金纳多对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡和caspase-3表达的影响

目的 探讨金纳多对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及caspase-3表达的影响。方法 线拴法制作大鼠脑缺血再灌注模型；30只健康成年SD大鼠随机分3组：假手术组、模型组、金纳多治疗组；每组于脑缺血2h再灌注24h行脑灌注固定取材，采用苏木素-伊红（HE）染色以观察梗死灶的部位和范围；采用原位末端标记法（TUNEL）及免疫组化染色检测脑组织凋亡细胞数及caspase-3蛋白表达。结果 与其它两组相比，金纳多治疗组脑组织病理变化明显减轻，神经细胞凋亡、caspase-3蛋白表达明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 金纳多对大鼠缺血性脑损伤有保护作用，下调caspase-3蛋白表达减少神经细胞凋亡可能是其主要机制之一。     

人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注大鼠nNOS，iNOS表达的影响

【摘要】 目的 探讨人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织一氧化氮合酶（NOS）表达的影响。方法 将大鼠随机分成假手术组,模型组（脑缺血再灌注损伤组）,人参皂苷Rg1 10,20,40mg/kg组,尼莫地平组（阳性药物对照组）,每组10只。采用大鼠中动脉栓塞法制作大鼠脑缺血再灌注模型,观察大鼠再灌注后神经功能缺损情况,采用比色法检测大鼠nNOS,iNOS和一氧化氮（NO）的含量,应用免疫组化和免疫印迹法检测脑组织缺血再灌注后nNOS,iNOS的表达。结果 （1）人参皂苷Rg1各组大鼠脑缺血后神经功能评分明显低于模型组（p<0.05）;（2）与模型组相比,人参皂苷Rg1各组随浓度增高nNOS含量及表达增高（p<0.05）,iNOS含量及表达明显降低（p<0.05）;（3）免疫组化和免疫印迹的结果也证明这一趋势。结论 人参皂苷Rg1防治大鼠脑缺血再灌注损伤的机制可能与激活nNOS,抑制iNOS有关,且以高剂量效果较好。     

不同剂量雌激素对大鼠脑缺血再灌注的脑保护作用研究

目的观察不同剂量雌激素对大鼠脑缺血再灌注损伤后的脑保护作用。方法雄性SD大鼠200只,随机分为5大组：假手术组（SO组）,缺血-再灌注组（I/R组）,雌激素大剂量组（EC组）、中剂量组（EB组）、小剂量组（EA组）,每组40只,然后建立大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血再灌注模型,观察神经功能缺损程度及神经元凋亡,比较不同剂量雌激素组和模型组的异同。结果不同剂量的雌激素组,神经元凋亡情况及神经功能评分均明显低于缺血再灌注组（P〈0.05）。结论雌激素对大鼠脑缺血再灌注损伤有显著的神经保护作用。     

黄芪提取物对大鼠全脑缺血再灌后炎症反应的影响

目的:探讨黄芪提取物对大鼠全脑缺血再灌后炎症反应的影响。方法:采用四血管阻塞法,复制大鼠全脑缺血再灌注模型;观察黄芪提取物对大鼠全脑缺血再灌后外周血白细胞和中性粒细胞计数、脑组织皮质和海马骨髓过氧化物酶(MPO)活性的影响;并对脑组织皮质做病理学检查。结果:与假手术组相比,模型组大鼠全脑缺血再灌注后外周血白细胞和中性粒细胞计数、脑组织皮质和海马MPO活性均明显升高;与模型组相比,黄芪提取物(20、40、80mg·kg-1)均可降低大鼠全脑缺血再灌注后升高的外周血白细胞和中性粒细胞计数、降低脑组织升高的皮质和海马MPO活性;改善脑组织皮质的缺血性改变。结论:黄芪提取物对大鼠全脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用,其作用机制可能与其抗炎作用有关。     

黄芪提取物对局灶性脑缺血再灌注损伤的抗氧化及线粒体保护作用

目的　研究黄芪提取物 (Extractofastragalus,EA)对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的抗氧化及线粒体保护作用。方法　采用栓线法复制局灶性脑缺血 (MCAO)再灌注损伤模型,观察EA对大鼠脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸 (LD)的影响;检测脑组织线粒体组分中的SOD、MDA含量及ATP酶活性的变化 ;电镜观察缺血再灌注后脑组织神经元超微结构的改变。结果　EA对大鼠MCAO2h再灌注 24h后脑组织及其线粒体组分中SOD活性的降低有明显的抑制作用,能抑制大鼠脑组织和脑组织线粒体组分中MDA含量的增加,能抑制大鼠脑组织LD含量的增加; EA可明显提高脑组织线粒体组分中Na+,K+ ATPase,Ca2+,Mg2+ ATPase活性;电镜照片显示EA组能改善脑组织神经元在脑缺血再灌注后的结构破坏情况。结论　EA对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用的机制可能与其抗脂质过氧化和保护线粒体的作用有关。     

