乙肝病毒的临床检测方法概论及比较

病毒性肝炎具有传染性强,传播途径复杂,流行面广泛,发病率高等特点,部分患者可演变成肝硬化和原发性肝细胞癌。因此病毒性肝炎的诊断工作在临床上极受重视。近年来,乙型肝炎病毒的实验室检测方法发展很快,为乙型肝炎的诊断、治疗、及研究提供了重要工具。现就乙型肝炎病毒检测技术及应用介绍如下。1免疫学检测方法及应用免疫学检测方法是目前临床上最常用的乙肝病毒检测方法,主要是检测乙型肝炎病毒感染过程中产生的抗原抗体免疫标志物。常规的乙型肝炎病毒免疫标志物的血清学检查为5项:HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HbcAb,即通常所说…     

新型冠状病毒核酸临床检测要点及经验

2019年12月以来,新型冠状病毒感染引起的肺炎病例数快速攀升。因患者体内病毒核酸的存在是目前唯一的确诊依据,而目前临床上普遍反映核酸检测阳性率不够理想,故对病毒核酸检测的实验室条件、检验人员及检测过程中各个环节都有较高要求。本文着重阐述了新型冠状病毒核酸检测各个环节中的检测要点、最新的行业规范及共识内容,同时探讨临床检测中的疑难问题,以期为新型冠状病毒所致疾病的准确诊断提供理论依据。     

丙肝病毒核心抗原检测的临床价值分析

目的 通过对4000例患者随机进行丙肝病毒筛查,分析丙肝病毒核心抗原在临床检测中的意义.方法 所有患者分别进行HCv-Ab检测,对其中的感染患者及高危患者再次进行HCV-cAg及HCV-RNA检测.结果 62例感染患者的HCV-cAg阳性率为47%,其中41例出现病毒复制;而37例高危患者的HCV-cAg阳性率为8%,2例出现病毒复制.结论 HCV-cAg的检测对丙型肝炎的预防传播,肝癌的辅助诊断以及丙肝患者的早期发现、诊断和最佳治疗时机提供依据.     

53例成人EB病毒感染相关疾病临床分析

目的 探讨近年来成人EB病毒感染相关疾病常见病种的构成、临床表现及病毒标志物特征.方法 分析了近3年来53例成人EB病毒感染相关疾病的种类及其临床特点,采用荧光定量PCR对外周血EB病毒DNA进行了定量检测,酶联免疫吸附法对EB病毒相关抗体进行了半定量检测,对切除淋巴结进行EBER-1原位杂交检测.结果 青年组EB病毒感染相关疾病发生率较高的为淋巴结炎、传染性单核细胞增多症及慢性活动性EB病毒感染等,中老年组发生率较高的为淋巴瘤.青年组EBV DNA、抗VCA-IgM抗体及抗EBEA抗体IgG的阳性率显著高于中老年组.结论 EB病毒感染相关疾病的发生与发病年龄关系密切,病毒标志物分析提示青年组EB病毒的复制及抗病毒体液免疫反应可能较中老年组活跃.     

临床用血中EB病毒核酸检测结果分析

目的探讨临床用血中EB病毒检测的应用价值,为降低输血感染提供依据。方法采用实时荧光定量PCR方法和酶联免疫吸附法,分别定量检测500例悬浮红细胞及100例新鲜冰冻血浆中EB病毒核酸载量,同时检测核酸阳性样本EB病毒相关抗体。结果检测500例悬浮红细胞样本中,EB-DNA阳性例数44例,阳性率为8.8%;该悬浮红细胞样本分离的血浆阳性40例,阳性率为8.0%;核酸阳性样本EB病毒壳抗原(VCA)IgG、EB病毒核抗原(EBNA1)均为阳性,阳性率100%。VCA抗体(IgA)、EB病毒壳抗原(VCA)IgM、EB病毒早期抗原(EA)IgG均为阴性。100例新鲜冰冻血浆EB-DNA均为阴性。结论临床用血EB病毒携带率较高,检测献血者EB病毒核酸、合理选择血液制品对减少输血感染具有重要意义。     

老年病毒性肝炎86例临床分析

为探讨老年病毒性肝炎的病原学及临床特点 ,对我院 1997年 7月至 1999年 6月收治的老年病毒性肝炎 86例及同期收治的非老年病毒性肝炎 ,随机选择 84例对照分析 ,现报道如下。1　资料与方法1.1　病例选择　老年组 86例中 ,男 5 9例 ,女 2 7例 ,年龄 6 0～80岁 ,平均 6 5 .9岁。非老年组 84例中 ,男 6 7例 ,女 17例 ,年龄18～ 5 0岁 ,平均 34 .6岁。1.2　检测方法　全部病例均检测肝功能 ,并用 EL ISA法检测HBV- M、抗 HAV- Ig M、抗 HCV、HDAg、抗 HDV- Ig M、抗 HEV-Ig M、抗 HEV- Ig G。2　结　果2 .1　病原学检测结果　老年…     

临床聚合酶链反应(PCR)测定的质量控制

我国临床PCR检测即将恢复,但在检测项目方面考虑临床实际需要将逐项放开,首批开放的检测项目有:结核分枝杆菌,沙眼衣原体、乙型肝炎病毒DNA及丙型肝炎病毒RNA、HLA.临床基因扩增实验室开展PCR检测这些项目,对其整个检测过程进行质量控制,可以保证其特异性与敏感性,防止假阴性与假阳性的发生.     

