脑脊液α_1-抗胰蛋白酶、α_1-酸性糖蛋白测定在中枢神经系统疾病鉴别诊断中的应用

本文用单项免疫扩散法测定了133例患者脑脊液中的α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)和α_1酸性糖蛋白(α_1-AG)的水平,结果表明α_1-AT、α_1-AG 是鉴别化脑、结脑、病脑等神经系统疾病的良好指标.化脑时α_1-AT 和α_1-AG 显著增高,分别为0.159±0.050g/L 和0.127±0.046g/L;结脑时α_1-AT、α_1-AG 分别为0.113±0.026g/L、0.096±0.024g/L,比正常高;而病脑时α_1-AT 和α_1-AG 则正常。脑膜白血病患者的α_1-AT、α_1-AG 与其它急性白血病比较有显著意义。脑血栓与脑出血患者α_1-AT 比较有显著意义,但两病患者的α_1-AG 比较无差异。对脑损伤等神经系统病时的脑脊液α_1-AT、α_1-AG也进行了测定。此法可为中枢神经系统疾患的鉴别诊断提供实用依据。     

多发性骨髓瘤患者ABO血型抗体缺乏2例

1 病例简介 1.1患者1,男,68岁,诊断为多发性骨髓瘤(MM)IgG型.实验室检查:Hb51g/L,Plt 37×109/L;血清白蛋白24g/L,球蛋白69g/L;血清醋酸纤维薄膜电泳:A 0.270,α10.125,α2 0.05,β 0.079,γ 0.476,γ区呈现基底窄而均一的单峰(M带);血清免疫球白:IgG 38.72g/L,IgA 0.13g/L,IgM 1.26g/L;尿蛋白(2+).临床申请输血,血型鉴定正定型为A型,反定型为AB型.     

弥漫型胸膜间皮瘤腰椎转移1例

患者 男,57岁.因胸痛、进行性气急8个月于1993年12月1日入院.既往有22年石棉接触史.查体:营养不良,全身浅表淋巴结未扪及.胸背部左、右侧分别可见约4cm×3cm和12cm×9cm隆起的肿块,表面欠光滑,边界不清,质中等硬,压痛,不活动.双下肺叩呈浊音,呼吸音减弱.心脏无异常.肝脾不大.杵状指.实验室检查:周围血RBC3.16×10~(12)/L,Hb88g/L·WBC4.4×10~9/L,NO.58,LO.42,ESR160mm/h,血清K~+3.2mmol/I、,Na~+142mmol/L,Cl~-110mmol/L,总蛋白49.0g/L,白蛋白(A)37.5g/L,球蛋白(G)11.2g/L,A/G=3.38.蛋白电泳:白蛋白39.1g/L,α_1球蛋白2.3g/L.α_2球蛋白0.7g/L,β在球蛋白1.1g/L,γ球蛋白5.8g/L.X     

川芎嗪对脑缺血/再灌注后脑组织肿瘤坏死因子-α含量及髓过氧化物酶活性的影响

目的:观察川芎嗪对大鼠脑缺血/再灌注后脑组织肿瘤坏死因子α(TNFα)含量及髓过氧化物酶(M PO)活性的影响,探讨其对脑缺血/再灌注损伤保护作用的机制。方法:36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和川芎嗪组。假手术组插入栓线但不阻塞大脑中动脉。模型组制备脑缺血/再灌注损伤模型。川芎嗪组于制模前30 m in腹腔注射川芎嗪注射液33 m g/kg。分别采用放射免疫分析法及分光光度计法测定各组大鼠脑组织缺血/再灌注6 h时TNFα含量及缺血/再灌注24 h时的M PO活性。结果:脑缺血/再灌注大鼠TNFα含量〔(1.576±0.153)μg/L〕及M PO活性〔(0.409±0.044)U/g〕较假手术组〔(0.601±0.089)μg/L和(0.026±0.008)U/g〕均显著升高(P均<0.01);川芎嗪组TNFα含量〔(1.035±0.092)μg/L〕及M PO活性〔(0.293±0.039)U/g〕较模型组均显著降低(P均<0.01)。结论:川芎嗪可通过降低缺血/再灌注后大脑皮质TNFα含量及M PO活性来减轻炎症反应,发挥其脑保护作用。     

