kg·d-1均能减轻肺组织炎性损伤;降低了TLR-7、Myd88、NF-κB P65 mRNA水平(P<0.05,P<0.01)。结论:银翘散通过抑制TLR-7介导的MyD88依赖性信号通路,抑制了NF-κB p65的表达,从而达到减少肺组织损伤的治疗目的。     

重楼克感滴丸对流感病毒FM_1感染小鼠的保护作用

目的:研究重楼克感滴丸对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用及作用机制。方法:将小鼠分为空白对照组、模型组、利巴韦林组及重楼克感滴丸大、中、小剂量组,观察小鼠行为状态、死亡率、肺指数及肺指数抑制百分率。结果:重楼克感滴丸各剂量组有明显改善流感病毒FM1感染小鼠行为状态的作用;重楼克感滴丸中、小剂量组与模型组比较,死亡率显著降低(P0.01);重楼克感滴丸大、中、小剂量组均能显著降低流感病毒FM1感染小鼠模型的肺指数(P0.01)。结论:重楼克感滴丸中、小剂量组对流感病毒FM1感染小鼠具有明显保护作用,其作用机制与重楼克感滴丸能显著抑制病毒在体内的增殖、减轻肺部炎性病变有关。     

新疆克孜勒苏自治州甲型H1N1流感中医药防治特色浅谈

新疆克孜勒苏自治州地处中国最西部,是一个偏远落后地区。2009年全球暴发甲型H1N1流感,本州也有421例报告病例。甲型H1N1流感在本州暴发过程中,结合本地特点应用中医药防治,取得了良好效果。     

有机阴离子转运多肽1B1的研究进展

 目的介绍有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)的研究进展。方法查阅国外有关文献,并对其进行分析、归纳和总结。结果OATP1B1存在遗传多态性,且不同等位基因所表达的OATP1B1的转运能力具有显著性差异,进而会对多种药物的药动学及药效学产生影响;OATP1B1还与药物不良反应及药物相互作用有关。结论基于OATP1B1对药物体内过程的重要作用,关注OATP1B1遗传多态性对药动学、药效学的影响,及其与不良反应及药物相互作用的关系具有一定临床意义。     

款冬润肺膏镇咳祛痰作用的实验研究

目的:研究观察款冬润肺膏镇咳祛痰的作用。方法:镇咳试验采用氨水致咳法,祛痰试验采用小鼠酚红排泌法。结果:款冬润肺膏可明显抑制氨水所致小鼠咳嗽反应,对小鼠气管痰液分泌具有明显的促进作用。结论:款冬润肺膏具有一定的止咳、化痰作用。     

高效液相色谱法测定三七中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1,Rb1的含量

目的测定三七药材中三七皂苷的含量.方法采用高效液相色谱法C18色谱柱,乙腈∶水(15∶85-12 min30∶70-45 min15∶85 v/v)梯度洗脱,检测波长203 nm.结果三七R1在72.8～109 μg*ml-1的范围内(r＝0.999 1),人参Rg1在68.8～860 μg*ml-1的范围内(r＝0.999 2),Rb1在62.8～785 μg*ml-1的范围内(r＝0.999 8),线性关系良好.平均回收率大于98%,方法的变异系数小于3.0%.结论方法简便,快速,准确,重现性好,可用于三七药材中三七皂苷的含量测定.     

低氧诱导因子介导胰岛素样生长因子促骨髓瘤增殖作用

目的:探讨胰岛素样生长因子(IGF-1)对多发性骨髓瘤细胞的作用是否与低氧诱导因子(HIF-1)有关,及其可能的机理.方法:检测IGF-1对多发性骨髓瘤细胞株KMM-1及U266增殖的影响,用免疫印迹法检测IGF-1对骨髓瘤细胞缺氧诱导因子HIF-1α表达的作用、并观察HIF-1拮抗剂Echinomycin对IGF-1作用下骨髓瘤细胞增殖的影响.此外,我们还用免疫印迹法检测IGF-1对HIF-1信号通路上游AKT的作用,并观察PI3-K/AKT的拮抗剂LY294002对IGF-1刺激下骨髓瘤细胞HIF-1α表达及骨髓瘤细胞增殖的影响,及LY294002和HIF-1拮抗剂Echinomycin对骨髓瘤细胞增殖的影响.结果:IGF-1上调骨髓瘤细胞HIF-1α的表达,从而促进骨髓瘤细胞增殖,用Echinomycin阻断HIF-1明显减弱IGF-1的促增殖作用;PI3-K/AKT通路是介导IGF-1上调HIF-1α表达的重要环节,阻断Pi3-K/AKT通路可逆转IGF-1对HIF-1α表达的作用.无论是阻断Pi3-K/AKT通路还是HIF-1都使IGF-1刺激骨髓瘤细胞增殖的作用显著减小.结论:IGF-1通过PI3-K/AKT通路上调骨髓瘤细胞HIF-1α的表达,从而促进骨髓瘤细胞的增殖.我们的研究提示,HIF-1在骨髓瘤的病理中起重要的作用,可能成为治疗骨髓瘤的新靶点之一.     

