成人间活体肝移植后小肝综合征的预防：附6例报告

目的：探讨预防成人间活体肝移植术后小肝综合征（SFSS)的方法。 方法：回顾性分析6例成人间活体肝移植(LDLT)的临床资料,包括受体术前血细胞计数、脾脏厚度、门静脉直径、移植物重量与受体体重比（GRWR）、移植物体积与受体标准肝体积比（GV/SLV）及肝静脉重建等,探讨合适体积移植物、良好肝静脉回流、及正常门静脉灌注对SFSS的预防作用。 结果：受体术前均无严重门静脉高压,均没有采用降门静脉压力与血流的措施,6例肝移植物GV/SLV均大于40%,除1例GRWR为0.74%外,余均大于0.8%。6例受体肝静脉重建均良好,重建后肝脏无淤血改变。术后无SFSS发生。 结论：LDLT通过选择合适体积移植物,重建良好的肝静脉回流,控制门静脉压力,防止门静脉过度灌注等有助于预防SFSS的发生。     

活体肝移植术后小肝综合症的预防与治疗

正活体肝移植术已被认为是器官短缺时代救治终末期肝病患者的最有效方法。但供肝体积是限制活体肝移植开展的主要问题之一,体积过小尤其当接受移植物受体重量比(GRWR,graft-to-recipient weight ratio)小于0.8%的情况下较易发生小肝综合症。小肝综合症发生的原因是多因素共同作用的结果,但其最主要的病因是门静脉高压或门静脉血流过度灌注,尤其当门静脉压力高于20 mmHg时,发生了门静脉微循环和肝窦内皮的损伤、淤胆的病理改变,并继发了中     

大鼠边缘性体积供肝肝移植模型的实验研究

目的通过建立不同体积供肝的大鼠肝移植模型,探索边缘性体积供肝大小的适宜范围,为研究小肝综合征的发病机理及防治措施提供一种易于复制的小动物模型。方法将192只大鼠随机分为全肝移植组、半肝移植组、小体积供肝移植组及超小体积供肝移植组,每组48只,分别建立全肝、半肝、小体积供肝和超小体积供肝的大鼠肝移植模型。移植术后,4组各抽取24只大鼠用于观察存活率;抽取12只大鼠于移植术前,移植术后5、15、30、45及60min测定门静脉压力;另12只大鼠于术后24h测定谷丙转氨酶（ALT）水平。结果全肝移植组的7d累积生存率为100％（24／24）,半肝移植组为87．5％（21／24）,小体积供肝移植组为37．5％（9／24）,超小体积供肝移植组均于术后48h内死亡。全肝移植组术中开放门静脉后,60min内其门静脉压力稳定;半肝移植组大鼠在开放门静脉后,其门脉压力虽有小幅升高,但仍保持相对稳定;而小体积供肝移植组和超小体积供肝移植组开放门静脉后,其门静脉压力均显著升高,15min时均达到高峰,之后该2组的门静脉压力开始回落,至45～60min时逐渐稳定。供肝的体积大小与开放门静脉后5（r=-0．942）、15（r=-0．947）、30（r=-0．900）、45（r=-0．825）和60min（r=-0．705）时的门静脉压力均呈负相关关系（P〈0．001）。肝移植术后24h,全肝移植组和半肝移植组ALT水平均低于小体积供肝移植组及超小体积供肝移植组（P〈0．05）,且小体积供肝移植组ALT水平低于超小体积供肝移植组（P〈0．05）。供肝体积的大小与大鼠移植术后的ALT水平呈负相关关系（r=-0．685,P〈0．001）。结论大鼠部分肝移植模型中,供肝与受体标准肝脏体积比（Gv／sLV）的安全界限为50％,GV／SLV为30％～35％的供肝可视为边缘性体积供肝,小于30％的供肝可视为超小体积供肝。     

