妇科良,恶性肿瘤患者CD3AK细胞的表型特征

为了解妇科肿瘤患者ＣＤ３ＡＫ细胞的表型特征，并探讨来源于妇科良，恶性肿瘤患者ＣＤ３ＡＫ细胞表型特征的异同，采用间接免疫荧光法测定良，恶性妇科肿瘤患者ＣＤ３ＡＫ细胞的ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８阳性细胞率。     

妇科良,恶性肿瘤患者CD3AK细胞和LAK细胞体外扩增能力比较

为探讨妇科良，恶性肿瘤患者ＣＤ３ＡＫ细胞的体外增殖能力，对其外周血淋巴细胞用ＣＤ３ＭＡｂ＋ＩＬ－２诱导ＣＤ３ＡＫ细胞，体外动脉观察ＣＤ３ＡＫ细胞增殖倍数，并与同期培养的ＬＡＫ细胞进行对比。     

妇科恶性肿瘤患者CD3AK细胞与LAK细胞体外增殖能力动态观察

采用ＣＤ３ＭＡｎ＋ＩＬ－２联合刺激泊制备妇科恶性肿瘤患者ＣＤ３ＡＫ细胞，体外动态观察ＣＤ３ＡＫ细胞的形态特征及增死去工与ＬＡＫ细胞进行比较。结果显示：１．ＣＤ３ＡＫ细胞与ＬＡＫ细胞在体外分别经ＣＤ３ＭＡｂ＋ＩＬ－２和ＩＬ－２刺激后，细胞体积增大，继之变为不规则形；２．ＣＤ３ＡＫ细胞培养第１周增殖倍数为２．８９，至第４周增殖倍数达１０９．３７倍，均显著高于同期培养的ＬＡＫ细胞的增殖倍数３．ＣＤ３ＡＫ     

妇科肿瘤患者CD3AK细胞和LAK细胞杀瘤活性比较

为比较ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞的杀瘤特性，观察发妇科肿瘤患者ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞对卵巢癌细胞系的杀伤活性。结果表明；良性肿瘤组ＬＡＫ细胞杀瘤活性高峰在培养第１，２周，显著高于同期培养的ＣＤ３ＡＫ细胞，第３周则较低，而ＣＤ３ＡＫ细胞的杀瘤活性高峰在培养第３，４周，显著高于ＬＡＫ细胞；恶性肿瘤组，ＬＡＫ细胞杀瘤高峰在培养第１周，显著高于同期培养的ＣＤ３ＡＫ细胞，而ＣＤ３ＡＫ细胞杀瘤高峰在培养第     

妇科恶性肿瘤患者CD_3AK细胞和LAK细胞表型特征动态比较

CD3AK细胞和LAK细胞均为异质细胞群，为了比较妇科恶性肿瘤患者LAK细胞和CD3AK细胞在体外培养过程中的表型特征，采用间接免疫荧光法动态观察CD3AK细胞和LAK细胞的CD_3~＋，CD_4~＋，CD_8~＋细胞率。结果表明：①培养第1周，CD3AK细胞的CD_3~＋，CD_4~＋，CD_8~＋细胞率分别为61．36％，54．23％和52．96％，显著高于LAK细胞组（P＜0．01）；③培养第2，3周，CD3AK细胞的CD_3~＋，CD_4~＋和CD_8~＋细胞率高于LAK细胞，但无统计学差异（P＞0．05）；③随着培养时间延长，CD3AK细胞CD_3~＋，CD_4~＋，CD_8~＋细胞率均不同程度下降，尤以CD_3~＋细胞率下降最快，而LAK细胞在培养第2周，CD_3~＋，CD_4~＋，CD_8~＋细胞率均有所升高，但第3周时又开始下降；④CD3AK细胞的CD_3~＋，CD_4~＋和CD_8~＋细胞率在培养第1周最高，而LAK细胞在培养第2周最高。提示：CD3MAb和IL－2激活CD3AK细胞和LAK细胞的途径不同，致使CD3AK细胞和LAK细胞向不同的表型特征分化。     

