rhBMP-2/PLA复合涂层种植体骨内诱导成骨的实验研究

目的：观察基因重组人骨形成蛋白-（recombinanthuman bone morphogenetic protein-2，rhBMP-2）和聚乳酸（polylactic acid，PLA）复合形成的活性涂层种植体骨内诱导成骨活性。方法：将rhBMP-2与聚乳酸复合构建活性涂层种植体，植入兔股骨内，分别于4，8，12，16周处死动物，进行组织学及扫描电镜及组织化学观察，检测其成骨活性。结果：构建的活性涂层种植体具有骨诱导能力，PLA为rhBMP-2的良好控释载体。结论：rhBMP-2/PLA涂层具有良好的生物相容性和骨诱导活性，是一种理想的种植体形式。     

rhBMP-2-PLA纳米微球的制备及生物学效应观察

目的:制备rhBMP-2-PLA纳米微球缓释系统,观察其对兔成骨细胞的生物学效应。方法:采用复乳-干燥法制备rhBMP-2纳米微球,观察其一般特性,并模拟体内条件研究BMP-PLA纳米微球的体外缓释特性。采用MTT法检测微球对成骨细胞增殖状况的影响,并与单纯rhBMP-2的作用进行比较。结果:纳米微球表面光滑圆整,球体大小均匀,平均粒径为45 nm,rhBMP-2-PLA纳米微球的包封率和载药量分别为(90.67±1.23)%和[(134.65±0.44)×10-3]%,微球体外释药符合Higuichi方程。该微球缓释系统有生物活性,能显著促进兔成骨细胞的增殖,其效应高于单纯施加rhBMP-2的效应。结论:rhBMP-2-PLA纳米微球缓释系统的作用明显优于单纯rhBMP-2,在骨创伤的治疗中有良好的前景。     

聚乳酸和无活性脱钙骨基质载体对rhBMP-2异位诱导骨形成的比较性研究

目的：为了研究聚乳酸和无活性脱钙骨基质载体对ｒｈＢＭＰ－２异位诱导的骨形成。方法：将重组人骨形态发生蛋白－２（ｒｈＢＭＰ－２）与无活性脱钙骨基质（ＤＢＭ）和聚乳酸（ＰＬＡ）复合,植入小鼠股部外侧肌肉陷窝比较ＰＬＡ和ＤＢＭ载体对ｒｈＢＭＰ－２诱导骨形成的影响。通过组织学检查、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）和钙含量测定以及骨钙素（ＢＧＰ）放疫测定,进行对比观察。结果：术后２１天,实验组均可见新生软骨细胞和软骨岛,ｒｈＢＭＰ－２／ＰＬＡ和ＤＢＭ／ｒｈＢＭＰ－２组还可见部分骨组织形成,见骨小梁、板层结构和红骨髓,ｒｈＢＭＰ－２／ＰＬＡ组ＰＬＡ部分吸收,ＤＢＭ／ｒｈＢＭＰ－２组ＤＢＭ无吸收迹象。各实验组与对照组对比,ＡＬＰ、ＢＧＰ水平和Ｃａ量均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）,ｒｈＢＭＰ－２／ＰＬＡ与ＤＢＭ／ｒｈＢＭＰ－２组在ＡＬＰ和ＢＧＰ水平上相比无显著差异（Ｐ＞０．０５）,但前组比后组的Ｃａ量为高（Ｐ＜０．０５）,这二组与单独植入ｒｈＢＭＰ－２组相比,定量检测指标均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论：（１）ＰＬＡ和ＤＢＭ均为ＢＭＰ的良好载体;（２）ｒｈＢＭＰ－２／ＰＬＡ是一种新的有价值的骨修复材料     

趋化因子SDF-1及其受体CXCR4对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨SDF-1/CXCR4生物轴对口腔鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响.方法 采用MTT法检测细胞的增殖能力.通过趋化实验观察细胞的侵袭迁移能力.结果 口腔鳞状细胞癌细胞在SDF-1作用下增殖反应明显增强,CXCR4抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖(P＜0.05).趋化实验显示SDF-1可诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生明显迁移,经50μg/ml CXCR4抗体孵育后,SDF-1介导Tca8113细胞的这种侵袭能力明显减弱(P＜0.05).结论 CXCR 4/SDF-1受体配体系统可介导口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移,在癌细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用.干扰SDF-1/CXCR4的相互作用有可能成为治疗口腔鳞状细胞癌的新方法.     

