凝血酶致脑水肿的实验观察

目的：探索凝血酶是否产生或促进水肿形成,以及由凝血酶引起的水肿能否被加入其特异性抑制剂水蛭素或钙拮抗剂尼莫地平所防止。方法：成熟SD大鼠分别接受立体定向尾状核注射,在指定时间点被断头处死,取出大脑作冠状切片,用于湿重法和显微镜(HE染色)观察脑水肿情况。结果：大剂量凝血酶注射后4小时即可产生明显脑水肿,与其余各组比水蛭素或尼莫地平治疗鼠脑水含量减少,脑肿胀减轻。结论：凝血酶直接涉及脑出血水肿形成的过程,水蛭素对脑出血后脑水肿治疗的有效性提供进一步依据证明凝血酶在实质性血块产生水肿病因中占重要地位,因而代表着治疗干预的潜在目标。钙离子拮抗剂尼莫地平能减缓凝血酶对脑细胞的毒性,起保护神经的作用。     

通心络对大鼠胚胎神经干细胞源性神经细胞谱系的影响

目的：前期体内动物模型实验说明，通心络可能具有影响神经干细胞增殖及向各种神经细胞分化的作用。实验拟观察通心络对大鼠胚胎神经干细胞源性神经细胞谱系的影响以及时效、量效的关系。 方法：实验于2007—06／10在南方医科大学机能学实验室完成。①实验材料：孕12～14dSD大鼠由南方医科大学实验动物中心提供，实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。通心络，主要成分为人参、水蛭、全蝎、土鳖虫、蜈蚣、蝉蜕、赤芍、冰片等，由石家庄以岭药业股份有限公司生产，国药准字Z19980015。通心络含药血清的制备：按大剂量组1g／（d·kg）、小剂量组0．5g／（d·kg）分别予大鼠通心络混悬液灌胃，7d后抽血离心，吸取血清，过滤消毒，分装，-70℃冻存备用。②实验方法：自孕12～14d大鼠胚胎中分离培养神经干细胞，取第3代细胞分别给予大、小剂量组通心络含药血清干预。以添加普通血清干预的为对照。③实验评估：于培养1，3，7d通过免疫荧光染色观察各种类型神经细胞所占比例。 结果：①神经干细胞经通心络含药血清干预后1d，仅在大剂量组海马齿状回有极少数细胞呈BrdU（＋）GFAP（＋），其余细胞都呈BrdU（＋）Nestin（＋），小剂量组和对照组均为BrdU（＋）Nestin（＋）细胞。②经通心络含药血清干预后3d，大剂量组、小剂量组和对照组Nestin（＋）、13tubulin（＋）、GFAP（＋）细胞比例差异有显著性意义（P〈0．01），GalC（＋）细胞比例差异无统计学意义（P〉0.05）。③大鼠胚胎神经干细胞经通心络含药血清干预后：各组Nestin（＋）细胞比例先降后升：13tubulin（＋）细胞比例大剂量组持续上升，小剂量组和对照组先升后降；GFAP（＋）细胞比例大剂量组先升后降，小剂量组和对照组持续上升，GalC（＋）细胞比例大、小剂量?     

凝血酶对脑微血管内皮细胞的损害及水蛭素的保护作用

目的：探讨凝血酶对大鼠脑微血管内皮细胞（BMVEC）的损伤以及凝血酶抑制剂水蛭素的保护作用。方法：分离新生大鼠脑微血管内皮细胞并进行培养,取第二或第三代内皮细胞进行实验。实验分成3组：对照组、凝血酶组和水蛭素组。通过透射电镜和流式细胞术检测3组细胞凋亡的情况。利用TRITC-鬼笔环肽对细胞进行染色观察3组细胞骨架的形态变化。结果：凝血酶可以增加血管内皮细胞凋亡并导致细胞骨架重排、紊乱,而水蛭素可以减轻凝血酶的这种作用。结论：凝血酶可以损害血管内皮细胞骨架,引起细胞收缩、变形,同时增加内皮细胞凋亡,破坏血脑屏障。水蛭素可以减轻这种改变。     