CD3AK细胞和LAK细胞的表型测定

用抗ＣＤ＿３抗体和低剂量ＩＬ－２以及单独用高剂量ＩＬ－２分别诱生正常鼠、免疫鼠脾细胞为ＣＤ＿３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞。用间接免疫荧光法和微云细胞毒实验两种方法测定培养４ｄ和９ｄ的细胞表型。结果：正常鼠ＣＤ＿３ＡＫ和ＬＡＫ细胞中ＣＤ＿３与ＣＤ＿８阳性细胞率均高于诱生前正常鼠脾细胞（Ｐ＜０．０１）。正常鼠ＣＤ＿３ＡＫ细胞中，ＣＤ＿３与ＣＤ＿８阳性细胞率明显高于正常鼠ＬＡＫ细胞（Ｐ＜０．０１）。免疫鼠ＣＤ＿３ＡＫ与正常鼠ＣＤ＿３ＡＫ的表型相似，而免疫鼠ＬＡＫ细胞的ＣＤ＿８阳性细胞率显著增加，明显高于正常鼠ＬＡＫ细胞（Ｐ＜０．０１）。     

妇科肿瘤患者CD3AK细胞对卵巢癌细胞杀伤活性动态观察

为探讨妇科良，恶性肿瘤患者ＣＤ３ＡＫ细胞体外肿瘤细胞的杀伤活性，将５例妇科良性肿瘤，１２例妇科恶性肿瘤患者的外周血单个核细胞制备成ＣＤ３ＡＫ细胞，用ＭＴＴ法测定ＣＤ３ＡＫ细胞对卵巢癌细胞的杀伤活性，同时观察不同效靶比的杀瘤情况，每周测定１次，共４周。     

原发性卵巢癌患者CD3AK细胞和LAK细胞杀瘤活性比较

为探讨ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞杀瘤作用的特异性及靶细胞选择性，对比观察了３例原发性卵巢癌患者ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞对卵巢癌细胞系和人早幼粒细胞白血病细胞系的杀伤活性。结果表明；ＬＡＫ细胞在培养第１－３周，各效靶比对ＨＬ６０的杀伤活性略高于对３ＡＯ的杀伤活性，但差异无显著性；ＣＤ３ＡＫ细胞在培养第１周，各效靶比对ＨＬ６０的钉伤活性均显著高于对３ＡＯ的杀伤活性，而培养第２，３，４周时，对ＨＬ６０     

正常鼠和免疫鼠CD3AK细胞和LAK细胞杀伤活性的比较研究

实验取正常鼠和Ｐ８１５肿瘤细胞致敏的免疫鼠脾细胞，经抗ＣＤ３抗体与低剂量ＩＬ－２或高剂量ＩＬ－２分别诱生为ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞，用改良的乳酸脱氢酶释放法以Ｐ８１５细胞和ＹＡＣ－１细胞为靶细胞，测定ＣＤ３ＡＫ和ＬＡＫ细胞的杀伤活性。结果表明：正常鼠ＣＤ３ＡＫ细胞对Ｐ８１５细胞的杀伤活性高于ＬＡＫ细胞，对ＹＡＣ－１细胞的杀伤活性低于ＬＡＫ细胞。免疫鼠ＬＡＫ细胞对Ｐ８１５细胞的杀伤活性明显增高，高     

妇科良、恶性肿瘤患者CD_3AK细胞的表型特征

为了解妇科肿瘤患者CD3AK细胞的表型特征，并探讨来源于妇科良、恶性肿瘤患者CD3AK细胞表型特征的异同，采用间接免疫荧光法测定良、恶性妇科肿瘤患者CD3AK细胞的CD3，CD4，CD8阳性细胞率。结果表明：①妇科恶性肿瘤患者CD3AK细胞于培养第1，2周，CD3，CD4和CD8阳性细胞率均较高（40．25％～61．36％），培养第3周，CD3，CD4和CD8阳性细胞率均有不同程度下降，尤以CD_8~＋细胞下降明显（第1周为52．96％，第2周为40．24％，第3周为25．72％）；②妇科良性肿瘤患者CD3AK细胞CD3，CD4和CD8阳性细胞率在培养第1周均较高（39．86％～59．84％），培养第2，3周均有降低，以CD_4~＋细胞下降更明显（第1周为50．52％，第2周为41．91％，第3周为29．97％）；③妇科良、恶性肿瘤CD3AK细胞CD3，CD4，CD8细胞阳性率除培养第1周恶性肿瘤组CD8细胞阳性率显著高于良性肿瘤组外（P＜0．05），余均无显著性差异（P＞0．05）。结果提示：CD3AK细胞是一异质细胞群，不同来源或相同来源不同功能状态的CD3AK细胞在体外受到刺激后，不同亚群细胞可呈选择性增殖，从而表现出不同的表型特征。     