双肝移植后移植物萎缩的动物实验探究

目的通过动物实验验证临床双肝移植后移植物萎缩的现象。 方法清洁级雄性SD大鼠18只,8～10周龄,体质量230～250 g,术前禁食12 h。12只SD大鼠作为供体,6只作为受体。建立大鼠双肝移植模型,通过磁共振检查观测受体大鼠术后移植物体积变化。采用成组t检验比较受体大鼠左、右侧移植物体积和重量。P<0.05为差异有统计学意义。 结果移植肝叶均为双右上叶。供肝重量和受体大鼠肝重量分别为(4.30±0.06)和(9.4±0.2)g,移植物与受体大鼠体质量、肝重量比分别为1.79%～1.88%、45.7%～46.8%。手术时间(70±4)min,冷缺血时间(30.0±1.5)min,热缺血时间(12.0±1.5)min,无肝期(20.0±2.5)min。6只受体大鼠双肝移植后1 d行磁共振检查,两侧移植物体积相同;术后15 d行磁共振检查,有3只发生单侧移植物萎缩。 结论大鼠双肝移植后部分受体一侧移植物会发生萎缩。     

小体积肝移植物的研究进展

近年来,尸肝供体的短缺促使成人活体肝移植数量有了显著的增加,随之产生的小体积移植物问题受到极大的关注。本文就小体积肝移植物的概念、移植物体积大小的评价、小体积移植物损伤的机制及手术方式的选择等问题做一综述。     

小鼠50%体积肝脏原位移植实验模型的建立

目的 介绍一种小鼠50%体积的原位肝脏移植实验模型.方法 选择同系雄性C57BL/6小鼠,供、受体各28只.实验分为50%体积移植组和全肝移植对照组.50%肝脏移植物通过切除左侧肝叶获得.供肝经门静脉灌注4℃威斯康星大学保存液.血管重建时,肝上腔静脉端端吻合,门静脉和肝下腔静脉采用袖套法吻合.不作动脉重建.术后观察移植物的存活时间.组织病理学检查肝脏移植物的组织结构和细胞形态,免疫组化检测肝细胞复制情况.结果 小鼠肝脏移植手术成功率为100%.50%体积的小鼠肝脏移植受体存活率为90%(＞15 d).全肝移植受体存活率为100%(＞15 d).所有受体手术无肝期保持在23 min内.术后组织学检查移植肝组织结构良好,全肝移植后肝脏再生反应不明显.50%体积的肝脏移植后激发明显的再生反应.结论 小鼠50%体积的肝脏移植实验模型存活率高,术后激发明显的再生反应.该模型可应用于缺血再灌注损伤和肝脏再生等基础研究.     

活体肝移植术后内脏血流动力学变化临床研究

目的 探讨门静脉高压症病人活体肝移植术后内脏血流动力学变化及其对侧支循环和术后肝功能的影响。方法 选取2006年12月至2008年6月因门静脉高压症在上海交通大学医学院附属瑞金医院行活体肝移植术18例病人,分别于术前,术后1、3、5、7d及1、3个月应用彩色多普勒超声监测病人门静脉血流平均速度（PBV）、门静脉血流量（PBF）和肝动脉阻力指数（HA-RI）变化,并与18例活体肝移植供体进行对照。应用计算机断层血管造影术分别于术后7、30和90d测量肝脏、脾脏体积大小,同时观察受体食管胃底曲张静脉变化。结果 移植术后受体组门静脉压力降低,但仍高于正常平均水平。术后PBF和PBV均明显升高,术后第1天PBF从术前（1081±278）mL/min升至（2171±613）mL/min,PBV从（15.0±5.7）cm/s升至（52.9±22.1）cm/s,其中脾动脉结扎组PBF低于不结扎组,但两组间差异无统计学意义（P＞0.05）;此后逐渐下降,但术后3个月仍高于供体组（P＜0.05）。供体组术后PBF与术前差异无统计学意义,而PBV从术前（23.7±7.2）cm/s增至（30.7±7.5）cm/s（P＜0.01）,1个月后恢复正常。术后移植物和残肝均迅速再生,3个月后分别增至（1426.2±203.4）mL和（1139.3±153.1）mL。受体组术后脾脏体积明显减小,但术后3个月脾脏体积仍远大于供体术前正常水平（P＜0.01）,而供体组术后脾脏体积较术前增加。术后早期食管胃底曲张静脉亦存在。结论 门静脉高压症病人活体肝移植术后门静脉血流呈高灌注状态,此变化与脾脏仍肿大有关。术后脾动脉结扎可有效预防移植物高灌注性损伤。     