不同剂量瑞舒伐他汀对急性冠脉综合征患者血VCAM-1、ICAM-1和PAI-1水平的影响

目的探讨不同剂量瑞舒伐他汀对急性冠脉综合征患者血清血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）水平的影响。方法将急性冠脉综合征患者256例随机分成A组（瑞舒伐他汀10mg/d,128例）,B组（瑞舒伐他汀20mg/d,128例）,另选50例冠状动脉造影检查证实无冠状动脉狭窄者设为对照组。分别于治疗前及治疗后1周、2周收集血液,采用酶联免疫吸附剂法测定血清VCAM-1、ICAM-1和PAI-1浓度。结果急性冠脉综合征患者血清中VCAM-1、ICAM-1和PAI-1的水平明显高于正常对照组（P〈0.05）;A组、B组在治疗后1周、2周VCAW-1、ICAM-1和PAI-1的水平较治疗前降低（P〈0.05）;B组在治疗后VCAW-1、ICAM-1和PAI-1水平均较A组低（P〈0.05）。结论瑞舒伐他汀可以有效降低ACS患者血清中VCAM-1、ICAM-1和PAI-1的水平,且随着瑞舒伐他汀剂量的增加,其降低ACS患者血清VCAM-1、ICAM-1和PAI-1水平的作用更为显著。     

Ⅳ型ZTC 1+1天然澄清剂在中草药制剂生产中的应用研究

研究了Ⅳ型ZTC1＋1天然澄清剂在八珍口服液制备中的应用，并从指标成分、工艺、稳定性和药理学等方面与水醇法进行了比较。结果表明，ZTC1＋1天然澄清剂为一种新型精制中草药液的澄清剂。可较好的保留中草药有效指标成分，在中草药制剂制备中可代替水醇法。     

Transport of salvianolic acid B via the human organic anion transporter 1B1 in the liver

Salvianolic acid B (SAB) has a high concentration in the liver, but the mechanism of its distribution in the liver is unclear. The aim of this study was to investigate the mechanisms of hepatic uptake of SAB. In this study, we first explored the uptake features of SAB in HepG2 cells and the effect of rifampicin on uptake. Then, we explored the effects of SAB on the uptake of pitavastatin in HepG2 cells. Finally, we established an HEK239T‐OATP1B1 cell model to confirm whether OATP1B1 mediated the transport of SAB. Results showed that the uptake kinetic parameters Vmax and Km for SAB in HepG2 cells were 21.28 ± 2.06 pmol mg^?1 per protein min^?1 and 28.47 ± 7.36 μM, respectively. Rifampicin inhibited the uptake of SAB in HepG2 cells (IC50 was 5.85 ± 1.70 μM), and SAB affected the uptake of pitavastatin in HepG2 cells (IC50 was 27.67 ± 1.90 μM). The uptake kinetic parameters Vmax and Km for SAB in HEK239T‐OATP1B1 were 60.03 ± 6.16 pmol mg^?1 per protein min^?1 and 87.24 ± 15.28 μM, respectively, whereas in EGFP‐HEK293 cells were 14.04 ± 2.53 pmol mg^?1 per protein min^?1 and 56.53 ± 15.50 μM. The SAB had no effect of on the expression of OATP1B1 in HEK239T‐OATP1B1 cells. In conclusion, this study demonstrated that OATP1B1 contributes to the transport and accumulation of SAB in the liver.     

三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的测量不确定度评定

目的：建立三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的测量不确定度评定方法.方法：采用HPLC法测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量,建立数学模型,分析不确定度来源,最后计算扩展不确定度.结果：按干燥品计算,三七中三七皂苷R1的含量为（0.815±0.020）％,k=2;人参皂苷Rg1的含量为（3.324±0.076）％,k=2;人参皂苷Rb1的含量为（2.931±0.008）％,k=2结论：本方法建立的数学模型合理、可靠,可用于三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的不确定度评定.