蒸馏水修复抗原法

抗原修复是做好免疫组化（ＰＲ、ＥＲ等）染色的重要步骤之一，目前进行的常规石蜡切片标本，一般均用甲醛固定。事实上经甲醛固定的部分组织细胞，免疫组化标记敏感性明显降低，其原因为：（１）在用甲醛固定过程中形成醛键而封闭了部分抗原决定簇；（２）甲醛在保存过程...     

pH9.0 Tris-EDTA 和pH6.0 Citrate在抗原修复中的应用

甲醛是形态学和免疫组织化学的标准固定液。但是,经甲醛固定的组织常引起蛋白质空间结构的改变而导致抗原决定簇的封闭。抗原决定簇是否充分暴露,是免疫组织化学成败的关键因素之一。抗原修复技术在石蜡切片免疫组织化学染色中是一种简单有效的增强方法,但目前尚没有单一的化学物质既能作为基本的修复液又能作为最佳的抗原修复液,为了确定理想的修复液,我们采用“组合实验”的方法,比较了0．05mol／LTris＋0．001mol／L EDTApH9．0（简称pH9．0Tris-EDTA）和0．01mol／LpH6．0Citrate微波热修复及不修复的情况下,免疫组织化学染色的表达效果。     

25例喉淋巴瘤的临床病理分析

一、材料和方法材料源于本院病理科自１９８０～１９９７年活检档案中经组织学诊断为喉淋巴瘤的病例，共２５例，全部标本经４％甲醛固定，常规石蜡包埋，ＨＥ染色；同时，２４例标本采用ＳＰ法行免疫组化标记：白细胞共同抗原（ＬＣＡ），Ｔ细胞抗原ＵＣＨＬ１，Ｂ细胞抗...     

不同抗原修复液对抗原微波修复结果的影响

免疫组织化学染色中，组织经福尔马林固定，使大量抗原决定簇被封闭，为获得满意结果，对组织切片进行抗原修复以暴露抗原决定簇十分必要。抗原修复的方法较多，其中微波修复法是目前应用最广的方法之,一但不同组织、不同抗原其所用微波强度、作用时间及选用缓冲液等均对结果影响甚大。我们对临床外检中多种组织和常用抗体的微波处理条件进行了摸索，现报道如下。     

微波、高压、真空负压和电炉四种加热法在抗原修复中的比较

常规免疫组织化学染色难以使癌基因、抑癌基因及其产物显示满意的效果。应用高温对组织抗原进行修复，可有效地暴露抗原决定簇而增强免疫组织化学染色的结果t‘］。据此，我们应用T4种不同的加热法，对胶质瘤组织抗原的修复进行了对比研究。l材料和方法1．l材料为我科收集的外科检查确诊为胶质瘤的标本，共80例，均经10％福尔马林液固定，石蜡包埋。每例做连续4M切片20张，附贴于涂有多聚一L一赖氨酸的玻片上，置60t烤箱内烘烤4h。P16，Rb，EGFR，CyclinDI及S－P试剂盆，均为美国饲edmBiotech公司产品；多聚一L一赖氨酸购自福州通新…     

非小细胞肺癌组织中Midkine蛋白表达上调

Midkine(MK)表达与癌发牛和生长有密切关系[1].然而,目前国内外关于MK与非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)发生与发展的研究报道极少,且结果也不尽一致.目前,新鲜冷冻切片已广泛应用于免疫组化研究,且丙酮或甲醛固定的冷冻切片已成为评价抗原修复在甲醛固定、石蜡包埋组织切片中免疫组化染色效果的标准.     

加热法修复抗原的方法和应用进展

加热法修复抗原的方法和应用进展石砚综述李甘地刘卫平审校作者单位：华西医科大学病理学教研室，成都６１００４１免疫组织化学在日常病理诊断中的作用越来越重要。但常规福尔马林液固定、石蜡包埋的组织，因固定液中甲醛的影响许多抗原失去了活性，导致假阴性的染色结果...     

