雪旺细胞源神经营养因子的神经营养活性及其抗NO神经毒性 …

目的：研究雪旺细胞源神经营养因子对脊髓前角神经元的神经营养活性及对抗一氧化氮（ＮＯ）神经细胞毒性的作用。方法：分４组进行神经元培养：（１）营养因子组：加入不同浓度的雪旺细胞源神经营养因子；（２）ＮＯ组，加入ＮＯ体外供体硝普钠；（３）营养因子＋ＮＯ组；同时加入雪旺细胞源神经营养因子和硝普钠；（４）对照组：加Ｄ－Ｈａｎｋ，培养２天后，ＭＴＴ法观察各组细胞情况。结果：营养因子组ＯＤ值均明显高于对照组；Ｎ     

雪旺细胞源神经营养因子预防臂丛神经根性撕脱伤所致 …

目的 研究雪旺细胞源细胞神经营养因子（ＳＤＮＦ）对臂丛神经根性撕脱伤所致前角运动神经元死亡的保护作用。方法 选成年ＳＤ大鼠,制成颈６、７神经根性撕脱伤动物模型,损伤处定期应用ＳＤＮＦ,３周后观察损伤侧脊髓前角运动神经元的成活率和形态学变化,以及一氧化氮合酶（ＮＯＳ）表达的情况。结果 对照组６８．６％的脊髓前角运动神经元死亡,成活神经元胞体明显萎缩,同时表达ＮＯＳ神经元增多;实验组脊髓前角运动神经元     

雪旺细胞源神经营养因子预防臂丛神经根性撕脱伤所致运动神经元死亡

目的　研究雪旺细胞源神经营养因子（ Ｓ Ｄ Ｎ Ｆ）对臂丛神经根性撕脱伤所致前角运动神经元死亡的保护作用。方法　选成年 Ｓ Ｄ 大鼠,制成颈６、７神经根性撕脱伤动物模型,损伤处定期应用 Ｓ Ｄ Ｎ Ｆ,３ 周后观察损伤侧脊髓前角运动神经元的成活率和形态学变化,以及一氧化氮合酶（ Ｎ Ｏ Ｓ）表达的情况。结果　对照组６８６％ 的脊髓前角运动神经元死亡,成活神经元胞体明显萎缩,同时表达 Ｎ Ｏ Ｓ神经元增多;实验组脊髓前角运动神经元的死亡率较对照组降低３５％ ,成活神经元胞体无萎缩,表达 Ｎ Ｏ Ｓ神经元未见增多。结论　 Ｓ Ｄ Ｎ Ｆ对臂丛神经根性撕脱伤所致运动神经元死亡有明显的保护作用,一氧化氮在臂丛神经根性撕脱伤所致运动神经元死亡中起一定作用。     

雪旺细胞源神经营养因子对脊神经根性撕脱所致运动神经元死亡的保护作用

目的研究雪旺细胞源神经营养因子（ＳＤＮＦ）对臂丛神经根性撕脱所致前角运动神经元死亡的保护作用。方法于颈神经根性撕脱处应用ＳＤＮＦ,３周后观察损伤侧脊髓前角运动神经元的存活率和形态学变化以及ＮＯＳ表达的情况。结果对照组６８．６％的神经元死亡,存活神经元胞体明显萎缩,同时表达ＮＯＳ神经元增多;实验组的死亡率较对照组降低３５％,存活神经元胞体无萎缩,表达ＮＯＳ神经元未见增多。结论ＳＤＮＦ对脊髓前角运动神经元死亡有明显的保护作用,ＮＯ在臂丛神经根性撕脱所致运动神经元死亡中起一定作用。     

雪旺细胞源神经营养因子对脊神经根性撕脱所致运动神经元 …

目的 研究雪旺细胞源神经营养因子对臂丛神经根性撕脱所致前角运动神经元死亡的保护作用。方法 于颈神经根性撕脱处应用ＳＤＮＦ,３周后观察损伤侧脊髓前角运动神经元的存活率和形态学变化以及ＮＯＳ表达的情况。结果 对照组６８．６的神经元死亡,存活神经元胞体明显萎缩,同时表达ＮＯＳ神经元增多;实验组的死亡率较对照组降低３５％,存活神经元胞体无萎缩,表达ＮＯＳ神经元未见增多。     

