PI3K抑制剂的研究进展

PI3K作为一种胞内磷脂酰肌醇激酶,是细胞内重要的信号转导分子,参与调节细胞的增殖、凋亡与分化等生理过程。众多研究表明PI3K依赖性信号通路(以PI3K-Akt-mTOR通路为主)的过度激活与肿瘤的发生有密切关系。过去的几十年中以PI3K-Akt-mTOR通路为靶点的治疗已经取得了很大进步,使得人们认识到PI3K抑制剂在肿瘤的治疗中发挥的重要作用。本文将对PI3K抑制剂在抗肿瘤方面的研究进展作一综述。     

PI3K和caspase-3在鼻咽癌中的表达及意义

[目的]观察鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）组织PI3K和caspase-3的表达,探讨其相互关系及其在鼻咽癌发生发展中的作用。[方法]应用免疫组织化学法检测60例鼻咽癌与23例鼻咽部慢性炎症组织PI3K和caspase-3的表达水平。[结果]NPC组中PI3K的阳性率分别为86.7%（52/60）与60.9%（14/23）（P〈0.05）;caspase-3的表达率分别为48.3%（29/60）与73.9%（17/23）（P〈0.05）;NPC中,PI3K的表达强度与caspase-3的表达呈负相关（P〈0.05）。[结论]PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活可能通过某种机制抑制caspase-3的表达,进而减少肿瘤细胞的凋亡,这在鼻咽癌的发病中起一定的作用。     

PI3K/Akt/mTOR信号转导通路在鼻息肉中的表达

目的:研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在鼻息肉中的表达及相关性,探讨PI3K/Akt/mTOR信号转导通路在鼻息肉发病过程中的作用.方法:鼻息肉组织28例和正常下鼻甲组织12例,用免疫组化Elivison二步法及Western blot检测鼻息肉组与对照组组织中PI3K、Akt与mTOR的表达,比较两组之间的表达差异.结果:鼻息肉组PI3K、Akt与mTOR免疫阳性细胞数及着色强度均明显高于对照组,图像分析显示鼻息肉组PI3K、Akt、mTOR的积分光密度(IOD,103/HP)分别为30.36±3.78、32.70±2.30、35.67±1.26,与对照组3.63 ±1.55、2.38±1.36、2.79±0.78相比有显著性差异(P值均＜0.01);Spearman等级相关分析显示,鼻息肉组PI3K、Akt、mTOR表达密切相关(P＜0.01);Western blot检测发现PI3K、Akt与mTOR在鼻息肉组织中特异性表达强度高于对照组(P＜0.01).结论:鼻息肉组织中PI3K、Akt和mTOR表达均上调,三者有协同表达关系,提示可能是通过PI3K/Akt/mTOR信号转导通路使炎性细胞凋亡受到抑制,导致慢性炎症反应,最终形成鼻息肉.     

同型半胱氨酸通过促进脂肪组织TRB3表达抑制PI3K/Akt信号通路

目的 建立高同型半胱氨酸血症的动物模型, 检测脂肪组织TRB3的表达, 探讨TRB3对PI3K/Akt信号通路的影响.方法 20只昆明小鼠分为正常对照组和高同型半胱氨酸血症组, 每组10只.饮用含1.5%蛋氨酸3个月建立高同型半胱氨酸血症组模型.2组麻醉处死后取脂肪组织, 逆转录PCR检测TRB3、Akt和GLUT4的m RNA表达水平, Western blot检测TRB3、Akt、p-Akt (473) 和GLUT4的蛋白质表达水平.结果 高同型半胱氨酸血症组的TRB3的m RNA表达较正常对照组增加 (P<0.05) , Akt和GLUT4的m RNA表达较正常对照组降低, 但差异无统计学意义 (P>0.05) ;高同型半胱氨酸血症组的TRB3的蛋白质表达较正常对照组增加 (P<0.05) , p-Akt (473) 蛋白质的表达降低, Akt和GLUT4的蛋白质表达差异无统计学意义 (P>0.05) .结论 同型半胱氨酸可能通过增加脂肪组织TRB3的表达, 降低p-Akt (473) 和GLUT4蛋白质含量, 抑制PI3K/Akt信号通路, 影响脂肪组织对葡萄糖的摄取和利用.     

