血清HBV DNA与乙型肝炎病毒血清学标志物的关系

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术定量检测HBV DNA与乙型肝炎病毒（HBV）血清学标志物之间的关系。方法采用ELISA检测乙肝病毒血清学标志物,FQ-PCR法检测HBVDNA,比较不同乙肝病毒血清学标志物阳性组合HBVDNA阳性情况。结果HBsAg、HBeAg和HBcAb性组HBVDNA阳性率为100％（155／155）;HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性组HBV DNA阳性率为35．2％（50／142）;HBsAg、HBcAb阳性组HBV DNA阳性率为30．2％（38／126）,HBsAg阳性组血清HBVDNA阳性率为10．0％（3／30）。结论荧光定量PCR法检测血清中衄VDNA含量可以准确地反映病人体内病毒的感染和复制情况,可准确地为临床提供科学的诊断依据。     

乙肝患者前S1蛋白和HBV—DNA检测结果分析

目的探讨乙型肝炎患者前S1蛋白和HBV—DNA检测的临床价值．方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测748例乙肝患者HBV—M和前S1蛋白，并与HBV—DNA做对比分析。结果在HBsAg／HBeAg／HBcAb均阳性的高复制组中，前S1蛋白阳性占86．9％，HBV—DNA阳性占98.2％；HBsAg／HBeAb／HBcAb均阳性的低复制组中，前S1蛋白阳性占31.1％，HBV—DNA阳性占41．6％；HBsAb／HBeAb／HBcAb均阳性的康复组中．前S1蛋白和HBV—DNA均为阴性．结论前S1蛋白能够敏感地反映乙型肝炎病毒的复制情况，尤其可以反映HBeAg阴性的乙型肝炎惠者是否有病毒复制。     

FQ-PCR检测HBV DNA效果分析

目的检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA拷贝数,分析乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)与血清免疫标志物的关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清样本中HBV-DNA含量;同时酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBV血清标志物(HBVM),并对检测结果进行分析。结果在HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)组(大三阳组)和HBsAg(+) HBeAg(+)组HBV-DNA阳性率分别为96.1%（298/310）和96.6%（28/29）,病毒含量为：1.85×108copies/ml;HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)组(小三阳组)和HBsAg(+)HBcAb(+)组患者血清HBV-DNA阳性率分别为44.2%(80/181)和82.9%（31/41）,病毒含量为：4.8×106copies/ml。血清中HBeAg与HBVDNA含量密切相关。结论荧光定量PCR在乙肝的诊断、判断传染性强弱及评价抗病毒治疗效果方面具有较大的临床应用价值。     

HBV感染者血清HBV标志物与HBV DNA相关性

目的 探讨HBV感染者常见血清HBV标志物模式的临床意义及与血清HBV DNA之间的相关性。方法 应用荧光-聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测了270例HBV感染者血清HBV DNA和HBV标志物。结果 270例HBV感染者中HBV标志物以HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性，HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性与HBsAg、HBcAb阳性三组最为常见，其构成比分别为0．3296、0．2963、0.3444。HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性，HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性与HBsAg、HBcAb阳性，三组HBV DNA阳性率分别为86．5％、41.3％、37．6％。HBeAb和HBcAb阳性组及单-HBsAg阳性组亦可检出HBV DNA。结论 临床上常规测定血清HBV DNA对深入了解HBV标志物模式的意义及病情的发展与预后具有重要的价值。     

荧光定量聚合酶链反应检测血清HBV DNA及临床应用价值

目的：应用光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）技术检测血清HBV DNA,评价其临床应用价值。方法：选取乙型肝炎病毒感染各时期血清标本331例,用荧光定量PCR法测定HBV DNA浓度。结果：119例HBsAg,HBeAg,HBcAb阳性标本,HBV DNA阳性率为98．3％;182例HBsAg,HBeAg,HBcAb阳性的血清标本,阳性率为52．3％;HBsAg,HBeAg阴性标本20便,1例阳性。结论：FQ－PCR技术检测血清HBV DNA,可以反映乙肝病毒感染的实际情况及复制水平,为确定乙型肝炎的临床诊断,可为选择治疗方案和评估药物疗效提供较可靠的理论依据。     