儿童肝移植术后早期门静脉搭桥血管狭窄一例

早期门静脉狭窄是儿童肝移植术后移植物失功和儿童受者死亡的重要原因之一。儿童肝移植术中有时出现供、受者门静脉长度不匹配, 需应用血管搭桥重建血管, 增加了门静脉狭窄的风险。本文报道1例儿童肝移植术中采用髂静脉搭桥完成门静脉重建, 术后3 d出现门静脉搭桥段血管狭窄, 及时行经皮肝穿刺门静脉球囊扩张和支架植入术, 术后肝功能顺利恢复, 监测门静脉血流良好。     

活体肝移植小肝综合症的防治

<正>活体肝移植小肝综合症(Small-for-size syndrome,SFSS)目前认为是肝移植中由于受体植入的肝脏体积太小,在功能上不能满足供体需求而出现的一种临床综合症。主要表现为术后长时间的黄疸,顽固性腹水,肝性脑病等肝功能障碍。发生小肝综合症的原因是多方面的,目前认为主要是供肝体积过小(接受移植物受体重量比GRWR小于0.8%)、门静脉高压或门静脉血流过度灌注(门静     

预防活体肝移植后肝小体积综合征的综合措施

目的 通过术前选择合适的供肝、术中建立充分的流出道及术后调整门静脉压等综合措施预防活体肝移植术后肝小体积综合征.方法 总结2007年12月至2009年11月的113例活体肝移植的临床资料,术前通过影像系统评估供肝体积,测算供肝体积与受者体重比(GRWR),根据供肝解剖及GRWR确定采用的供体类型(含肝中静脉右半肝,不含肝中静脉右半肝,含肝中静脉左半肝等),术中通过建立充分的流出道,根据GRWR、术前脾功能亢进情况、肝动脉开放后门静脉血流量及门静脉压力,确定是否采用脾动脉结扎等方法将门静脉压力控制在＜20 mm Hg(2.67 kPa),门静脉血流量控制在＜250 ml·min-1·100 g-1,观察采取上述措施后肝小体积综合征的发生情况.结果 75例受者接受含肝中静脉的右半肝,37例接受不含肝中静脉的右半肝,1例接受含肝中静脉左半肝.随访6个月,所有受者均未出现持续黄疸、败血症等严重的肝小体积综合征表现,1例受者于术后42 d死于脑卒中及呼吸衰竭,受者术后6个月存活率为99.1％(112/113).结论 术前根据供肝血管解剖及GRWR选择适当的供肝类型,术中建立充分的流出道,通过脾动脉结扎等方式调整门静脉血流及压力的综合方法可有效预防肝小体积综合征.     