大鼠胚胎脊髓移植后对损伤脊髓神经营养因子表达的影响

目的：研究大鼠胚胎脊髓移植对损伤脊髓神经营养因子表达的影响。方法：将孕１４ｄ大鼠胚胎脊髓组织移植到成鼠半切洞损伤的脊髓中,手术后采用免疫组织化学技术,对损伤脊髓组织中神经生长因子（ＮＧＦ）、脑源性神经生长因子（ＢＤＮＦ）、神经生长因子３（ＮＴ－３）、睫状神经生长因子（ＣＮＴＦ）进行定量分析。结果：移植组神经营养因子１周、２周、４周、都明显高于单纯损伤组,４周时移植组ＢＤＮＦ表达高于其它各组（Ｐ〈０     

雪旺细胞源神经营养因子在大鼠生长发育腰髓中的表达

目的：观察雪旺细胞源神经营养因子在大鼠生长发育腰髓中的表达。方法：取不同年龄的胎鼠、幼鼠及成年鼠的腰髓或相关组织，行常规免疫组织化学研究。结果：雪旺细胞源神经营养因子在成年大鼠腰髓的整个白质和灰质后角Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ层有较低表达。雪旺细胞源神经营养因子在胎龄14、15d开始有表达，胚胎时期表达先增高后下降，其中胎龄21d最高。出生后雪旺细胞源神经营养因子（SDNF）在腰髓中表达明显下降，其中第7、12d稍高。结论：SDNF在成年大鼠腰髓（包括背根神经节）有较低表达。SDNF在生长发育的腰髓中表达基本呈逐渐下降趋势。SDNF对大鼠脊髓的发育可能起促进作用。     

神经生长因子和脑源性神经营养因子基因转入雪旺细胞的实验 …

目的 神经生长因子（ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ＮＧＦ）和脑源性神经营养因子（ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＢＤＮＦ）是具有感觉和运动神经元营养活性的因子。为提高雪旺细胞（Ｓｃｈｗａｎｎ ｃｅｌｌ,ＳＣ）分泌ＮＧＦ和ＢＤＮＦ的能力,将ＮＧＦ和ＢＤＮＦ基因转入ＳＣ进行探讨。方法 用消化后的组织块法和差速离心法分离、纯化雪旺细胞。用脂质体转染法将ＮＧＦ     

神经营养因子治疗脊髓损伤的研究进展

神经营养因子治疗脊髓损伤的研究进展邓少丽１廖维宏１神经营养因子家族的居员包括神经生长因子（ＮＧＦ）、脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）、神经营养素Ⅲ（ＮＴ－３）、神经营养素Ⅳ／Ⅴ（ＮＴ－４／５）及新近发现的神经营养素Ⅵ（ＮＴ－６）等。它们在体内和离体情况...     

许旺细胞源神经营养因子对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的 了解许旺细胞源神经营养因子对神经损伤所致脊髓前角运动神经元死亡的保护作用。方法 选用出生３周ＳＤ鼠切断坐骨神经,神经近侧行旺细胞源神经营养因子或生理盐水,４周后观察腰４－５节段脊髓前角运动神经元的存活率和一氧化氮合成酶表达情况。结果术后４周,营养因子组神经元的存活率是９３．４％,生理盐一是５９．６％,两组一氧化氮合酶表达均未见增加。结论 许旺细胞源神经营养因子对员的俏髓前角运动神经元有明显     

雪旺细胞胞浆神经营养蛋白促进周围神经再生的实验

目的 研究雪旺细胞胞头神经营养蛋白（ＳＤＮＦ）对周围神经再生的影响。方法 选用９０只成年ＳＤ大鼠,在右侧坐骨神经造成长１０ｍｍ缺损,用植入血管的变性骨骼肌桥接神经缺损。分成三组,每组３０只。分别将分子量为２６、５８ｋｕ的ＳＤＮＦ和生理盐水（对照组）于术中、术后７及１４天注入肌桥的近段、中段和远段。术后均观察６个月。术后１５天开始,每隔１５天走足印一次,测定坐骨神经功能指数。术后１、３、６个月,每组     