妇科良、恶性肿瘤患者CD_3AK细胞和LAK细胞体外扩增能力比较

为探讨妇科良、恶性肿瘤患者CD3AK细胞的体外增殖能力，对其外周血淋巴细胞用CD3MAb＋IL－2诱导CD3AK细胞，体外动态观察CD3AK细胞增殖倍数，并与同期培养的LAK细胞进行对比。结果：①良性肿瘤组CD3AK细胞在培养第1周，增殖倍数高于恶性肿瘤组，但无显著性差异（P＞0．05），第2、3、4周，良、恶性肿瘤组CD3AK的增殖倍数较接近；②LAK细胞增殖倍数，在良性肿瘤组培养第1周时显著高于恶性肿瘤组（P＜0．05），培养第2、3周也高于恶性肿瘤组，但无统计学意义（P＞0．05）。结果提示：CD3AK细胞和LAK细胞短期培养时，不宜取材于恶性肿瘤患者。     

妇科恶性肿瘤患者CD_3AK细胞与LAK细胞体外增殖能力动态观察

采用CD3MAb＋IL－2联合刺激法制备了妇科恶性肿瘤患者CD3AK细胞，体外动态观察CD3AK细胞的形态特征及增殖能力，井与LAK细胞进行比较。结果显示：①CD3AK细胞与LAK细胞在体外分别经CD3MAb（0．5mg／L）＋IL－2（105U／L）和IL－2（106U／L）刺激后，细胞体积增大，继之变为不规则形；②CD3AK细胞培养第1周增殖倍数为2．89，至第4周增殖倍数达109．37倍，均显著高于同期培养的LAK细胞的增殖倍数；③CD3AK细胞体外存活时间为4～5周，而LAK细胞仅为2～3周。结果提示：CD3AK细胞制备简便，体外存活时间长，增殖能力强，可以为临床提供充足的过继免疫效应细胞。     

CD3 AK细胞与LAK细胞的诱导和体外杀伤活性的比较

目的：探讨CD3AK细胞与LAK细胞的诱导、增殖动力学和杀伤活性的变化。方法：采用抗CD3单克隆抗体（anti-CD3McAb)和rIL-2及PHA（植物血凝素）共刺激法诱生扩增CD3AK细胞,用等量rIL-2 t PHA共刺激法诱生LAK细胞。观察它们的增殖动力学变化;用MTT法以K562细胞和H7402细胞为靶细胞,测量CD3AK细胞和LAK细胞的杀伤活性。结果：微量的anti-CD3McAb辅以少量的rIL-2和PHA就能诱导和大量扩增CD3AK细胞,其扩增能力显著高于LAK细胞（P<0.001);CD3AK细胞对K562细胞和H7402细胞的杀伤活性显著高于LAK细胞（P<0.05)。结论：CD3AK细胞的扩增能力及杀伤活性均较LAK细胞为强,是更为有效的杀瘤效应细胞。     

妇科肿瘤患者CD_3AK细胞和LAK细胞杀瘤活性比较

为比较CD3AK细胞和LAK细胞的杀瘤特性，观察了妇科肿瘤患者CD3AK细胞和LAK细胞对卵巢癌细胞系（3AO）的杀伤活性。结果表明：良性肿瘤组LAK细胞杀瘤活性高峰在培养第1、2周，显著高于同期培养的CD3AK细胞（P＜0．05，P＜0．01），第3周则较低，而CD3AK细胞的杀瘤活性高峰在培养第3、4周，显著高于LAK细胞（P＜0．05）；恶性肿瘤组，LAK细胞杀瘤高峰在培养第1周，显著高于同期培养的CD3AK细胞（P＜0．05），而CD3AK细胞杀瘤高峰在培养第2、3周，显著高于同期培养的LAK细胞（P＜0．05）。提示：妇科恶性肿瘤组LAK细胞和CD3AK细胞杀瘤活性高峰均较妇科良性肿瘤早1周左右；CD3AK细胞杀瘤活性高峰较LAK细胞延迟1～2周。说明CD3AK和LAK细胞的杀瘤活性在不同培养阶段表现不同，LAK细胞宜短期培养，CD3AK细胞宜长期培养。     

CD3AK、LAK与CIK细胞生物学特性的研究

①目的探讨CD3AK、LAK及CIK细胞的诱导、增殖能力及杀伤活性的变化.②方法采用CD3单抗和IL-2刺激诱生扩增CD3AK细胞,用IL-2刺激诱生LAK细胞,采用第0天加入IFN-γ,第1天加入IL-1,CD3单抗,IL-2诱生CIK细胞,观察它们的扩增情况;用MTT法以K562和H7402细胞为靶细胞,测定CD3AK、LAK及CIK细胞的杀伤活性.③结果CD3AK和CIK细胞的扩增能力远大于LAK细胞(P＜0.05).CIK细胞和CD3AK相比,在前期无明显差异,至第19、22天时CIK细胞的扩增能力显著高于CD3AK的扩增倍数(P＜0.05).CD3AK和CIK细胞对K562和H7402细胞的杀伤活性均显著高于LAK细胞(P＜0.05).④结论CIK细胞具有更高的扩增能力和更强的杀伤活性,是肿瘤过继免疫治疗中更为有效的杀瘤效应细胞.     