HBV-DNA定量与乙肝标志物及谷丙转氨酶结果对比分析

目的探讨血清中HBV—DNA定量与乙肝标志物（HBV—M）及谷丙转氨酶（ALT）之间的关系及临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链式反应法（FQ—PCR）和ELISA法分别检测578例病人的血清HBV—DNA含量和HBV-M,自动生化分析仪检测ALT并对结果进行对比分析。结果HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV—DNA检出率833％（259／2311）,平均拷贝数1.1×10^8／ml。HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV--DNA检出率33．5％（44／132）,平均拷贝数5.9×10^8／ml。HBsAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV-DNA检出率242％（14／58）,平均拷贝数1.9×10^8／ml。HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV—DNA检出率78％（1／15）,平均拷贝数3.5×10^3／ml。全阴性组血清HBVDNA检出率53％,平均峙贝数2．0×10^3／ml。HBsAg（＋）、aBeAg（＋）组的HBV--DNA阳性率高、定量值高,而HBsAg（＋）、HBeAg（-）组HBV—DNA阳性率较低、定量值也较低,二者差异有显著性;HBsAg（-）者亦可检出HBV-DNA;HBV感染者ALT阳性的概率增大,但二者在数量上无相关性。结论同时检测血清乙肝标志物和HBV—DNA及谷丙转氨酶,对临床HBV感染、复制及传染性的判断具有重要意义。     

乙型肝炎病毒标志物与HBV-DNA检出率的关系

目的：探讨乙型肝炎病毒标志物（HBV－M）常见模式与HBV－DNA检出率的关系。方法：采用地高辛标记探针斑点杂交法检测200例HBV－M常见模式血清中HBV－DNA。结果：41份HBsAg、HBeAg、HBcAb三项阳性（大三阳）标本中检了HBV－DNA阳性38例（HBV－DNSA阳性率为92．6％）;52例HBsAg、HBeAb、HBcAb三项阳性（小三阳）标本中检出HBV－DNA阳性9例（阳性率17．3％）;30例HBV－M全阴性标本中检出HBV－DNA阳性2例（阳性率6．7％）;20例仅HBsAb阳性的标本,其HBV－DNA全部阴性。结论：BHeAg阳性与HBV－DNA关系极为密切,其HBV复制最活跃,传染性最强。无论何种原因产生HBsAb,都能有效地清了HBV;只有HBsAb是保护性抗体,能有效地清除HBV或抑制HBV复制。即使HBV－M全阴性人群中,仍可能有病毒复制,一般都应接种乙肝疫苗。     

HBsAg阳性人群HBV-DNA定量测定的调查研究

目的：通过收集HBsAg阳性人群血清进行HBV—DNA定量测定,分析HBV感染人体后不同年龄组、不同血清标志物模式病毒复制状况。方法：乙肝血清学标志物检查采用ELISA法,HBV—DNA检测采用实时荧光定量PCR法。结果：A、B、C、D四个年龄组模式Ⅰ（HBsAg＋,HBeAg＋／HBsAg＋,HBeAg＋,HBeAb＋）间有显著差异,F=9．90（P〈0．01）,模式Ⅱ（HBsAg＋,HBeAb＋／HBsAg＋,HBeAb＋,HBcAb＋）和模式Ⅲ（HBsAg＋．HBcAb）组间无差异,HBV—DNA阳性率（检测结果〉1．0×103copies／ml为阳性）模式Ⅰ与模式Ⅱ（u=9．60,P〈0．01）、模式Ⅰ与模式Ⅲ（u=4．61,P〈0．01）之间均有显著性差异,模式Ⅱ与模式Ⅲ（u=2．07,P〈0．05）有差异。结论：HbeAg阳性者病毒成高水平复制状态,并且不同年龄组间有差异。HBeAb阳性和无HBeAb者不能完全代表无病毒复制。乙肝免疫标示物和HBV—DNA的检测不能相互替代。     

Pre-S2、抗Pre-S2和HBVDNA在乙型肝炎患者中的相关性分析

目的：探讨Pre-S2,抗Pre-S2二对半和HBV DNA对乙型肝炎患者血清的诊断意义。方法：用ELISA法和PCR法分别检测93例乙型肝炎患者和28例健康人血清中的Pre-S2,抗Pre-S2,二对半和HBV DNA水平。结果：93例乙肝患者HBsAg,HBeAg,HBcAb阳性32例,HBsAg,HBeAb,HBcAb阳性39例,HBsAg,HBcAb阳性18例,HBcAb阳性4例。Pre-S2结果阳性率66．7％（62／93）,Pre-S2抗体结果阳性率1．1％（1／93）,HBV DNA结果阳性率40．9％（38／93）,28例健康人二对半,五项全阴16例,HBsAb阳性12例,Pre-S2阳性1例,HBV DNA阳性1例,Pre-S2抗体阳性5例占HBsAb阳性47．7％（5／12）,Pre-S2和HBV DNA相比有明显差异（P＜0．01）,非HBeAg阳性组中HBV DNA阳性率约低于Pre-S2。结论：Pre-S2,抗Pre-S2,HBV DNA和二对半在乙型肝炎血清学诊断中显示,Pre-S2优于HBV DNA和二对半,Pre-S2抗体出现早于抗HBs和抗HBe,抗Pre-S2阳性检出率较低,可能同乙型肝炎疫苗中抗Pre-S2含量低有关。     