四种腹泻病毒抗原联检技术在临床儿童腹泻诊断中的应用价值

目的 评估四种腹泻病毒（轮状病毒、肠道腺病毒、诺如病毒、星状病毒）抗原联检技术在临床儿童腹泻病毒病原学检测中的应用价值.方法 采用荧光免疫法,四种腹泻病毒抗原联检技术（博晖腹泻四病毒联合检测系统）对临床采集的270份婴幼儿腹泻标本进行检测,并用进口的四种腹泻病毒酶免法单检试剂盒同时进行比对实验.结果 酶免法对轮状病毒、诺如病毒、肠道腺病毒及星状病毒的抗原阳性检出率分别为10.37％,14.81％,1.48％和2.96％;荧光免疫法的抗原阳性检出率分别为9.63％,10.37％,4.07％和2.22％.采用配对资料的χ^2检验进行统计分析,两种方法对轮状病毒、诺如病毒及肠道腺病毒的抗原阳性检出率差异有统计学意义（卡方值分别为121.710,4.685和47.592,P值分别为0.000,0.030和0.000,P值均＜0.05）,对星状病毒的抗原阳性检出率差异无统计学意义（卡方值为0.187,P值为0.665,P值＞0.05）;两种方法对轮状病毒的检测结果具有较好的一致性（Kappa值为0.558,0.4＜Kappa值＜0.75）,对诺如病毒、肠道腺病毒和星状病毒的检测结果一致性较差（Kappa值分别为0.142,-0.025和0.361,Kappa值均≤0.4）.结论 两种腹泻病毒检测方法之间除轮状病毒外,其它病毒检测结果的一致性较差,这些方法只可用于腹泻病原的初步筛查,确认必须进一步做培养或分子诊断.但是,在临床检测工效上,荧光免疫法有着明显的优势.     

腹泻4项病毒抗原检测在疑似食物中毒中的临床应用

目的探讨腹泻4项病毒抗原(轮状病毒、肠道腺病毒、诺如病毒、星状病毒)联合检测在疑似食物中毒中的应用价值。方法收集疑似食物中毒患者急性期粪便176份,采用荧光免疫层析法进行腹泻4项病毒抗原检测,同时进行致病菌培养鉴定。结果 176份疑似食物中毒患者粪便标本中,检出1株志贺菌,未检出其他致病菌;腹泻4项病毒抗原中轮状病毒、肠道腺病毒、诺如病毒、星状病毒抗原的检出率分别为9.66%、1.70%、14.77%、2.84%。结论应用腹泻4项病毒抗原联合检测可明确病毒病原体,及时识别和预警食源性疾病暴发。     

诺如病毒RNA检测的性能验证与临床应用

目的 对诺如病毒RNA检测试剂进行性能验证,并评估人群中诺如病毒的感染现况.方法 收集2020年12月至2021年7月北京协和医院各科室疑似诺如病毒感染的患者粪便样本,使用诺如病毒RNA检测试剂盒(PCR-荧光探针法,湖北朗德公司)进行检测,并从重复性、符合率、检测下限、抗干扰能力和交叉反应等方面对其检测性能进行评估....     

宫颈液基细胞与人乳头状病毒联合初筛宫颈癌的临床价值

目的:探讨宫颈液基细胞与人乳头状病毒联合检测在宫颈癌初筛中的临床价值。方法:选择2012年1月~2014年1月于我院接受宫颈癌初筛的500例妇女为研究对象,分别行宫颈液基细胞(TCT)、人乳头状病毒(HPV)及两者联合检测,观察各检查结果与最终病理诊断结果,比较TCT、HPV、TCT联合HPV检测的阳性预测值、敏感度及特异度。结果:TCT+HPV检查,阳性预测值75.00%,敏感度90.00%、特异度98.77%,其阳性预测值、敏感度与TCT(57.89%、55.00%)、HPV(40.00%、60.00%)比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:宫颈液基细胞与人乳头状病毒联合检测阳性预测值、敏感度、特异度高于单独检测,可作为宫颈癌初筛的重要手段。     

