中脑导水管周围灰质内催产素在电针镇痛中的作用及机制的实验研究

我们以往的工作表明 ,侧脑室和脊髓蛛网膜下腔内注射催产素 (ＯＴ)能明显提高大鼠电针镇痛效应 ,注射抗催产素血清 (ＡＯＴＳ)则能显著降低电针镇痛效应。提示 ,中枢神经系统内的催产素在电针镇痛的复杂过程中发挥着一定作用。中脑导水管周围灰质 (ＰＡＧ)是电针镇痛的关键部位 ,其内含有丰富的ＯＴ、ＯＴ神经末梢及ＯＴ受体 ,但中枢ＯＴ在电针镇痛中的作用是否与之有关 ,作用机制怎样 ?是一个引人关注的问题。本工作以钾离子透入法 ,以甩尾法作为疼痛指标 ,测定大鼠痛阈 ,观察ＰＡＧ注射ＯＴ、ＡＯＴＳ、纳洛酮 (Ｎｘ)、抗 β 内啡肽血清 (…     

中脑导水管周围灰质在电针镇痛和痛觉调制中的作用

我们对中脑导水管周围灰质(PAG)在针刺镇痛和痛觉调制中的作用进行了系列的研究，结果如下：     

血管紧张素Ⅱ在家兔中脑导水管周围灰质对抗电针镇痛并参与电针耐受的形成

本工作以2．0—2．6公斤的雄性家兔为实验对象，在一侧后肢相当于“足三里”和“昆仑”穴的部位进针，用辐射热照射家兔鼻唇部皮肤引起甩头的潜伏期(ERL，s)作为伤害性反应的指标。将血管紧张素Ⅱ(AⅡ)或AⅡ的抗血清注入中脑导水管周围灰质(PAG)或伏核内，观察AⅡ在电针镇痛和电针耐受中的作用。     

脊髓内催产素参与电针镇痛

<正> 催产素(Oxytocin,OT)是在下丘脑室旁核和视上核内合成的一种垂体肽类激素,除有促进排乳和使子宫收缩的作用外,它的另一些作用正日益引起人们的关注。一些研究表明,中枢神经系统内的OT在痛调制和针刺镇痛过程中发挥着一定作用,但脊髓水平的OT对电针镇痛是否发挥作用,     

家兔中脑导水管周围灰质（PAG）中八肽胆囊收缩素（CCK-8）对吗啡镇痛和电针镇痛的拮抗作用

CCK-8是目前所知作用最强的一种抗阿片肽。我们曾经报告，只要向大鼠脑室注射1-4ng的CCK-8即可显对抗吗啡镇痛和电针镇痛。为探讨CCK-8的中枢抗阿片作用部位及种属特异性，我们将CCK-8注入家兔PAG，观察其对吗啡镇痛和电针镇痛的影响。     

电刺激中脑导水管周围灰质对大脑皮层和脊髓慢痛反应的影响

本文以体感皮层诱发电位(C-CEP)为指标，观察中脑导水管周围灰质(PAG)对慢痛反应的影响，为探讨慢痛的调制提供资料。     

家兔下丘脑弓状核参与由中脑导水管周围灰质到伏核的上行镇痛通路

本室以往的工作表明，从中脑导水管周围灰质(PAG)有一条上行镇痛神经通路到达伏核，在伏核内5-羟色胺和甲啡肽参与镇痛信息的传递。本工作在家兔脑内埋植慢性套管，采用脑内微量注射抗体的方法研究下丘脑弓状核（ARH)及β-内啡肽(β-EP)是否参与上述镇痛神经通路。研究结果如下：     