胃癌组织端粒酶活性及p53基因异常的分析

一、材料和方法１组织标本：４０例胃癌为我院１９９４年～１９６年手术切除标本，每例包括癌肿及正常胃粘膜，均经冷冻切片、染色、镜检证实癌组织癌细胞在７０％以上，正常组织无癌细胞。每例标本取一部分用甲醛固定、石蜡包埋留做免疫组化分析，余下部分－８０℃冰箱...     

微波抗原修复对乳腺癌基因蛋白表达的影响

免疫组织化学染色成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露。组织经10％甲醛固定，组织蛋白发生交联而在一定程度上遮蔽抗原决定簇，从而影响检测蛋白表达。微波抗原修复是目前常用的方法^[1]。本实验利用高灵敏HPIAS-1000图像处理系统进行定量分析，从而得到微波处理与否，乳腺癌组织中p53、rasp21、PCNA蛋白表达的阳性率和阳性表达强度对比。     

胸腺基质细胞的抗原提呈作用

目的 研究胸腺基质细胞的抗原提呈能力。方法 应用ＯＶＡ－特异的、受Ｉ－Ａ＾ｄ分子识别限制的辅助Ｔ细胞杂交瘤（３ＤＯ．１８．３）识别提呈的ＯＶＡ的ＣＮＢｒ水解片段而被活化后产生ＩＬ－２,测定ＩＬ－２活性来分析胸腺基质细胞的抗原提呈作用。结果ＩＦＮ－γ能促进ＭＴＥＣＩ和ＭＴＳＣ４表达Ｉ－Ａ＾ｄ分子,并促进ＭＴＳＣ４表达Ｂ７－１分子。经ＩＦＮ－γ作用后,ＭＴＥＣ１和ＭＴＳＣ４均有抗原提呈能力,ＭＴＳＣ     

H-E染色切片灰染修复方法的比较

<正>组织切片在常规H-E染色中,有时会出现染色模糊不清(灰染)的现象,这给切片的判读造成困难。这一问题的形成原因及补救方法,有过文献报道但效果各异~([1-3])。本研究采用几种不同的方法对灰染的组织切片进行补救并比较了各自的效果,现介绍如下。1材料和方法1.1材料和试剂收集本系病理外检灰染的组织蜡块和切片10例。10%中性甲醛、Gill苏木精染液、0.5%伊红液由福建医科大学病理学系配制~([4]),柠檬酸修复粉剂、EDTA抗原修复液均购自福州迈新     

免疫组化中高压消毒蒸锅处理修复抗原时间的选择

石蜡切片浸泡于0．01mmol／L柠檬酸缓冲液（pH6．0）中，置高压消毒蒸锅处理（125℃103KPa）4～12min，以恢复组织中因甲醛固定而被封闭的抗原。结果表明：相同温度和压力，但经不同时间处理后，抗原活性部位的暴露情况不同，免疫组化染色的敏感性和效果也不一致．提出了高压消毒蒸锅在处理修复抗原时，需摸索最佳修复时间，以期抗原活性部位充分暴露，从而提高免疫组化的敏感性和显色效果。     

恶性黑色素瘤中细胞角蛋白的表达

一、材料和方法１材料：收集本院恶性黑色素瘤（下称恶黑）标本１２例,其中皮肤原发恶黑９例,淋巴结内转移性恶黑３例。无色素性恶黑２例。组织用４％甲醛液固定,石蜡包埋,切片均作ＨＥ染色和细胞角蛋白、波形蛋白、ＨＭＢ４５、Ｓ１００染色。２方法：免疫组化...     

免疫组织化学LDP染色法在病理诊断中的应用

介绍一种优于常用的ＡＢＣ和ＬＳＡＢ染色的新的免疫组化染色法———ＬＤＰ法（ｌａｂｅｌｅｄｄｅｘｔｒａｎｐｏｌｙｍｅｒｍｅｔｈｏｄ）。一、材料与方法：１材料：活检组织４％甲醛固定，石蜡包埋。ＬＤＰ法试剂即第二抗体ＥｎＶｉｓｉｏｎ，编号Ｋ４００１，以及...     