β_2微球蛋白与肾功能

β_2微球蛋白(β_2M)是一种低分子蛋白质,分子量11800,系由100个氨基酸组成的多肽单链。人体内几乎所有的有核细胞均能合成β_2M,并附着于细胞表面,以后被释放入体液中。在健康人体内,β_2M以一种相对不变的速率生成,其降解部位主要在肾脏,可被肾小球滤过而为近端肾小管所重吸收。正常人由于年龄的增长,肾小球滤过率有生理性的下降而影响血清β_2M的水平,每增加10岁,血清β_2M可增高280μg/L。正常血清值为1.1～2.7mg/L,尿排出量<370μg/24小时。β_2M常用的最可靠的测定方法为放射免疫法或酶联吸附法。     

α-硫辛酸、银杏叶提取物对波动高糖所致人视网膜色素上皮细胞损伤的作用

目的:研究α-硫辛酸(alpha lipoic acid,ALA)、银杏叶提取物(Gingko biloba,EGb761)对波动性高糖所致人视网膜色素上皮细胞(human retinal pigment epithelial,HRPE)氧化应激和炎性损伤的保护作用。方法:培养HRPE细胞株,取生长良好的对数期细胞用于实验,换用不同条件培养液,分10组进行试验。1)5.5 mmol/L葡萄糖对照组(N组);2)33 mmol/L持续高糖组(H组);3)5.5~33 mmol/L波动葡萄糖组(F组);4)33 mmol/L渗透压对照组(P组);5)ALA_(50)干预组(ALA_(50)组):5.5~33 mmol/L波动葡萄糖组+50μmol/L ALA;6)ALA_(100)干预组(ALA_(100)组):5.5~33mmol/L波动葡萄糖组+100μmol/L ALA;7)ALA_(200)干预组(ALA200组):5.5~33 mmol/L波动葡萄糖组+200μmol/L ALA;8)EGb761_(0.1)干预组(EGb761_(0.1)组):5.5~33 mmol/L波动葡萄糖组+0.1 g/L EGb761;9)EGb761_(0.5)干预组(EGb761_(0.5)组):5.5~33 mmol/L波动葡萄糖组+0.5 g/L EGb761;1 0)EGb761_(1.0)干预组(EGb761_(1.0)组):5.5~33 mmol/L波动葡萄糖组+1.0 g/L EGb761。各组细胞培养72 h,72 h时检测各组HRPE细胞上清液中SOD,GSH,MDA,TNF-α与ICAM-1的含量。采用SPSS18.0软件进行统计学分析。结果:与正常对照组相比,持续高糖组、波动性高糖组、ALA干预组(ALA_(50),ALA_(100),ALA_(200))、EGb761干预组(EGb761_(0.1),EGb761_(0.5),EGb761_(1.0))的SOD,GSH,MDA,TNF-α与ICAM-1含量差异有统计学意义(分别为F_(SOD)=67.936,F_(GSH)=71.363,F_(MDA)=81.123,F_(TNF-α)=70.684,F_(ICAM-1)=80.193;均P0.05);渗透压对照组与正常对照组相比各指标差异均无统计学意义(P0.05);波动性高糖组与持续性高糖组相比,SOD活性、GSH含量明显下降,MDA、ICAM-1与TNF-α的表达量明显升高(均P0.0 5)。ALA干预组(ALA_(50),ALA_(100),ALA_(200))、EGb761干预组(EGb761_(0.1),EGb761_(0.5),EGb761_(1.0))与波动性高塘组相比,各组有统计学差异,且随药物剂量增加,SOD活性、GSH含量增加,MDA,ICAM-1与TNF-α的表达量下降,存在剂量相关性(均P0.05)。结论:ALA,EGb761可能通过降低波动性高血糖对人HRPE所致氧化应激水平,减轻炎性反应,对波动性高血糖所导致的病理损伤有一定保护作用。     