山茶花总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究山茶花总黄酮（TFC）对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法pulsinelli方法制成全脑缺血模型，大鼠全脑缺血30min再灌注40min后，按V级记录脑缺血前、缺血30min及再灌注40min后的脑电图（EEG），采用荧光指示剂Fura-2定量测定大鼠前脑皮层组织细胞内游离钙离子浓度，测定超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮合酶（NOS）活性和丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量。结果各模型组大鼠脑缺血5min内，脑电显受抑变平。     

黄芪提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后炎症因子及细胞凋亡的作用

目的研究黄芪提取物(EA)对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法采用线栓法大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,以免疫组化法观察EA对缺血再灌注后大鼠脑组织中TNFα表达的影响、以放免法观察对IL1β水平的影响、以TUNEL法观察对脑组织细胞凋亡的影响。结果与模型组比较,EA(20、40、80mg·kg-1,ig)能减少TNFα的表达、降低IL1β水平和减少细胞凋亡数。结论EA对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织中TNFα及IL1β的升高和神经元的凋亡有明显的抑制作用。     

疏血通对大鼠脑缺血再灌注后TNF—a表达的影响

目的本试验通过观察疏血通对大鼠脑缺血再灌注后TNF-a含量的影响,探讨其保护作用及作用机制。方法Wistor雌、雄性大鼠共42只,随机分为假手术组、盐水对照组及疏血通用药组,对照组及用药组再进一步分为3、6、24h,根据Koizumi线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型（MCAO）。用免疫组化检测血清和脑组织匀浆肿瘤坏死因子TNF—a含量。结果TNF-a含量假手术组几乎无TNF-a的表达,盐水组TNF—a表达3h开始升高,于6h达到高峰并逐渐下降。用药组较盐水组TNF—a含量明显减少P〈0．01。结论疏血通对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与减少TNF-a含量有关。     

热敏灸对脑缺血再灌注损伤大鼠SOD、MDA的影响

目的 观察热敏灸对局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠超氧化物歧化酶 （SOD） 的活性、 表达和丙二醛（MDA） 含量的影响， 以阐明热敏灸减轻脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法 雄性SD大鼠36只， 分为假手术组、 模型组、 艾灸组和热敏灸组。采用线栓法闭塞大脑中动脉2 h后进行再灌注， 制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型； 比色法测定SOD活性和MDA含量； Western blot技术检测大鼠大脑皮质SOD2蛋白的表达。结果 热敏灸组大鼠血清和大脑皮质SOD活性 （22.78±1.31） U/mL、（4 909.6±1 345.6） U/g均高于模型组 （20.17±1.12） U/mL、（2 602.0±1 515.5） U/g， 血清和大脑皮质MDA含量 （3.78±2.00） μmol/L、（1 226.5±38.4） nmol/g均低于模型组 （16.82±6.70） μmol/L、（1 905.6±478.6） nmol/g； 大脑皮质SOD2蛋白表达量 （0.974±0.166） 高于模型组的 （0.702±0.040）。结论 热敏灸具有减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用， 提高SOD活性和表达、 降低氧自由基含量可能是其作用机制之一。     

银杏叶提取物对局灶性脑缺血/再灌注大鼠突触素表达的影响

目的：研究银杏叶标准提取物（EGB）对局灶性脑缺血／再灌注损伤（I／R）后突触素表达的影响．并探讨其可能的机制。方法：Wistar大鼠随机分为假手术组,I／R模型对照组和EGB干预组,采用线栓法制造大鼠大脑中动脉阻塞／再灌注（MCAO／R）模型,MCAO2h后恢复再灌注．用免疫组化方法检测再灌注后1d、3d、7d、14d、21d五个时间点突触素（SYN）的表达。结果：I／R对照组自再灌注1d起,梗死灶周围皮质SYN表达开始下降（P〈0．05）．3d降至最低（P〈0．01）,7d开始逐渐回升,14d超过正常水平（P〈0．05）。EGB干预组．从1d后各时间点SYN表达显著高于I／R对照组（P〈0．05）。结论：I／R大鼠术后SYN表达变化明显,表明脑缺血再灌注损伤后存在突触可塑性．EGB可以易化这种突触可塑性。     