SARS病人实验室检查结果临床应用价值探讨

目的 探讨血象和SARS病毒IgG、IgM抗体检查在诊断SARS时的临床价值。方法 分别用血细胞计数仪和酶联免疫吸附试验检测SARS病人的血细胞和SARS病毒IgG、IgM抗体。结果 6例SARS病人均出现外周血白细胞总数、淋巴细胞绝对值降低及病毒IgG抗体阳性，其中2例出现IgM抗体阳性。结论 SARS早期诊断应充分注意患者的病史、X线胸片的征象及外周血白细胞计数尤其是淋巴细胞绝对值计数的动态变化。     

儿童手足口病咽拭子39例病毒检测及临床分析

目的:探讨手足口病(HFMD)患儿咽拭子病毒水平及其临床意义.方法:对39例HFMD患儿采集咽拭子(其中19例于恢复期采集咽拭子复查),以荧光定量RT-PCR方法检测病毒负荷量并做对比分析；用描述性流行病学方法对实验室确诊病例进行流行病学特征分析.结果:本组病例均为肠道病毒71型(EV71)检测阳性,其中合并甲型流感病毒、冠状病毒感染各1例,副流感病毒感染4例.急性期患儿EV71病毒负荷水平明显升高,恢复期病毒水平显著下降,8例恢复期患儿病毒检测阴性.结论:2010年秋冬季佛山地区儿童HFMD病原以EV71为主,在流行季节可出现流感病毒及其他呼吸道病毒混合感染.咽拭子荧光定量RT-PCR检测是儿童手足口病病原学诊断的快速有效手段.HFMD临床表现轻重与患儿咽部EV71病毒负荷量无相关性,患病早期病毒呈高水平表达,抗病毒治疗宜尽早实施.     

寨卡病毒检测技术的研究进展

寨卡病毒是一种经蚊媒传播的单链RNA病毒,属于黄病毒科黄病毒属,目前暂无靶向抗病毒药物及病毒疫苗。近年来,全球范围内屡次暴发寨卡病毒疫情,我国也陆续出现输入性感染病例,已严重威胁公共安全。寨卡病毒的实验室检测主要包括病毒分离培养、血清学检测、核酸检测及生物传感器检测等,该文就近年来寨卡病毒检测技术的研究进展进行综述。     

佛山地区手足口病病毒检测及临床特征

目的探讨手足口病(HFMD)患儿咽拭子的病毒水平及其临床意义。方法对105例HFMD患儿采集咽拭子(其中66例于恢复期采集咽拭子复查),以荧光定量RT-PCR方法检测病毒负荷量并做对比分析;用描述性流行病学方法对实验室确诊病例进行流行病学特征分析。结果本组病例中57例(54.3%)肠道病毒71型(EV71)检测阳性,28例(26.7%)柯萨奇病毒A16(CoxA16)检测阳性。其中合并甲型流感病毒感染1例,副流感病毒感染4例,冠状病毒感染1例。急性期患儿病毒负荷水平明显升高,恢复期病毒水平明显下降,部分(13例)恢复期患儿病毒检测阴性。结论咽拭子荧光定量RT-PCR检测是儿童HFMD的病原学诊断的快速有效手段。HFMD临床表现轻重与患儿咽部病毒负荷量无相关性。患病早期病毒呈高水平表达,抗病毒治疗宜尽早实施。     

常见腹泻病毒多重荧光逆转录聚合酶链反应检测方法的建立及临床应用

目的建立能同时检测星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒和诺如病毒的多重荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法。方法根据上述4种病毒基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析多重荧光RT-PCR的特异性、敏感性、灵敏度;以所建立方法对256例病毒性腹泻患者粪便标本进行检测,同时以基因测序进行验证。结果所建立的腹泻病毒多重荧光RT-PCR检测方法对具有星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒、诺如病毒特异性,灵敏度可达500 copy/mL。256例粪便标本中,星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒和诺如病毒的检出率分别为3.13%、42.97%、9.38%和10.16%,与基因测序比对结果相符。结论成功构建可用于常见腹泻病毒检测的多重荧光RT-PCR检测方法,该法具有快速、灵敏、特异等优点,可用于临床病原诊断。     

非嗜肝病毒所致急性肝损害36例临床分析

对36例病例检测甲~戊型肝炎病毒标志物,排除甲~戊型嗜肝病毒感染,于入院时及出院后3、6个月各查1次巨细胞病毒、柯萨奇病毒、单纯疱疹病毒特异性IgG、IgM抗体。结果36例非嗜肝病毒引起的急性肝炎中巨细胞病毒IgM抗体阳性12例,柯萨奇病毒IgM抗体阳性9例,单纯疱疹病毒IgM抗体阳性8例,2例线粒体抗体和抗核抗体阳性,不明原因者5例。     

