转染的FasL基因诱导HCC9204细胞凋亡的形态学研究

目的 构建含FasL基因的腺病毒载体，转染肝癌9204细胞株，观察FasL基因对9204细胞株的影响。方法 以腺病毒作载体，把FasL基因克隆入腺病毒载体，构建成含FasL基因的转基因载体并酶切鉴定，用脂质体包裹法把含FasL的腺病毒载体转染HCC9204细胞株，用RT－PCR方法证实转染后有无FasL基因表达，采用电镜观察9204细胞形态学变化。结果 酶切鉴定证实含FasL基因的转基因载体构建成功；RT－PCR显示转染后9204细胞株FasL基因表达水平显高于未转染细胞株（P＜0.01）；肝癌细胞株9204转染FasL基因72h后，在光镜下可见调亡细胞体积缩小，生长不良，染色质浓度，密度增高，胞核中出现颗粒样物质，电镜下可见调亡小体。结论 成功地构建了FasL基因的转基因载体；转染FasL基因可诱导肝癌9204细胞株出现凋亡。     

细胞凋亡相关基因APG诱导肝癌细胞凋亡实验研究

ＰＧ基因是Ｂｃｌ 2家族中一员 ,与Ｂｃｌ 2家族的广泛氨基酸同源性主要表现在高度保守的ＢＨ1和ＢＨ2 结构域。ＡＰＧ过表达能够对抗Ｂｃｌ 2抑制细胞凋亡的活性 ,在促凋亡因素的刺激下Ｂｃｌ 2 /ＡＰＧ的比值将决定细胞的生与死。本研究旨在研究ＡＰＧ基因转染ＨＣＣ 92 0 4细胞能否诱导该细胞发生凋亡 ,从而探讨ＡＰＧ基因成为肿瘤基因治疗靶基因的潜在可能性。1　材料与方法1 1　细胞系和细胞培养 :人肝癌细胞系ＨＣＣ 92 0 4为启东肝癌研究所建立。在 5 0ｍｌ/Ｌ胎牛血清的Ｅａｇｌｅ’ｓ培养液中培养 ,ＨＣＣ 92 0 4细胞系的ｐ5 3基因…     

细胞凋亡与肝癌

细胞凋亡（Apoptosis）是指在一定生理和病理情况下,机体为维护内环境的稳定,通过基因调控而使细胞主动消亡的过程。它有别于组织坏死。有关细胞凋亡的一般性知识已有不少文献进行了论述。本文仅就细胞凋亡在肝癌发生发展中的作用研究近况作一综述。1肝癌细胞凋亡现象无论是在体外培养的肝癌细胞还是体内发生的肝癌,都存在细胞凋亡现象。TeSSitohe等在大鼠肝癌的组织切片上观察到了凋亡的特征性改变：染色质浓聚和凋亡小体。核酸电泳亦出现了DNA阶梯条带。FuKuda等在体外培养的MCARH7777肝癌细胞株中也发现了类似的凋亡特征性改变…     

乙醇诱导肝癌细胞凋亡的形态学观察

目的：探讨在乙醇诱导下发生凋亡时,原发性肝细胞癌（简称肝癌）细胞的形态学变化。方法：用含60mL.L^-1乙醇的培养液持续作用6h诱导人肝癌细胞系HCC－9204凋亡,进行凋亡活细胞的台盼蓝,吖啶橙／溴化乙啶（AO／EB）染色,凋亡细胞固定后的May-Grunwald-Giemsa (MGG),HE染色和透和透射电镜观察,并进行TUNEL法凋亡检测。结果：60mL.L^-1乙醇可使HCC－9204细胞产生明显的细胞固缩,变圆,胞核和胞质浓染,胞核呈颗粒状,环形或新月体状,胞质可见“出泡”现象等凋亡形态学变化,大部分细胞为台盼蓝拒染,并呈TUNEL阳性着色,部分TUNEL阳性细胞也可见明显的凋亡形态学变化。结论：乙醇可使肝癌细胞产生明显的凋亡形态学变化。TUNEL法可原位同时显示凋亡细胞的形态和分布。     

胃癌细胞凋亡相关基因研究进展

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,死亡率很高。胃癌的发生是细胞凋亡与增殖调控失衡的结果。现综述细胞凋亡相关基因在胃癌的发生、发展、转归和治疗中的地位及其应用前景。     

细胞凋亡与肝癌

1细胞凋亡 细胞凋亡(apoptosis)又称程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD),是活体内单个细胞或小团细胞的死亡,是机体为维护自身稳定在基因调控下细胞发生主动消亡的过程.     