电针对偏头痛大鼠中脑导水管周围灰质5-羟色胺7受体和血浆降钙素基因相关肽表达的影响

目的:探讨电针是否能通过调控中脑导水管周围灰质(PAG)5-羟色胺7(5-HT7)受体和外周血降钙素基因相关肽(CGRP)介导抗偏头痛。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和电针组,每组14只。反复电刺激大鼠上矢状窦区硬脑膜诱发神经源性偏头痛模型。对照组仅予颅内电极安置,电针组于硬脑膜电刺激后电针"风池"穴,每日1次,治疗6次。采用免疫荧光标记法和Western blot法检测PAG区5-HT7受体的表达,放射免疫法检测外周血CGRP含量。结果:与对照组比较,反复硬脑膜电刺激造模后PAG区5-HT7受体阳性神经元数目和蛋白相对表达量及外周血CGRP含量显著增高(均P0.001);与模型组比较,电针组5-HT7阳性神经元数目和蛋白相对表达量显著降低(P0.01),外周血CGRP含量降低(P0.05)。结论:电针"风池"穴可下调偏头痛大鼠PAG区5-HT7受体表达,降低其外周血CGRP含量。     

大鼠楔状核内微量注射TRH、ACh对中脑导水管周围灰质痛放电的影响

实验在60只SD大鼠上进行。采用细胞外记录方法，记录中脑导水管周围灰质（PAG）内痛兴奋神经元（PEN）的自发放电和伤害性刺激的诱发放电。主要观察中脑楔状核（NCF）内微量注射促甲状腺激素释放激素（TRH）和乙酰胆碱（ACh）对PAG内PEN的痛放电影响，以及TRH与NCF内胆碱能神经的关系。结果表明：（1）NCF内分别注入TRH（0．5μg／0．5μl）和ACh（2．5μg／0．5μl）均能明显抑制PAG内PEN的痛放电频率。而将等剂量TRH注入NCF背侧的下丘内，对PAG的痛放电则无明显影响。（2）预先注入阿托品（2．5μg／0．5μl）再注入TRH或ACh，阿托品能阻断ACh对PAG痛放电的抑制效应；但不影响TRH的抑制作用。（3）单独注入阿托品（2．5μg／0．5μl）对PAG的抑制效应也无明显影响。结果提示：外源性TRH和ACh都参与NCF对伤害性信息的调制作用，ACh的抑制效应是经m-受体介导的；而TRH的作用似乎与m-受体无关。     

电针对大鼠类痛经痛反应、脊髓κ-受体表达及中脑导水管周围灰质脑啡肽和β-内啡肽含量的影响

目的:观察电针同神经节段支配的不同经穴与非穴对实验性类痛经模型大鼠中枢痛觉调制系统内阿片肽类物质的影响,探讨经穴效应的特异性。方法:动情间期雌性SD大鼠80只,随机分为盐水组、模型组、三阴交组、悬钟组、非穴组,每组16只。除盐水组外,其余各组大鼠注射苯甲酸雌二醇及缩宫素制备类痛经模型。电针治疗20min,观察大鼠的扭体反应,并应用免疫组化法和酶联免疫吸附法分别检测大鼠相应节段脊髓背角浅层κ-受体的表达和中脑导水管周围灰质(PAG)内脑啡肽(ENK)、β-内啡肽(β-EP)的含量。结果:与盐水组相比,模型组扭体潜伏期明显缩短(P<0.01),扭体次数和评分明显增加(P<0.01)。与模型组相比,各电针组扭体评分和次数均明显减少(P<0.01),三阴交组扭体潜伏期明显延长(P<0.05);三阴交组各节段脊髓背角浅层κ-受体表达均明显增加(P<0.01),悬钟和非穴组仅分别在S1节段(P<0.05)和L6节段(P<0.01)表达明显增加;三阴交和悬钟组PAG内ENK(P<0.01,P<0.05)和β-EP(P<0.01)含量明显升高。各电针组之间相比,三阴交组L1、L2、L6节段κ-受体表达与悬钟组相比明显升高(P<0.01),三阴交组各节段κ-受体表达与非穴组相比均明显升高(P<0.01,P<0.05);三阴交组的β-EP含量与悬钟组相比明显升高(P<0.01),三阴交组的ENK和β-EP含量与非穴组相比均明显升高(P<0.01),悬钟组的β-EP含量与非穴组相比明显升高(P<0.05)。结论:电针同神经节段支配的穴位与非穴位均可缓解大鼠的类痛经反应,并可通过调节中枢痛觉调制系统内的阿片肽类物质而达到镇痛作用。但穴位不同,其调节程度不同,说明经穴效应具有相对特异性,这种特异性不仅与神经节段有关,而且与其所属经络有关。     

