灵芝孢子粉增强免疫力模型的建立及流式细胞术检测的研究

目的:探讨环磷酰胺建立的免疫低下动物模型应用于保健食品增强免疫力检验的研究,并试图应用流式细胞术研究小鼠自然杀伤细胞(NK)细胞分化抗原CD69+/NKG2D+和T淋巴细胞分化抗原CD69+/CD3+检测在免疫低下动物模型评价中的应用。方法:以环磷酰胺一次较大剂量造模、适时强化建立免疫低下模型,灌胃给予灵芝孢子粉,30 d后处死,取外周血和脾,分别检测小鼠外周血自然杀伤细胞(NK)亚群CD69+/NKG2D+和外周血T淋巴细胞CD69+/CD3+亚群,同时进行脾NK细胞活性测定、ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,观察环磷酰胺对外周血T淋巴细胞、NK细胞免疫功能的影响。结果:灵芝孢子粉可使环磷酰胺降低的小鼠外周血和脾的活化的NK细胞和T淋巴细胞比例及T淋巴细胞转化增殖能力、脾NK细胞活性增强。结论:灵芝孢子粉可有效增强小鼠细胞免疫功能,流式细胞术检测T淋巴细胞和NK细胞分化抗原在免疫调节功能评价中有较好应用价值。     

免疫低下模型的建立及流式细胞术的检测研究

目的：探讨环磷酰胺致免疫低下模型的建立,并试图研究应用流式细胞术检测小鼠自然杀伤细胞（NK）和T淋巴细胞的应用。方法：以环磷酰胺强化注射、少量多次注射、一次大剂量注射分别建立免疫低下模型,30 d后处死,取外周血和脾,分别检测小鼠外周血自然杀伤细胞（NK）亚群和外周血T淋巴细胞亚群,同时进行脾NK细胞活性测定、ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,观察环磷酰胺对外周血T淋巴细胞、NK细胞免疫功能的影响。结果：环磷酰胺强化注射、少量多次注射均可使小鼠外周血和脾的活化的NK细胞和T淋巴细胞比例及T淋巴细胞转化增殖能力、脾NK细胞活性降低。结论：环磷酰胺强化注射可以长时降低小鼠细胞免疫功能的作用,适用于建立保健食品免疫低下模型;流式细胞术检测T淋巴细胞和NK细胞分化抗原在保健食品免疫调节功能评价中有较好应用价值。     

CD69+/NKG2D+比值在保健食品评价中应用

目的研究小鼠外周血自然杀伤细胞(NK)细胞分化抗原CD 69+/NKG2D+检测在保健食品免疫调节作用评价中的应用.方法以左旋咪唑25mg(kg·bw)连续灌胃3 d设立左旋咪唑阳性对照;进行小鼠外周血自然杀伤细胞(NK)亚群CD69+/NKG2D+检测和脾NK细胞活性测定试验,观察0.83,1.67g/(kg·bw)剂量组蛋白粉对小鼠NK细胞免疫功能的影响.结果与阴性对照组比较,左旋咪唑对照组和0.83,1.67g/(kg·bw)剂量组蛋白粉剂量组外周血NK细胞CD69-/NKG2D+、CD69+/NKG2D+比值以及脾NK细胞活性均明显升高.结论外周血NK细胞CD69+/NKG2D+检测与传统的NK细胞免疫检测结果有较好一致性,且方法敏感性较好,在保健食品免疫调节功能评价中有较好应用价值.     

CD69在急性髓系白血病患者外周血T淋巴细胞的表达及意义

目的检测急性髓系白血病患者外周血T淋巴细胞CD69的表达,评估T细胞活化状态,了解急性髓系白血病的免疫功能、状态。方法采用流式细胞术检测15例急性髓系白血病患者化疗前后外周血T淋巴细胞CD69的表达,同时以正常外周血标本作对照。结果急性髓系白血病组化疗前、化疗后CD69的表达均显著低于正常对照组(P<0.05),但化疗后CD69的表达较化疗前明显升高(P<0.05)。结论急性髓系白血病存在T细胞活化受抑、免疫功能受损。T细胞活化受抑可能是急性髓系白血病免疫逃逸的重要机制。CD69可能成为疗效评价的辅助指标及免疫治疗的潜在靶点。     

乌龙茶多糖对糖尿病鼠免疫功能的影响

目的:研究乌龙茶多糖(OTPS)对糖尿病(DM)模型鼠免疫功能的影响。方法:以链脲佐菌素复制Balb/CDM小鼠和WistarDM大鼠模型,依据卫生部保健食品功能学评价程序和检验方法,检测脏器/体重比值、迟发型变态反应(DTH)、半数溶血值(HC50)、腹腔巨噬细胞吞噬功能、自然杀伤细胞(NK)活性,血清IL-2,并用流式细胞仪(FCM)分析外周血免疫分子。结果:(1)OTPS能极显著提高DM小鼠NK细胞的活性,促进T细胞介导的DTH反应,增强巨噬细胞的吞噬功能以及提高血清HC50值,同时还能增加胸腺指数和脾指数。(2)FCM测试表明OTPS能降低DM鼠T淋巴细胞中毒性CD8T淋巴细胞比例,增加CD4T淋巴细胞,减少过度表达的NK细胞,降低活化的T淋巴细胞数量,从而减少IL-2的含量,纠正免疫功能紊乱现象。结论:OTPS对DM模型鼠有较好的免疫恢复功能。     

