云锡矿工肺癌N-ras、c-myc和c-fos原位杂交检测

目的探讨云锡矿工肺癌发病机制。方法用原位分子杂交的方法，检测２０例云锡矿工肺癌（Ｍ组）、２０例其它地区非矿工肺癌（ＮＭ组）以及１０例死于非肺部疾患者的尸解肺组织（Ｃ组）中Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ及ｃ－ｆｏｓ癌基因的过表达情况。结果癌基因过表达出现率：Ｍ组Ｎ－ｒａｓ５５％（１１／２０）、ｃ－ｍｙｃ５０％（１０／２０）、ｃ－ｆｏｓ２５％（５／２０）；ＮＭ组Ｎ－ｒａｓ８０％（１６／２０）、ｃ－ｍｙｃ５５％（１１／２０）、ｃ－ｆｏｓ６０％（１２／２０）；Ｃ组３个癌基因过表达率均仅为１０％（１／１０）。表明Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ的过表达与肺癌的发生有关；ｃ－ｆｏｓ与矿工肺癌发生的关系不明显而与非矿工肺癌的发生有关。有２种或３种癌基因同时表达的，Ｍ组分别为４５％、２０％；ＮＭ组分别为７５％、２５％。癌旁增生上皮中发现有阳性反应。结论肺癌的发生可能与２种或２种以上癌基因过表达有关。矿工与其他人群肺癌的发生机制可能有不同之处。     

快速, 高敏感度检测Ki—ras基因突变方法的建立及其在检测大肠癌中的应用

建立一种检测Ｋｉ－ｒａｓ基因突变的快速、高敏感度的方法，并将其应用于大肠癌的检测中，应用引物导限制富集突变等位基因检测法（ＰＣＲ＿ＰＩＲＥＭＡ，Ｐｒｉｍｅｒ Ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ ｏｆ Ｍｕｔａｎｔ ＡｌｌｅｌｅＡｓｓａｙ）的敏感度达１０＾－５－１０＾－６，并在３０例大肠癌样品中检测出了８例Ｋｉ－ｒａｓ基因１２密码子突变的样本，突变率达２６．     

苯作业工人白细胞Ki─ras癌基因点突变分子检测初探

本文应用ＰＣＲ技术和寡聚核苷酸探针检测苯作业工人外周血白细胞中Ｋｉ─ｒａｓ癌基因第１２位密码子点突变。４１名接触苯工人和４１名对照工人中只有１例接苯工人发生ＧＧＴ→ＴＧＴ（Ｇｌｙ→Ｃｙｓ）突变，该女工苯作业工龄６年，连续三次（均间隔三个月）白细胞计数均呈低下状态，但其他血液学指标未见明显异常。初步探讨了Ｋｉ─ｒａｓ基因点突变检测作为苯白血病的生物标志和职业人群早期监护指标的可能性。     

青石棉与苯并（a）芘联合诱发大鼠肺癌Ki－ras癌基因点突变

用青石棉＋苯并（ａ）芘碘油混悬液对大鼠气管注入染尘，取染尘后１８０和２７０天剖检的肺组织标本２５例。提取标本中ＤＮＡ，用人工合成的寡核苷酸引物进行ＰＣＲ体外扩增，再用γ－３２ＰＡＴＰ标记正常和两种突变Ｋｉ－ｒａｓ１２位探针，杂交，放射自显影。结果表明，正常对照组７例标本Ｋｉ－ｒａｓ１２位点突变为阴性，青石棉＋苯并（ａ）芘组１８例标本中，３例Ｋｉ－ｒａｓ１２位点突变为阳性，其中２例由ＧＧＴ（Ｇｌｙ）突变为ＡＧＴ（Ｓｅｒ），１例由ＧＧＴ（Ｇｌｙ）突变为ＴＧＴ（Ｃｙｓ），并对突变原因进行了探讨。     

磷脂酶A2活性对高糖或（和）高胰岛素环境下培养的大鼠血管平滑？…

目的 观察磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ａ２,ＰＬＡ２）活性变化对高糖或（和）高胰岛素（Ｉｎｓ）环境下培养大鼠血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＶＳＭＣ）增殖的影响。方法 在含２２ｍｍｏｌ·Ｌ＾－１Ｇｌｕ或（和）１００Ｍｕ·Ｌ＾－１Ｉｎｓ的ＤＭＥＭ培养液中加入２￣２０μｍｏｌ·Ｌ＾－１（终浓度）的ＰＬＡ２抑制剂ＡＡＣＯＣＦ３与ＶＳＭＣ共同孵育７２ｈ后     