中缝大核内催产素在电针镇痛中的作用

目的 :探讨中缝大核 (NRM )内催产素 (OT)在电针镇痛中的作用 ,及其和内源性 5 HT在电针镇痛中的关系。方法 :以钾离子透入法引起大鼠甩尾反应的电流强度为痛行为反应指标 ,测定动物痛阈 ,观察NRM内注射催产素和噻庚啶对电针镇痛的影响。结果 :向大鼠NRM内微量注入催产素后 ,能明显增加电针镇痛的效应 ;而向NRM内注入噻庚啶后 ,可阻断催产素增加电针镇痛的效应。结论 :NRM内的催产素在电针镇痛的复杂过程中发挥着一定作用 ,且其效应可能是通过内源性 5 HT系统中介的。     

慢性坐骨神经损伤大鼠中脑导水管周围灰质MC4R的表达及HS014对热痛觉过敏的影响

目的观察大鼠慢性坐骨神经损伤(CCI)后不同时间点中脑导水管周围灰质(PAG)4型黑皮质素受体(MC4R)mRNA表达变化及给予选择性MC4R拮抗剂HS014对CCI大鼠疼痛行为学的影响。方法 1将42只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组6只、假手术组18只和CCI组18只,检测各组大鼠术前和术后3,7,14 d热缩足潜伏期(TWL),假手术组和CCI组分别于术后3,7,14 d,对照组于术后14 d TWL检测完成后处死大鼠,取PAG脑组织,用半定量RT-PCR法检测PAG脑区MC4R mRNA表达情况。2将30只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组6只、假手术组6只和CCI组18只,均先进行PAG置管。置管后7 d,CCI组随机分成CCI+NS组、CCI+HS014 5μg组和CCI+HS014 10μg组,每组6只。假手术组和CCI各组手术造模。术后7 d,CCI+NS组经导管注射生理盐水0.5μL,CCI+HS014 5μg组注射HS014 5μg/0.5μL,CCI+HS014 10μg组注射HS014 10μg/0.5μL。检测各组大鼠置管后7 d、术后7 d和干预后(注射后10~30 min完成检测)TWL。结果 CCI组大鼠术后3 d开始出现TWL缩短(P0.05),术后7 d和14 d TWL缩短更加明显(P均0.05),与对照组和假手术组比较差异均有统计学意义(P均0.05)。CCI组术后各时间点MC4RmRNA表达量均明显高于对照组和假手术组(P均0.05),并且随着CCI术后时间的推移,MC4RmRNA的表达量逐渐增高(P均0.05)。CCI各组大鼠术后7 d TWL明显低于置管后7 d(P均0.05);CCI+NS组干预后TWL与术后7 d比较差异无统计学意义(P0.05),而CCI+HS014 5μg组和CCI+HS014 10μg组干预后TWL均明显长于术后7 d和CCI+NS组(P均0.05),CCI+HS014 10μg组干预后TWL明显长于CCI+HS014 5μg组(P0.05)。结论 CCI可引起PAG中MC4RmRNA的表达增加,其选择性拮抗剂HS014可剂量依赖性减轻CCI大鼠的热痛觉过敏,提示PAG中MC4R的表达增加可能参与神经病理性疼痛的形成和维持。     

芎芷地龙汤对偏头痛模型中脑导水管周围灰质c-fos和NOS蛋白共存表达的影响

目的 研究芎芷地龙汤对偏头痛模型中脑导水管周围灰质c-fos和NOS蛋白共存表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠随机为4组:生理盐水组、模型组、舒马普坦组、中药治疗组.皮下注射NTG注射剂复制实验性偏头痛动物模型,经药物干预后在4小时、6小时两个时间点取材,采用免疫组化双标染色法测定导水管周围灰质c-fox和NOS的免疫阳性神经元的兴奋状态及其共存表达情况.结果 模型组c-fos阳性细胞数和NOS阳性细胞数增多,4小时多于6小时,两个时间点的阳性细胞数与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.01).中药组和舒马普坦组c-fos阳性细胞数和NOS阳性细胞数减少,两个时间点的阳性细胞数与模型组比较有显著性差异(P<0.01).结论 芎芷地龙汤可以减少由硝酸甘油诱导的致痛物质c-fos、NOS的表达,从而进一步减少导水管周围灰质神经元的兴奋性,阻止痛觉信息的传递.     