荧光定量PCR检测HBV DNA与HBV血清标志物的对比监测和分析

目的：探讨荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA与HBV血清免疫学标志物(HBVM)的相互关系。方法：801例血清标本采用ELISA方法对其免疫学标志物进行检测，并用实时荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测血清HBV DNA。结果：HBV DNA的总检出率为67.0％，在模式HBsAg( )，HBeAg( )，HBcAb( )中，HBV DNA的含量明显高于HBsAg( )，HBeAb( )，HBcAb( )及HBsAg( )，HBcAb( )模式。在HBsAg(-)模式中HBV DNA亦有检出。结论：HBVM能提供乙肝感染的间接证据，而荧光定量PCR法检测HBV DNA准确灵敏，能真实反映HBV感染、复制及病程变化，在乙型肝炎的诊断治疗中具有重要的临床指导价值。     

乙肝病毒DNA和前S1抗原及其标记物三者相关性分析

目的探讨乙肝病毒前S1抗原(PreS1)与乙肝病毒DNA(HBV DNA)、乙肝病毒标志物(HBVM)之间的相关性,为拉米夫定(Lamivudine)治疗提供新的监测指标。方法收集慢性乙型病毒性肝炎患者500例,其中HBV DNA阳性400例(拷贝数>500/ml),按HBV-DNA含量由低到高分8组;其余为HBVDNA阴性对照100例。同步以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测PreS1;以电化学免疫发光法检测乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝病毒e抗体(HBeAb)、乙肝病毒表面抗原(HBsAg);以荧光定量PCR法检测HBV DNA(以HBV DNA拷贝数>500/ml为阳性)。结果(1)在HBVDNA拷贝数500~1×106/ml之间,PreS1的阳性率比HBeAg高(P<0.05);在HBV DNA拷贝数1×106/ml以上,二者阳性率无显著性差异(P>0.05);(2)PreS1的灵敏度为90%(360/400),高于HBeAg的68.5%(274/400)(P<0.05);PreS1的阴性预示值为55.6%(50/90),高于HBeAg的43.2%(96/222)(P<0.05);PreS1的检测有效率为82.0%(410/500),高于HBeAg的64.8%(324/500)(P<0.05)。(3)在HBVDNA拷贝数500~1×104/ml之间,HBsAg的阳性率比PreS1高(P<0.05),在HBVDNA拷贝数1×104/ml以上,HBsAg的阳性率与PreS1的阳性率无显著性差异(P>0.05)。在HBVDNA拷贝数500~1×106/ml之间,HBeAb有较高的阳性率。结论PreS1与HBVDNA具有较好的相关性,其检测灵敏度和阴性预示值、检测有效率都优于HBeAg检测。PreS1可作为拉米夫定等抗病毒药物疗效观察指标之一。HBeAg阴性、HBeAb阳性不是传染性消失的可靠指标。     

HBV M和HBV DNA的关系探讨

目的:研究乙肝病毒血清学标志物(HBV M)与乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)之间的关系。方法:对497例患者同时检测HBV M和HBV DNA,HBV M检测用ELISA法,HBV DAN检测用PCR法。结果:HBV M的检测结果分为6组,每组HBV M组合都有一定的HBV DNA检出率。结论:说明HBV M只能作为乙肝病毒有无感染的一般性检测,而HBV DNA能检出复制病毒,但难以表达非复制状态的感染,所以两者关系值得进一步探讨。     

氧化苦参碱对乙型肝炎病毒转基因小鼠乙肝抗原表达的影响

目的：研究氧化苦参碱抗乙型肝炎病毒的作用,并初步探讨其作用机制。方法：以乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠ＩＣＲ－ＴｇＮ（ＨＢＶａｄｒ１．２）ＳＭＭＵ 为动物模型,运用ＥＬＩＳＡ和免疫组化的方法检测小鼠肝脏内乙肝抗原含量。结果：分别予氧化苦参碱１００, ２００, ３００ ｍ ｇ／ｋｇ 腹腔注射,１次／ｄ,３０ ｄ 后,乙型肝炎病毒转基因小鼠肝脏内ＨＢｓＡｇ 和ＨＢｃＡｇ 的含量较空白对照组（予等体积生理盐水腹腔注射）均有明显的下降,且对两者作用一致;进一步的研究表明氧化苦参碱２００ ｍ ｇ／ｋｇ 作用１０ ｄ,２０ ｄ 时小鼠肝脏内ＨＢｓＡｇ 和ＨＢｃＡｇ 的含量较治疗前有明显的下降。结论：氧化苦参碱能降低乙型肝炎病毒转基因小鼠肝脏内ＨＢｓＡｇ 和ＨＢｃＡｇ 的含量,有抗乙型肝炎病毒作用。     

