动脉粥样硬化性脑梗塞患者载脂蛋白B基因的MspI限制性…

为了解动脉粥样硬化性脑梗塞与载脂蛋白代谢异常的关系，利用Ａｐｏｂ ｃＤＮＡ探针检测了５４名ＡＣＩ患者和６２名正常对照者的载脂蛋白Ｂ基因ＭｓｐＩ限制性片段长度多态性等位基因频率。结果显示，１１６例标本共出现２．３５ｋｂ（Ｍ１）和２．６０ｋｂ（Ｍ２）两条杂交片段。     

浙江汉族人冠心病患者载脂蛋白B基因的多态性研究

对１０３例浙江汉族人载脂蛋白（Ａｐｏ）Ｂ基因ＸｂａⅠ酶切位点，应用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰｓ）研究表明：（１）冠心病组中少见Ｘ２等位基因的相对频率为０．１１，显著高于正常对照组的０．０２（Ｐ＜０．０１）；（２）Ｘ２等位基因的相对频率与冠心病的病变范围无明显关联；（３）冠心病组中具Ｘ１Ｘ２基因型者与具Ｘ１Ｘ１基因型者比较，ＨＤＬ－Ｃ及ＳＯＤ水平明显降低（Ｐ分别＜０．０１，＜０．０５）。本研究结果表明，ＡｐｏＢ基因ＸｂａⅠ酶切点的ＲＦＬＰｓ可能与冠心病的发病有一定关系。     

载脂蛋白AⅠ－CⅢ基因区域DNA多态性与动脉硬化性脑梗塞关系的研究

为探讨载脂蛋白ＡＩ－ＣⅢ基因区域ＤＮＡ多态性与动脉硬化性脑梗塞的关系，作者利用重组ＤＮＡ技术，对５９名正常血脂汉族个体和４４名动脉硬化性脑梗塞（ＡＢＩ）患者载脂蛋白ＡＩ－ＣⅢ基因区域ＤＮＡ多态频率和特征进行了分析，发现Ｓ２和Ｍ２２种多态性片段，正常人群等位基因频率为０．１５７和０．１９５，而在ＡＢＩ患者中分别为０．３６４和０．４８９．经统计学处理两组有显著性差异，提示Ｓ２和Ｍ２与ＡＢＩ发生有关。单体型分析表明，动脉硬化性脑梗塞患者Ｓ１－Ｍ２单体型频率（０．１２５）明显高于正常血脂人（０．０２９），两组有显著统计学差异，提示Ｓ１－Ｍ２单体型可作为一种遗传标记，有可能在中国人群中预测某些与脂类代谢障碍有关的疾病。     

载脂蛋白AI—CⅢ基因区域DNA多态性与动脉硬化性脑梗塞关系…

为探讨载脂蛋白ＡＩ－ＣⅢ基因区域ＤＮＡ多态性与动脉硬化性脑梗塞的关系，作者利用重组ＤＮＡ技术，对５９名正常血脂汉族个体和４４名动脉硬化性脑梗塞患者载脂蛋白ＡＩ－ＣⅢ基因区域ＤＮＡ多态频率和特征进行了分析，发现Ｓ２和Ｍ２２种多态性片段，正常人群等位基因频率为０．１５７和０．１９５，而在ＡＢＩ患者中分别为０．３６４和０．４８９。     