黄芪提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注血脑屏障损伤的影响

目的 研究黄芪提取物(extract of astragalus,EA)对大鼠局灶性脑缺血(MCAO)再灌注的血脑屏障损伤的影响。方法 采用线栓法制备MCAO再灌注模型,观察EA对缺血再灌注大鼠的神经功能障碍、脑梗死体积和脑含水量、外周血循环内皮细胞(CEC)含量、缺血脑组织中细胞间粘附分子(ICAM-1)的表达、缺血侧脑组织皮质血脑屏障超微结构的病理学变化的影响。结果 EA80 mg·kg^-1,EA(40,80 mg·kg^-1)、EA(20,40,80 mg·kg^-1)可分别改善缺血再灌注2,8,24 h大鼠的神经功能障碍;能明显降低外周血中的CEC含量,明显减轻缺血脑组织的脑水肿和脑梗死体积,对脑缺血再灌注后血脑屏障超微结构的病理改变有一定的改善作用;能减少ICAM-1免疫反应阳性血管数。结论 EA对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有一定的保护作用,作用机制可能与其保护血管内皮细胞,减轻脑缺血再灌注后的血脑屏障损伤有关。     

纳洛酮对大鼠脑缺血再灌注后JNK3蛋白表达的影响

目的：观察纳洛酮对脑缺血再灌注损伤后海马区C—jun氨基末端激酶3（JNK3）表达的影响,探讨纳洛酮的脑保护作用机制。方法：采用线栓法制造大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注对照组、小剂量纳洛酮给药组、高剂量纳洛酮给药组、SP600125（JNK3抑制剂）给药组及其溶剂组;采用氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法检测大鼠缺血再灌注后脑梗死范围;采用免疫印迹法检测海马区JNK3的磷酸化水平。结果：高剂量纳洛酮干预组、SP600125干预组与缺血再灌注组相比脑梗死范围缩小,蛋白JNK3磷酸化水平显著降低;随着干预剂量增加,纳洛酮抑制蛋白JNK3磷酸化水平作用增强。结论：纳洛酮通过抑制脑缺血再灌注损伤后JNK3的磷酸化激活参与了对脑组织的部分保护性作用,其作用呈剂量依赖性。     

环磷酰胺对大鼠脑缺血再灌注后脑组织中肿瘤坏死因子-α影响的研究

目的 观察环磷酰胺对大鼠脑缺血再灌注后神经功能、脑组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法 36只雄性SD大鼠分为假手术组和脑缺血再灌注组。脑缺血再灌注组中包括环磷酰胺治疗组和生理盐水对照组，每组按脑缺血2h后再灌注2、4、6、24h又分为4个亚组。脑缺血再灌注组于脑缺血2h再灌注24h进行神经功能评分；并分别于再灌注后2、4、6、24h处死动物，用免疫组织化学法观察再灌注后不同时间点TNF-α的表达情况。结果 （1）环磷酰胺治疗组的神经功能评价明显好于生理盐水对照组。（2）脑缺血再灌注后，脑缺血坏死区周边TNF-α的表达增多，并于24h达高峰；环磷酰胺组在相同再灌注时间点的TNF-α的表达明显低于对照组。结论脑缺血再灌注后TNF-α的表达上调，参与了脑缺血再灌注损伤的过程。环磷酰胺治疗组神经功能好于对照组，TNF-α表达少于对照组，说明环磷酰胺有抑制细胞因子表达上调，具有神经保护的作用，为该治疗应用于临床提供了理论基础。     

二血管阻断加低血压法建立大鼠全脑缺血再灌注模型的实验研究

目的通过二血管阻断加低血压法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,探讨全脑缺血再灌注大鼠大脑组织结构变化,为脑复苏中的进一步神经保护作用研究提供条件。方法30只SD大鼠采用二血管阻断加低血压法制作大鼠全脑缺血再灌注模型;实验结束后,计算成功例数和死亡例数。开颅取大脑组织进行形态学观察。结果30只大鼠中,26只造模成功,成功率86．67％。全脑缺血再灌注大鼠大脑出现大量神经元坏死、胞浆浓缩、核固缩现象。结论二血管阻断加低血压法成模效果稳定,死亡率较低。能较好地建立大鼠全脑缺血再灌注模型,可为脑复苏的的深入研究提供良好实验基础。     

促红细胞生成素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的：观察脑缺血再灌注大鼠腹腔注射人重组促红细胞生成素（Epo）后，脑组织切片的病理形态及细胞凋亡指标caspase-3蛋白的变化。方法：应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺彬再灌注模型，应用免疫组化染色、原位末端标记法（TUNEL），检测脑缺血再灌注后各组大鼠凋亡细胞数和caspase-3蛋白的表达，经图像分析仪计算凋亡细胞数及测量阳性反应细胞光密度。结果：①治疗组海马CAl区和皮层神经细胞较缺血再灌组数目明显减少；②TUNEL法检测凋亡细胞数与caspase-3蛋白阳性反应细胞数统计学分析显示：再灌注组与假手术组比较、给药组与缺血再灌注组比较均有极显著性差异（P〈0．01），多次给药组与一次给药组比较差异显著（P〈0．05）。结论：促红细胞生成素对局灶性脑缺血再灌注大鼠具有神经保护作用，可能与其明显减少海马及皮层神经元细胞的凋亡数量以及降低caspase-3蛋白的表达有关。     