基质细胞衍生因子-1α在组织修复再生领域的研究进展

基质细胞衍生因子(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)可以诱导内源性干/祖细胞进入损伤部位进行组织修复再生,在组织工程领域受到越来越多的关注。本文就SDF-1α在骨、牙齿、血管、神经、软骨、肌腱等领域的修复再生应用及SDF-1α控释技术等方面的研究进展作一综述。     

rhBMP-2-mPEG-PLA纳米缓释微球缓释凝胶的制备及体外释放实验研究

目的制备一种改性后的rhBMP-2聚乳酸缓释纳米微球(rhBMP-2-mPEG-PLA-Ns),并研究其理化性能和体外释放研究,以用于将来的骨创伤修复。方法运用复乳法制备mPEG-PLA缓释微球,利用透射电子显微镜观察微球表面形态,激光粒度分布测试仪测试纳米微球粒径。采用ELISA法测定微球包封率及载药量,并选择动态透析释药法测定其体外释放率。结果微球表面光滑、圆整,纳米球体粒径均匀。纳米微球的粒径在45⁵0 nm,粒径分布范围较窄。包封率和载药量分别为(78.2±1.81)%和((2.24±0.24)×10-5)%,体外释放试验中,没有发现突释现象,24 h释放率为23.47%,微球在21 d后释放度达78.56%。结论 rhBMP-2-mPEG-PLA缓释纳米微球具备良好的理化特性和缓释效果,为后续药物在口腔方面的应用打下良好的基础。     

骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米缓释载体的制备及性能测定

目的 制备负载骨形态发生蛋白2（BMP-2）的壳聚糖纳米球,测定纳米球粒径、zeta电位、形态、体外降解和体外释放性能,探讨负载BMP-2的壳聚糖纳米球作为缓释载体的可行性。方法以壳聚糖（chitosan）和三聚磷酸钠(tripolyphosphate )为原料,采用离子交联法制备壳聚糖纳米球。应用纳米粒度分析仪及zeta电位测定仪检测微球粒径、分布及zeta电位,透视电镜下测定其表面形态。Elisa法测定包封率、载药率及体外释放率。采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学分析。结果离子交联法制备的BMP-2壳聚糖纳米球成球形好,球形较规则,分散较均匀,无团聚,表面较光滑;平均粒径为150.85 nm,分散指数PI=0.37,Zeta电位为+35.42 mV,包封率为(68.24±3.83)%,载药率为(56.83±2.26)%。体外释药试验显示,BMP-2可从壳聚糖纳米微球中缓慢释放,释放行为符合双相动力学规律,释放过程可达30 d。结论以壳聚糖和三聚磷酸钠为原料,可成功制备具有良好缓释能力的BMP-2纳米球,为组织工程骨的进一步应用提供依据。     

rhBMP-2和FGF-2对成骨细胞矿化及ENPP1、ANK、TNAP表达的影响

目的:研究重组人骨形态发生蛋白(rhBMP-2)和重组人碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)对成骨细胞(MC3T3-E1 Subclone 14)矿化及焦磷酸合成酶(ENPP1)、跨膜蛋白(ANK)和组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)表达的影响,探讨生长因子影响细胞矿化的机制。方法:将MC3T3-E1 Subclone 14细胞分成3组:成骨细胞诱导液(OS)成骨诱导培养组(对照组),OS与rhBMP-2培养组(rhBMP-2组),OS与FGF-2培养组(FGF-2组)。培养12 d后进行ALP活性检测及茜素红染色,实时荧光定量PCR检测矿化相关基因ENPP1、ANK和TNAP表达的差异。结果:rhBMP-2组ALP活性以及钙化结节明显高于对照组,ENPP1、ANK和TNAP均高表达;FGF-2组ALP活性以及钙化结节明显低于对照组,ENPP1和ANK呈高表达,TNAP低表达。结论:rhBMP-2和FGF-2通过调节ENPP1、ANK和TNAP的表达变化来影响骨的矿化。     

rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料的细胞活性研究

目的：检测不同浓度的rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料的生物学活性。方法：通过细胞计数（MTT法）,碱性磷酸酶（ALP）活性检测,对不同浓度的rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料的活性进行检测。结果：不同浓度的rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料对体外培养的Beagle犬骨髓基质细胞（MSC）的增殖和碱性磷酸酶的含量的影响不同。结论：rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料的生物学活性有剂量依赖性,和细胞浓度也有关。     

rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料的活性研究

目的:检测不同浓度的rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料的生物学活性.方法:通过细胞计数(MTT法),碱性磷酸酶(ALP)活性检测,对不同浓度的rhBMP-2/bTGF-β1/胶原复合材料的活性进行检测.结果:不同浓度的rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料对体外培养的Beagle犬骨髓基质细胞(MSC)的增殖和碱性磷酸酶的含量的影响不同.结论:rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料的生物学活性有剂量依赖性.     

珊瑚转化多孔羟基磷灰石复合rhBMP-2人工骨的动物实验研究

目的：寻找新的骨代用材料。方法：采用珊瑚转化多孔羟基磷石（ＣＨＡ）作为移植物支架,用Ｉ型胶原作为ｒｈＢＭＰ－２的缓释载体及赋形剂,将三者复合制成新型人工骨,进行了大鼠标准颅骨缺损骨移植实验。结果：ＣＨＡ／胶原具有良好的生物相容性和骨引导作用。ｒｈＢＭＰ－２／ＣＨＡ／胶原具有骨引导和骨诱导双重特性,其成骨效应明显优于单纯ＣＨＡ／胶原植入。结论：该复合人工骨有可能成为临床修复骨缺损的有效材料。     

Effect of rhBMP-2 with PLGA/gelatin sponge type (PGS) carrier on alveolar ridge augmentation in dogs

Summary  Recombinant human bone morphogenetic protein-2 has been shown to promote bone formation because of its osteoinductive property. The purpose of this study was to evaluate the efficacy of rhBMP-2 delivered on a poly ( d , l -lactic-co-glycolic acid) copolymer/gelatin sponge (PGS) in vertical alveolar ridge augmentation on height-reduced edentulous mandible to verify the retention of rhBMP-2 withstanding the pressure of soft tissues. Coronal defects of the alveolar bone were created in six adult beagle dogs. After a healing period of 9 weeks, PGSs with or without rhBMP-2 (0 or 0·4 mg mL⁻¹) were implanted on the defects(6 mm in height, 30 mm in length, 8 mm in width). Sixteen weeks after implantation, the bone mineral content (BMC) and the total bone area were measured by peripheral quantitative computed tomography. The BMC and the total bone area of the defect sites with rhBMP-2 group were significantly greater (133 ± 33 mg mm⁻¹, 277 ± 54 mm², respectively) than those of the control group (80 ± 19 mg mm⁻¹, 155 ± 49 mm², respectively) ( P  <   0·01, P  <   0·0001, respectively; paired t -test). From the histological analyses, the height of newly formed bone in the experimental group was greater than that of the control group (4·3 ± 0·9 mm, 0·22 ± 0·28 mm, P  <   0·0001, n  = 6, paired t -test). These results indicate that PGS has characteristics of effective bone graft substitutes for implantation of rhBMP-2 on vertical alveolar ridge augmentation in huge defect of mandibles in dogs.