脊髓损伤后脊髓组织内凝血酶受体1的表达

目的：观察脊髓损伤后脊髓组织内凝血酶受体l的表达，分析表达规律与脊髓损伤程度是否具有时效性。 方法：（1）实验于2005—04／08在兰州大学基础医学院解剖学教研室实验室和甘肃省医学科学研究院动物实验中心完成。（2）选用成年健康Wistar大鼠75只，雌雄不拘。按随机抽签法将大鼠分为3组：正常对照组：只打开椎板，不损伤脊髓；模型组：打开椎板，损伤脊髓；脊髓损伤＋注全血组：打开椎板，损伤脊髓，立即自大鼠尾静脉取20μL自体血，注入骨窗中心的损伤脊髓组织中，缓慢注射，注射完毕后留置3min。（3）于术后6，24，48，72h和5d，采用免疫组织化学法检测各组脊髓组织凝血酶受体1表达。电镜观察各组术后72h神经元的超微结构变化。苏木精-伊红染色后对脊髓组织进行形态学观察。 结果：大鼠75只均进入结果分析。①凝血酶受体l阳性表达神经元数：模型组和脊髓损伤＋注全血组明显多于正常对照组（P〈0．01）；脊髓损伤＋注全血组明显多于模型组（P〈0．01）。模型组和脊髓损伤＋注全血组脊髓组织阳性细胞表达上调开始于术后6h（每400倍视野阳性细胞数分别为6．20&;#177;1．48，8．30&;#177;1．42），逐渐升高，72h达高峰（每400倍视野阳性细胞数分别为14．50&;#177;1．43，20．40&;#177;1．71），以后逐渐降低。②脊髓组织形态学观察结果：术后6h模型组和脊髓损伤＋注全血组神经细胞出现轻度水肿，术后72h神经细胞和细胞周围水肿非常明显，之后水肿情况逐渐减轻；脊髓损伤＋注全血组脊髓组织水肿较模型组重。③术后72h各组脊髓组织超微结构：模型组和脊髓损伤＋注全血组脊髓组织出现神经元凋亡。正常对照组见正常神经元。 结论：脊髓损伤后脊髓组织中神经元凝血酶受体l表达增强，其表达规律与脊髓损伤程度有一定的时效关系，凝血酶受体l的表达可能参与了脊髓组织继发性损伤.     

益元活血丹对大鼠脑缺血再灌注保护作用的研究

目的：通过实验研究，观察益元活血丹对防止脑细胞的损伤及保护脑细胞的作用。方法：取大鼠５０ 只，雌雄各半，正常饲养１４ｄ ，随机分为５ 组：正常组、脑缺血模型组、氟桂嗪对照组、益元活血丹大剂量组、益元活血丹小剂量组。分别用药观察。结果：益元活血丹大剂量组和小剂量组均显示对降低脑组织含水率和Ｃａ２＋ Ｎａ ＋ 的含量有影响。结论：益元活血丹可降低脑组织含水率和Ｃａ２＋ 和Ｎａ ＋ 含量，有明显提高过氧化物岐化酶（ＳＯＤ） 活性，降低脑组织过氧化脂质（ＬＰＯ） 含量的作用。     

银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血后梗死体积和Bcl-2,Caspase-3表达的影响

目的：探讨银杏叶提取物（ginkgo biloba extract，GBE）对脑缺血后梗死体积及神经元凋亡相关蛋白Bel-2，Caspase-3表达的影响。方法：将SD大鼠随机分为缺血对照组、小剂量GBE治疗组（小剂量组）、大剂量GBE治疗组（大剂量组）。采用大鼠大脑中动脉栓塞模型，应用光镜、TIC染色、免疫组织化学染色及TUNEL染色检测方法，在不同时间点观察各组大鼠脑梗死体积的变化以及Bcl-2，Caspase-3阳性细胞表达的不同和神经细胞凋亡的情况。结果：在不同时间点各给药组大鼠的脑梗死体积小于缺血对照组，差异有显著性（P〈0．01）；大剂量组脑梗死体积与小剂量组脑梗死体积相比差异亦有统计学意义（P〈0．05）。各给药组大鼠Bel-2阳性细胞表达数目均高于缺血对照组，而Caspase-3阳性细胞表达数目则低于缺血对照组（P〈0．01）；大剂量组阳性细胞表达数目与小剂量组阳性细胞表达数目相比差异亦有显著性（P〈0．05）。结论：银杏叶提取物可减少脑梗死体积，在脑缺血损伤急性期可增加Bcl-2的表达而减少Caspase-3的表达。     