附加门体分流术对小体积移植肝保护作用的实验研究

目的 研究附加门体分流术对小体积移植肝的保护效果.方法 建立巴马小型猪小体积肝移植模型,将15只小型猪平均分为3组:(1)A组,小体积肝移植组(对照组);(2)B组,远端脾肾分流术+小体积肝移植组;(3)C组,肠腔H形分流术+小体积肝移植组.手术后观察动物7 d存活率,动态监测肝功能生化指标、自由门静脉压、门静脉血流量(PBF)以及移植肝组织病理学改变.结果 动物7 d存活率分别为:A组1/5,B组3/5,C组5/5.A组动物移植肝复流后自由门静脉压立即升高,高峰达(28.6±2.07)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),复流1 h后单位肝组织PBF达(3.56±0.1 1)ml·min-1·g-1;移植肝组织病理学改变严重,包括肝细胞气球样变或肝细胞坏死、肝窦淤血、肝实质出血.B、c组中动物肝功能酶学指标有所改善.移植肝复流后自由门静脉压显著低于A组水平(P<0.05),PBF保持相对平稳.移植肝组织病理学病变明显减轻.结论 附加门体分流术可能可以避免小体积移植肝的损伤.     

Implanted adipose-derived stem cells attenuate small-for-size liver graft injury by secretion of VEGF in rats

Graft injury after small-for-size liver transplantation impairs graft function and threatens the survival of the recipients. The use of adipose-derived stem cells (ADSCs) for liver injury protection and repair is promising. Our aim was to investigate the role of vascular endothelial growth factor (VEGF) secreted by ADSCs in the treatment of small-for-size liver graft injury. Studies were performed using ADSCs with VEGF secretion blocked by RNA interference. In vitro, ADSCs prevented apoptosis of freshly isolated liver sinusoidal endothelial cells (LSECs) by secretion of VEGF. Syngeneic 35% orthotopic liver transplantation followed by implantation of syngeneic ADSCs through the portal vein system was performed using Wistar rats. We found VEGF secreted by implanted ADSCs improved graft microcirculatory disturbances, serum liver function parameters and survival. The improved microcirculatory status was also reflected by reduced hepatocellular damage, especially LSEC apoptosis and improved liver regeneration. These effects were accompanied by decreased expression of endothelin receptor type A, increased Bcl-2/Bax ratio, decreased expression of Bad and elevated proportion of phosphorylated Bad. In conclusion, implanted syngeneic ADSCs attenuated small-for-size liver graft injuries and subsequently enhanced liver regeneration in a rat 35% liver transplantation model. The VEGF secreted by implanted ADSCs played a crucial role in this process.     

大鼠小体积肝移植后肝再生障碍的实验研究

目的探讨部分肝移植后肝再生状况和小体积移植物发生肝再生障碍的可能机制。方法实验分为大鼠全肝移植组（OLT）、50%部分肝移植组（50%PLT）和30%部分肝移植组（30%PLT）。分析各组术后肝功能的变化,通过免疫组化观察移植肝标本Cyclin D1和PCNA的表达,并对移植肝组织结构进行电镜观察。结果各组ALT和AST于术后24hr达到峰值,且30%PLT组上升显著。Cyclin D1和PCNA的免疫组化表达中,50%PLT组表达明显上调,而30%PLT组表达则明显抑制。电镜观察发现30%PLT组术后微观结构改变显著。结论 30%PLT组术后肝细胞增殖再生受到明显抑制,推测与肝细胞微环境的恶化和叠加的缺血再灌注损伤有关。     

表达HGF的骨髓间充质干细胞促进小移植肝早期肝再生

目的 建立大鼠小体积肝移植模型,输注表达人肝细胞生长因子(human hepatocyte growth factor,hHGF)的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),研究其在移植早期对小移植肝促再生作用.方法 将已建立的表达hHGF和绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的MSCs,分别命名为HGF/MSCs,GFP/Mscs.建立大鼠30%肝移植模型.受体分为4组,实验组输注5×106HGF/MSCs;对照组则分别输注相同体积的生理盐水(PS),5×106 GFP/MSCs或1.0×109 pfu含hHGF的重组腺病毒液(Ad-HGF).分别于术后1,3,5,7 d各组随机抽取5只大鼠处死.取血检测血清ALT和hHGF.记录移植物湿重.取肝组织检测hHGF、c-met表达,以及肝细胞凋亡和增殖活性.另每组15只,分组同上,用于观察生存期.结果 PS组大鼠7 d生存率33.3%;组织学及血清学检查示术后肝脏损伤重,汇管区单核细胞浸润多;而实验组大鼠7 d生存率为73.3%.肝脏损伤轻,炎性细胞浸润少;实验组移植肝再生较PS组明显增加.结论 大鼠部分肝移植后,输注HGF/MSCs能够保护小体积移植肝,促进小移植肝再生,提高7 d生存率.     