CD+69/CD+3比值和左旋咪唑对照在评价保健食品免疫调节作用中的应用研究

〔目的〕研究左旋咪唑阳性对照和外周血T淋巴细胞CD 6 9 CD 3检测在保健食品免疫调节作用评价中的应用。〔方法〕以左旋咪唑 ( 2 5mg kgbw)连续灌胃 3d的方法设立左旋咪唑阳性对照 ;进行外周血T淋巴细胞亚群CD 6 9 CD 3检测、ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验、NK细胞活性测定、迟发型变态反应试验 ,观察低、中、高剂量 (分别为 3 .75、7.5 0、15 .0ml kgbw)参茸膏对小鼠细胞免疫功能的影响。〔结果〕与阴性对照组比较 ,左旋咪唑对照组各项试验指标均明显升高 ,参茸膏低、中剂量组T淋巴细胞转化增殖能力、各剂量组外周血T淋巴细胞CD 6 9 CD 3比值以及中剂量组迟发型变态反应能力均明显升高。〔结论〕左旋咪唑有明显增强小鼠细胞免疫功能的作用 ,可以作为保健食品免疫调节功能评价中的阳性对照 ;外周血T淋巴细胞CD 6 9 CD 3检测与传统的细胞免疫检测结果有较好一致性 ,且方法敏感性较好 ,在保健食品免疫调节功能评价中有较好应用价值。     

胃癌患者外周血淋巴细胞免疫功能的变化及临床意义

目的检测胃癌患者外周血淋巴细胞免疫功能的变化,探讨其与胃癌新临床病理分期(TNM)及组织病理学分级的关系。方法流式细胞仪测定胃癌患者及正常对照组外周血淋巴细胞亚群及NK细胞数量。结果胃癌患者外周血CD3+、CD4+、NK、CD19+细胞数量及CD4+/CD8+比值较正常对照组明显下降(P<0.01),而CD8+细胞水平显著升高(P<0.01)。Ⅲ～Ⅳ期患者的CD3+细胞数、CD4+/CD8+比值、NK细胞数降低(P<0.05)。胃癌组织的分化程度与细胞免疫功能无明显相关性。结论胃癌患者外周血淋巴细胞免疫功能低下,且临床病理分期越晚,其免疫功能越低。检测淋巴细胞亚群、NK细胞可用于胃癌患者的免疫状态监测。     

胃癌患者外周血淋巴细胞免疫功能的变化及临床意义

目的 检测胃癌患者外周血淋巴细胞免疫功能的变化,探讨其与胃癌新临床病理分期（TNM）及组织病理学分级的关系。方法流式细胞仪测定胃癌患者及正常对照组外周血淋巴细胞亚群及NK细胞数量。结果胃癌患者外周血CD3^＋、CD4^＋、NK、CD19^＋细胞数量及CD4^＋／CD8^＋比值较正常对照组明显下降（P〈0．01）,而CD8^＋细胞水平显著升高（P〈0．01）。Ⅲ～Ⅳ期患者的CD3^＋细胞数、CD4^＋／CD8^＋比值、NK细胞数降低（P〈0．05）。胃癌组织的分化程度与细胞免疫功能无明显相关性。结论胃癌患者外周血淋巴细胞免疫功能低下,且临床病理分期越晚,其免疫功能越低。检测淋巴细胞亚群、NK细胞可用于胃癌患者的免疫状态监测。     

乳腺癌患者外周血T细胞亚群与NK、NKT细胞检测的临床意义

目的:检测乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群及NK、NKT细胞表达率的变化,探讨乳腺癌患者免疫状况与肿瘤分期的关系以及免疫指标变化在治疗前后的临床价值。方法 :采用荧光标记法与多参数流式细胞仪检测40例正常女性和120例乳腺癌患者的总T淋巴细胞(CD3+)、T辅助/T诱导细胞(CD3+CD4+)、T抑制/细胞毒细胞(CD3+CD8+)、自然杀伤细胞(NK)、NK样T细胞(NKT)的表达率,并进行统计学分析。结果:无淋巴结转移组乳腺癌患者治疗前CD3+、CD3+CD4、CD3+CD8+、CD4+/CD8+与对照组比较无统计学意义,NK、NKT显著低于对照组(P<0.05)。淋巴结转移组乳腺癌患者CD3+、CD3+CD4、CD3+CD8+、NK、NKT表达率均明显低于对照组(P<0.05)。经过综合治疗后乳腺癌组各项免疫指标均恢复到正常值。结论:外周血T细胞亚群的检测对判断乳腺癌患者的病情、临床分期有一定意义;经过治疗后能够有效地改善乳腺癌患者的免疫状态。     

化疗对乳腺癌患者外周血CD4~+CD25~+CD127~-调节性T细胞的影响

目的观察化疗对乳腺癌患者外周血免疫指标的变化并探讨其影响。方法采用流式细胞术分析129例乳腺癌患者化疗前后CD4+CD25+CD127-调节性T细胞占CD4+T细胞的比率及T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8;B淋巴细胞CD19;NK细胞(CD16+CD56)和CD4/CD8比值的动态变化。结果化疗后的乳腺癌患者CD4+CD25+CD127-调节性T细胞占CD4+细胞比率较化疗前降低,T淋巴细胞亚群中CD3、CD4、CD4/CD8增高,CD8、NK和CD19降低;乳腺癌患者外周血调节性T细胞的数量与临床分期和组织分化程度相关。结论乳腺癌患者化疗后调节性T细胞的数量降低,免疫调节抑制功能下降,免疫功能得到提高,但体液免疫及NK功能未见提高。