顽疣净对复发尖锐湿疣T细胞分泌Th1/TH2细胞因子的影响

目的:观察顽疣净含药血清对复发尖锐湿疣(CA)患者外周血T细胞分泌Th1/Th2细胞因子的影响。方法:ELISA法检测顽疣净含药血清对T细胞分泌IL-2I、L-4和IFN-γ的影响。结果:顽疣净能有效提高Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ水平,降低Th2型细胞因子IL-4表达。结论:顽疣净含药血清具有调整复发CA患者的Th1/Th2亚群平衡的作用。     

人脐血间充质干细胞抑制异体T淋巴细胞反应的实验及临床意义

目的:研究人脐血间充质干细胞(MSCs)对异体外周血T淋巴细胞抑制的影响.方法:分离、扩增脐血MSCs,流式细胞术检测表面标志以鉴定.取分离培养的脐血MSCs,与经分离的异体淋巴细胞共培养,在植物血凝素(PHA)刺激下,用MTT还原法测定细胞增殖,观察脐血MSCs对PHA刺激的T淋巴细胞转化抑制作用.采用ELISA检测培养上清中IFN-γ和IL-4的分泌水平.结果:脐血MSCs在PHA刺激下可抑制T淋巴细胞增殖,且其培养上清也具有抑制异体淋巴细胞增殖转化能力.ELISA检测7 d共培养上清中IFN-γ和IL-4两种细胞因子的含量,发现IFN-γ分泌水平下调、IL-4分泌水平部分上调.结论:脐血MSCs具有抑制异体淋巴细胞免疫反应,降低移植物抗宿主反应(GVHD)的作用.具有研究价值和应用潜能.     

抑制性寡脱氧核苷酸对小鼠CD4+Th1细胞功能性分化的影响

目的：观察抑制性寡脱氧核苷酸对小鼠脾脏CD4^＋T细胞Th1分化的影响。方法：分离小鼠脾脏淋巴细胞，以免疫磁珠阳性选择法纯化CD4^＋T细胞，以荧光活化细胞分拣术分析其分选纯度，在抗-CD3ε抗体、抗-CD28抗体和IL-12作用下，加入抑制性寡脱氧核苷酸或对照寡脱氧核苷酸培养72h后，用ELISA检测上清IFN-γ和IL-4的分泌，用RT-PCR检测细胞r—bet mRNA的表达。结果：抑制性寡脱氧核苷酸能明显抑制CD4^＋T细胞IFN-γ的分泌，促进IL-4的分泌，同时还抑制T-bet mRNA的表达。结论：在促Th1细胞因子刺激下，抑制性寡脱氧核苷酸对小鼠体外CD4^＋T细胞的功能性分化有作用，既促进Th2分化，又抑制Th1分化。     

麻黄-甘草药对对小鼠脾细胞的增殖以及Th1/Th2平衡的影响

目的研究麻黄-甘草药对对小鼠脾细胞的增殖以及在刀豆蛋白A刺激下对Th1/Th2平衡的影响,探讨其对免疫功能的作用与机制。方法利用MTT法考察不同质量浓度的药对及单体对脾淋巴细胞增殖的影响;药对干预刀豆蛋白A(5mg/L)建立的淋巴细胞Th1/Th2平衡模型,qPCR法检测药对及单体对刀豆蛋白A刺激条件下脾淋巴细胞Th1型常见标志物IFN-γ、T-bet及Th2型常见标志物IL-4、GATA3基因的表达,ELISA法检测IL-4与IFN-γ蛋白水平。结果 25~100mg/L浓度的麻黄-甘草药对对静息状态以及刀豆蛋白A诱导的脾细胞有促增殖作用;麻黄碱、伪麻黄碱对静息状态以及刀豆蛋白A诱导的脾细胞有促增殖作用;甘草苷与甘草酸在0.01~10μmol/L浓度范围内对脾细胞增殖未见明显影响。在调节Th1/Th2平衡方面,麻黄-甘草药对可以显著抑制IL-4与GATA3的表达,而对IFN-γ与T-bet的表达未见明显影响;其中麻黄碱能显著上调IFN-γ与T-bet的表达,伪麻黄碱既能抑制IL-4与GATA3的表达,也能抑制IFN-γ与T-bet的表达;甘草酸能抑制IL-4与GATA3的表达,同时能上调IFN-γ与T-bet的表达(P0.01);甘草苷对上述基因未见明显影响;药对及单体均能抑制IL-4的蛋白水平,其中以药对、麻黄碱与伪麻黄碱作用更明显(P0.05~0.01);药对与甘草苷能抑制IFN-γ的蛋白水平,麻黄碱、伪麻黄碱及甘草酸能提高IFN-γ的蛋白水平,其中甘草酸的作用最明显(P0.05)。结论麻黄-甘草药对及其单体能对静息状态与活化状态的脾细胞产生促增殖作用,并能通过调节Th1/Th2平衡影响机体的免疫功能。     