PI3K蛋白在食管鳞癌中的表达与临床意义

目的 检测PI3K在食管鳞癌及正常食管中的表达情况,探讨其临床意义。方法 采用免疫组化的方法检测56例食管癌组织及20例正常食管组织中PI3K基因的表达,分析肿瘤组织中的PI3K表达与临床病理特征的关系。结果 PI3K蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为78.6%(44/56),在正常食管组织的阳性表达率为15.0%(3/20),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PI3K表达与食管癌发生发展及侵袭转移有关,可作为评价食管鳞癌生物学行为的指标。     

PI3K抑制剂在恶性肿瘤中的应用及研究进展

PI3K信号通路是肿瘤疾病中最重要的信号通路之一,它的突变或者过表达广泛存在于实体瘤及淋巴血液肿瘤中,包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、头颈肿瘤、淋巴瘤等.而且,在部分肿瘤中,PI3K突变与患者的生存期存在显著相关性.不同PI3K抑制剂对多种肿瘤均表现出一定程度的抗瘤活性;早期临床试验也获得了可观的疗效,尤其在淋巴瘤和乳腺癌,...     

胃癌组织Oct4和PI3K的表达和相关性

目的:探讨八聚体结合转录因子(Oct4)与磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)在胃癌组织中的表达和意义,并分析二者的相关性.方法:应用免疫组化S-P法检测60例胃癌组织和25例正常胃组织(距癌组织边缘10cm以上的胃组织)Oct4与PI3K蛋白的表达情况.结果:胃癌组织Oct4、PI3K的阳性表达率均明显高于癌旁正常胃组织(P ＜0.01);胃癌组织Oct4、PI3K的表达均与分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关(P＜0.05),与年龄和性别无关(P＞0.05).胃癌组织Oct4、PI3K的表达呈正相关关系(r=0.532,P＜0.05).结论:Oct4和PI3K可能与胃癌的发生、发展及浸润转移密切相关.     

PI3K通路及其抑制剂抗肿瘤的研究进展

磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinases,PI3K)是许多生命活动中关键的信号分子,PI3K介导的信号转导通路调节细胞的分裂、分化、凋亡等活动.因此PI3K被认为可能与多种肿瘤的发生发展密切相关,以PI3K为分子靶点进行的抗肿瘤机制方面的研究近年来备受关注.本文就近年来有关PI3K通路及其抑制剂在抗肿瘤方面的研究进展作一综述.     

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路研究小青龙汤方对小青龙汤证大鼠模型PI3K、Akt、mTOR mRNA表达的影响

目的:观察小青龙汤对小青龙汤证模型大鼠肺组织中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)mRNA表达的影响。方法:将24只雄性Wistar大鼠按照完全随机分组分成空白组、模型组、小青龙汤高剂量组、小青龙汤低剂量组共4组。建立外寒里饮(小青龙汤证)大鼠模型,予小青龙汤灌胃治疗15 d后,记录各组大鼠的体质量变化并加以分析,运用实时荧光定量(RT-qPCR)技术检测各组大鼠肺组织中PI3K、Akt、mTOR mRNA表达的差异。结果:与空白组比较,模型组与小青龙汤高、低剂量组大鼠体质量在造模后增加不明显,甚至出现负增长(P0.01);经过药物干预治疗后,与空白组比较,模型组大鼠体质量增长仍不明显;与模型组比较,小青龙汤高、低剂量组大鼠体质量明显增加(P0.01)。RT-qPCR结果显示,与空白组比较,模型组PI3K、Akt、mTOR mRNA表达升高(P0.05);与模型组比较,小青龙汤高剂量组PI3K、Akt、mTOR mRNA表达降低(P0.05,P0.01),小青龙汤低剂量组PI3K、Akt、mTOR mRNA表达有降低趋势,但差异无统计学意义。结论:小青龙汤证的发生发展与PI3K、Akt、mTOR mRNA表达量的上调相关,小青龙汤高剂量治疗效果明显,其作用机制与其能够下调PI3K、Akt、mTOR mRNA的相对表达量有关。     