北京汉族人群载脂蛋白AI基因多态性与血脂水平关系的研究

目的：探讨中国汉族人ＡｐｏＡＩ基因变异特点及其与血脂水平的关系。方法：应用ＰＣＲ技术对北京地区４５０名汉族人的载脂蛋白ＡＩ基因启动子（ＭｓｐＩ１，－７５ｂｐ）及第一内含子（ＭｓｐＩ２，＋８３ｂｐ）两个ＭｓｐＩ限制性片段长度多态性进行分析。结果：北京汉族人群ＡｐｏＡＩ基因ＭｓｐＩ１多态性以Ｍ１＋＋和Ｍ１＋－为主要基因型，Ｍ１－等位基因少见其频率为０２５９，男性显著低于女性（０２２０∶０２９４，Ｐ＜００５）；北京汉族人群中少见的Ｍ１－等位基因频率显著高于文献报道的欧美白种人。汉族人具有Ｍ１－－、Ｍ１＋－基因型者与Ｍ１＋＋基因型者比较，血清总胆固醇、甘油三酯水平显著降低（均为Ｐ＜００１）。ＡｐｏＡＩ基因ＭｓｐＩ２位点大多数为Ｍ２＋＋基因型，Ｍ２－等位基因频率仅为００５８，与其他人种比较未见明显差异；ＭｓｐＩ２多态性对各血脂变量影响不明显。结论：１北京地区汉族人的ＡｐｏＡＩ基因ＭｓｐＩ１多态性频率分布于性别间存在差异，与欧美白种人有明显差异；推测Ｍ１－等位基因对血清总胆固醇和甘油三酯水平降低可能有一定影响；２ＭｓｐＩ２多态性与其他人种间未见明显差异，其对各血脂变量影响不明显。     

载脂蛋白AI基因的基因型与冠心病临床表现型的关系

对４３例经冠状动脉造影证实的冠心病患者及６０例正常人载脂蛋白（Ａｐｏ）ＡＩ基因ＰｓｔＩ酶切位点限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰｓ）进行检测，结果表明：冠心病组中少见Ｐ２等位基因的相对频率为０．１４，明显高于正常对照组的０．０５；Ｐ２等位基因的相对频率随冠状动脉病变支数的增多而增高，以３支病变增高最为明显；冠心病组中具Ｐ１Ｐ２基因型得与具Ｐ１Ｐ１基因型者比较，ＨＤＬ－Ｃ和ＳＯＤ水平明显降低，而ＴＣ及Ｌ     

载脂蛋白AI基因多态性与高脂血症关系的研究

本文利用２．２ｋｂ人ＡＰＯＡＩ基因探针，检测５７例高脂血症儿童及３８例正常血脂儿童的ＡＰＯＡＩ基因限制性片段长度多态性，发现中国上海汉族儿童人群ＡＰＯＡＩ基因存在ＰｓｔＩ多态位点，其等位基因频率Ｐ１为０．９２，Ｐ２为０．０８。并发现Ｐ２多态位点与低高密度脂蛋白血症关系密切（Ｐ＜０，０５），但与单纯高甘油三酯血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症合并高胆固醇血症无相关性。     

ApoE 基因多态性与中国人非胰岛素依赖型糖尿病血脂水平的关系

为研究ＡｐｏＥ基因对中国人非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者血脂水平的影响，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增出ＡｐｏＥ基因第４外显子内的２９２ｂｐ片段，继以限制性内切酶ＨｈａⅠ酶解消化，最后行８％聚丙烯酰胺凝胶电泳，根据电泳带型判断ＡｐｏＥ基因型。共检测了１１２例非胰岛素依赖型糖尿病患者的ＡｐｏＥ基因型。通过比较不同ＡｐｏＥ基因型与血脂水平的关系发现：ＡｐｏＥ基因多态性与ＴＧ，ＨＤＬ－Ｃ，ＡｐｏＡⅠ，ＡｐｏＢ及Ｌｐ（ａ）水平无相关性，而与ＴＣ（Ｐ＝０．００２９）及ＬＤＬ－Ｃ（Ｐ＝０．００２１）水平相关，携带ε４等位基因者具有较高的ＴＣ及ＬＤＬ－Ｃ水平，而携带ε２等位基因者具有较低的ＴＣ及ＬＤＬ－Ｃ水平。     