哮喘中Th1/Th2类细胞因子免疫失衡对神经生长因子表达的影响

目的:初步探讨支气管哮喘Th1/Th2类细胞因子免疫失衡对脾淋巴细胞神经生长因子(NGF)mRNA表达的影响.方法:采用鸡清卵蛋白建立SD大鼠哮喘模型,分离脾淋巴细胞并培养,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法测定细胞在刀豆素A(ConA)刺激下表达NGF mRNA的基础水平,并观察予γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)干预后NGF mRNA表达的改变.结果哮喘大鼠脾淋巴细胞在基础状态下具有表达NGF mRNA的功能,并在ConA刺激下呈时间依赖性增强.50 μg/L IL-4干预12 h、24 h、36 h及48 h时NGF mRNA相对表达量随时间延长逐渐增高,并分别与同时间点的基础值比较有统计学意义(均P＜0.01);0,10,50,100 μg/L的IL-4干预24 h时NGF mRNA表达量依次增高,分别比前一梯度低浓度干预组有显著增高(P＜0.05).10 μg/L IFN-γ干预12 h、24 h、36h、48 h时NGF mRNA相对表达量分别与同时间点的基础值相比有显著下降(均P＜0.01);0,1,10,50μg/L的IFN-γ干预24 h时NGF mRNA表达量依次减低,分别比前一梯度低浓度干预组有显著降低(P＜0.05).结论:在哮喘中Th2类细胞因子IL-4可上调淋巴细胞NGF mRNA表达,Th1类细胞因子IFN-γ可下调淋巴细胞NGF mRNA表达,两者均呈时间和浓度依赖性;Th1/Th2类细胞因子免疫失衡可能通过调控NGF mRNA表达间接促进其诱导神经源性炎症.     

Th1/Th2类细胞因子对哮喘大鼠脾淋巴细胞神经生长因子表达的影响

目的:初步探讨IL-13和IFN-γ对支气管哮喘大鼠脾淋巴细胞神经生长因子NGF表达的影响.方法:建立Wistar大鼠哮喘模型,分离脾淋巴细胞并培养,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法测定NGF mRNA的基础,12 h, 24 h水平,并观察予以干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-13(IL-13)干预后NGF mRNA表达的情况.结果:哮喘大鼠脾淋巴细胞在基础状态下具有表达NGF mRNA的功能,并在ConA刺激下呈时间依赖性增强,IL-13组随着干预时间的延长基础NGF mRNA表达量逐渐升高,呈现时间和浓度依赖性,并且至12 h后分别高于各时间点的空白对照组(均P＜0.01).而随着IFN-γ干预浓度的依次增高,NGF mRNA表达相对值却逐渐降低,也表现出浓度和时间依赖特征.结论:在哮喘中Th2类细胞因子IL-13可上调淋巴细胞NGF mRNA表达,Th1类细胞因子IFN-γ可下调淋巴细胞NGF mRNA表达,两者均呈时间和浓度依赖性;Th1/ Th2类细胞因子免疫失衡可能通过调控NGF mRNA表达间接促进其诱导神经源性气道炎症.     