细胞凋亡与肝癌

<正>1 凋亡与肝癌的形成肿瘤的形成是一个涉及正常细胞的生长过程改变和基因改变的复杂的多阶段过程.过去的研究重点放在化学物对细胞增生的影响上.随着研究的深入,人们发现凋亡也起着重要作用.现在一般认为,细胞增生和凋亡之间的平衡失调对细胞癌变的引发、癌前细胞和癌细胞的生存、生长起着基本的作用.细胞复制的增强有助于增加突变频率,而某一组织中的细胞凋亡通过丢失突变细胞抵抗致癌过程.在肝癌组织中高度增生和高度凋亡经常并存.于是人们推测凋亡在肝细胞癌的生长过程中可能起着重要作用.Hino-N等利用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP-生物素缺口末端标记法和增生细胞核抗原染色技术研究人肝细胞癌中增生和凋亡的发生.他们发现,     

神经疾病中细胞凋亡的相关基因及作用

<正>细胞凋亡在生长发育和疾病的发生发展中起着重要作用。细胞以凋亡方式主动“自杀”对维持机体自身的稳定有积极的生理意义。但是,凋亡规律失常也会导致机体肿瘤和疾病的发生。本文着重介绍了近年来细胞凋亡相关基因的研究进展及其在神经系统病变中的作用。     

胰腺癌细胞凋亡相关基因的研究进展

细胞凋亡是一种特殊的细胞死亡方式,参与肿瘤的发生发展,在胰腺癌组织中,多种基因参与了胰腺癌细胞的凋主恨过程.随着其机制的进一步阐明,从基因水平上诱导细胞凋亡有望成为综合治疗胰腺癌的一个重要内容.     

细胞凋亡调节基因蛋白表达及前列腺癌的预后

目的：探讨细胞凋亡调节基因蛋白表达与前列腺癌临床预后的关系。方法：采用免疫组化染色方法，检测57例前列腺癌中Fas及其配体（FasL）、bcl-2、bax的表达，并同前列腺癌临床和病理特征一起，先后进行单因素和多因素分析。结果：bax在前列腺癌低分化肿瘤中的表达强于在高分化肿瘤中的表达（P＜0．05）；FasL表达可能对生存预后有一定影响，而肿瘤分化程度与临床分期仍是重要的预后指标。结论：FasL表达可能与前列腺癌预后有关。     

鼻咽癌中与已知基因同源的差异表达cDNA序列

采用新近发展的ｃＤＮＡ代表性差异分析法筛选鼻咽癌中不表达的或表达降低的ｃＤＮＡ序列。结果显示：有９个与已知基因高度同源的ｃＤＮＡ序列。通过对这些已知基因的结构和功能分析,发现有与细胞骨架成分相关的基因：αａｃｔｉｎｉｎ,ｅｚｒｉｎ和细胞角蛋白１３;直接与瘤基因和抑瘤基因相互作用的基因：鲨烯合成酶和ＴＲＩＰ１基因;直接参与ＤＮＡ合成以及调控基因转录和翻译的基因：ＴＡＦⅡ６８和组蛋白Ｈ１０;另外还有人类补体因子Ｂ及类转运ＲＮＡ合成酶的基因。这些基因大多具有相当于抑瘤基因的功能。从而进一步说明鼻咽癌的发生是多基因相互作用的结果。     

鼻咽癌中与已知基因同源的差异表达cDNA序列

采用新近发展的ｃＤＮＡ代表性差异分析法筛选鼻咽癌中不表达的或表达降低的ｃＤＮＡ序列。结果显示：有９个与已知基因高度同源的ｃＤＮＡ序列。通过对这些已知基因的结构和功能分析,发现有与细胞骨架成分相关的基因：ａ－ａｃｔｉｎｉｎ,ｅｚｒｉｎ和细胞角蛋白１３;     