快速诊断人细小病毒B19感染方法学比较研究

目的 比较本实验室自行构建的ELISA法与德国ELISA试剂盒方法及PCR法快速诊断人细小病毒B19感染的临床应用价值.方法 血液标本215份,分别采用B19病毒VP1独特区(VP1u)蛋白包被ELISA板建立B19病毒抗体检测方法(自行构建ELISA法),德国ELISA试剂盒方法检测标本B19病毒IgM与IgG,并采用PCR法检测B19病毒DNA,分析自行构建E1ISA法检测B19病毒的敏感性、特异性及准确度.结果 自行构建的B19病毒ELISA体系最佳抗原包被量为25 ng/孔,最佳标本血清稀释倍数为1∶ 200;以德国B19病毒ELISA试剂盒为对照,自行构建ELISA法检测B19病毒IgM的敏感性、特异性及准确度分别为79.07％,87.18％,94.89％,检测B19病毒IgG的敏感性、特异性及准确度分别为88.46％,90.79％,93.53％;以PCR法检测B19病毒DNA为标准,自行构建ELISA法检测B19病毒IgG的敏感性、特异性及准确度分别为90.32％,77.77％,95.71％.结论 本实验室自行构建的ELISA检测方法与德国B19病毒抗体检测ELISA试剂盒法及PCR法检测B19病毒DNA有较好一致性,可作为B19病毒感染常规诊断方法.     

肝脏相关指标水平在肝脏疾病中的临床应用

目的探讨甘胆酸(CG) 、胆红素、氨基转移酶等临床肝脏相关指标单独及联合检测在不同类型肝脏疾病中的临床应用价值。方法收集2017年1月至2018年5月苏州市第五人民医院就诊的250例肝病患者作为疾病组,其中慢性重型乙型病毒性肝炎患者95例,自身免疫性肝炎患者48例,急性黄疸型病毒性肝炎患者68例,戊型病毒性肝炎胆汁淤积型患者39例, 另收集健康人对照组50例。采集各组静脉血标本,分离血清及血浆,并检测总胆汁酸(TBA) CG、总胆红素(T-Bil)、天门冬氨酸氨基转移酶( AST)、丙氨酸氨基转移酶( ALT)、清蛋白(Alb)、纤维蛋白原(Fg)的表达水平。GC指标与其他指标的相关性分析采用Spearman分析, ROC曲线评估各指标单独及联合检测筛查病毒性肝病的临床价值。结果CG 、TBA、T-Bil. AST、ALT、Alb和Fg指标水平在各组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。T-Bil 在慢性重型乙型病毒性肝炎组中的表达水平最高,TBA在戊型病毒性肝炎胆汁淤积型组中的表达水平最高,AST和ALT在自身免疫性肝炎组中的表达水平最高。CG水平在慢性重型乙型病毒性肝炎组中与TBA相关性最高(r=0.784),在自身免疫性肝炎组中与T-Bil水平相关性最高(r=0.597),在急性黄痘型病毒性肝炎组中与T-Bil 水平相关性最高(r=0.638),在戊型病毒性肝炎胆汁淤积型患者组中与TBA水平相关性最高(r=0.762)。CG、TBA、T-Bil、AST、ALT单独及TBA、CG、T-Bil三者联合检测筛查病毒性肝病的AUCROC分别为0.697( 0.638~0.756)、0.901 (0.865 ~0.937)、0.693(0.634-0.752)、0.652(0.590~0.714)、0.626( 0.563~ 0.689)和0.994(0.990 ~0.999),敏感性分别为44.0% 、78.4% .44.8%、36.6% .35.1%和89.6%,特异性分别为74.4% .88.0% .75.3%、72. 1% .72.3%和100%。结论对于肝脏疾病患者进行CG、TBA、T-Bil、AST、ALT、Alb和Fg单独及联合检测有望用于评估肝脏疾病的种类及严重程度。     

3种不同方法检测乙型肝炎病毒的诊断性能比较

目的比较酶联免疫法(ELISA)、电化学发光法(ECLIA)及聚合酶链式反应法(PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)对临床诊断的对比分析。方法应用ELISA、ECLIA及PCR法同时检测200例HBV患者或HBV携带者血清标本的HBV病毒,比较不同方法 HBV病毒检出率差异。结果 ELISA对HBV病毒有5份漏检,而PCR、ECLIA没有。PCR、ECLIA和ELISA方法对HBV的检测结果与临床符合率分别为99.5%、100.0%及93.5%。HBV-DNA的检测结果与ECLIA法检测HBV病毒一致性较好。结论 ELISA分别与ECLIA及PCR检测HBV病毒的检出率有显著性差异,ELISA比较适合初筛,ECLIA相对准确性更好一些,而PCR检测HBV-DNA用于判断体内HBV病毒复制与否。