尿蛋白分析在肾脏疾病中的临床价值

目的探讨尿蛋白分析[尿α_1-微球蛋白(α_1-MG)、β_2-微球蛋白(β_2-MG)、微量白蛋白(MA)、尿总蛋白(UTP)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)]对于诊断早期肾损伤的临床价值。方法收集病理上无明显肾小球、肾小管病变且尿常规检查正常但可能存在早期肾损伤的高血压病、糖尿病患者的尿液标本80例,同期收集健康体检尿液标本80例为健康对照组。检测各组α_1-MG、β_2-MG、MA、UTP、NAG的含量,并对结果进行统计学分析。结果当出现早期肾损伤(如高血压、糖尿病)尿α_1-MG、β_2-MG、MA、UTP、NAG均有不同程度的升高,5项检测指标之间具有较好的相关性,且与健康对照组相比差异具有统计学意义[α_1-MG(mg/L):19.7±1.4比5.3±1.6,β_2-MG(mg/L):10.8±0.04比1.2±0.03,MA(mg/L):56.3±6.7比8.6±4.2,UTP(g/L):0.395±0.097比0.069±0.028,NAG(U/L):78.4±7.6比17.9±5.1,均P0.01]。结论对尿α_1-MG、β_2-MG、MA、UTP、NAG进行联合检测可以为肾脏早期损伤的诊断提供灵敏可靠的指标,从而帮助临床诊断早期肾损伤并及时干预,提高患者的治愈率。     

脓毒症中功能性及失活α_2-巨球蛋白的定量

α_2-巨球蛋白(α_2M)是纤维蛋白溶酶、凝血酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶等多种蛋白水解酶的广谱抑制剂,这些蛋白水解酶是在炎性反应中产生的。因此,α_2M在脓毒症这样一些病症治疗中具有重要作用。为了研究α_2M在脓毒症中的状况,作者建立了测定功能性及失活α_M 的方法。血浆中功能性α_2M 的测定是通过α_2M 与固相胰蛋白酶的定量结合,运用放射免疫法(RIA)实现的;失活α_2M 则是通过单克隆抗体-McAbM_1与暴露于α_M 表面的新决定簇的特异性反应,运用RIA 法进行测定的。与健康人相比,48例脓毒症病人血浆中功能性α_M 减少(P<0.0001)。就允许的和最低的功能性α_2M 而言,23例休克病人比其余25例患者的低(分     

肺吸虫病伴肾病综合征一例

男,8岁。尿道下裂术前检查发现尿蛋白,血红蛋白107～110g/L,白细胞6.3～10.5×10~9/L,中性47～69％,淋巴20～44％,酸性8～15％,酸性细胞计数0.52×10~9/L,24小时尿蛋白定量4.63g,尿白细胞1～3/HP,红细胞0～2/HP,血清总蛋白44.3～48.9g/L、A 23.0～2.8g/L、G 21.3～24.7g/L,血清胆固醇7.36mmol/L,血清蛋白电泳:白蛋白52.5％,α_14.0％,α_222.7％,β10.1％,     

117例急性白血病患者纤溶抑制物研究

目的 探讨急性白血病(AL)患者凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)、纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)、α2抗纤溶酶(α2:-PI)等纤溶抑制物的变化及其临床意义.方法 采用ELISA法测定117例AL患者和50名正常对照的PAI-1抗原(PAI-1:Ag)含量、TAFI抗原含量;采用发色底物法测定PAI活性、α2-PI活性、TAFI活性.结果 ①AL患者的α2-PI活性水平明显低于对照组,其中急性淋巴细胞白血病患者[(96.8±21.2)%]较对照组[(129.1±13.1)%]下降更明显;②急性髓系白血病患者PAI-1:Ag含量[(37.8±9.2)μg/L]高于对照组[(33.8±4.9)μg/L];③急性早幼粒细胞白血病患者PAI-1:Ag含量[(37.8±9.0)μg/L]高于对照组,TAFI活性水平[(13.3±4.8)mg/L]低于对照组[(16.9±2.6)mg/L],急性单核细胞白血病患者PAI-1:Ag含量[(39.9±11.6)μg/L]高于对照组;④复发/难治组的PAI-1:Ag含量[(39.6±11.6)μg/L]高于对照组;⑤明显出血组TAFI活性水平[(13.2±5.3)mg/L]低于对照组及无出血组[(17.0±4.6)mg/L];⑥TAFI活性与出血程度呈显著负相关,r=-0.276(P《0.05).结论 α2-PI及TAFI活性降低是AL出血的原因之一,且TAFI活性与卅血程度呈显著负相关.     