用PCR—RFLP方法检测动脉硬化性脑梗死患者的载脂蛋白E基因多态性分布

目的 研究动脉硬化性脑梗死（ＡＣＩ）患者中的载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因的分布。方法 利用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术扩增ＡｐｏＥ基因含编码１１２位和１５８位氨基酸的片段，并用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）技术对ＡＣＩ患者和相应健康对照的ＡｐｏＥ基因进行分型，从而进行ＡＣＩ与ＡｐｏＥ等位基因多态性的关联分析。结果 ＡＣＩ患者中ＡｐｏＥ等位基因ε４占２８．３０％，明显高于正常人对照组的７．６４％，而等位基因ε３则占５７．５５％，低于正常人对照组的８４．１２％，均有极显著性差异（ｐ〈０．０１）。结论 ＰＣＲ－ＲＦＬＰ是一种快速有效的ＡｐｏＥ基因分型方法，ε４可能为ＡＣＩ的易感因子，而ε３则为保护因子。     

中国人细胞色素P4502D6基因多态性

目的为探讨中国人ＣＹＰ２Ｄ６酶基因的多态性分布规律。方法应用聚合酶链反应和ＸｂａⅠ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）对１００名正常汉族人的ＣＹＰ２Ｄ６基因做了研究。结果发现在中国人群该基因Ａ、Ｂ、Ｄ和Ｅ４种引起酶活性缺失的突变频率分别为１％、６．５％、０．５％和１％；ＸｂａⅠＲＦＬＰ显示：２９ｋｂ／２９ｋｂ、４４ｋｂ／２９ｋｂ和４４ｋｂ／４４ｋｂ基因型的频率分别为３８％、４６％和１３％；而且还发现虽然Ａ和Ｂ突变主要于２９ｋｂ／２９ｋｂ基因型，但也有１２％的Ｂ突变见于４４ｋｂ／４４ｋｂ基因型。结论中国人ＣＹＰ２Ｄ６基因的这四种引起酶缺乏性的突变频率均较欧美人低。ＸｂａⅠ４４ｋｂ等位基因频率相对较高。     

中国人内源性高甘油三酯血症与载脂蛋白CⅢ基因Sst Ⅰ酶切位点多态性关联的研究

为观察中国人载脂蛋白ａｐｏＣⅢ基因变异的频率及其与内源性高甘油三酯血症（ＨＴＧ）的关联，应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）对７４例正常人及６９例ＨＴＧ患者ａｐｏＣⅢ基因酶切位点的限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）进行了研究。结果表明：ＨＴＧ患者和正常人均以Ｓ１等位基因（ＳｓｔⅠ－）为主。大多数为Ｓ１Ｓ１纯合子基因型；Ｓ２等位基因（ＳｓｔⅠ＋）少见，其频率显著高于白种人（０．２７９ｖｓ０．１２０，Ｐ＜０．００３）。ＨＴＧ组Ｓ２等位基因频率较正常对照组有增加趋势（０．３５３ｖｓ０．２７９，Ｐ＞０．０５）。ＨＴＧ组及对照组中具有Ｓ２Ｓ２基因型者与Ｓ１Ｓ１及Ｓ１Ｓ２基因型者比较，血清ａｐｏＣⅢ及ａｐｏＥ水平显著升高（Ｐ＜０．０２，Ｐ＜０．０５）及血清ＴＧ／ＨＤＬ－Ｃ比值显著升高（Ｐ＜０．０３）。推测ａｐｏＣⅢ基因ＳｓｔⅠ酶位点的ＲＦＬＰ与中国人ＨＴＧ可能有一定关联，ａｐｏＣⅢＳ２Ｓ２基因型对血清ａｐｏＣⅢ、ａｐｏＥ含量及ＴＧ／ＨＤＬ－Ｃ比值的升高有一定影响。     

湖北汉族人群C4限制性片段长度多态性的研究

用限制性内切酶ＴａｑＩ和Ｃ４基因５￣＇末端探针ｐＡＴ－Ａ检测５８份湖北地区健康献血员基因组ＤＮＡ的Ｃ４基因限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ），观察到７．０ｋｂ、６．０ｋｂ和５．４ｋｂ三种Ｃ４基因片段，它们共组成三种常见的Ｃ４基因ＲＦＬＰ表型，即Ａ：７．０５－４ｋｂ（频率为２４．１４％））；Ｂ：７．０－６．０ｋｂ（频率为２０．６９％）和Ｃ：７．０－６．０－５．４ｋｂ（频率为５５．１７％，在所检测的样本中未观察到６．４ｋｂ的Ｃ４基因片段。     

