胰岛素样生长因子-1对成骨细胞生长影响的实验研究

目的探讨胰岛素样生长因子-1对成骨细胞生长增殖的影响.方法采用酶消化法获取兔骨膜成骨细胞,取第三代成骨细胞与0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml的胰岛素样生长因子-1共同体外培养,在第1～7d观察细胞的形态、生长特点,MTT法测定细胞增殖情况,并通过细胞计数绘制细胞生长曲线.结果不同浓度的胰岛素样生长因子-1对成骨细胞的生长增殖与对照组比较均有显著性差异(P＜0.01),各浓度之间对成骨细胞的生长增殖亦存在显著性差异(P＜0.05).结论胰岛素样生长因子-1对成骨细胞生长增殖具有促进作用,在0.1～10ng/ml范围内此种作用与浓度呈正相关.     

胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对成骨细胞的成骨影响

目的：探讨不同浓度IGF－1对兔成骨细胞的成骨影响。方法：采用组织块细胞培养技术获得兔成骨细胞，第2代成骨细胞分别在含0.1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml,20ng/mlIGF－1的DMEM中培养，24，36h后行MTT法检测细胞增殖情况，72，108h收集培养上清进行骨钙素放射免疫法（RI）测定。结果：IGF－1与成骨细胞培养24，36h，经MTT法检测，不同浓度IGF－1与对照组比较，有显著性差异（P＜0．001）；IGF－1浓度为0．1、1、10ng/ml，各组之间相比存在显著性差异（P＜0．05）；IGF－1与成骨细胞培养72．108h，经RI检测，不同浓度IGF－1对成骨细胞合成骨钙素与对照组比较无显著性差异（P＞0．05）：结论：IGF－1对成骨细胞有明显促进增殖作用，在0．1－10ng/ml范围，存在浓度依赖性，未发现IGF－1对成骨细胞合成骨钙素有影响。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子对人成骨细胞生长及增殖的影响

目的研究酸性成纤维细胞生长因子(acidfibroblastgrowthfactoraFGF)对成骨细胞生长及增殖的影响。方法取人胚胎颅盖骨骨内膜,利用组织块培养法进行成骨细胞原代培养,DMEM-F12培养液传代、扩增培养,以细胞形态学、细胞形成钙结节的能力及碱性磷酸酶活性鉴定成骨细胞。应用光镜、电镜、MTT法及流式细胞仪检测,分别从细胞形态、细胞生长及增殖特性分析不同浓度的aFGF对人成骨细胞生长和增殖的影响。结果10～100ng/mlaFGF可明显促进成骨细胞生长、增殖使S期细胞数增加,但高浓度aFGF(>1μg/ml)对成骨细胞生长具有抑制作用。结论aFGF对体外培养的人成骨细胞具有促生长和增殖作用,其有效浓度为10～100ng/ml。     

胰岛素样生长因子对体外培养豚鼠肋软骨细胞的影响

目的：了解胰岛素样生长因子(insulin-1ike growthfactor-1，IGF-1)对体外培养豚鼠肋软骨细胞分裂增殖及功能代谢的影响。方法：体外单层培养豚鼠肋软骨细胞，对照组培养液为无血流清DMEM，实验组在培养液DMEM中加入IGF-1使其终浓度分别为10ng／ml、50ng／ml、100ng／ml，作用6天后，检测细胞DNA含量和培养液中糖醛酸的含量。结果：IGF-1在10～100ng／ml浓度范围能明显增加培养软骨细胞的DNA及糖醛酸的含量，且以50ng／ml作用效果最明显，与对照组相比，有统计擘意义(P＜0．01)。结论：IGF-1对体外培养肋软骨细胞有刺激，并以剂量依赖性方式影响细胞的增殖及功能代谢。     