黄芪对脑缺血再灌注损伤c-fos/c-jun表达和细胞凋亡的影响

目的:探讨黄芪注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的保护作用。方法:采用线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉(MCA)血流2h,再灌注24h制成局灶性脑缺血再灌注损伤模型。将30只Wistar雄性大鼠随机分成假手术组、缺血再灌注组、黄芪组3组。造模前1h时黄芪组给与黄芪200mg/kg腹腔注射。假手术组、缺血再灌注组给予等剂量生理盐水。再灌注24h后断头取脑、切片,进行HE染色、c-fos和c-jun免疫组化染色和细胞凋亡检测。结果:缺血2h再灌注24h后,黄芪组和缺血再灌注组大鼠缺血侧皮层可检测到凋亡细胞,黄芪组凋亡细胞数明显少于缺血再灌注组,假手术组未见凋亡细胞;黄芪组和缺血再灌注组大鼠缺血侧皮层c-fos/c-jun阳性细胞数均高于假手术组,与缺血再灌注组相比,黄芪组大鼠缺血侧皮层c-fos/c-jun表达降低。结论:黄芪可抑制缺血再灌注损伤后缺血侧皮质的细胞凋亡。     

西比灵对大鼠脑缺血再灌注时凋亡相关基因c—fos与bcl—2蛋白表达的影响

目的：探讨西比灵对大鼠脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响。为临床应用西比灵治疗缺血性脑血管病提供更充分的理论依据。方法：对实验大鼠于脑缺血前应用西比灵进行干预。然后采用免疫组化法检测脑缺血再灌注不同时间内凋亡相关基因c-fos及bcl-2蛋白表达的变化。结果：与未用药组相比，西比灵组大鼠脑缺血后的梗死体积显著减小；西比灵组脑缺血再灌注时皮层和基底节区c-fos的表达明显下降，而bcl-2的表达明显增高。结论：西比灵可抑制脑缺血再灌注时细胞凋亡的发生，具有神经保护作用。     

麝香醒脑滴丸对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨麝香醒脑滴丸（Shexiang Xingnao dropping pills,SXD）对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法线栓法建立大鼠局灶性脑缺血（MCAO）再灌注模型,按 Bederson 的方法对 MCAO 再灌注0、4、8、22 h 时大鼠的神经功能损伤进行评分;测定脑梗死百分比、脑指数、脑含水量;检测血浆中血小板聚集率和脑组织超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）活性以及丙二醛（MDA）含量;HE 染色观察脑组织病理变化。结果与模型组比较,SXD（0．42、0．84 g·kg －1）对MCAO 再灌注大鼠的神经功能损伤评分有一定的改善作用,能减少脑梗死百分比、脑含水量、脑指数和血小板聚集率,提高脑组织 SOD 和 LDH 活性,降低脑组织中 MDA 含量,减轻脑组织皮质神经元的损伤。结论SXD 对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抗氧自由基损伤及抑制血小板聚集等有关。     

纳洛酮对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响

目的：研究纳洛酮在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的保护机制。方法：腔内线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。16只雄性Wistar大鼠随机分为缺血组及纳洛酮治疗组，采用TUNEL法检测各组大鼠脑组织于缺血再灌注各2．5h后神经细胞凋亡情况。结果：大鼠脑缺血再灌注2．5h后凋亡的神经细胞主要分布在梗死灶边缘，纳洛酮治疗组细胞凋亡数量低于缺血组(P＜0．05)。结论：纳洛酮具有减少大鼠脑组织缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的作用。纳洛酮具有抗脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

吗啡对大鼠脑缺血再灌注后脑含水量及S100β的影响

目的：探讨吗啡预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑含水量及脑脊液S100β的影响。方法：Pusinelli方法建立四动脉阻断全脑缺血模型：成年雄性大鼠36只,随机分为假手术组（n=12）、脑缺血再灌注组（n=12）、吗啡预处理组（n=12）。脑缺血8min,再灌注48h后,每组取6只大鼠断头取脑制作石蜡切片,HE染色观察海马区组织病理学改变;另取剩余6只大鼠于枕骨大孔抽脑脊液后立即断头取脑,干湿称重法测量脑含水量,酶联免疫吸附法检测脑脊液中S100β蛋白含量。结果：吗啡预处理组细胞受损的病理学改变显著轻于脑缺血再灌注组。吗啡预处理组脑含水量及S100β蛋白含量明显低于脑缺血再灌注组（P〈0.05或P〈0.01）。结论：吗啡预处理可减轻缺血性脑损伤,提高脑缺血耐受性。