1例含有8种自身抗体的SLE患者

1　病例报告　陈某 ,女 ,4 5y,5年前诊断为系统性红斑狼疮 ( SLE) ,现因明显蛋白尿 ( )来我院就诊。心电图示心肌肥厚。化验结果 :免疫球蛋白 G( Ig G) 2 9.0 0 g/L,Ig A3 .79g/L,Ig M1 .0 0 g/L,补体 C30 .79g/L,C40 .1 3 g/L。自身抗体检测结果 :抗核抗体 ( ANA) 1∶ 4 0阳性 ,抗双链DNA ( ds-DNA)阳性 ,抗可提取性核抗原 ( ENA)多肽抗体谱有 6种阳性 (抗 Sm、抗 ul RNA、抗 r RNP、抗 ss A、抗 ss B、抗 D’E)。最后诊断为 SLE重叠干燥综合征 ( SS)。2　讨论　 SLE患者血清中含有多种自身抗体 ,但含有 8种之多实…     

血清肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶ELISA检验方法的建立及临床应用

目的 应用抗人肝癌组织中蔓陀罗凝集素(DSA)强结合的γ-谷氨酰转移酶(GGT)单克隆抗体(MeAb),建立其血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法 ,并探讨其在原发性肝癌(PHC)诊断的应用价值.方法 通过McAb技术制备的抗DSA-GGT的McAb,采用蛋白G亲和层析柱色谱纯化;纯化的McAb经生物素标记后,构建血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法 .用建立的方法 对39例PHC患者和122例非PHC患者进行初步临床应用研究,用P-P概率图检验119例健康对照血清DSA-GGT分布状态,依据受试者工作曲线(ROC)确定DSA-GGT诊断PHC的cut-off值.结果 获取5株分泌McAb杂交瘤细胞制备的腹腔积液,经纯化后McAb蛋白总量在2.12～6.70 mg之间;McAb的生物素标记率为48.6%～72.2%.所构建的血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法 的最低检出限为2μg/L;平均批内、批间变异分别为8.9%和11.5%.119份健康对照血清DSA-GGT水平呈正态分布,x±s为(1.50±0.51)μg/L;经ROC分析确定其诊断PHC的临界值为3.25μg/L.39例PHC患者26例DSA-GGT阳性,其诊断PHC敏感度为66.7%;122例非PHC患者10例DSA-GGT阳性,其诊断特异度为91.8%.结论 所建立的血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法 具有良好的重复性和可靠性.临床初步应用表明其诊断PHC的敏感度、特异度良好,且方法 操作简便,便于临床推广应用,为PHC实验室诊断提供了新方法 .     

急性肾炎恢复期尿微量蛋白与尿酶检测的临床意义

目的　探讨急性肾炎在临床治愈期尿微量蛋白联合尿酶检测的临床价值。方法　对 5 0例正常对照组和 30例急性肾炎组治愈期者采用酶联免疫吸附法检测尿微量白蛋白 (mALB)、视黄醇结合蛋白(RBP)、尿转铁蛋白 (TRF)和α1 微球蛋白 (α1 M ) ;终点法测尿N 乙酰 β D 氨基葡萄糖苷酶 (NAG) ;比色法测尿肌酐 (Cr)。结果　正常对照组尿mALB为 (3.6 1± 2 .4 6 )mg/L,RBP/Cr为 (7.4 6± 5 .0 2 ) μg/mmol,TRF/Cr为 (0 .0 5± 0 .0 3)mg/mmol,α1 M /Cr为 (0 .78± 0 .5 1)mg/mmol,NAG/Cr为(0 .5 2± 0 .4 6 )U/mmol,急性肾炎治愈期患者尿mALB为 (5 .12± 3.4 4 )mg/L ,RBP/Cr为 (8.87± 4 .4 5 ) μg/mmol,TRF/Cr为(0 .38± 0 .32 )mg/mmol,NAG/Cr为 (2 .13± 2 .0 2 )U/mmol,α1 M /Cr为 (0 .88± 0 .4 2 )mg/mmol;其检测的阳性率分别为 :mALB 4 0 % ,NAG 30 % ,RBP 13.3% ,TRF 2 0 % ,α1 M 3.3% ,NAG与mALB两项指标联合检测其阳性率为 4 6 .7%。结论　联合检测尿NAG与mALB在急性肾炎临床治愈期是判定肾脏损害及恢复情况的最灵敏与可靠的实验室指标。     