OGP和IGF-1对人牙周膜细胞增殖和总蛋白含量的影响

目的 探讨成骨生长肽(OGP)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对体外培养的人牙周膜细胞(PDLC)增殖及其总蛋白含量的影响.方法 体外培养人PDLC与不同浓度的OGP和IGF-1单独或联合应用,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)观察人PDLC增殖的情况,用考马斯亮蓝染色法检测细胞内总蛋白含量的变化.结果 OGP明显促进人PDLC增殖,第3天最大显效浓度为10-9mol/L,最小显效浓度为10-11mol/L.IGF-1也促进人PDLC增殖,第3天最大显效浓度为100ng/ml,最小显效浓度为1ng/ml.在第1、3、6天,OGP与IGF-1最大显效浓度联合和最小显效浓度联合,对人PDLC增殖活性和细胞内总蛋白合成的促进作用均较对照组增加.结论 OGP和IGF-1均可促进人PDLC增殖和细胞内总蛋白含量的提高,在一定范围内呈浓度时间依赖关系,二者联合具有协同效应.     

rhIGF-1对成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfa1基因表达的影响

目的通过重组人胰岛素样生长因子(rhIGF-1)对体外成骨细胞增殖、骨形态蛋白-2(BMP-2)及核心结合因子1(Cbfa1)基因表达的影响,探讨rhIGF-1对骨代谢影响的可能机制。方法不同浓度的rhIGF-1(0、10、50、100ng/ml)刺激体外培养的大鼠成骨细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,用半定量RT-PCR法检测成骨细胞BMP-2、Cbfa1基因的表达。结果rhIGF-1可明显促进成骨细胞增殖(P0.05),并促进成骨细胞BMP-2、Cbfa1基因的表达(P0.01),具有浓度依赖性。结论rhIGF-1可促进成骨细胞的增殖、分化及成熟,可能是通过增强BMP-2、Cbfa1基因的表达来实现的。     

胰岛素样生长因子-Ⅰ对兔关节软骨细胞增殖及代谢的影响

目的　探讨胰岛素样生长因子 - (IGF- )对体外生长的关节软骨细胞分裂增殖及功能代谢的影响。方法　采用体外单层培养的方法 ,应用兔关节软骨细胞 ,对照组培养液为 10 %小牛血清 DMEM,实验组在培养液DMEM中加入 IGF- 使其终浓度分别为 3、10、30、10 0及 30 0 ng/ ml,作用细胞 2、4和 6天 ,检测细胞 DNA含量和基质中糖醛酸的含量。结果　 IGF- 在 3～ 30 0 ng/ ml浓度范围能明显增加培养软骨细胞的 DNA及糖醛酸的含量 ,且以30～ 10 0 ng/ ml作用 4天刺激效果最明显 ,与对照组相比 ,有统计学意义 (P<0 .0 1)。结论　 IGF- 对体外培养软骨细胞有刺激 ,并以剂量时间依赖性方式影响增殖及功能代谢。     

骨组织工程中促细胞粘附因子bFGF的研究

目的：针对骨组织工程中成骨细胞与基质材料间促粘附这一重要问题,研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)对成骨细胞粘附特性的影响。方法：取兔骨髓基质干细胞来源的成骨细胞体外培养,分别用0ng/ml、10ng/ml、100ng/ml浓度的bFGF诱导培养,观察接种后各时间点成骨细胞粘附情况,体视学计量粘附细胞数量。结果：10ng/mlbFGF诱导成骨细胞24小时后,细胞粘附数量增加最明显,显高于对照组及100ng/ml组（P＜0．01）。实验还发现,成骨细胞粘附最快发生在接种后4小时内。结论：一定浓度碱性成纤维细胞生长因子具有促进成骨细胞粘附特性的作用。     