湖北汉族人群C4性片段长度多态性的研究

用限制性内切酶ＴａｑＩ和Ｃ４基因５＇末端探针ｐＡＴ－Ａ检测５８份湖北地区健康献血员基因组ＤＮＡ的Ｃ４基因限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ），观察到７．０ｋｂ、６．０ｋｂ和５．４ｋｂ三种Ｃ４基因片段，它们共组成三种常见的Ｃ４基因ＲＦＬＰ表型，即Ａ：７．０－５．４ｋｂ（频率为２４．１４％）；Ｂ：７．０－６．０ｋｂ（频率为２０．６９％）和Ｃ：７．０－６．０－５．４ｋｂ（频率为５５．１７％）。在所检测的样本     

我国Marfan综合征基因连锁标记的研究

为了探索对Ｍａｒｆａｎ综合征进行产前诊断和症状前诊断的方法，应用１５号染色体ＦＢＮ１基因内两个多态位点ＴａｑⅠ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）和（ＴＡＡＡＡ）ｎ扩增片段长度多态性（Ａｍｐ－ＦＬＰ）为遗传标记，在正常人群中检出前者有５．０ｋｂ（＋）和６．０ｋｂ（－）两种等位基因，基因频率各为２７％和７３％；后者有１５０ｎｔ（１）和１６０ｎｔ（２）两种等位基因，基因频率分别为３１％和６９％，未见白种人中的罕见变异型。两个患病家系的单倍型分离分析表明，致病基因均与－，２单倍型连锁，提示中国人群中Ｍａｒｆａｎ综合征也与ＦＢＮ１基因连锁。以该基因内的多态位点为遗传标记，可对该病的一些家系成员进行产前或症状前诊断。     

载脂蛋白E基因多态性与血管性痴呆关系的研究

为探讨载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因多态性与血管性痴呆（ｖａｓｃｕｌａｒｄｅｍｅｎｔｉａ，ＶＤ）的关系，采用单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测了３７例ＶＤ患者的ＡｐｏＥ基因型，并与４０例同龄对照组及４０例非痴呆脑梗塞组比较，同时检测血脂、脂蛋白及部分载脂蛋白。结果表明，ＶＤ组ε４基因频率明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）和非痴呆脑梗塞组（Ｐ＜０．０５），ＶＤ患者中携ε４等位基因者血ＴＣ及ＬＤＬ－Ｃ水平显著高于携ε２、ε３者。提示：ε４基因可能是ＶＤ的危险因子，其机理可能与大脑血管性和变性性损害有关。     

中国人C4Qo表型的C4DNA限制性片段长度多态现象：静息基因的机制初探

对１７例中国人Ｃ４Ａ／Ｃ４Ｂ表型中含有Ｑ０的个体的基因组ＤＮＡ进行了ＨｉｎｄⅢＲＦＬＰ的检测。从五型Ｃ４Ａ／Ｃ４Ｂ（３，０／１，１；３；０／２．１；３．３／１．０：３．２／１．０；３．０／１．０）中共检出５种ＲＦＬＰ片段组合Ａ：３２－２５－１５ｋｂ；Ｂ：３２－１５ｋｂ；Ｃ：２５－１５ｋｂ；Ｄ：３２－１５－８．５ｋｂ；Ｅ：２５－１５－８．５ｋｂ）。根据代表Ｃ４Ａ基因缺失的８．５ｋｂ片段的有无，测出大约５０％的Ｃ４ＡＱ０是由基因缺失造成的。此外，本文还对Ｃ４ＡＱ０时Ｃ４Ｂ长、短基因的分配，Ｃ４ＢＱ０时Ｃ４基因的变动情况等进行了分析与讨论。     