PI3K抑制剂对转化生长因子β1诱导人肾小管上皮细胞Smad泛素化调节因子2表达的影响

目的探讨体外条件下转化生长因子β1(TGF-β1)对人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)表达Smad泛素化调节因子2(Smurf2)的诱导情况,以及PI3K抑制剂LY294002对其的影响。方法应用RT-PCR法检测Smurf2 mRNA的表达,应用Western印迹法检测Smurf2蛋白的表达。结果HK-2细胞有基础量的Smurf2 mRNA和蛋白的表达,TGF-β1呈时间和剂量依赖性增加HK-2细胞Smurf2 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。PI3K抑制剂LY294002呈剂量依赖性抑制TGF-β1(100pM)所诱导的HK-2细胞Smurf2 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论在体外,TGF-β1可能通过PI3K/AKT通路诱导HK-2细胞Smurf2 mRNA和蛋白的表达。PI3K抑制剂LY294002可抑制Smurf2 mRNA和蛋白的表达。     

疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞PI3K p85α蛋白表达的影响

目的观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠肝细胞磷脂酰肌醇-3-激酶p85α（PI3K p85α）表达的影响。方法以高脂饮食12周建立大鼠NAFLD模型后,造模组大鼠再随机分为模型组、疏肝组、健脾组、综合组和自然恢复组等5组。治疗组分别给予相应药物灌胃,其他组给予等量蒸馏水灌胃,模型组继续高脂饮食,其余均予基础饲料喂养。治疗8周后,用3%戊巴比妥腹腔麻醉,腹主动脉取血,全自动生化仪检测血脂及肝功,稳态模型法评价胰岛素抵抗程度,光镜下观察各组肝脏病理改变,免疫组化方法检测肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达情况。结果与模型组相比,药物治疗各组及自然恢复组肝脏脂变程度明显减轻,肝功、血脂、胰岛素抵抗均有显著改善（P〈0.05或P〈0.01）,肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达明显减少（P〈0.05）。与自然恢复组相比,药物治疗各组肝功、血脂、血糖的改善无显著差异,但肝脏脂变程度减轻,胰岛素抵抗指数明显下降（P〈0.05）,肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达显著降低（P〈0.05）。结论疏肝健脾方药对高脂饮食诱导的大鼠NAFLD有较好的治疗作用,其机制可能是与其降低肝细胞PI3K p85α的表达有关。     

PI3K/Akt信号通路与肿瘤关系的研究进展

PI3K/Akt信号通路作为细胞内重要信号转导通路之一,通过影响下游多种效应分子的活化状态,在细胞内发挥着抑制凋亡、促进增殖的关键作用,与人类多种肿瘤的发生、发展密切相关。该信号通路的成分在人类大多数恶性肿瘤中都发生了变化,在肿瘤的增殖、存活和抵抗凋亡、血管发生以及细胞运动中发挥了重要作用。因此,通过对PI3K/Akt信号通路的研究有望寻求肿瘤药物治疗的新靶点。本文将重点就PI3K/Akt信号通路的组成及其与肿瘤发生、发展的关系予以综述。     