重组人胰岛素样生长因子Ⅰ对大鼠成骨细胞增殖、凋亡及Ⅰ型胶原蛋白合成的影响

目的 观察胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）对体外培养的大鼠成骨细胞的增殖、凋亡及Ⅰ型胶原蛋白合成的影响，探讨IGF-Ⅰ对骨代谢影响的可能机制。方法 不同浓度rhIGF-Ⅰ刺激体外培养的大鼠成骨细胞，采用噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖能力；肿瘤坏死因子α（TNF-α单独或与rhIGF-Ⅰ共同刺激成骨细胞，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率；rhIGF-Ⅰ刺激成骨细胞，免疫细胞化学结合计算机图像分析系统检测Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果 一定浓度IGF-Ⅰ能明显增加成骨细胞数量（P〈0．05），在0．1～100ng／ml这种作用与IGF-Ⅰ的浓度呈正相关；TNF-α在0．1～100ng/ml浓度范围内呈剂量依赖性地促进成骨细胞凋亡（P〈0．05），并使S期细胞减少（P〈0．05），而IGF-Ⅰ能抑制，TNF-α对成骨细胞的促凋亡作用（P〈0．05）；经IGF-Ⅰ的刺激，成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达明显高于对照组（P〈0．05）。结论 IGF-Ⅰ对大鼠成骨细胞有明显的促增殖作用，在0．1～100ng/ml之间呈浓度依赖性，IGF-Ⅰ能抑制，TNF-α诱导的大鼠成骨细胞凋亡，IGF-Ⅰ能促进大鼠成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的合成。     

HB-EGF对系膜细胞增殖及转化生长因子-β1表达的影响

目的：观察肝素结合性表皮生长因子样生长因子（HB-EGF）对肾小球系膜细胞（GMC）增殖及转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的作用。方法：以原代培养大鼠肾小球系膜细胞为细胞模型,采用MTT、ELISA、RT-PCR等方法观察外源性HB-EGF对系膜细胞增殖及TGF-β1表达的影响。结果：（1）不同浓度HB-EGF对系膜细胞增殖有不同影响,10ng/ml时无刺激GMC增殖作用（P〉0.05）,100、1000ng/ml均能刺激GMC增殖（P〈0.01）,100ng/ml作用最明显。（2）HB-EGF（10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml）能刺激系膜细胞TGF-β1的表达（P〈0.01）,100ng/ml时作用最强。（3）100ng/mlHB-EGF刺激GMC24h、36h、48h,系膜细胞TGF-β1的表达均增加,随作用时间而变化,刺激36h和48h比24h作用更明显（P〈0.05）。结论：一定浓度范围内HB-EGF刺激GMC增殖,促进系膜细胞TGF-β1的表达,且具有一定的时间及浓度依赖性。     

胰岛素样生长因子-1对成纤维细胞向成骨细胞转化的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子-1对成纤维细胞(Fb)向成骨细胞转化的影响. 方法 Fb来源于成年新西兰大白兔,通过分离、纯化、培养而得到.实验分为3组:空白对照组、成骨诱导组和实验组.空白对照组:常规培养液培养,不加入任何诱导剂及干预因子;成骨诱导组:成骨诱导液为常规培养液中加入浓度为1×10-8 mol/L地塞米松、50 mg/L维生素C、10 mmol/L β-甘油磷酸钠;实验组:成骨诱导液中加入终浓度为50 ng/mL的IGF-1.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞增殖情况,检测各组细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,测定各组细胞培养后6d后的骨钙素含量,采用钙钴染色评价培养后2周的成骨能力.结果 实验组细胞增殖较其他两组旺盛,差异有统计学意义(P＜0.05),而空白对照组和成骨诱导组差异无统计学意义(P＞ 0.05).ALP活性和骨钙素测定:实验组ALP表达明显高于其他两组,差异有统计学意义(P＜0.05);成骨诱导组ALP表达高于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).实验组钙化结节数量明显较其他两组多,成骨诱导组次之,空白对照组未见钙化结节.结论 胰岛素样生长因子-1可以促进Fb在成骨过程中的增殖以及增加其成骨能力.     