HLA—DQA1,DQB1基因与特发性膜性肾病关联研究

为探讨上海地区特发性膜性肾病（ＩＭＮ）与ＨＬＡ－Ⅱ类基因的关联，本研究用聚合酶链反应（ＰＣＲ）及序列特异性寡核苷酸（ＳＳO）探针杂交方法，对３３例上海地区汉族ＩＭＮ患者及７０例同一地区 正常人作了ＨＬＡ－ＤＱＡ１、－ＤＱＢ１位点的等位基因分型，并比较其基因频率。结果表明：ＩＭＮ组ＤＯＡ１０１０１等位基因频率高于对照组，统计学处理有显著性差异（ＲＲ＝３．０４３，Ｐ＝０．００２，Ｐｃ－０．０１８）。ＤＱＢ１０６０４等位基因频率较对照组高，而ＤＱＢ１０３０１等位基因频率较对照组低，但统计学处理后差异均不显著（Ｐ＜０．０５，Ｐｃ＞０．０５），以上结果提示，１ＭＮ的发病机制可能与免疫遗传因素有关。     

I型糖尿病患者的HLA—DR—DQ基因单体型分析

应用ＨＬＡ－ＤＲＢ，ＤＱＢ１序列特异性引物ＰＣＲ扩增方法，鉴定８１例ＩＤＤＭ患者，７个家系和８４例正常对照汉族人群的ＤＲＢ基因多态性及ＩＤＤＭ的ＨＬＡ－ＤＲ－ＤＱ基因单体型。结果表明：（１）ＩＤＤＭ患者ＤＲＢ１＊０３，ＤＲＢ１＊０９等位基因频率明显高于对照组，其频率分别为８．６４％ｖ．ｓ３．０％和２８．４％ｖ．ｓ１６．１（Ｐ〈０．０５）。（２）患者中ＤＲＢ１－ＤＲＢ３／ＤＲＢ１－ＤＲＢ４基因型频率     

长寿老人血脂,脂蛋白和载脂蛋白价值的研究

对９０岁以上３６例长寿老人的血脂、脂蛋白和载脂蛋白进行了测定，并与陈旧性心肌梗塞（ＯＭＩ）和成人组对比。结果显示：与ＯＭＩ组比较，长寿老人血清ＨＤＬ－ｃ／ＴＣ、ＨＤＬ－ｃ／ＬＤＬ－Ｃ和ＡｐｏＡ１／ＡｐｏＢ１００比率明显高于ＯＭＩ，而ＴＣ、ＴＧ、ＬＤｃ、ＶＬＤＬ－ｃ、ＡｐｏＢ１００和ＡｐｏＡ１明显低于ＯＭＩ，ＨＤＬ－ｃ在两组间无显著性差异，与成人组比较，长寿老人血清ＴＧ、ＶＬＤＬ－ｃ、ＡｐｏＡ、／Ａ     

汉坦病毒A9株M基因片段全长cDNA克隆及其在痘苗病毒中的瞬时表达

采取反转录一聚合酶链反应（ＰＣＲ），分３个片段扩增Ｉ型汉坦病毒（野鼠型）中国毒株Ａ９株Ｍ基因片段，分别克隆入ＰＧＥＭ－Ｔ载体中。选择３个正向插入的ＴＡ９ＩＢ、ＴＡｇＣＤ、ＴＡｇＥＡ克隆，选用ＣｌａＩ、ＥｃｏＲＶ进行酶切、连接，获得了１个在ＰＧＥＭ－Ｔ载体中插入３．６ｋｂ的Ａｇ株Ｍ基因片段ｃＤＮＡ克隆，酶切图谱分析证实播入片段正确。将Ａ９Ｍ片段在痘苗病毒／Ｔ７噬菌体ＲＮＡ聚合酶瞬时（Ｔｒａｎｓｉｅｎｔ）表达系统中进行表达，用抗汉坦病毒糖蛋白单克隆抗体进行免疫荧光检测，观察到很强的特异性荧光，证明ＡｇＭ基因ｃＤＮＡ能进行表达。