人骨髓间充质干细胞对异体外周血T淋巴细胞的抑制作用及机制

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)体外对异体外周血T淋巴细胞的抑制作用及机制.方法:从骨髓中分离培养MSCs,反复贴壁进行纯化;用尼龙棉柱法纯化异体外周血T淋巴细胞;观察MSCs对植物血凝素(PHA)刺激下T淋巴细胞增殖的影响,用ELISA方法检测IFN-γ,IL-4水平变化.结果:MSCs对PHA诱导的T淋巴细胞增殖有抑制作用,并呈剂量依赖性;同时MSCs亦可抑制T淋巴细胞的IFN-γ分泌,但可促进IL-4的分泌.结论:MSCs对异体外周血T淋巴细胞的增殖有抑制作用,其作用可能与其影响T淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-4有关.     

协同刺激分子B7-1/2对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响

目的：观察协同刺激分子B7-1／2(CD80／CD86)对日本血吸虫感染小鼠后Th1／Th2细胞因子水平的影响，探讨B7-1／2介导Thl／Th2，免疫偏移对控制血吸虫虫卵肉芽肿的作用。方法：取小鼠感染后6、8、10和12w的脾淋巴细胞用抗CD80mAb和抗CD86mAb处理后培养。72h，用ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFN-γ和IL-4的表达水平的动态变化。结果：抗CD80mAb和抗CD86mAb对IFN-γ的抑制作用不明显，但二者均能显著抑制IL-4的表达水平，尤其是抗CD86mAb对IL-4抑制作用非常显著。结论：通过干预B7：CD28协同刺激途径可以调节Thl／Th2细胞因子的表达水平，而且B7-2分子对Th2反应的影响作用大于B7—1分子。B7：CD28协同刺激途径可以调节Th1／Th2免疫偏移，为控制日本血吸虫肉芽肿病变提供了一种新途径。     

IP-10对变应性接触性皮炎小鼠Th1/Th2型细胞因子表达的影响

目的:探讨干扰素诱导蛋白10(IP-10)对变应性接触性皮炎(ACD)小鼠体外培养淋巴细胞分泌Th1/Th2型细胞因子表达的影响,进一步探讨变应性接触性皮炎的发病机制.方法:建立ACD小鼠模型,分离纯化小鼠脾淋巴细胞,并和不同浓度的IP-10共培养,RT-PCR法检测与IP-10共同培养的小鼠脾淋巴细胞中IFN-γ及IL-4 mRNA水平,2-△△CT法分析结果.结果:IP-10高、中浓度组体外培养的ACD小鼠淋巴细胞IFN-γ mRNA的表达明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.01和P＜0.05),IP-10低浓度组体外培养的ACD小鼠淋巴细胞IFN-γ mRNA的表达与时照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).IP-10 3个浓度组之间比较,IFN-γmRNA表达差异均具有统计学意义(P＜0.01和P＜0.05);IP-10 3个浓度组之间及与对照组比较,体外培养的ACD小鼠淋巴细胞IL-4 mRNA的表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:IP-10可诱导IFN-γ生成增多,促使T细胞向Th1细胞趋化,使Th1/Th2分化失衡,促进了变应性接触性皮炎的发生发展.     

雷公藤内酯醇对试验性色素膜视网膜炎Th_1反应相关因子的抑制作用

目的:探讨雷公藤内酯醇（TP）对试验性色素膜视网膜炎（EAU）Th1反应相关因子的抑制作用。方法:用ELISA检测IL-12、IFN-γ水平;采用原位杂交染色法,观测TP对EAU的T淋巴细胞IL-12mRNA的表达的影响;采用电泳迁移率改变试验对EAU T淋巴细胞NF-AT活性检测。结果:①TP能有效的降低S-抗原诱导产生的EAU（P<0.05）;②TP能降低EAU T淋巴细胞IL-12、IFN-γ分泌水平;③P能抑制EAT淋巴细胞IL-12 mRNA的表达;④TP抑制EAU T淋巴细胞NF-AT活性。结论:TP对EAU的免疫抑制作用可能是通过抑制与Th1反应相关的调节因子使Th1反应减弱,而使EAU的发病率明显降低。     