血管紧张素Ⅱ对转化生长因子β诱导的人皮肤成纤维细胞增殖的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)对人皮肤成纤维细胞增殖及对转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)诱导的成纤维细胞增殖作用的影响,并初步探讨可能的信号机制. 方法 取自愿捐献的正常皮肤组织标本,采用胶原酶法行成纤维细胞培养.取第4～5代细胞,按实验设计分别加入不同浓度的Ang Ⅱ(1×10-10、1×10-9、1×10-8、1×10-7 mol/L)、 TGF-β(0.1、1.0、10.0 ng/ml)、1×10-10 mol/L Ang Ⅱ+ 0.1 ng/ml TGF-β共8组;对照组仅加入等量DMEM.以3H-TdR掺入法测定细胞增殖,Western blot法检测抗细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)活性变化,观察不同浓度的Ang Ⅱ或/和TGF-β对培养的成纤维细胞3H-TdR掺入量和ERK磷酸化的影响. 结果 与对照组比较Ang Ⅱ(1×10-9、1×10-8、1×10-7 mol/L)或TGF-β(1.0、10.0 ng/ml)均能促进成纤维细胞的3H-TdR掺入量(P＜0.05);1×10-10 mol/L Ang Ⅱ或0.1 ng/ml TGF-β单独使用不影响成纤维细胞的3H-TdR掺入量,但二者联合使用提高了成纤维细胞的3H-TdR掺入量(P＜0.05).1×10-7 mol/L Ang Ⅱ、10.0 ng/ml TGF-β增加皮肤成纤维细胞的ERK磷酸化,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).1×10-10 mol/L Ang Ⅱ或0.1 ng/ml TGF-β单独刺激成纤维细胞并未影响ERK磷酸化,而二者联合使用增加ERK磷酸化,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).应用抗ERK抗体显示各组ERK含量一致. 结论 Ang Ⅱ不仅能作为促有丝分裂素直接促进成纤维细胞分裂增殖,同时也可作为调节因子促进TGF-β的促增殖作用.Ang Ⅱ和TGF-β通过各自特异性受体共同作用于ERK,使磷酸化增加是其产生协同作用可能的机制之一.     

黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF-α损伤人脐静脉内皮细胞ET-1/NO的影响

目的 探讨黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞(ECV-304)的一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)的影响.方法 用DMEM培养液在37℃、5％ CO2条件下对ECV304细胞株进行扩增至足够数量后,调细胞密度为1×105,并分为7组:A组:空白组,不加任何诱导剂;B组:TNF-α(40ng/ml)诱导组;C组:TNF-α(40ng/ml)+氯沙坦钾(105 mol/l);D组:TNF -α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(0.1 mg/ml);E组:TNF -α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(1mg/ml);F组:TNF-α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(10mg/ml);G组:TNF-α (40ng/ml)+毛蕊异黄酮(20mg/ml).分别于孵育6小时、24小时后时收集上清液,用ELISA检测上清液中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)的含量.结果 ①与空白组比较,TNF-α降低了ECV-304NO水平(P＜0.001)、提高了ET-1水平(P＜0.001);②氯沙坦钾提高了ECV-304NO水平(P ＜0.001)、降低了ET-1水平(P＜0.001);③毛蕊异黄酮(0.1 mg/ml～10mg/ml)能够促进ECV-304细胞NO的产生(P＜0.001)、降低ET -1的产生(P＜0.001);④氯沙坦钾和毛蕊异黄酮(20mg/ml)对ECV-304细胞ET-1和NO水平的影响无明显差异((P＞0.05);⑤毛蕊异黄酮浓度(在0.1 mg/ml ～20mg/ml内)与ECV-304 ET-1的分泌呈负相关性(r=-0.02、P＜0.001);与ECV-304NO的分泌呈正相关性(r=0.0075、P ＜0.001).结论 黄芪毛蕊异黄酮单体可以促进TNF-α诱导的内皮细胞NO分泌,抑制ET-1分泌,并在一定浓度内(0.1 mg/ml～20mg/ml)呈浓度依赖性.     

TGF-β对胎兔颅骨成骨样细胞增殖和分化影响的实验研究

目的：研究TGF-β对成骨细胞增殖和分化的影响。方法：利用已建立的胎兔颅骨成骨样细胞体外模型，采用MTT法、流式细胞仪检测、骨钙素、胶原和钙含量测定来分析不同浓度的TGF-β对成骨样细胞增殖和分化的影响。结果：低浓度TGF-β（0.010.1ng/ml）促进成骨样细胞增殖，使S期细胞增加，但高浓度TGF-β（110ng/ml）抑制成骨样细胞的增殖。在TGF-β0.01-1ng/ml范围内，与对照组相比，TGF-β各治疗组的骨钙素、胶原和钙含量明显增加，并随TGF-β浓度增加而增加，到TGF-β10ng/ml时，增加不再明显。结论：TGF-β对成骨细胞的增殖表现为双相作用，低浓度促进，高浓度时抑制，可明显促进成骨细胞的分化，并呈一定的量效关系，其有效剂量为0.011ng/ml。     