20%小体积的大鼠肝脏移植模型

目的 应用显微外科技术建立20%小体积移植物的大鼠原位肝脏移植模型.方法 原位移植建立20%小体积大鼠肝脏移植模型.雄性Lewis大鼠40只,供体20只,受体20只.供肝经门静脉用4℃ UW液灌注.肝上下腔静脉用端端吻合连续缝合的方法.肝下下腔静脉和门静脉分别用套管方法固定.套叠缝合法重建肝动脉.胆管重建采用内支架管端端连接的方法.观察移植物的存活率.免疫组化检测肝细胞摄取溴脱氧尿核苷的情况.结果 共施行肝脏移植手术20例,移植手术成功率为100%.20%小体积肝脏移植物的存活率为93.8%(＞14 d).组织学检查移植后的肝脏组织结构良好.移植术后72 h溴脱氧尿核苷染色阳性的肝细胞计数明显增多.结论 20%小体积大鼠肝脏移植物可启动完成移植后的肝脏再生.显微外科技术是移植模型成功的关键.该模型稳定性强,适合于部分肝脏移植领域的基础研究.     

缺血预处理对大鼠小体积供肝的保护作用及机制

目的探讨缺血预处理（IPC）对大鼠小体积供肝的保护作用及其机制。方法120只SD大鼠随机分为3组（每组20对）：无热缺血组（NWI）、缺血再灌注组（WI）和缺血预处理组（IPC）。用双袖套法建立大鼠小体积肝移植模型。各组10只受体大鼠于术前1d、术后1、2、3、5d取血，用自动生化分析仪检测AST和ALT。NWI组于供肝灌注前及植入后0．5、1、2、3h，WI组于热缺血前及植入后0．5、1、2、3h，IPC组于IPC前、IPC后及植入后0．5、1、2、3h取肝组织，用硝酸还原法检测其NO浓度。结果IPC可降低大鼠小体积肝移植术后血清AST和ALT浓度，提高再灌注早期肝脏组织NO的浓度，降低再灌注晚期肝脏组织NO的浓度（P〈0．05）。结论NO在大鼠肝脏的缺血再灌注损伤中可能具有双重作用。IPC对大鼠小体积供肝的缺血再灌注损伤有保护作用。其机制可能是通过促进供肝再灌注后早期NO合成，改善肝脏微循环，同时抑制供肝再灌注后晚期NO合成，减轻过量NO的损伤作用，从而保护移植肝脏功能。     

两种不同方法的大鼠小体积肝移植模型建立的比较

目的　探索一种大鼠小体积肝移植模型简单有效的建立方法。方法　选取体重相近的SD大鼠作为供受体 ,采用体外和体外两种方法切除部分肝叶以获取小体积供肝 ,按Kamada两套管法做供肝植入。比较两种方法的技术并发症。结果　体外法在术后肝断面出血、渗血 ,肝后下腔静脉狭窄和继发血栓 ,术中因出血引起的低血压休克 ,相近肝叶静脉误扎引起的回流障碍等并发症发生方面较体内法多。两者总的并发症发生率分别为 35 % (6 / 16 )和 5 % (4 / 78) (P <0 0 5 ) ,而两种方法在无肝期 ,冷缺血时间及总的手术时间上无统计学差异。结论　选取体重相近的供受体进行体内切除减体积是大鼠小体积肝移植模型建立的可行有效方法     