蜈蚣提取液治疗肝癌Bel-7404细胞后的差异表达蛋白研究

目的 筛选蜈蚣提取液(ECP)治疗肝癌Bel-7404细胞后的相关差异表达蛋白,探讨其药物治疗机.方法 一步抽提法制备肝癌Bel-7404细胞株治疗组ECP浓度(10 mg/mL)和对照组(RPIM1640完全培基培养)的总蛋白质,双向凝胶电泳建立两组总蛋白的双向凝胶电泳图谱,PDQuest软件对其图谱比较,MALDI-TOF-MS对差异表达的蛋白质进行分析并获取肽质量指纹图谱,数据库搜索鉴定主要差异表达蛋白质.结果 共发现76个差异表达蛋白点(P<0.05).治疗组中41个表达下调,35个表达上调.选择最明显的14个蛋白质斑点作质谱分析,其中肽基脯氨酰顺反异构酶A(PPIA)、核纤层蛋白-Bl(Lamin-B1)、黄素还原酶(FRase)、转铁结合蛋白2(Tbp2)、唾液酸合成酶(SAS)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH),周期素依赖激酶抑制蛋白1(P21)和半乳凝素(Gal-7)在治疗组中表达上调,角蛋白(CK-19)、肌动蛋白(Actin)、转内质网ATP(三磷酸腺苷酶)酶(TER AIPase)、ω-1谷胱甘肽转移酶(GSTOl-1)、抑制蛋白(PFNl)及碱性磷酸酶(ALP)在治疗组中表达下调.结论 ECP能诱导肝癌Bel-7404细胞内某些蛋白异常表达,能多途径抑制肝癌细胞的生长,诱导其凋亡或直接死亡.     

Ki-67和凋亡细胞在肝癌中的表达及其临床意义

目的　探讨细胞增殖和凋亡在原发性肝癌中的表达及其临床意义。方法　检测 5 7例肝癌病理标本凋亡细胞指数 (AI)、Ki- 6 7增殖指数 (KI)和AI/KI比率 ,分析其与临床病理、术后复发、预后的关系。结果　细胞凋亡和增殖指数在肝癌组织中高于癌旁组织 ,在低分化肝癌中高于高分化肝癌。AI/KI值随着术后复发时间和生存时间的延长而逐渐升高 (P <0 .0 1)。结论　细胞增殖和凋亡共同参与肝癌的发生和进展 ,但细胞凋亡相对不足。AI/KI值对肝癌的预后判断有一定意义。     

喉鳞癌组织与相邻正常黏膜的基因表达谱差异

目的:研究喉鳞癌组织与相邻正常黏膜的基因表达谱差异。方法:对2例经病理证实的喉鳞状细胞癌标本和邻近的正常黏膜组织标本与基因表达谱芯片进行杂交,利用激光共聚焦荧光检测系统扫描芯片杂交信号,获得样品中基因序列及表达信息。结果:对比2例喉癌和邻近正常组织的基因表达图谱,发现癌组织和正常组织存在差异表达,2例标本重复出现且差异表达的基因共74个,其中喉癌组织表达上调的基因(R 5)27个,表达下调的基因(0相似文献   

沉默信息调节因子3对肝癌细胞增殖的影响

目的探讨沉默信息调节因子3（SIRT3）对肝癌细胞增殖的影响。方法Western blotting检测SIRT3在正常肝组织、永生化
肝细胞及肝癌细胞系中的蛋白表达水平;在肝癌细胞中过表达SIRT3,台盼蓝排斥实验检测过表达SIRT3对肝癌细胞增殖的影
响,EdU标记实验检测SIRT3对肝癌细胞DNA合成的影响;在肝癌细胞中过表达SIRT3,平板集落实验检测SIRT3对肝癌细胞
集落形成能力的影响;qRT-PCR验证SIRT3的沉默效率,台盼蓝排斥实验检测SIRT3沉默对肝癌细胞增殖的影响,EdU标记实
验检测SIRT3沉默对肝癌细胞DNA合成的影响。结果SIRT3在肝癌细胞系中的蛋白水平较永生化肝细胞、正常肝组织降低;
SIRT3在肝癌细胞中成功过表达,过表达SIRT3使肝癌细胞增殖数目减少了约为51%~61%（P<0.001）,使肝癌细胞DNA合成下
降了约57%（P<0.05）;过表达SIRT3抑制肝癌细胞的集落形成能力;SIRT3沉默有效,SIRT3沉默使肝癌细胞的增殖增加了约
51%~61%（P<0.01）,使肝癌细胞的DNA合成能力增强了137%~149%（P<0.01）。结论SIRT3可抑制肝癌细胞的增殖。
     