不同浓度转化生长因子β_1对人主动脉平滑肌细胞增殖及迁移的影响

目的探讨不同浓度转化生长因子(TGF)-β_1对人主动脉平滑肌细胞(HA-VSMCs)增殖及迁移的影响。方法体外培养人主动脉平滑肌细胞,用0、0.05、0.1、0.5、1、2、5、10ng/ml浓度的重组人TGF-β_1进行干预,分别在干预后第0、6、12、24、36小时5个不同时间点进行CCK-8试验,或24小时后进行Transwell迁移试验,观察细胞增殖及迁移情况。结果当TGF-β_1浓度5ng/ml时,随着刺激浓度增加,人主动脉VSMCs增殖水平逐渐升高,当TGF-β_1浓度5 ng/ml时,细胞增殖水平降低。不同浓度TGF-β_1(0、0.05、0.1、0.5、1、2、5、10 ng/ml)干预细胞,随着作用时间延长,细胞增殖水平逐渐升高,在24小时时达到高峰,之后逐渐降低。TGF-β_1浓度为5 ng/ml且培养时间为24小时时细胞增殖水平最高(OD值:0.843±0.016)(P0.01)。当TGF-β_1浓度≤5ng/ml(0、0.05、0.1、0.5、1、2、5 ng/ml)且作用时间为24小时时,随着TGF-β_1浓度增加,人主动脉VSMCs迁移水平不断升高,其中以TGF-β_1浓度为5 ng/ml时细胞迁移水平最高,迁移细胞数为84.667±0.577;TGF-β_1浓度5 ng/ml时,细胞迁移水平降低,迁移细胞数为69.667±1.528。与其余各组TGF-β_1浓度作用下的迁移细胞数比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论 5ng/ml的TGF-β_1作用24小时更能刺激人主动脉平滑肌细胞发生增殖及迁移。     

rhBMP-2诱导脂肪成体干细胞向成骨细胞分化的量效作用

目的 探讨体外条件下rhBMP-2诱导脂肪成体干细胞(adipose-derived adult stem cells,ADASCs)向成骨细胞分化和增殖的情况,并观察其量效关系.方法 从成年兔颈后部获取脂肪组织,采用酶消化法分离并培养脂肪成体干细胞.稳定传代后,用不同浓度rhBMP-2对ADASCs进行诱导分化,采用碱性磷酸酶染色及Ⅰ型胶原免疫组织化学染色进行成骨细胞鉴定,采用碱性磷酸酶活性测定及MTT比色法进行分化和增殖活性比较.结果 碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原免疫组织化学染色为阳性;当rhBMP-2浓度在100～400 ng/ml时,各组碱性磷酸酶活性提高明显(P＜0.05),在400 ng/ml以上各组则无明显差异(P＞0.05);当rhBMP-2浓度在800 ng/ml以下时,各组增殖活性无明显差异(P＞0.05),在800 ng/ml以上则存在明显的抑制作用,各组存在明显差异(P＜0.05).结论 研究表明,在体外条件下rhBMP-2能诱导脂肪来源干细胞向成骨细胞分化;并且当其浓度在400～800 ng/ml时,能促进脂肪来源干细胞的增殖和分化.     

EGF和IGF对体外培养兔关节软骨细胞的影响

目的　了解表皮生长因子 (EGF)和胰岛素样生长因子 (IGF)对体外培养兔关节软骨细胞存活数目和分裂增殖百分数的影响。方法　体外培养兔关节软骨细胞传至第 2代 ,分别以EGF、IGF ,以及二者不同的浓度组合作用于软骨细胞。通过酶联免疫检测仪 (MTT)测定软骨细胞存活数 ,流式细胞仪测定软骨细胞分裂增殖百分数。结果　不同浓度EGF对兔关节软骨细胞存活和分裂增殖均有促进作用 ,作用浓度强度次序为 :10ng/ml>0 1ng/ml>10 0ng/ml。不同浓度IGF对兔关节软骨细胞的存活和分裂增殖均有较强促进作用 ,浓度为 5 0ng/ml时 ,刺激效果最显著。EGF与IGF联合使用时 ,刺激效果优于任何一种因子单独使用 ,而以EGF 10ng/ml和IGF 5 0ng/ml为最佳浓度组合。 结论　EGF和IGF都可促进兔关节软骨细胞存活和分裂增殖 ,但以协同作用效果最佳。     