MtbAK细胞与CD3AK、LAK细胞全外增殖和杀瘤活性比较

目的：比较结核杆菌抗原激活的杀伤细胞（MtbAK）、CD3AK及LAK细胞的体外增殖能力和杀瘤活性。方法：分别和结核杆菌抗原（Mtb-Ag）、CD3 mAb和rIL-2刺激人外周血单个核细胞（PBMC）,在含rIL-2的RPMI1640培养液中诱导扩增MtbAK、CD3AK和LAK细胞,用计数法动态观察细胞扩增情况,在流式细胞仪上分析MtbAK中的γδT细胞比例,以MTT法检测三种扩增细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性。结果：与CD3AK和LAK细胞相比,MtbAK细胞具有更强的增殖能力和较高的细胞毒活性。结论：MtbAK细胞在体外更易于扩增,具有较高的杀瘤活性,有可能应用于肿瘤患者的临床过继免疫治疗。     

CD3AK与LAK细胞体外培养增殖及细胞毒活性的比较

我院 1993～ 1998年应用 CD3AK细胞、L AK细胞治疗癌症过程中 ,在细胞培养期间进行了两种细胞增殖力及杀伤力的比较。近年来对于 L AK细胞的抗肿瘤作用及临床已有广泛深入的研究。对 CD3AK也有了初步探讨。但对两种效应细胞的体外增殖及抗肿瘤作用同时进行比较则未见报道。本文对 CD3AK、L AK细胞的体外扩增、杀伤作用进行了比较 ,以期为选择合适的抗癌效应细胞用于临床治疗提供依据。1　资料与方法1.1　资料　均为住院癌症患者 ,不能应用常规手术及放、化疗 ,输用 CD3AK及 L AK细胞各 78例。1.2　主要试剂及细胞株　 Anip- 937…     

原发性卵巢癌患者CD_3AK细胞和LAK细胞杀瘤活性比较

为探讨CD3AK细胞和LAK细胞杀瘤作用的特异性及靶细胞选择性，对比观察了3例原发性卵巢癌患者CD3AK细胞和LAK细胞对卵巢癌细胞系（3AO）和人早幼粒细胞白血病细胞系（HL60）的杀伤活性。结果表明：LAK细胞在培养第1～3周，各效靶比（10：1，20：1，40：1）对HL60的杀伤活性略高于对3AO的杀伤活性，但差异无显著性（P＞0．05）；CD3AK细胞在培养第1周，各效靶比（10：1，20：1，40：1）对HL60的杀伤活性均显著高于对3AO的杀伤活性（P＜0．05），而培养第2、3、4周时，对HL60和3AO的杀伤活性无显著区别（P＞0．05）。提示：LAK细胞和CD3AK细胞均缺乏杀瘤特异性，而CD3AK细胞具有一定的靶细胞选择性。     

CD3AK与LAK培养过程中的增殖率及杀伤率的比较

自1995～2003年间,我院对CD3AK与LAK细胞进行培养并广泛用于肿瘤的治疗,在治疗过程中对其增殖率及杀伤率进行了比较,由于CD3AK细胞在抗肿瘤作用的显效性,已备受临床重视,现将其应用过程报告如下。     

CD3AK细胞治疗晚期恶性肿瘤疗效观察

目的：探讨抗CD3单克隆抗激活的杀伤细胞（CD3AK细胞）对晚期恶性肿瘤的疗效和对患者免疫功能的影响。方法：采用CD3AK细胞对58例晚期恶性肿瘤患者进行治疗,并对患者治疗前后的T细胞亚群和血清可溶性白介素2受体（sIL-2R)水平进行测定。结果：①治疗有效率（CD＋PR＋MR）为39．65％;②免疫功能变化：治疗后T细胞亚群中CD8^ 下降（P＜0．05）,CD3^ 、CD4^ 、CD4^ /CD8^ .比值均升高（P＜0．01）,sIL-2R水平显著下降（P＜0．01）。结论：CD3AK细胞能有效地治疗晚期恶性肿瘤。