三七总皂甙对大鼠脑出血模型中神经细胞凋亡、Bcl-2表达的影响

目的：研究大鼠实验性脑出血模型中神经细胞凋亡发生的规律以及与Bcl-2表达的关系，观察三七总皂甙对出血性脑损伤的保护作用。方法：将雄性SD大鼠随机分成正常组、假手术组、脑出血模型组、三七总皂甙治疗组。采用VⅡ型胶原酶注入到大鼠右侧苍白球制备脑出血模型，每组分别在术后6h、1d、3d、5d4个时间点取SD大鼠脑组织标本，应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法（TUNEI。）检测细胞凋亡，免疫组化法检测Bcl-2蛋白表达。结果：正常组与假手术组比较，大鼠脑出血后各时间点脑组织TuNEL阳性细胞数、Bcl-2表达显著增高（P〈0．01）；与脑出血模型组比较，三七总皂甙治疗组1d、3d、5dTUNEI，阳性细胞数显著减少（P〈0．05～0．01），Bcb2显著增高（P〈0．05～0．01）。结论：细胞凋亡参与了脑出血后神经细胞的继发损伤过程，Beb2有抑制细胞凋亡的作用；三七总皂甙可以增高脑出血后Bcl-2的表达，对脑组织具有保护作用。     

大豆磷脂脂质体对谷氨酸所致体外神经细胞损伤的保护作用

目的：观察大豆磷脂脂质体对谷氨酸引起培养神经细胞兴奋毒性损伤的保护作用，并探讨其可能的作用机制。 方法：①实验于2004-11／2005-06在锦州医学院生化实验室完成。选用清洁级新生0～1dSD大鼠12只。取大脑皮质神经细胞进行原代培养8—10d后，随机分为3组：正常对照组、损伤组和大豆磷脂脂质体保护组。损伤组加入谷氨酸（终浓度1&;#215;10^-4mol／L）作用3h，造成神经细胞的损伤，大豆磷脂脂质体保护组在谷氨酸损伤处理的同时加入0．2，0．4，0、8，1.6g／L的大豆磷脂脂质体。②参照由南京建成生物工程研究所提供的试剂盒说明书测定培养液中乳酸脱氢酶活力和一氧化氮含量。培养神经细胞中丙二醛含量、超氧化物歧化酶及一氧化氮合酶活力测定参照由南京建成生物工程研究所提供的试剂盒说明书进行。蛋白质定量用考马斯亮兰试剂盒测定。③多样本均数检验采用方差分析的方法，方差分析差异有显著性后再进行样本的两两比较（Q检验）。 结果：①培养上清液中乳酸脱氢酶活力、一氧化氮含量及培养神经细胞一氧化氮合酶活力：损伤组明显高于正常对照组（P〈0．01），大豆磷脂脂质体各质量浓度保护组明显低于损伤组（P〈0．01）。②培养神经细胞丙二醛含量：损伤组明显高于正常对照组（P〈0．01），大豆磷脂脂质体各质量浓度保护组明显低于损伤组（P〈0．01）。③培养神经细胞超氧化物歧化酶活力：损伤组明显低于正常对照组（P〈0．01），大豆磷脂脂质体各质量浓度保护组明显高于损伤组（P〈0．01）。大豆磷脂脂质体保护作用随着其质量浓度增加（0．2-0．8g／L）而增强，但当剂量达到一定浓度（1．6g／L），该保护作用不再随着浓度的升高而增强。 结论：大豆磷脂脂质体对谷氨酸引起的培养神经细胞兴奋毒性损伤具有显著的保护作用，且存在大豆磷脂脂质体质量浓度依赖性；该种保护作用发生机制可能与大豆磷脂脂质体抗脂质过氧化作用有关。     