Bim介导白杨素诱导肝癌Hep 3B细胞凋亡

目的:研究白杨素诱导人肝癌Hep 3B细胞凋亡是否涉及上调促凋亡蛋白Bim.方法:体外培养Hep3B细胞.碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率.细胞凋亡ELISA试剂盒检测细胞组蛋白/DNA碎片.Western blot和小干扰RNA(siRNA)转染用于探索其作用机制.结果:白杨素显著诱导Hep3B凋亡,并上调Bim表达.Bim特异性siRNA能有效拮抗白杨素诱导Hep 3B细胞凋亡作用.结论:白杨素具有诱导人肝癌Hep3B细胞凋亡作用,其作用机制涉及上调Bim表达.     

Knockdown of Survivin Expression by siRNA Induces Apoptosis of Hepatocellular Carcinoma Cells

Survivin, a newly identified member of lAP family, is a powerful apoptosis-inhibiting factor. It is expressed in embryonic tissues as well as in the majority of human cancers, but not in most normal adult tissues. The cancer-specific expression of survivin makes it a potential target for cancer treatment. A survivin-specific small inhibitory RNA （siRNA） was introduced into hepatocellular carcinoma cells to investigate its effect on cancer cell apoptosis, growth and sensitivity to chemotherapeutic drugs. It was found that expressions of survivin protein and proliferation index （PI） in siRNA groups were significantly decreased, the apoptosis index （AI） of siRNA groups was significantly higher than those of others groups, and the growth inhibition rate （GIR） of chemotherapeutic drugs in siRNA groups were significantly higher than those of other groups. Our study suggests that the expression of survivin may be significantly decreased in hepG2 cell after siRNA transfection. siRNA targeting survivin could induce cell apoptosis, inhibit cell proliferation and sensitize hepatocarcinoma cells to chemotherapy. Our findings provide preliminary evidence for the therapeutic use of survivin-targeted RNA interference for human tumors that express high levels of this molecule.     

Effect of preoperative transcatheter arterial chemoembolization on apoptosis of hepatocellular carcinoma cells

Ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ (ＨＣＣ)ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔｃｏｍｍｏｎｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ ＳｕｒｇｉｃａｌｒｅｓｅｃｔｉｏｎｉｓｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄａｓｔｈｅｍｏｓｔｅｆｆｅｃｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＨＣＣ Ｕｎｆｏｒｔｕｎａｔｅｌｙ,ｏｎｌｙａｍｉｎｏｒｉｔｙｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｃｕｒｒｅｎｔｌｙｄｉａｇｎｏｓｅｄｗｉｔｈＨＣＣｍａｙｂｅｎｅｆｉｔｆｒｏｍｔｈｉｓｒａｄｉｃａｌｏｐｔｉｏｎ Ｔｒａｎｓｃａｔｈｅｔｅｒａｒｔｅｒｉａｌｃｈｅｍ…     

上调XB130表达对人肝癌HepG2细胞凋亡和增殖的影响

目的观察XB130 表达上调后人肝癌细胞HepG2 增殖和凋亡的变化,并探讨其作用机制。方法Western blot及实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测肝癌细胞株中XB130表达;构建过表达质粒pCMVEGFP-XB130 转染HepG2 细胞,实验分为pCMV-EGFP-XB130 组（pCMV-EGFP-XB130 转染）,空白对照组（EGFP 转染）。以免疫荧光、Western blot法及qRT-PCR 法检测上调效率。Western blot 法检测PI3K/Akt通路相关基因表达;采用MTT法检测转染后细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果XB130 蛋白及其mRNA在肝癌细胞株Hep3B、Huh7、HepG2 和MHCC97H 中均有表达,在HepG2 细胞株中表达量最低（ F=6.342 和5.424,均P=0.001）。与EGFP 组比较,pCMV-EGFP-XB130 组中p-p21、p-p27、p-FOXO3a 及Pro Capase-9蛋白表达上调（t =4.652,3.558,6.743 和3.021,均P<0.05）;XB130 表达上调后在72 及96 h HepG2 细胞增殖能力增强（ t=4.752 和8.542,均P=0.001）;XB130 表达上调后HepG2 细胞凋亡率降低（t =7.467,P =0.001）。结论XB130 表达上调通过PI3K/Akt信号通路促进肝细胞癌细胞增殖,抑制凋亡。