DA方案治疗成人急性白血病100例

我们两院从１９９０年６月起至１９９８年６月末止,应用柔红霉素（ＤＮＲ）和阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）（ＤＡ）方案治疗急非淋白血病,资料完整可供评价的有１００例,总结报告如下。１　材料与方法１００例病人均系我们两院的住院病人,均经临床、血象、骨髓象、细胞化学染色等检查确诊（诊断标准依据１９８６年９月天津关于白血病诊断、分型会议的修订意见）,年龄从１６～６０岁,中数３５１岁,其中男６１例,女３９例,其亚型分布为Ｍ１型３例,Ｍ２型５９例,Ｍ３型２５例,Ｍ４型５例,Ｍ５型（４＋４）８例。在上述１００例中,８…     

接触苯工人白细胞癌基因激活的研究

应用ＰＣＲ－Ｂｌｏｔ和Ｄｏｔ－Ｂｌｏｔ技术检测了１０３名接触苯工人和７０名对照组工人外周血白细胞ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ２基因和ｃ－ｍｙｃ基因。结果表明，１０３名接苯者中有４例其外周血白细胞检出ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ２基因１２位点Ｇ→Ｔ突变，其接苯工龄在６～１０年，而７０名对照者未检出该突变；ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ２基因１２位点（Ｇ→Ａ突变在两组工人中均未检出阳性；ｃ－ｍｙｃ基因亦未在两组工人中检出扩增现象。结果提示，ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ２基因１２位点Ｇ→Ｔ突变与慢性接触苯有关，有可能是苯白血病发生的分子机理。     

职业性肺癌HSPs与多种瘤抑制基因,k—ras表达的相关性

目的 观察ＨＳＰ２７，ＨＳＰ７０与多种瘤抑制基因（ＭＴＳ１），ｋ－ｒａｓ基因及其蛋白产物在职业性肺癌（ｏｃｃｕｐａｔｉｏｎａｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ，ＯＬＣ）中的联合表达的情况，方法 采用免疫组化和原位分子杂交技术。结果 ＯＬＣ中的ＨＳＰｓ较正常肺组织高，ＯＬＣ中的ＨＳＰｓ与ｋ－ｒａｓ都有基因扩增和蛋白产物的过表达；ＭＴＳ１的表达与ＨＳＰｓ，ｋ－ｒａｓ的表达呈负相关，结论ＭＴＳ１表达的变化可能是ＯＬ     

硫代反义bcl—2脱氧寡核苷酸对U937细胞凋亡的影响

为研究硫代反义ｂｃｌ－２脱氧寡核苷酸（ＡＮ－Ｓ－ＯＤＮｓ）对单核细胞病细胞系Ｕ９３７细胞株凋亡的影响,采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ、ＤＮＡ电泳、电镜和流式细胞计数技术检测了单核细胞白血病细胞系Ｕ９３７细胞株ｂｃｌ－２基因的表达和ＡＮ－Ｓ－ＯＤＮｓ时Ｕ９３７细胞凋亡的影响。结果发现Ｕ９３７细胞有大量ｂｃｌ－２基因表达：适当浓度（３０μｍｏｌ／Ｌ）ＡＮ－Ｓ－ＯＤＮｓ使Ｕ９３７细胞出现凋亡ＤＮＡ电泳梯     

急性髓系白血病细胞自分泌GM-CSF及其凋亡的研究

要探讨急性髓系白血病（ＡＭＬ）原代细胞自分泌的粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对原代ＡＭＬ细胞凋亡的影响,应用放射免疫技术检测ＧＭ－ＣＳＦ水平,ＤＮＡ电泳检查梯状条带及流式细胞仪检测细胞凋亡率和ＢｃＩ－２蛋白表达的阳性细胞率和相对荧光强度（ＭＦＩ）。结果在５例原代ＡＭＬ细胞体外培养中,３例的培养上清液可检测到ＧＭ－ＣＳＦ,其自发细     

β－胡萝卜素对人体乳腺癌细胞株BCap－37生物学作用的研究

应用细胞培养技术，分子杂交的ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ方法和图像细胞分析技术（ＩＣＭ）研究了β－胡萝卜素对体外培养的人乳腺癌细胞株ＢＣａｐ一３７的生物学作用。细胞生长曲线的结果显示，两个实验组（５×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ，１×１０（－４）ｍｏｌ／Ｌ）对细胞的生长有显著抑制作用并伴有明显的细胞形态学特征的改变。抑制率分别为３３．３３％和２８．２５％（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。血浆生理浓度组（１×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ）对细胞的生长没有抑制作用（Ｐ＞０．０５）。基因表达的研究显示，β－胡萝卜素（１×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ，１×１０（－４）ｍｏｌ／Ｌ）对癌基因Ｃ一ｅｒｂＢ２ｍＲＮＡ的表达没有抑制作用，１×１０（－４）ｍｏｌ／Ｌ浓度组对癌相关基因ＥＧＦＲｍＲＮＡ的表达有抑制作用，应用ＩＣＭ技术测定四项指标，即ＤＮＡ指数（ＤＩ值），Ｓ期百分比（Ｓ％），总ＤＮＡ含量以及细胞核面积。结果显示，两实验组（１×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ，１×１０（－４）ｍｏｌ／Ｌ）ＤＩ值为１．８１和１．７４，反映细胞呈异倍体水平，为恶性细胞的特征。两组的Ｓ期百分比为３３．７０％和３０．３９％，核面积为１４３．０μＭ２和１２０．９０μＭ２，均低?     