肿瘤坏死因子-α诱导成骨细胞凋亡时Bcl-2和Bax蛋白表达变化

目的:了解成骨细胞凋亡发生机制,观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导大鼠成骨细胞凋亡过程中Bcl-2,Bax蛋白表达变化及意义。方法:以原代培养的SD大鼠颅骨成骨细胞为实验对象,分别用含量为0,10,20,30,40μg/LTNF-α刺激成骨细胞。通过对细胞活性、超微结构变化观察TNF-α对成骨细胞凋亡的诱导作用;同时检测细胞Bcl-2,Bax蛋白表达变化。结果:随刺激含量的加大,成骨细胞的活性逐渐降低,细胞凋亡逐渐增加。TNF-α含量为<30μg/L时Bax表达呈稳步上升趋势,30～40μg/L时开始下降。Bcl-2表达在含量为10μg/L的时候轻度上升,在20μg/L回复到正常,后随着剂量的加大Bcl-2表达开始明显下降,30～40μg/L时下降非常显著。对于Bax/Bcl-2相对表达强度与细胞死亡率做相关性分析两者呈显著性正相关(n=25,r=0.827,P<0.001)。结论:蛋白相对比例是决定成骨细胞对TNF-α诱导凋亡的易患性的重要因素。     

大疱性系统性红斑狼疮1例报告

查阅文献,发现报告大疱性系统性红斑狼疮(BSLE)的病例极少见,本院近期收住1例,现报告如下。 患者杜某,女性,42a。因手背红斑5a持续加重伴面部红斑1a及全身发疹伴痒2wk,于1997年7月来我院皮肤科就诊,拟诊为“SLE"。 入院检查:T37.4℃、BP014/10kPa。急性病容,全身浅表淋巴结未及,心肺(一),腹(一);皮肤科检查双颊见蝶形分布水肿性红斑呈鲜红色,跨过鼻背;前额、耳后、颈、胸背部、四肢、手掌、足底可见蚕豆大小密集分布,互不融合的对称性水肿性红斑,色鲜红,压之退色,部分呈虹膜样损害。手足背有散在暗红色斑疹,皮损中央覆有灰白色粘着性鳞屑,毛细血管扩张。甲周红斑( )、指腹红斑(-)。实验室检查:血常规:RBC3.6×10~12/L、Hb106g/L、WBC4.6×10~9/L、血小板173×10~9/L;尿常规:P,( ),ESR快(25mm/h);肝肾功能正常;电解质正常;补体:CH_(50)80u/ml、C_30.51g/L、C_40.2g/L;抗“0”<333/ml,RF(-);抗ds-DNA抗体:8.21u/ml,抗ENA抗体:SS-A( );ANA( );尿蛋白定量0.19g/24h;蛋白电泳:A53.5、α_1 13.9％、α_2 72％、β12.3％、γ23.1％。皮肤病理(取材于膝部伸侧皮损)示:表皮层     

哮喘患儿治疗前后痰液嗜酸细胞阳离子蛋白和肿瘤坏死因子-α的含量变化

目的探讨哮喘儿童痰液嗜酸细胞阳离子蛋白 ( ECP)和肿瘤坏死因子 -α( TNF -α)含量的变化及其关系。方法采用 pharmacia UniCAP检测系统和双抗体夹心 ELISA法对 2 5例哮喘患儿急性发作期及 19例治疗后诱导痰液 ECP和 TNF-α水平进行检测。结果哮喘发作期痰液 ECP( 78.6 8± 5 3.95 )μg/L和 TNF-α( 99.44± 32 .93) ng/L,水平明显高于治疗后 ECP:( 2 2 .5 4± 15 .83)μg/L;TNF -α:( 6 5 .42± 2 7.0 1) ng/L ,差异显著 ( P<0 .0 1)。痰液 TNF-α和 ECP两者之间存在显著正相关 r急性期 =0 .475 5 ;r治疗后 =0 .4943。结论 ECP和 TNF-α参与哮喘的发生发展 ,在哮喘发病机制中起重要作用     