僵蚕注射液对凝血酶诱导血管内皮细胞纤溶平衡的影响

目的：观察不同浓度僵蚕注射液对凝血酶诱导血管内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活物（t-PA）和纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）活性的影响。方法：培养新生儿脐带静脉，选取生长良好的第2～5代脐静脉内皮细胞用于实验。将大、中、小剂量僵蚕注射液（浓度分别为600、300和150mg／L）加入5kU／L凝血酶诱导的内皮细胞中，培养12h后收集细胞液，用酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测细胞培养液中PAI-1和t-PA的活性。结果：单用5kU／L的凝血酶组具有诱导内皮细胞分泌PAI-1增加、抑制t-PA释放作用，与无凝血酶和僵蚕的空白对照组比较差异均有显著性（P均〈0．01）。与凝血酶组比较，僵蚕大、中、小剂量组均能明显增加t-PA活性、降低PAI-1活性，差异均有显著性（P均〈0．01）；僵蚕大、中、小剂量组对凝血酶诱导内皮细胞释放t-PA的影响率分别为96，8％、95．6％和55．1％，对PAI-1的影响率分别为92．5％、85。4％和29．3％。结论：大剂量僵蚕注射液可明显抑制凝血酶诱导的内皮细胞释放作用，并能抗血栓形成。     

乌龙丹对大鼠局灶性脑缺血神经元凋亡及其相关基因表达的影响

目的：观察乌龙丹对大鼠局灶性脑缺血神经元损害病理过程的保护作用，并分析其作用途径。 方法：实验于2004—09/2005—10在南方医科大学中医药学院实验室完成。①选用Wistar大鼠30只，3-4月龄，体质量（250&;#177;20）g。按随机抽签法将大鼠分为5组（每组6只）：假手术组：只做开颅术，不结扎血管；模型组和乌龙丹低、中、高剂量组：造成局灶性脑缺血模型。乌龙丹低、中、高剂量组：造模前灌胃乌龙丹流浸膏[乌龙丹由生黄芪、葛根、制首乌、川芎、丹参、地龙、全蝎、制僵蚕、水蛭．生晒参、石菖蒲、女贞子、白术、当归组成，由南方医科大学南方医院中药房提供，加工为流浸膏（含生药2．5g／mL）]1，2，4mL，给药7d；假手术组：术前灌胃2mL生理盐水，干预7d；模型组：造模前灌胃2mL生理盐水，干预7d。②于末次给药后2h造模：结扎右侧颈总动脉，夹闭左侧颈总动脉1h后放开；阻断大脑中动脉造成局灶性脑缺血模型。③大鼠造模24h后，剥取脑组织，冠状连续切片。在JEM1200-EX透射电镜下观察脑组织的超微结构。采用原位末端标记法，按试剂盒说明书方法操作，应用图形分析仪系统，计算原位末端标记法染色阳性细胞数（细胞凋亡数）。采用免疫组化法，按试剂盒说明书方法操作检测Bcl-2与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达情况。④组间计量资料差异比较采用单因素方差分析. 结果：Wistar大鼠30只均进入结果分析。①假手术组：神经细胞形态正常。模型组：神经细胞有明显病理改变，神经元肿胀或浓缩，有凋亡细胞表现。乌龙丹3个剂量组：多数细神经细胞胞保存完好，神经细胞基本形态结构完整，与假手术组相似。②模型组脑组织原位末端标记法染色阳性细胞、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3免疫反应阳性细胞数明显多于其他4组（P〈0.05），Bcl-2免疫反应阳性细胞数明最少于其他4组（P〈0．05）。乌龙丹低、中、高剂量组神经细胞凋亡情况与相关基因表达与假手术组相近。 结论：乌龙丹具有减轻局灶性脑缺血神经细胞结构的病理损伤，对抗细胞凋亡的神经保护作用，该作用发挥可能与乌龙丹影响脑缺血后Bcl-2，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3基因表达有关。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

31例误诊哮喘原因分析

目的通过对中央气道不全性梗阻和支气管结核、术后痰栓形成误诊为支气管哮喘的分析,探讨误诊原因及正确诊断的方法。方法对误诊为支气管哮喘的3l例患者的临床资料进行分析。结果临床特征以刺激性咳嗽为主,其次为活动后胸闷、气促,肺部闻及哮鸣音,胸部影像学多无特征性改变或极易漏诊,支气管舒张试验阳性率低,诊断前缺乏气管镜及病理检查,均误诊为支气管哮喘。结论中央气道不全梗阻性病变或炎性病变包括支气管结核、术后痰栓形成时原发疾病症状不典型,肺部影像学检查无异常表现或极易漏诊,故该类以表现为咳嗽、喘息、活动后胸闷,进而出现严重呼吸困难的患者常被误诊为支气管哮喘,延误诊治。支气管镜及病理检查再结合肺CT是鉴别诊断的重要方法。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据