74例小儿乙型病毒性肝炎的临床分析

本文对７４例小儿乙型病毒性肝炎传播途径,临床特点及预后进行了调查分析。１对象和方法１．１对象：１９９８年１月～１９９９年１２月５岁以下的住院患儿,均符合１９８１年武汉全国小儿病毒性肝炎座谈会制定的诊断标准。其中男５１例,女２３例。１． ２方法：对患儿测定乙肝表面抗原（ ＨＢｓＡｇ）（ＲＡＮＡ）、乙肝核心抗体（抗－ＨＢｃ）（ＳＰＲＩＡ）、乙肝ｅ抗体（抗－ＨＢｅ）（ＥＬＩＳＡ）,免疫球蛋白Ｍ型乙型肝炎核心抗体（抗 ＨＢｃＩｇＭ）（ＥＬＩＳＡ）,免疫球蛋白Ｍ甲型肝炎病毒抗体（抗－ＨＡＶＩｇＭ）（ＥＬＩＳ…     

微量细胞病变中和实验在检测流行性出血热抗体中的应用研究

采用Ｎ－２羟乙哌嗪－Ｎ－２－乙磺酸（ＨＥＰＥＳ）诱导的微量细胞病变中和实验（ＨＥＰＥＳ－ＭＣＰＥＮＴ）检测流行性出血热病毒（ＥＨＦＶ）中和抗体国内已有报道［１］,为了探索测定动物ＥＨＦ抗体比较便利的方法以及ＥＨＦ患者与健康人ＩＦＡ抗体与中和抗体的关系,笔者使用该法对ＥＨＦ患者、健康人及多种动物血清进行了检测并与免疫荧光法进行了比较,结果如下：１材料和方法１．１细胞：Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞购自北京药品生物制品检定所,常规方法传代培养。１．２毒株和血清：偏９８－３毒株分离于１９９８年月１０月,标本来源于…     

苯作业工人白细胞K_i-ras基因点突变分子检测初探

苯作业工人白细胞Ｋ_ｉ－ｒａｓ基因点突变分子检测初探夏昭林，金锡鹏，陆培廉，顾学箕，夏俊杰，丁晓华（上海医科大学公共卫生学院，２０００３２）人类ｒａｓ基因包括Ｈａ－ｒａｓ、Ｋｉ－ｒａｓ、和Ｎ－ｒａｓ三个成员，ｒａｓ基因常通过点突变尤其第１２位密码子突?..     

杂色曲霉素致人胚肺细胞p53及Ki-ras基因突变研究

为探讨中国恶性肿瘤高发区粮食中优势污染霉菌毒素－杂色曲霉素（Ｓｔｅｒｉｇｍａｔｏｃｙｓｉｎ,ＳＴ）的致癌作用,运用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法分析了不同浓度的ＳＴ（１μｇ／ｍｌ和３μｇ／ｍｌ）对体外培养的人胚肺细胞恶性转化过程中抑癌基因ｐ５３第５、６、７、８显外子及癌基因Ｋｉ－ｒａｓ的突变情况。结果显示ＳＴ处理后第２２周,人胚肺成纤维细胞ｐ５３基因的第８外显子和Ｋｉ－ｒａｓ癌匀出现异常泳动带型,表明Ｓ     

新疆出血热北疆株单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

作者应用新疆出血热病毒北疆株９０－９株鼠脑免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，共获得４株分泌抗ＸＨＦＶ北疆株单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞系。核型分析表明符合杂交瘤细胞的标准。用间接免疫荧光法及间接酶联免疫吸附试验检测表明，ＭｃＡｂ的腹水具有很高滴度，其中２株可达５×１０５（ＥＬＩＳＡＰ／Ｎ≥２．１）。ＭｃＡｂ免疫球蛋白亚型鉴定均属ＩｇＧ，其中３株为ＩｓＧ１，１株为ＩｇＧ２ａ。对ＭｃＡｂ的初步应用表明，在反向被动血凝抑制试验（ＲＰＨＩ）中，分别采用南、北疆ＭｃＡｂ致敏血球检测小鼠腹水，其结果有明显差异。     