骨髓基质细胞源性神经活性物质的提取与纯化

目的分离纯化骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)胞浆中神经营养蛋白,并验证其神经活性作用. 方法自小鼠股骨分离培养 MSCs,超声粉碎后离心并收集其上清液,超滤浓缩后收集大于10 ku浓缩蛋白液.Sephadex G-100层析、高效液相色谱分析(high performance liquid chromatography,HPLC)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)等技术分离神经活性蛋白,培养脊髓运动神经元,通过MTT法及观察细胞形态来验证其神经活性作用. 结果 MSCs胞浆上清液经Sephadex G-100层析后发现,Ⅱ峰对神经细胞生长有促进作用.对Ⅱ峰行HPLC分析发现,A峰对神经细胞生长有明显促进作用.对A峰行SDS-PAGE分析,提示为单一蛋白带,分子量为13 ku. 结论 MSCs胞浆中含有神经营养蛋白,其分子量为13 ku.     

Growth cone collapsing effect of lidocaine on DRG neurons is partially reversed by several neurotrophic factors

BACKGROUND: Local anesthetics were suggested to have a potential for neurotoxicity in both clinical reports and laboratory experiments. Growing neurons have been shown to be susceptible to the toxic effects of local anesthetics in culture. These findings have generated the interest in factors that would rescue the neurons affected by the neurotoxicity of local anesthetics. METHODS: Primary cultured dorsal root ganglia were isolated from age-matched chick embryos and exposed to lidocaine. After 60 min of exposure, the culture media were replaced to wash out the lidocaine. Neurotrophic factors (NTFs)-brain-derived neurotrophic factor, glial-derived neurotrophic factor, or neurotrophin 3-were added to the replacement media to examine the capacity of these NTFs to support the reversibility of the lidocaine-induced growth cone collapse. The growth cone collapse assay was applied a quantitative method of assessment. RESULTS: When any of the three NTFs was added to the replacement media at a minimum concentration of 10 ng/ml, significantly high reversibility of the lidocaine-induced growth cone collapse was observed, especially at 48 h after washout (P < 0.05). At that time point, there was no significant difference between the values of growth cone collapse percentage in the cells that were exposed to lidocaine and supported by the NTFs after the washout, and the control cells (not exposed to lidocaine) (P > 0.05). CONCLUSION: The NTFs-brain-derived neurotrophic factor, glial-derived neurotrophic factor, and neurotrophin 3-were demonstrated to support the reversibility of lidocaine-induced growth cone collapse in primary cultured sensory neurons, an effect that was concentration- and time-dependent. Because similar effects were observed after tetracaine washout, the supporting effects of NTFs may not be specific to lidocaine.     

不同浓度碱性成纤维细胞生长因子对体外培养兔肌腱细胞增殖的影响

目的探讨不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养兔肌腱细胞增殖的影响,并确定促进肌腱细胞增殖的最佳浓度。方法在体外培养第2代兔肌腱细胞的培养液中分别加入不同浓度(0.5、1、2、5、10、20、30、40、50μg/L)的bFGF,继续培养48 h,噻唑蓝(MTT)法染色,在酶联免疫检测仪上测出不同浓度bFGF组光密度(OD)值。结果与对照组OD均值相比:5、10、20、30、40、50μg/L bFGF组差异均有统计学意义(P<0.05);各组OD均值随bFGF浓度的增加,先逐渐增大(5～20μg/L),达到峰值后又逐渐降低(20～50μg/L)。结论 bFGF有明显促肌腱细胞增殖的作用,且与浓度有一定相关性,即促肌腱细胞增殖的起始bFGF浓度为5μg/L,而20μg/L时可达到促肌腱细胞增殖的最佳浓度。     

大鼠BMSCs体外诱导培养后连接蛋白40及超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4表达的初步研究