目的评价胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据,以及纳入系统评价的临床随机对照试验（RCT）的方法学质量。方法检索Cochrane Library数据库（2009年第4期）中有关胰腺癌治疗的系统评价,并运用RewMan5.0.21对所纳入研究的偏倚进行评估。结果共检索到胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的系统评价、放化疗治疗不能手术的进展期胰腺癌的系统评价共2篇系统评价,共纳入79个RCT。依照Cochrane协作网推荐的质量评价方法,对所纳入RCT的偏倚进行评估,表明均存在不同程度的偏倚,方法学质量普遍较低。结论 Cochrane系统评价是公认的最高质量的研究证据,但目前缺少足够强度的证据来支持胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的疗效。其他治疗手段的疗效如胰腺癌围手术期的营养支持治疗等还需要通过进一步的完成系统评价来评估。建议推行临床试验透明化,实施临床试验注册制度以及按照CONSORT声明严格规范RCT的报告,以便于总结胰腺癌治疗的临床证据。     

护理干预对提高中风患者生活质量的效果观察

目的探讨提高中风患者生活质量的护理方法。方法将50例中风患者随机分为对照组23例和实验组27例,对照组给予针灸内科常规护理,实验组在此基础上给予心理护理和康复训练。结果两组患者治疗护理后日常生活活动(ADL)能力和贝克抑郁量表(BDI)评分均有好转,但实验组疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论实施针对性心理护理和康复训练可明显提高中风患者的治疗效果。     

中国人四肢瘫日常生活能力评定量表的信度研究

目的研究四肢瘫日常生活能力评定量表评测四肢瘫患者的重测信度及观察者间信度。方法由1位评定者应用四肢瘫日常生活能力评定量表对20例四肢瘫患者进行评定,评定后1周内再次对该患者进行评定;另1位评定者在第1位评定者初次评定后2 d内对该患者进行评定。结果第1位评定者两次评定总分的组内相关系数为0.994(P<0.01);第1位评定者与第2位评定者评定总分的组内相关系数为0.971(P<0.01)。结论四肢瘫日常生活能力评定量表具有良好的重测信度及观察者间信度。     

超声评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响

目的 探讨超声在评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响的价值。方法 回顾性收集经病理学证实为头颈部肿瘤、放疗前后的颈动脉超声资料以及其他基线资料完整的患者93例,比较放疗前后放疗侧颈动脉和非放疗侧颈动脉粥样硬化斑块和溃疡斑块的总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积。结果 放疗前后颈动脉超声检查的平均间隔时间为（6.1±1.9）年;放疗前放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积与非放疗侧比较差异均无统计学意义（P均>0.05）;放疗后放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积均较非放疗侧加重,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 放疗可导致头颈部肿瘤患者颈动脉粥样硬化斑块的形成和进展,且斑块具有易损性特点。     

乳腺叶状肿瘤的影像分析

目的 分析乳腺叶状肿瘤的X线钼靶摄片和超声表现.方法 收集经手术病理证实的19例乳腺叶状肿瘤,术前均行超声检查,其中15例行X线钼靶摄片,回顾分析其临床特点和影像学表现.结果 19例乳腺叶状肿瘤中,良性8例,交界性6例,恶性5例.15例患者X线钼靶摄片中病灶均为高密度孤立肿块影,呈圆形(8例)或浅分叶状(7例),边界清晰(10例)或部分不清(5例),部分肿块周边见"晕"征(4例).超声检查6例发现囊性变,6例表现为后方回声增强.病灶为圆形(8例)、浅分叶状(8例)或有角状突起(3例).所有病例均未发现腋下转移淋巴结及周围组织浸润等恶性征象.结论 认识乳腺叶状肿瘤的病理类型和临床特点,结合影像表现综合分析,可提高术前诊断率.     

肇庆市居民颈椎病流行病学调查

目的 :调查肇庆市居民颈椎病发病情况及相关问题。方法 :通过分层随机抽样选择该市区18～70岁居民5000人为研究对象 ,入户或至单位询问调查。结果 :该市居民颈椎病发病率为8.11% ,男女差异无显著性 ,随着年龄的增长 ,发病率逐渐增加。经多因素分析 :体位姿势不正确、情绪紧张、潮湿、疲劳是发病的主要诱因。结论 :该病严重影响肇庆市居民的健康 ,做好防治应从早做起 ,综合防治。