系统性红斑狼疮合并冠状动脉性心脏病患者Th1／Th2失衡的研究

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）合并冠状动脉性心脏病（简称冠心病）患者的 Th1／Th2是否存在失衡状况。方法收集 SLE 患者（SLE 组）、SLE 合并冠心病患者（合并组）及健康对照者（对照组）外周血,real-time PCR 法检测外周血 Th1／Th2细胞转录因子 T-bet／GATA-3的表达;流式细胞术检测 Th1／Th2细胞内 IFN-γ及 IL-4水平;酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者外周血清中 IFN-γ及 IL-4水平并与对照组比较。结果 SLE 组患者外周血 Th1细胞转录因子 T-bet 表达水平、CD4＋ T 细胞内 IFN-γ分泌水平及血清 IFN-γ水平均明显低于对照组（P＜0．05）。合并组患者外周血 Th1细胞转录因子 T-bet 表达水平、CD4＋ T 细胞内 IFN-γ分泌水平及血清 IFN-γ水平均明显高于 SLE 组患者及对照组（P＜0．05）;合并组患者外周血 Th2细胞转录因子 GATA-3表达水平、CD4＋ T 细胞胞内 IL-4分泌水平及血清 IL-4水平均明显低于 SLE 组患者及对照组（ P ＜0．05）。结论 SLE合并冠心病患者存在 Th1优势活化的 Th1／Th2失衡状态,这种失衡状态可能与疾病的发生发展有关。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群比例和Th1/Th2细胞因子水平检测及其临床意义

目的：研究各型乙型肝炎患者和健康者外周血T淋巴细胞亚群和Th1/Th2细胞因子水平变及其临床意义,为诊断、治疗疾病提供实验依据。方法：采用流式细胞仪检测34例乙型肝炎患者（其中慢性乙型肝炎中度组14例,慢性乙型肝炎重度组7例,重型乙型肝炎组8例,急性乙型肝炎组5例）和20例健康对照者(对照组)的外周血CD3+、CD4+和CD8+T细胞占淋巴细胞的比率;采用酶联免疫吸附技术（ELISA）夹心法检测研究对象血清中IL-2、IL-4及IFN-γ水平的变化。结果：对照组比较,急性乙型肝炎患者外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞、血清IL-2、IFN-γ水平明显升高（P<0.05）;重型乙型肝炎患者CD3+、CD8+T淋巴细胞数量下降（P<0.05）,IFN-γ水平升高（P<0.05）;慢性乙型肝炎患者的IL-4和IFN-γ水平明显升高（P<0.05）。结论：Th1细胞因子在乙型肝炎病毒(HBV)感染的疾病发展中可能起一定的作用,HBV感染慢性化可能与Th2细胞因子增高有关。     

肝癌患者血清Th1/Th2细胞因子含量检测及其与机体免疫功能的关系

目的：研究肝癌患者血清中Th1/Th2细胞因子的含量及其与机体免疫功能的关系。方法：将在本院就诊的肝癌患者纳入研究的观察组,同期在我院体检的健康者纳入研究的对照组,采用酶联免疫吸附法检测两组受试者血清中Th1、Th2细胞因子以及补体C3和C4的含量,流式细胞法检测T细胞亚群含量。结果：（1）Th1/Th2细胞因子：观察组的Th1细胞因子肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、干扰素-γ（IFN-γ）含量低于对照组,Th2细胞因子白介素-6、10（IL-6、IL-10）含量高于对照组（P〈0.05）;（2）免疫功能：观察组的CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4含量低于对照组,CD8＋T细胞的含量高于对照组（P〈0.05）;（3）细胞因子与免疫功能的关系：TNF-a、IFN-γ含量与CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4的含量呈正相关,与CD8＋T细胞含量呈负相关;IL-6、IL-10含量与CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4的含量呈负相关,与CD8＋T细胞含量呈正相关。结论：肝癌患者存在Th1/Th2漂移,血清中Th1细胞因子TNF-a和IFN-γ含量降低、而Th2细胞因子IL-6、IL-10含量升高,且与机体的天然免疫和细胞免疫功能密切相关。     