抗原修复技术研究进展

自从应用抗原修复技术的文章于1991年发表后,抗原修复技术（煮沸石蜡切片于水溶液中）迅速、广泛应用于常规甲醛固定、石蜡包埋组织切片的免疫组织化学染色,从而打开了从传统形态学迈向分子形态学的大门。抗原修复技术被誉为免疫组织化学技术的革命性突破旧。Gown在评价抗原修复技术所取得的成就时,指出“在过去十多年里,抗原修复技术在诊断性免疫组织化学分析方面造成了如此深远的影响,使得这方面的文献分为2个时代：抗原修复技术前与抗原修复技术后时代。20世纪90年代初抗原修复技术的问世就是这两个阶段的分水岭”。     

2种嗜银染色改进法的应用

在以往的嗜银染色中由于染色时间长、操作较为复杂,制约了这种技术的广泛应用。我们经复习文献发现２种改进法既可保证染色结果又能缩短染色时间。为了更好地了解和掌握这２种方法,我们作了应用染色实验,并根据条件对原方法稍作修改,现报道如下。１　材料和方法１１　材料　选择已确诊的１０例肿瘤,其中肺类癌３例,甲状腺髓样癌４例,嗜铬细胞瘤３例。标本经常规处理后切片,厚４μｍ。切片经Ｇｒｉｍｅｌｉｕｓ方法证实有嗜银细胞存在,然后应用下列方法进行实验。１２　方法１２１　Ｓｔａｐｌｅｓ煮沸法　用煮沸的双蒸馏水…     

不同固定液和固定时间对大肠癌淋巴结免疫组化染色的影响

目的:探讨不同固定液和固定时间对大肠癌淋巴结组织的免疫组化染色效果.方法:42枚原发大肠癌淋巴结组织,分别用不同pH:5.0、6.0、7.0、8.0、9.0的混合甲醛固定液固定不同的时间(6h以下、6～12 h,1～7d,8d以上),进行组织免疫组化染色.以细胞角蛋白20为目标抗原,用Olympusdp70图像采集分析仪依据染色强度和阳性细胞率来计算评分.结果:采用pH7.0的固定液处理后,样品的阳性表达率为92.86%,显著高于pH为5.0、 6.0、 8.0、 9.0的固定液处理(P<0.05);固定时间为6～12 h,样品的阳性表达率为97.62%,显著高于固定时间为6h以下、1～7d、8d以上的各处理(P<0.05).结论:以细胞角蛋白20为目标抗原,选择pH值7.0的混合缓冲甲醛固定液固定大肠癌淋巴结标本6～12 h,可以得到最佳免疫染色效果.     

CD44v6 mRNA在人肝细胞癌中的表达

一、材料与方法手术切除肝细胞癌（ＨＣＣ）新鲜癌组织３３例及死后１小时以内尸检取材的正常肝组织３例。部分标本立即置于液氮中保存，部分标本４％甲醛固定常规石蜡包埋，ＨＥ染色，进行肿瘤数目、大小，有无合并慢性肝炎、肝硬化，血清甲胎蛋白是否阳性的临床病理观察...     

肺癌增殖细胞核抗原表达及与DNA含量,AgNOR关系的研究

肺癌增殖细胞核抗原表达及与ＤＮＡ含量、ＡｇＮＯＲ关系的研究朱红杨梅怀张岩峰项锋钢一、材料和方法１．材料：系我院自１９７７～１９８８年间经病理诊断为原发性肺癌患者的手术切除标本共１９９例。均经１０％福马林固定、石蜡包埋、４μｍ厚连续切片，ＨＥ染色后按Ｈ...     

高压抗原修复方法在免疫组化染色的应用比较

目的:优化免疫组化高压抗原修复法染色效果。方法:同一组织分别采用高压抗原修复直接法或间接法,用柠檬酸缓冲液或EDTA抗原修复液进行抗原修复,检测10种常用抗体的免疫组化染色效果。结果:抗原修复间接法与直接法染色强度有明显差异,直接法优于间接法;两种抗原修复液间也存在差异,EDTA抗原修复液效果优于柠檬酸缓冲液。结论:高压抗原修复直接法并用EDTA抗原修复液对组织切片进行抗原修复效果更好。