Rapamycin Attenuates Liver Graft Injury in Cirrhotic Recipient—The Significance of Down-Regulation of Rho-ROCK-VEGF Pathway

To investigate whether rapamycin could attenuate hepatic I/R injury in a cirrhotic rat liver transplantation model, we applied a rat orthotopic liver transplantation model using 100% or 50% of liver grafts and cirrhotic recipients. Rapamycin was given (0.2 mg/kg, i.v.) at 30 min before graft harvesting in the donor and 24 h before operation, 30 min before total hepatectomy and immediately after reperfusion in the recipient. Rapamycin significantly improved small-for-size graft survival from 8.3% (1/12) to 66.7% (8/12) (p = 0.027). It also increased 7-day survival rates of whole grafts (58.3%[7/12] vs. 83.3%[10/12], p = 0.371). Activation of hepatic stellate cells was mainly found in small-for-size grafts during the first 7 days after liver transplantation. Rapamycin suppressed expression of smooth muscle actin, which is a marker of hepatic stellate cell activation, especially in small-for-size grafts. Intragraft protein expression and mRNA levels of vascular endothelial growth factor (VEGF) were down-regulated by rapamycin at 48 h both in whole and small-for-size grafts. Consistently, mRNA levels and protein expression of Rho and ROCK I were decreased by rapamycin during the 48 h after liver transplantation. In conclusion, rapamycin attenuated graft injury in a cirrhotic rat liver transplantation model by suppression of hepatic stellate cell activation, related to down-regulation of Rho-ROCK-VEGF pathway.     

大鼠小体积肝移植后肝细胞再生的研究

目的 探讨小体积肝移植术后肝再生的情况。方法 建立大鼠30％原位肝移植模型,实验分为肝切除（PH）组、全肝移植（0LT）组和30％小体积肝移植（30％POLT）组,观察1w生存率,并于术后1、2、3、7d检测肝细胞增殖活性、肝功能和肝组织学变化。结果 各组1w生存率均为100％;30％POLT组术后2d达到增殖高峰,峰值与PH组无差异（P〉0．05）;其肝功能酶学指标在术后1、3d明显升高,组织学见肝细胞核分裂极其活跃。结论 冷缺血1h的30％供肝和肝切除后肝脏具有同样的增殖活性,仅增殖高峰稍晚;较短的冷缺血时间以及熟练的手术技术可能对小体积供肝的再生起重要作用。     

Attenuation of acute phase shear stress by somatostatin improves small-for-size liver graft survival.

The major concern of living donor liver transplantation is small-for-size graft injury at the early phase after transplantation. Novel therapeutic strategies should be developed. To investigate the protective effect of somatostatin related to hemodynamic stress on small-for-size liver graft injury, we applied a treatment regimen of low-dose somatostatin in a rat orthotopic liver transplantation model using small-for-size grafts (median, 38.7%; range, 35-42%). Somatostatin was given at 5 minutes before total hepatectomy and immediately after reperfusion in the recipient (20 microg/kg). Graft survival, portal hemodynamics, intragraft gene expression and hepatic ultrastructural changes were compared between the rats with or without somatostatin treatment. Seven-day graft survival rates in the somatostatin treatment group were significantly improved compared to the control group (66.7% vs. 16.7%, P = 0.036). In the treatment group, portal pressure and hepatic surface blood flow were significantly decreased within the first 30 minutes after reperfusion, whereas in the control group, transient portal hypertension and excessive hepatic blood flow were observed. Intragraft expression (both messenger RNA and protein) of endothelin-1 was significantly downregulated accompanied with upregulation of heme oxygenase-1 and A20. Better preservation of liver function was found in the treatment group. Hepatic ultrastructure, especially the integrity of sinusoids, was well protected in the treatment group. In conclusion, low-dose somatostatin rescues small-for-size grafts from acute phase injury in liver transplantation by attenuation of acute-phase shear stress that resulted from transient portal hypertension.