目的观察大鼠BMSCs与窦房结组织块混合诱导培养后连接蛋白40(connexin 40,Cx40)及超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channel 4,HCN4)的表达情况,探讨大鼠BMSCs向窦房结细胞诱导分化的可能性。方法 4～6周龄SD大鼠20只,雌雄不限,体重200～300 g。取6只SD大鼠,采用贴壁筛选法分离BMSCs,取第3代细胞以羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯标记后,接种于6孔培养板内,同时制作细胞爬片。取14只SD大鼠窦房结组织,剪成0.3 cm×0.3 cm大小组织块,与标记后的第3代BMSCs混合培养,作为实验组;对照组仅单独培养第3代BMSCs。对照组培养1周及实验组混合培养1、2、3周,采用免疫组织化学方法检测Cx40和HCN4表达,并采用Image pro plus 5.0图像分析软件检测各组细胞表达Cx40和HCN4的平均积分吸光度值(mean integrated absorbance,MIA);采用实时荧光定量PCR检测细胞Cx40及HCN4 mRNA表达水平。结果免疫组织化学染色检测示,实验组混合培养1、2、3周,Cx40和HCN4 MIA值均显著高于对照组(P<0.01);且实验组随培养时间延长,Cx40和HCN4MIA值均逐渐增加,各时间点间差异均有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量.PCR检测示,实验组混合培养后1、2、3周,Cx40和HCN4 mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.01);实验组随培养时间延长,Cx40和HCN4 mRNA表达水平均逐渐增加,各时间点间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论将大鼠BMSCs与窦房结组织块体外混合培养,诱导后细胞高表达Cx40及HCN4,具有向窦房结细胞分化的可能。     

米非司酮对子宫腺肌病灶组织细胞作用的实验研究

目的　观察米非司酮对子宫腺肌病灶组织细胞的作用。　方法　采用噻唑兰法观察米非司酮对 11例子宫腺肌病患者腺肌病灶组织原代培养细胞体外生长状态的影响 ,实验分为 1.2 5、2 .5、5 0mg/L 3个药物浓度组 ,培养 5 2h ,测定OD值 ,并与空白对照组对比。　结果　 1.2 5、2 .5、5 0mg/L组及对照组的OD值分别为 (0 .2 19± 0 .0 4 4 )、(0 .185± 0 .0 38)、(0 .15 2± 0 .0 33)、(0 .2 6 2± 0 .0 6 8) ,5 0与 1.2 5mg/L组有显著差异 (P <0 .0 1) ,5 0、2 .5mg/L组与对照组有显著差异 (P <0 .0 1)。细胞生长抑制率 2 .5mg/L组 (IR =2 9.4 %)是 1.2 5mg/L组 (IR =16 .4 %)的 1.79倍 ,5 0mg/L组 (IR =4 2 .0 %)是 2 .5mg/L组的 1.4 3倍。　 结论　米非司酮能够抑制子宫腺肌病腺肌组织细胞的生长 ,其抑制能力与药物浓度呈正相关。     

Growth Cone Collapsing Effect of Lidocaine on DRG Neurons Is Partially Reversed by Several Neurotrophic Factors

Background: Local anesthetics were suggested to have a potential for neurotoxicity in both clinical reports and laboratory experiments. Growing neurons have been shown to be susceptible to the toxic effects of local anesthetics in culture. These findings have generated the interest in factors that would rescue the neurons affected by the neurotoxicity of local anesthetics.

Methods: Primary cultured dorsal root ganglia were isolated from age-matched chick embryos and exposed to lidocaine. After 60 min of exposure, the culture media were replaced to wash out the lidocaine. Neurotrophic factors (NTFs)-brain-derived neurotrophic factor, glial-derived neurotrophic factor, or neurotrophin 3-were added to the replacement media to examine the capacity of these NTFs to support the reversibility of the lidocaine-induced growth cone collapse. The growth cone collapse assay was applied a quantitative method of assessment.

Results: When any of the three NTFs was added to the replacement media at a minimum concentration of 10 ng/ml, significantly high reversibility of the lidocaine-induced growth cone collapse was observed, especially at 48 h after washout (P < 0.05). At that time point, there was no significant difference between the values of growth cone collapse percentage in the cells that were exposed to lidocaine and supported by the NTFs after the washout, and the control cells (not exposed to lidocaine) (P > 0.05).