间质性膀胱炎患者尿液中特异性上皮生长因子的变化

目的　探讨间质性膀胱炎 (IC)患者尿液中生长因子水平变化的意义。　方法　应用ELISA法测定 35例IC患者和 2 0例无症状正常对照者尿液中上皮生长因子 (EGF)、胰岛素样生长因子 (IGF1)、胰岛素样生长因子结合蛋白 3(IGFBP3)及肝素结合的上皮生长因子 (HB EGF)的水平。　结果　IC组和对照组患者尿液中HB EGF浓度分别为 (2 .17± 0 .2 1)ng/ml和 (6 .5 9± 0 .97)ng/ml,两组间差别有显著性意义 ,P <0 .0 1。两组患者尿液中EGF、IGF1和IGFBP3浓度分别为 (15 .5 9± 1.74)ng/ml和 (7.5 8± 0 .97)ng/ml,(2 2 .46± 2 .0 4) pg/ml和 (12 .98± 1.17)pg/ml,(14.5 6± 2 .37)ng/ml和 (6 .16± 0 .82 )ng/ml,IC患者EGF、IGF1和IGFBP3水平均明显升高 ,差别有显著性意义 ,P <0 .0 1。　结论　尿液中上皮细胞生长因子的变化与间质性膀胱炎有关 ,HB EGF可作为诊断IC的标记物之一。     

低频振动对人成骨细胞生物学特性影响的研究

目的:研究低频振动对人成骨细胞增殖分化及基质分泌的影响.方法:取成人的髂骨松质骨,获得人成骨细胞.并在培养48h后,施加0.1、0.2、0.5、2和5Hz的低频微振动,通过流式细胞仪检测成骨细胞增殖状况:化学比色法和放射免疫法检测碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素含量.结果:加载 0.2和0.5Hz可使成骨细胞的ALP活性明显增高(P＜0.01);0.1和2Hz振动后其ALP活性与对照组无明显差异;5Hz振动则明显降低ALP活性(P＜ 0.01).加载 0.2和0.5Hz振动的成骨细胞,S期细胞从10.4%增加至12.45%和16.12%,增殖指数从20.14%增加到26.21%和 28.75%.0.1和2Hz低频振动则显示出对细胞增殖指数无明显影响(P＞0.05).而5Hz使细胞增殖指数明显降低至13.22%(P＜0.05).同时,加载0.2和0.5Hz振动可明显增加成骨细胞骨钙素分泌量至1.87和 2.47ng/ml(P＜0.05),而加载0.1Hz对骨钙素分泌量无明显影响(P＞0.05),加载2和5Hz相应降低了骨钙素分泌量(P＜0.05).结论:0.2～0.5Hz的低频振动能促进成骨细胞增殖分化和成骨活性物质分泌,对低频振动应用于骨折治疗有指导作用.     

降钙素对体外培养成骨细胞的影响

目的观察破骨细胞抑制剂--降钙素(密钙息)对体外培养成骨细胞的作用.方法在新生SD大鼠头颅骨第二继代成骨细胞(OB\-2)培养液中分别加入不同浓度(10-4～10-12g/ml)的密钙息,分别观察OB\-2的增殖功能(用波长570nm处OD值表示),分化功能[用碱性磷酸酶(ALP)活性表示]和矿化功能(用矿化结节数量/视野表示).结果OD值(均值+标准差)为0.323±0.101～0.523±0.158;ALP活性(均数±标准差)为(0.104±0.012)U/mg蛋白质;矿化结节数量/视野(均数±标准差)为5.75±0.957个.结论与对照组比较,适当浓度(10-8～10-12)的密钙息对OB\-2的增殖,分化和矿化功能均具有促进作用,10-10g/ml浓度密钙息作用尤其显著,它们的作用显著性差异为促进OB2增殖功能P＜0.05;促进OB2分化功能P＜0.01和促进OB2矿化功能P＜0.001.