口服抑毒调平液对慢性乙型肝炎患者Th1/Th2细胞因子的调节作用

目的观察抑毒调平液对慢性乙肝患者Th1/Th2细胞因子的影响.方法60例慢性乙型肝炎(中度)患者按随机双盲原则分为治疗组、对照组(每组30例).两组分别口服抑毒调平液或安慰剂.收集治疗前、治疗后停药时及停药3月末空腹血清标本,用酶联免疫吸附法检测细胞因子白细胞介素-2、白细胞介素-4、白细胞介素-12、干扰素-γ.另选30例年龄、性别与治疗组、对照组无差异的正常人作正常组.结果治疗前治疗组、对照组患者血清IL-2、IFN-γ、IL-12的水平及IFN-γ/IL-4明显低于正常人(P＜0.05),IL-4的含量明显高于正常人(P＜0.05),治疗组与对照组患者间上述各项指标比较均无显著差异(P＞0.05);治疗后停药时、停药3月末治疗组IL-2、IL-12、IFN-γ、IFN-γ/IL-4的值持续增加(P＜0.05),IL-4持续下降(P＜0.05),而对照组无明显变化(P＞0.05).结论抑毒调平液上调血清中IL-2、IL-12、IFN-r的含量及IFN-γ/IL-4的比值,下调IL-4的含量,促使Th1/Th2分泌的细胞因子比值恢复平衡,至少维持治疗结束后3个月.     

急性脑出血患者早期外周血干扰素-γ分泌水平与预后关系的研究

目的 观察急性脑出血患者早期外周血干扰素-γ(IFN-γ)分泌水平与病情预后的关系.方法 选取2015年7月至2016年8月在该院急诊科住院的急性脑出血患者66例作为试验组,体检中心健康人群60例作为空白对照组,分离其外周血单个核淋巴细胞(PBMC)及血浆,ELISA检测辅助T细胞(Th) 1/Th2类细胞因子[IFN-γ、白细胞介素(IL)-2、11-4及IL-10];流式细胞术检测胞内细胞因子;NIHSS量表分析试验组发病第1天及第30天病情变化;分析细胞因子与第30天NIHSS量表评分预后的关系.结果 两组外周血中IFN-γ差异有统计学意义(P＜0.05),IL-2、IL-4、IL-10差异无统计学意义(P＞0.05).试验组早期外周血IFN-γ分泌水平与预后之间存在正向相关(P＜0.05).结论 早期外周血IFN-γ水平增高与急性脑出血的预后不良相关.     

白细胞介素-18与白细胞介素-12协同增强肿瘤浸润淋巴细胞对胃癌细胞的杀伤作用

目的:研究白细胞介素-18(IL-18)与白细胞介素-12(IL-12)对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)杀伤功能的影响.方法:IL-18与IL-12共同刺激的TIL与人的胃癌细胞系SGC-7901共孵育后接种于BALB/c SCID小鼠皮下,测定小鼠肿瘤的生长大小并观察荷瘤小鼠的生存时间,酶联免疫吸附试验(ELISA方法)检测小鼠血清中Th1型细胞因子TNF-α、IFN-γ及Th2型细胞因子IL-10、IL-4的表达水平,同时体外测定NK细胞及CD8+T细胞的肿瘤杀伤活性.结果:IL-18与IL-12共同作用于TIL后,与对照组相比,SGC-7910细胞的荷瘤小鼠皮下肿瘤生长明显减慢,小鼠生存率明显延长;同时,两种细胞因子联合处理组荷瘤小鼠血清中细胞因子TNF-α、IFN-γ的水平明显增高,而IL-10与IL-4水平明显降低;体外LDH杀伤实验证实IL-18联合IL-12处理组NK细胞及CD8+T细胞杀伤活性明显提高.结论:IL-18与IL-12协同刺激能增强TIL对胃癌胞的杀伤功能.     