中脑导水管周围灰质对猫丘脑后核内脏大神经诱发放电的影响

本以强电流刺激猫内脏大神经传入纤维引起的丘脑后核单位放电为内脏痛的指标，观察电刺激中脑导水管周围灰质(PAG)对内脏痛的影响。     

青藤碱对偏头痛模型大鼠中脑导水管周围灰质区NF-κB和COX-2表达的影响

目的研究青藤碱对偏头痛大鼠中脑导水管周围灰质区(PAG)核转录因子-κB(NF-κB)和环氧化酶-2(COX-2)表达的影响,探讨青藤碱治疗偏头痛的可能机制。方法 60只健康SD大鼠随机分成对照组、模型组、尼美舒利组、青藤碱低、中、高剂量组,复制硝酸甘油型偏头痛大鼠。尼美舒利为阳性对照组,在制模、药物干预后,免疫组化检测大鼠PAG区NF-κB和COX-2阳性表达。结果 1与对照组比较,模型组PAG区NF-κB、COX-2表达明显增多,差异有统计学意义(P0.01);2与模型组比较,尼美舒利组和青藤碱高剂量组PAG区NF-κB、COX-2表达明显减少,差异有统计学意义(P0.01);3与尼美舒利组比较,青藤碱高剂量组PAG区NF-κB、COX-2表达无明显差异(P0.05)。结论 NF-κB、COX-2参与了偏头痛发病过程;青藤碱能较好地缓解硝酸甘油型偏头痛大鼠行为学变化,推测其作用机制可能是通过抑制PAG区NF-κB和COX-2的表达。     

电针对炎症痛大鼠痛阈及中缝大核、中缝背核和导水管周围灰质c-fos表达的影响

越来越多的研究均表明 ,不同类型的伤害性刺激可诱发ｃ ｆｏｓ在大鼠、小鼠、猫和豚鼠的脊髓和不同脑区中表达。本实验观察了大鼠在角叉菜胶致炎后 ,在痛觉调制密切相关的中缝大核、中缝背核和导水管周围灰质ｃ ｆｏｓ表达的变化 ,及电针镇痛作用对ｃ ｆｏｓ表达的影响。实验分成正常对照组、角叉菜胶致炎组和电针 角叉菜胶致炎组。大鼠脚掌注射角叉菜胶 (2 % ,0 .1ｍＬ)造成大鼠炎症痛模型 ,测定大鼠的痛阈变化。电针组动物 ,在角叉菜胶致炎前电针大鼠“足三里”和“昆仑”穴(疏密波 ,2Ｈｚ和 6 0Ｈｚ交替 ,强度 1～ 3ｍＡ) 30ｍｉｎ。大…     

侧脑室微量注射血管紧张素Ⅱ对大鼠中脑导水管周围灰质伤害性神经元电活动的影响

本实验用玻璃微电极记录技术,在５５只雄性ＳＤ大鼠ＰＡＧ区记录到６５个伤害性神经元,观察了 ＡＩＩ对 ＰＡＧ伤害性神经元电活动以及吗啡镇痛效应的影响。结果显示：①ＡＩＩ（５０ｎｇ、１μｇ、２μｇ／５μｌ,ｉ．ｃ．ｖ．）对ＰＡＧ区痛兴奋神经元（ＰＥＮ）电活动产生显著的兴奋效应;②９个ＰＡＧ痛抑制神经元（ＰＩＮ）在给 ＡＩＩ后 ８个产生抑制效应,一个无反应;③ＡＩＩ（５０ｎｇ、２μｇ／５μｇ,ｉ． ｃ． ｖ）部分翻转吗啡（ｉ．ｐ,２．５ｍｇ／ｋｇ体重）的抑制作用,两组间ＡＩＩ的作用有显著性差异。以上结果提示：ＡＩＩ可能通过易化ＰＡＧ区 ＰＥＮ、抑制 ＰＩＮ的电活动,从而调制伤害性信息的传递,拮抗吗啡镇痛。