大鼠卵巢镉暴露对ＤＮＡ 甲基转移酶表达的实验研究

摘要：目的　研究新出生卵巢组织体外镉暴露后,ＤＮＡ 甲基转移酶类（ＤＮＭＴｓ） 基因转录和蛋白表达的 情况,了解ＤＮＭＴｓ的变化在镉致卵巢毒性中的作用。方法　４ 日龄雌性ＳＤ 大鼠卵巢取出置于ＤＭＥＭ／ Ｆ１２与α ＭＥＭ 混合培养体系进行体外染毒,镉剂量分别为０、０．５、１０、５０μｍｏｌ／Ｌ,连续染毒４ｄ。分别 采用ＲｅａｌＴｉｍｅ ＰＣＲ 和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法检测ＤＮＭＴｓｍＲＮＡ 及其蛋白表达水平。应用单因素方差进行分 析比较,犘＜０．０５为差异有统计学意义。结果　各剂量组ＤＮＭＴ１、ＤＮＭＴ３α、ＤＮＭＴ３βｍＲＮＡ 与对照组 比较,差异均有统计学意义（犉＝１３．５７９、１２．９２６、１０．６２０,犘＝０．００９、０．０１２、０．０３１）,其中ＤＮＭＴｓ在 ０．５、１０μｍｏｌ／Ｌ 组表达上调,５０μｍｏｌ／Ｌ 组表达下调;各剂量组ＤＮＭＴ１蛋白表达与对照组比较,差异有 统计学意义（犉＝５６．３１１,犘＜０．０１）,其中在０．５μｍｏｌ／Ｌ 和５０μｍｏｌ／Ｌ 组降低,１０μｍｏｌ／Ｌ 组表达升高; ＤＮＭＴ３α蛋白表达在１０μｍｏｌ／Ｌ 组升高,５０μｍｏｌ／Ｌ 组降低, 与对照组比较差异有统计学意义（犉＝ ２８．５３３,犘＜０．０１）; 各剂量组ＤＮＭＴ３β 蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义（犉＝２．０４７,犘＝ ０．１８６）。结论　在本次实验条件下,镉暴露后卵巢组织ＤＮＭＴｓ表达发生改变,这可能参与镉致卵巢毒性 过程。 关键词：镉;ＤＮＡ 甲基转移酶;卵巢 中图分类号：Ｒ１１４　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１６）０６ ０４０１ ０４     

石英的人类致癌性在DNA分子水平的证据

收集３６例石英粉尘作业工人肺癌（石英肺癌）的组织石蜡包埋物,提取其 Ｄ Ｎ Ａ,对 ｐ５３基因和 Ｋ ｒａｓ 基因进行了 Ｐ Ｃ Ｒ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ、 Ｐ Ｃ Ｒ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ及 Ｄ Ｎ Ａ 测序分析,发现具有完全有别于普通肺癌的特异基因突变谱。小细胞肺癌的 ｐ５３基因突变多发于第８外显子,腺癌的 ｐ５３基因突变率高。石英肺癌的 Ｋ ｒａｓ 基因突变未见一例发生于普通肺癌突变热点区第１２密码子上,相反发现多处非热点区突变,突变类型以 Ｇ→ Ｃ 突变为主。     

二甲基甲酰胺细胞免疫毒性研究

为研究二甲基甲酰胺（ＤＭＦ）的免疫毒性，从免疫器官病理组织学检查、足垫肿胀实验、外周血淋巴细胞α－醋酸萘酯酶（ＡＮＡＥ）染色，脾细胞Ⅱ型白细胞介素（ＩＬ－２）释放，体外刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ）诱导的淋巴细胞增殖等四个方面研究了ＤＭＦ对动物免疫器官及细胞介导免疫的影响。结果显示，ＤＭＦ可使脾脏、胸腺相对重量减轻，绵羊红细胞介导的足垫反应值明显降低。皮下注射及灌胃染毒可使不同种属动物的ＡＮＡＥ阳性率降低，在１／１０～１／１６０ＬＤ５０情况下还可使ＣｏｎＡ诱导的ＩＬ－２释放明显减少。体外试验显示，ＤＭＦ在１０～１５０ｍｍｏｌ／Ｌ之间可明显抑制ＣｏｎＡ诱导的淋巴细胞增殖，表明ＤＭＦ对小鼠具有细胞免疫毒性作用。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇,黄曲霉毒素G1对体外培养人外周血淋巴细胞凋？…

以细胞培养、流式细胞义ＤＮＡ含量分析及ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳方法研究了我国食管癌高发区磁县居民粮食中优势污染霉菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）和黄曲霉毒素Ｇ１（ＡＦＧ１）对人淋巴细胞凋亡的影响,流式细胞术（ＦＣＭ）检测结果显示,ＤＯＮ、ＡＦＧ１处理组淋巴细胞出现了典型的亚二倍体凋亡细胞峰,凋亡百分率与毒素作用时间（ＤＯＮ,２－７２小时;ＡＦＧ１;２－２４小时）及测量（ＤＯＮ;５０－２０００μｇ／Ｌ