纳洛酮对急性缺血-再灌注心肌细胞Bcl-2蛋白和肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的从分子水平探讨纳洛酮对急性心肌缺血-再灌注细胞凋亡和凋亡相关基因bcl-2产物Bcl-2蛋白表达的影响,及其对心肌的保护作用.方法 SD大鼠30只,随机分成3组,单纯缺血-再灌注组,纳洛酮干预组(缺血前10 min及再灌注2 h后腹腔注射纳洛酮0.517 mg/kg)和正常对照组,每组10只.实验动物采用戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉,开胸,打开心包,穿线结扎左冠状动脉前降支再恢复灌注制备大鼠心肌缺血-再灌注模型.用免疫组化法检测心肌组织Bcl-2蛋白表达;用放射免疫法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量.结果正常对照组无Bcl-2蛋白表达,TNF-α含量为(0.39±0.06)μg/L;单纯缺血-再灌注组Bcl-2蛋白表达及TNF-α含量均增加.与单纯缺血-再灌注组比较,纳洛酮干预组Bcl-2蛋白表达明显增加(+ + + vs. +);TNF-α含量明显降低[(0.55±0.12)μg/L比(0.86±0.11)μg/L,P<0.01).结论纳洛酮预处理可抑制TNF-α的产生,并通过上调Bcl-2蛋白表达,抑制缺血-再灌注后心肌细胞的凋亡,从而保护缺血-再灌注对心肌细胞的损伤.     

血栓性血少板减少性紫癜病人的凝血酶生成

血栓性血少板减少性紫癜(TTP)主要由内皮细胞损伤或原发性血小板凝集引起.为了评价TTP患者在急性期体内凝血酶生成情况,本研究测定了10例急性TTP病人的血浆凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物(TAT)和纤维蛋白溶解酶-α_2-抗纤维蛋白溶解酶复合物(PAP),并与10例正常人比较.10例急性期TTP病人的血浆TAT均值±SD为6.7±3.7μg/L(范围3.0-15.8)μg/L),比正常对照组的1.7±0.3μg/L(1.3-2.1μg/L)明显为高(P<0.001),PAP值为2.1±1.2mg/L(范围1.0-4.3mg/L)亦比对照组的0.2±0.1mg/L(范围0.1-0.4mg/L)为高(P<0.001).病人的TAT、PAP值均不在正常范围内,TTP患者的TAT和PAP之间未发现有显著相关性(r=-0.134,p=0.7).血浆FDP与TAT和PAP浓度亦未发现有显著的相关性(分别为r=-0.251,P=0.5及r=0.344,P=0.3).     

骨髓间充质干细胞对烟雾吸入性损伤兔早期炎症因子分泌的影响

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对烟雾吸入性损伤早期外周血及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β、IL-6、IL-10)分泌的影响.方法 全骨髓培养法体外培养兔MSCs,用流式细胞术鉴定.将56只健康新西兰大耳白兔按随机数字表法分为正常对照组(C组,n=8)、烟雾吸入性损伤组(S组,n=24)、烟雾吸入性损伤+MSCs移植组(M组,n=24),后两组再分为伤后2、4、6 h亚组,每组8只.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆及肺组织匀浆液中促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6及抗炎因子IL-10的含量.结果 与C组比较,S组各时间点血浆促炎、抗炎因子均显著升高;各时间点肺组织促炎因子显著升高,抗炎因子无明显变化.与S组比较,M组各时间点血浆促炎因子显著下降,抗炎因子显著升高[6 h时TNF-α(μg/L):1.7±1.7比4.1±1.6,IL-1β(ng/L):9.9±1.7比21.2±2.6,IL-6(μg/L):1.0±0.3比1.3±0.2,IL-10(ng/L):15.2±4.4比7.9±3.5,均P＜0.05];各时间点肺组织促炎因子显著降低,而抗炎因子仅在4 h、6 h显著升高[6 h时TNF-α(ng/L):503.0±156.4比587.7±171.2,IL-1β(ng/L):0.4±0.2比0.6±0.2,IL-6(ng/L):155.2±13.7比350.2±20.3,IL-10(ng/L):23.3±5.4比11.0±5.6,均P＜0.05].结论 MSCs移植能降低烟雾吸入性损伤早期促炎因子水平,升高抗炎因子水平,改善全身炎症反应,对烟雾吸入性损伤肺组织具有一定的保护作用.