围绝经期非器质性失眠妇女肝郁与PI3K/Akt信号通路的相关性研究

[目的]探讨肝郁影响围绝经期非器质性失眠的可能免疫学机制。[方法]收集围绝经期非器质性失眠妇女150例,通过四诊信息的采集获得患者的肝郁证素积分、肝郁分级及匹兹堡睡眠质量指数(PSQI),运用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测外周血单个核细胞(PBMC)中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化蛋白激酶B(pAkt)的蛋白表达量,实时荧光定量PCR法(RT-QPCR)检测PBMC中PI3K、Akt的mRNA含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白介素1-β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。观察围绝经期非器质性失眠妇女的肝郁分级、PI3K/Akt信号通路各指标(PI3K、Akt、pAkt的蛋白表达量,PI3K mRNA、Akt mRNA含量;IL-1β、TNF-α水平)和PSQI之间的相互关系。[结果] 1)围绝经期非器质性失眠妇女中,肝郁分级与PSQI、PI3K/Akt信号通路各指标均呈正相关(P0.01);IL-1β、TNF-α均与PSQI呈正相关(P0.01);PI3K、Akt与其相应的基因水平分别呈正相关(P0.01)。2)PSQI、PI3K/Akt信号通路各指标在不同肝郁分级间的差异均具有统计学意义(P0.01),且肝郁分级越高,PSQI和PI3K/Akt信号通路各指标含量越高。[结论]肝郁是诱发或加重围绝经期非器质性失眠的病因之一。是通过影响PI3K/Akt信号通路,促使PBMC中PI3K mRNA和Akt mRNA含量增加,经基因表达后使PI3K、Akt和pAkt蛋白含量上升,经一系列级联反应后,进一步提高血清中IL-1β与TNF-α的含量,最终影响围绝经期妇女非器质性失眠。故今后研究可考虑通过阻断PI3K/Akt信号通路以改善围绝经期妇女非器质性失眠。     

地塞米松增强L02细胞P-糖蛋白的表达作用机制的初步研究

目的 探讨地塞米松对人正常肝细胞株L02细胞P-糖蛋白(P-gp)表达的影响,以及磷酸肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)途径在调控P-gp表达中的作用.方法 采用Western blot检测体外培养L02细胞P-gp与Akt的表达水平,比较经地塞米松、PI3K/Akt酶抑制剂LY294002及两者联合处理24 h前后L02细胞P-gp表达水平的变化及地塞米松处理24 h前后L02细胞Akt表达水平的差异,分析L02细胞P-gp表达与PI3K/Akt表达之间的关系.结果 10 μmol/L地塞米松刺激24 h后L02细胞P-gp及Akt表达水平较刺激前分别显著增加60.8％ (P =0.026 7)和25.0％ (P =0.035 8);L02细胞中P-gp表达水平与Akt表达水平之间呈显著正相关(Pearson系数=0.87,P＜0.01);LY294002(20 μmol/L)处理组L02细胞P-gp表达水平较对照组(未处理组)显著降低33.8％ (P =0.018 4);地塞米松单独处理组和地塞米松与LY294002联合处理组L02细胞P-gp表达水平分别是对照组的(163.5±18.4)％和(130.1±22.0)％,两者间相差显著(P =0.031 3).结论 地塞米松可能通过激活PI3 K/Akt途径诱导L02细胞P-gp增强表达.     

PI_3K/Akt与血液恶性肿瘤关系的研究进展

在肿瘤的发生发展中,细胞的凋亡受抑在细胞生存中起着主要的作用。磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路与肿瘤发生发展中的许多细胞生物学过程存在着密切联系,这些生物学过程包括:细胞凋亡、转录及细胞周期的调控等。因此,探讨PI3K/Akt作用的分子机制并揭示其与肿瘤的关系将为抗肿瘤药物的研究提供新靶点。     