乙肝病毒不同血清标志物ALT中与HBVDNA载量临床意义

目的分析乙肝病毒（HBV）不同血清标志物（HBVM）中丙酸氨基转移酶（ALT）异常率与乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBVDNA）载量的关系,探讨乙肝病毒感染时肝损伤的主要原因及检测HBVM与HBVDNA载量及ALT的临床意义。方法对345份乙肝患者的血清标本分别用ELISA、荧光定量PCR、速率法检测HBVM、HBVDNA载量及ALT。结果①HBeAg（＋）与HBeAg（-）两组HBVDNA阳性率、HBVDNA载量〉10^5的百分率比较均有显著差异（P〈0．01）。②ALT异常率在HBeAg（＋）组的不同HBVDNA载量级中无差异（P〉0．05）,在HBeAg（-）组中随HB—VDNA载量级增大而增大（P〈0．01）。结论在HBeAg（＋）时,肝损伤与HBVDNA载量无关;HBeAg（-）时,大多病毒复制减弱,但有少数HBVDNA载量为高拷贝,其肝损伤程度与HBVDNA载量呈正相关。     

Relationship between Maternal PBMC HBV cccDNA and HBV Serological Markers and its Effect on HBV Intrauterine Transmission

Objective To investigate the relationship between maternal peripheral blood mononuclear cells (PBMC) hepatitis B virus(HBV) covalenty closed circular deoxyribonucleic acid(cccDNA) and other HBV serological markers and its effects on HBV intrauterine transmission. Methods We enrolled 290 newborns and their hepatitis B surface antigen(HBsAg) positive mothers. HBV cccDNA in PBMC and HBV DNA in serum were detected by a real‐time PCR‐TaqM an probe while HBV serological markers were detected with an electrochemiluminescence immunoassay. Results There was a positive correlation between the levels of PBMC HBV cccD NA and serum HBV DNA and HBeA g(r = 0.436 and 0.403, P 0.001). The detection rate of pattern A [‘HBsA g(+), HBeA g(+), and anti‐HBc(+)'] was significantly higher in the PBMC HBV cccD NA positive group than in the control group(χ2 = 48.48, P 0.001). There was a significant association between HBV intrauterine transmission and PBMC HBV cccD NA(χ2 = 9.28, P = 0.002). In the presence of serum HBV DNA, HBeA g, and PBMC HBV cccD NA, the risk of HBV intrauterine transmission was three times higher(OR = 3.69, 95% CI: 1.30‐10.42) than that observed in their absence. The risk of HBV intrauterine transmission was the greatest(OR = 5.89, 95% CI: 2.35‐14.72) when both PBMC HBV cccD NA and pattern A were present. A Bayesian network model showed that maternal PBMC HBV cccD NA was directly related to HBV intrauterine transmission. Conclusion PBMC HBV cccDNA may be a direct risk factor for HBV intrauterine transmission. Our study suggests that serological markers could be combined with PBMC‐related markers in prenatal testing.     

乙型肝炎病毒载量与血清免疫标志物及ALT的关系

目的探讨不同乙肝病毒（HBV）载量与其血清标志物模式及ALT的关系。方法采用荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）和速率法分别检测患者血清HBV-DNA载量、血清学标志及谷氨酸丙氨酸转移酶（ALT）活性。结果在605例患者样本中共检测出9种血清模式,HBeAg阳性模式,即HBsAg（＋）,HBeAg（＋）,抗HBc（＋）模式与HBsAg（＋）,HBeAg（＋）模式,其HBV-DNA阳性率分别为96.2%和100.0%,病毒平均含量106.53copies/mL,明显高于HBeAg阴性模式（P〈0.01）。HBV-DNA水平与ALT异常存在相关。结论 HBeAg阳性模式HBV载量显著高于HBeAg阴性模式,HBV载量越高,ALT异常的比例越大。     