Abstract：

Objective To explore the effect of bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) engraftment on secretion of tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukins (IL-1β, IL-6, IL-10) in peripheral blood and lung homogenates in the early stages of smoke inhalation injury. Methods MSCs were proliferated by the method of whole marrow culture and identified by flow cytometry. Fifty-six healthy New Zealand rabbits were randomly divided into control group (C group, n=8), smoke inhalation injury group (S group, n=24)and smoke inhalation injury+MSCs engraftment group (M group, n=24). The latter two groups were subdivided into 2, 4, 6 hours after injury subgroups, with 8 rabbits in each group. The levels of TNF-α,IL-1β, IL-6 and IL-10 in peripheral blood and lung homogenates were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results Compared with C group, concent of pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines in peripheral blood at each time point in S group were increased significantly.The concent of pro-inflammatory cytokines in lung homogenate at each time point in S group was significantly higher than thoae in C group, and that of anti-inflammatory cytokines showed no significant changes.Compared with the S group, concent of pro-inflammatory cytokines in peripheral blood in M group was decreased significantly, and that of anti-inflammatory cytokines was increased significantly [6 hours TNF-α(μg/L):1.7±1.7 vs. 4.1±1.6, IL-1β (ng/L): 9.9±1.7 vs. 21.2±2.6, IL-6 (μg/L): 1.0±0.3 vs.1.3 ± 0. 2, IL-10 (ng/L): 15. 2 ± 4. 4 vs. 7. 9 ± 3.5, all P＜0.05]. Concent of pro-inflammatory cytokines at each time point in M group was decreased significantly when compared with S group in lung homogenate,while only anti-inflammatory cytokine at 4 hours and 6 hours was increased significantly [6 hours TNF-α (ng/L): 503. 0±156. 4 vs. 587.7±171.2, IL-1β (ng/L): 0.4±0.2 vs. 0.6±0.2, IL-6 (ng/L): 155.2±13.7 vs. 350.2±20.3, IL-10 (ng/L): 23.3±5.4 vs. 11.0±5.6, all P＜0.05]. Conclusion MSCs engraftment could decrease pro-inflammatory cytokines and increase anti-inflammatory cytokines in the early stages of smoke inhalation injury, thus amelioratea inflammatory reaponse, which confers protective effect on smoke inhalation injury.     

小白菊内酯对巨噬细胞系RAW264.7极化分型的影响

[目的]探讨小白菊内酯(PAR)对巨噬细胞系RAW264.7极化分型的影响.[方法]巨噬细胞系RAW264.7细胞分为对照组、模型组及实验组.对照组给予常规培养,模型组中加入100μg/L脂多糖,实验组分别加入低、中、高浓度PAR(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)处理,连续培养7 d后采用ELISA法检测RAW264.7两种极化分型(M1型和M2型)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-l(MCP-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和白细胞介素-4(IL-4)水平;采用流式细胞计量术测定两种细胞表面分子CD16/32和表面分子CD206的表达;采用Western blot测定不同浓度PAR三组细胞中ApoE蛋白水平;采用实时荧光PCR(RT-qPCR)检测三组细胞中IL-10、精氨酸酶(Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA水平.[结果]实验组TNF-α和MCP-1水平均显著低于对照组与模型组(P<0.05),TGF-β1、IL-4和ApoE蛋白水平显著高于对照组与模型组(P<0.05);实验组中高、中、低浓度PAR处理后,TNF-α和MCP-1水平依次降低,TGF-β1、IL-4和ApoE蛋白水平依次增高,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).模型组M2/M1为0.47,显著低于对照组的0.85;而实验组低、中、高浓度M2/M1分别为0.61、0.69、0.73,显著高于模型组,其差异均有统计学意义(P<0.05);低、中、高浓度M2/M1依次升高,其差异具有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,Arg-1 mRAN水平显著下降;IL-10、iNOS mRNA水平显著升高,其差异均有统计学意义(P<0.05);实验组高浓度中IL-10、iNOS mRNA水平均显著低于低浓度和中浓度;Arg-1 mRAN水平显著高于低浓度和中浓度,其差异均有统计学意义(P<0.05).[结论]PAR可能进而诱导RAW264.7从M1促炎表型向M2抗炎表型极化.