镉处理对小鼠睾丸间质细胞PI3K/AKT信号通路的影响

目的 探讨镉对小鼠睾丸间质细胞3-磷酸肌醇激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路的影响.方法 TM3细胞经20μmol/L CdCl2处理,分别在加入CdCl24 h和8h后收集细胞;对照组给予相应体积的PBS,8h后收集细胞.利用实时定量RT-PCR法测定炎症相关细胞因子白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-2、MIP-1和环氧合酶(COX)-2 mRNA的表达水平以及用Western blot法检测细胞COX-2、AKT和p-AKT蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,镉能够显著诱导TNF-α和IL-6 mRNA的表达(P＜0.01);镉处理4h组MCP-1 mRNA表达水平明显高于对照组(P＜0.01),而镉处理8h组MCP-1 mRNA表达水平与对照组相比差异无统计学意义;镉对TM3细胞MIP-1和MIP-2mRNA表达差异无统计学意义;镉能够明显诱导TM3细胞COX-2蛋白和mRNA的表达(P＜0.01).此外,镉处理组p-AKT蛋白表达水平也明显高于对照组(P＜0.01).结论 镉可能通过激活TM3细胞中PI3 K/AKT信号通路进而选择性调节部分炎症相关细胞因子的表达.     

Quercetin suppresses HeLa cells by blocking PI3K/Akt pathway

To explore the effect of quercetin on the proliferation and apoptosis of HeLa cells, HeLa cells were incubated with quercetin at different concentrations. Cell viability was evaluated by MTT assay, cell apoptosis was detected by Annexin- V/PI double labeled cytometry and DNA ladder assay. Cell cycle was flow cytometrically determined and the morphological changes of the cells were ob- served under a fluorescence microscope after Hoechst 33258 staining and the apoptosis-related pro- teins in the HeLa cells were assessed by Western blotting. The results showed that quercetin signifi- cantly inhibited the growth of HeLa cells and induced obvious apoptosis in vitro in a time- and dose-dependent manner. Moreover, quercetin induced apoptosis of HeLa cells in cell cycle-dependent manner because quercetin could induce arrest of HeLa cells at G0/G1 phase. Quercetin treatment down-regulated the expression of the PI3K and p-Akt. In addition, quercetin could down-regulate ex- pression of bcl-2, up-regulate Bax, but exerted no effect on the overall expression of Akt. We are led to conclude that quercetin induces apoptosis via PI3k/Akt pathways, and quercetin has potential to be used as an anti-tumor agent against human cervix oancer.     

COX-2通过PI3K/Akt通路调节氧诱导视网膜病变模型中视网膜新生血管的形成

目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)调节氧诱导视网膜病变(OIR)模型中视网膜新生血管形成的信号转导机制.方法 将乳鼠随机分为正常对照组、OIR模型组以及COX-2选择性抑制剂NS-398组(每组18只乳鼠).正常对照组小鼠生长于正常空气氧浓度(21%),OIR模型组和NS-398组小鼠于出生后第7天放置于高浓度氧环境(75%)生长,第12天调整氧浓度为正常.NS-398组小鼠于出生后第12～17天每日腹腔注射10 mg/kg NS-398.于第17天,获取3组视网膜标本,采用常规病理学检查在光镜下观察视网膜新生血管的变化;应用免疫组织化学法、Real-time PCR以及West-ern blot技术检测视网膜组织中COX-2、VEGF和PI3K/Akt的表达.结果 正常对照组病理切片未见视网膜新生血管形成,OIR模型组和NS-398组均出现与内界膜相连的新生血管,以OIR模型组为甚.COX-2、VEGF和PI3K/Akt在正常对照组均存在一定表达,在OIR模型组呈强表达,在NS-398组的表达明显低于OIR组,但仍高于正常对照组.3组间COX-2、VEGF的吸光度值、mRNA和蛋白相对量及PI3K/Akt的蛋白相对量两两比较,差异均有显著性意义(均P<0.05).结论 COX-2表达受到抑制后通过下调VEGF的表达减少OIR模型中的视网膜新生血管形成,在此过程中涉及到PI3K/Akt信号通路的作用.     

PI3K/AKT信号转导通路与肿瘤转移及其机制的研究进展

PI3K/AKT信号转导通路与肿瘤的发生发展关系密切,本文概述PI3K、AKT的结构特征、PI3K/AKT信号转导通路的活化及其与恶性肿瘤转移的关系及机制。