白念珠菌性外阴阴道炎患者Th1/Th2细胞因子的研究

目的:观察白念珠菌性外阴阴道炎患者阴道分泌物Th1/Th2细胞因子水平,探讨其在阴道局部免疫功能中的作用.方法:采用ELISA检测阴道分泌物中细胞因子IFN-γ、IL-12、IL-4及IFN-γ,IL-4表达情况.结果:念珠菌性外阴阴道炎组(VVC组)阴道灌洗液细胞因子IL-12明显高于正常对照组及复发性念珠菌性外阴阴道炎组(RVVC组)(P<0.05),RVVC组与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05);IFN-γ、IL-4在VVC组与RVVC组间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于正常对照组(P<0.05);VVC组与RVVC组IFN-γ/IL-4值均低于正常对照组(P<0.05).结论:VVC患者阴道局部存在Th2细胞极化,抑制Th1细胞增殖及免疫功能的发挥,局部免疫功能紊乱降低了对念珠菌感染的抵抗力.     

Effect of Tripterygium wilfordii on Th1, Th2 cytokines production in asthma patients

Objective: To observe the effect of Tripterygium wilfordii on Th1, Th2 cytokines in asthma patients for further study on the therapeutic mechanism. Methods: Twelve patients of middle or severe asthma were treated by Tripterygium polyglucoside 40 mg or 60 mg daily for 4 weeks. Blood of patients was collected before and after treatment for serum and peripheral blood mononuclear cells (PBMC) preparation. The prepared PBMCs were stimulated in vitro with Concanavalin A (ConA) for 6 hrs and followed by culturing with Triptolide for 24 hrs and then the supernatant was collected. The concentration of interleukin-2(IL-2),-4(IL-4), -5(IL-5) and interferon-γ(IFN-γ) in serum and in the supernatant were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA). Results: Serum levels of IL-2, IL-4 and IL-5 of patients decreased significantly after treatment of Tripterygium polyglucoside (P＜0.01), but IFN-γ level was under the detection sensitivity both before and after treatment. Triptolide could inhibit PBMC to secrete IL-2, IL-4 and IL-5 in vitro (P＜0.01), but IFN-γ was also under the detection sensitivity. Conclusion: The marked inhibition of Th2 cytokine expression by Tripterygium was the important mechanism of it in treating asthma. But the fact that Tripterygium also showed inhibition on Th1 cytokine indicated that the inhibition of Tripterygium on Th2 and Th1 cytokines was non-specific.     

无痛人流术对患者Th1/Th2细胞因子平衡的影响

目的:观察无痛人流术患者血浆Th1/Th2细胞因子的变化,评价麻醉下人工流产术对患者应激反应及免疫功能的影响。方法:选择做人工流产手术患者60例,随机分为2组,无痛人流组(A组)和普通人流组(B组),每组各30例,分别于开始手术前(T1)、扩宫口时(T2)、手术结束后30min(T3)三个时点,在患者非输液侧前臂采集静脉血2mL,采用ELASA法测定血浆IFN-γ和IL-10浓度。结果:丙泊酚-芬太尼静脉麻醉用于人工流产手术患者IFN-γ和IL-10浓度变化不大,而无麻醉组IFN-γ浓度显著降低,IL-10浓度显著升高。结论:无痛人流术减少了患者的痛苦,术中便于操作,缩短了手术时间,预防人工流产综合征的发生,降低了病人因手术刺激引起的血浆IFN-γ和IL-10变化,有效抑制应激反应,保护机体免疫功能。