乙型肝炎病毒滴度与血清标志物的关系

目的探讨乙型肝炎病毒的滴度与血清标志物及肝功能的关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和ELISA法同时检测420份血清的HBV-DNA和血清标志物(HBV-M),并用全自动生化分析仪测定其肝功能ALT,对结果进行分析。结果105例HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+组的血清HBV-DNA平均拷贝数为3.16×1010/m l,检出率为95.23%,显著高于其他组(P<0.01);HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+组ALT异常率为64.76%(68/105),显著高于HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+组ALT异常率36.96%(34/92)(P<0.01)。45例HBsAb+组血清HBV-DNA检出率为0,38例HBV-M全阴性组血清HBV-DNA检出率为7.89%。HBV-DNA阳性组ALT异常率为57.84%(107/185),显著高于HBV-DNA阴性组ALT异常率31.06%(73/235)(P<0.01)。结论定量PCR方法可以作为确认乙肝病毒感染不同状态的一种有效手段,血清标志物HBV-M阴性患者仍可有HBV-DNA阳性,HBV-DNA与HBV-M、肝功能同时检测,对乙肝的临床诊断、治疗方案的选择以及疗效判断有一定的指导意义。     

乙肝母婴阻断中婴幼儿隐匿性 HBV 感染研究

目的：研究乙肝母婴阻断中婴幼儿隐匿性感染情况和影响因素。方法通过深圳市疫苗监测和接种网络,收集223对乙肝母婴阻断人群的血清样本,进行HBV血清学和分子生物学检测,分析隐匿性感染对传统HBV母婴阻断效果评价标准的影响;并分析母婴阻断中婴幼儿隐匿性感染的因素。结果血清学结果显示223例婴幼儿接受乙肝母婴阻断后,212例HBbAg （＋）,传统血清学结果计算HBV母婴阻断成功率为95.1％（212／223）;分子生物学筛查显示,183例HBV－DNA（－）,40例HBV－DNA（＋）,该方法计算HBV母婴阻断成功率为82.1％（183／223）,两者差异有统计学意义（P＜0.05）。孕产妇血清HBV－DNA水平与所产婴幼儿隐匿性感染相关性分析显示,孕产妇血清HBV－DNA水平与婴幼儿隐匿性感染呈正相关;31例隐匿性感染的婴幼儿中有12例病毒S区“a”抗原决定簇出现点突变;而6例血清型HBsAg（＋）的病例S区“a”抗原决定簇没有发生突变,病毒突变对血清学漏检差异有统计学意义（礸2＝7.025,P＝0.020）。结论隐匿性感染在HBV母婴阻断婴幼儿群体中存在一定的流行趋势,并对HBV母婴阻断成功构成了威胁;病毒突变和孕产妇血清HBV－DNA水平与婴幼儿隐匿性感染呈正相关。     

新疆331例HBV感染患者基因型及临床特征分析

目的探讨新疆慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者基因型分布情况和临床特征。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的方法,分析2007年在新疆医科大学第一附属医院就诊的331例慢性HBV感染者基因型与临床特点。结果 331例慢性HBV感染者中,HBV B基因型占14.8%（49/331）,C基因型占72.8%（241/331）,C/D重组体占9.7%（32/331）,D基因型占2.7%（9/331）。4种基因型中,C基因型所占比例明显高于B基因型、C/D重组体和D基因型。C基因型在乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性、慢性乙型肝炎（CH）、乙肝肝硬化（LC）、乙肝肝癌（HCC）患者中所占比例明显高于B基因型、C/D重组体、D基因型,差异均有统计学意义（P〈0.05）。4种基因型在性别、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、血清白蛋白（ALB）等方面比较,差异无统计学意义（P均〉0.05）。结论新疆地区HBV感染者,HBV基因型以C基因型为主,慢性乙型肝炎C基因型病情重,预后差。     

HBV拉米呋啶耐药相关基因及HBV基因分型的初步研究

目的：利用基因测序技术，根据HBV S基因序列和HBV P基因区YMDD基因序列的特征，建立一种既可以诊断HBV基因型，又能检测拉米呋啶耐药突变的简便、可靠的方法。方法：采用特异的引物对待检标本进行PCR扩增后作基因序列检测，利用Chromas2．23软件对测序结果进行分析有无突变产生，测序结果用软件DNASIS进行基因分型分析。结果：61例经拉米呋啶治疗的慢性乙肝患者B型11例（18％），C型50例（82％）。发生YMDD变异47例，变异检出率为77．0％。结论：该方法能同时检测HBV基因型和YMDD变异，可以通过准确的P基因序列测定区分YMDD变异的类型，并可根据需要监测其他的伴随突变，进一步进行核苷酸多态性分析，对临床治疗和病情监控均有指导意义。