大鼠实验性脑震荡的病变规律和神经细胞凋亡研究

采用Wistar大鼠复制脑震荡动物模型，于伤后1，3，7，14及30天活杀取脑组织，经光镜，电镜和原位末端标记等技术研究脑震荡的病变规律及神经细胞凋亡情况。结果显示，100g砝码于1m处撞击大鼠头部可复制大鼠脑震荡的模型，其基本病变为脑血管扩张，淤血，出血，脑组织水肿，神经元变性，凋亡和坏死，尼氏体减少甚至消失。伤后1－3天，脑组织呈点状坏死，周围组织疏松，单核及泡沫样细胞增多，神经元变性，凋亡和坏死。7天脑水肿达高，海马锥体细胞减少，呈极度缺血性改变，14－30天内仍见血管扩张，淤血，可见出血，水肿好转。原位末端标记显示，伤后1天见凋亡细胞增多，3天数量达高峰，伤后30天凋亡的神经元持续存在。结果显示，脑震荡以血液循环障碍和实质细胞变性，凋亡和坏死为主要病理改变；神经细胞凋亡是脑震荡神经元迟发性损害的主要形式之一。     

HLA-G蛋白及基因在子宫内膜异位症在位和异位内膜中的表达

目的 探讨人类白细胞抗原G（HLA-G）基因及蛋白在子宫内膜异位症（EM）在位和异位内膜组织中的表达及其生物学意义。方法 应用免疫组化法和原位杂交法检测38例子宫腺肌症、30例卵巢子宫内膜异位症异位内膜及在位内膜、20例子宫肌瘤患者（对照组）在位子宫内膜中HLA-G蛋白和基因的表达。结果 HLA-G蛋白和基因在子宫内膜异位症患者异位和在位内膜组织中的表达均明显高于对照组（P〈0．01）,但在异位内膜和在位内膜的表达无明显差异（P〉0．05）。HLA-G蛋白在EM不同临床分期的表达无明显差异（P〉0．05）,在增生期和分泌期子宫内膜的表达无差异（P〉0．05）。结论 HLA-G的表达可能与子宫内膜异位症的发病有关。     

低氧诱导因子1α在大鼠脊髓损伤中的表达

目的　了解低氧诱导因子 1α(hypoxiainduciblefactor- 1α ,HIF - 1α)在实验性脊髓损伤中的表达规律并探讨其在脊髓损伤中的作用。　方法　通过逆转录聚合酶链式反应 (RT -PR)、原位杂交和免疫组化方法 ,分别从mRNA和蛋白水平研究HIF - 1α在脊髓损伤后不同时段的表达情况。结果　HIF - 1α的mRNA和蛋白在损伤脊髓中的各种细胞类型中广泛表达 ,而且表达较正常脊髓明显增高 (P <0 .0 5 ) ,其中蛋白表达高峰 (伤后 1d)较mRNA表达高峰 (伤后 3d)提前。　结论　脊髓损伤中存在缺血缺氧损害 ,缺氧环境可通过诱导转录和增强蛋白稳定性来增加HIF - 1α蛋白量 ,这可能与HIF - 1α的下游基因激活和脊髓组织细胞耐受缺氧环境有关。     

HER-2在骨肉瘤中蛋白表达、基因扩增及临床意义研究

目的探讨骨肉瘤中人类表皮生长因子受体-2(HER-2)的蛋白表达、基因扩增及其临床意义。方法收集2002年1月至2015年6月辽宁省人民医院的51例骨肉瘤及20例骨软骨瘤存档蜡块,采用免疫组化法检测其HER-2蛋白表达情况;采用免疫荧光原位杂交技术(FISH)检测HER-2基因扩增情况。结果在骨肉瘤及骨软骨瘤中HER-2蛋白的阳性表达率分别为64.7%及0;HER-2基因扩增的阳性率分别为58.8%、10.0%;组间比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论骨肉瘤中HER-2基因扩增及蛋白表达均高于骨软骨瘤,可作为其分子靶向治疗的靶点。     

原位杂交技术在软骨组织工程研究中的应用

组织工程学是近 10年来发展起来的一门新兴学科 ,软骨组织工程学研究为软骨缺损的修复提供了新的方法[1,2 ] 。通过各种组织学、免疫组织化学以及原位杂交等手段 ,对建造的组织工程化人工软骨进行检测 ,是进行软骨组织工程研究的重要一环 ,尤其是原位杂交技术因其具有敏感、组织定位准确等优势 ,是对建造的组织工程化软骨质量进行评价的重要手段 ,但国内相关研究尚少。本研究应用辣根过氧化物酶显色系统的原位杂交技术 ,探讨对组织工程化人工软骨中Ⅰ、Ⅱ型胶原进行检测的方法。1　材料与方法1.1　材料Ⅰ、Ⅱ型胶原基因探针 (胶原蛋白Ⅰ、Ⅱ…     

金属蛋白酶组织抑制因子-2在大鼠肝组织中的定位及表达

用人血白蛋白攻击的方法制备实验性免疫性肝纤维化大鼠模型，以正常大鼠为对照。采用免疫化法及原位杂交技术分别检测肝脏中金属酶组织抑制因子－2在正常及实验性免疫性肝纤维化大鼠肝组织中的定位及表达状态。结果为实验组肝脏中TIMP－2mRNA和相关抗原表达在肌纤维细胞、成纤维细胞，以汇管区及纤维间隔中最明显，阳性信号位于细胞胞浆中，未见细胞核表达。提示在肝纤维化中，成纤维细胞及肌成纤维细胞是TIMP－2表达的主要细胞，并随着病损肝脏中肝纤维化程度的加重，TIMP－2基因和蛋白表达水平随之增高。     

清醒状态下大鼠脑震荡动物模型的建立

目的 :建立简单实用的大鼠脑震荡动物模型 ,为其损伤规律和机制的研究奠定基础。方法 :采用自制装置 ,分别利用不同重量 (2 0 0g,10 0g和 5 0g)砝码 ,从 1m高度对大鼠造成脑损伤 ,选择合适的砝码重量制作脑震荡动物模型 ,动态观察伤后大鼠意识状态、行为学及病理学变化。结果 :大鼠受到撞击后 ,呈现典型的“先昏迷再清醒”的脑震荡临床表现 ,病理学显示顶枕部、额叶、颞叶出血 ,迷宫实验显示其学习记忆能力下降。结论 :该装置较好地复制了脑震荡模型 ,且与临床上造成脑震荡的表现相似 ,有助于进行不同程度脑损伤后继发病理生理变化的机制和相应的治疗研究。     

大鼠脊髓损伤后血红素氧化酶-1的表达

目的　研究血红素氧化酶 - 1(HO - 1)及其mRNA在脊髓损伤后表达变化。　方法用免疫组织化学技术和原位杂交技术 ,观察正常大鼠、脊髓损伤后 1d和 3d大鼠脊髓HO - 1及其mRNA的分布和含量变化。　结果　正常大鼠脊髓HO - 1表达较少 ,主要在神经元 ;而损伤后表达明显增加 ,主要是小胶质细胞和星形胶质细胞 ,并围绕在血肿周围。损伤后 1d蛋白的表达开始增加 ,阳性细胞的灰度和面积分别为 (14 8.2 6± 11.39)和 (90 .5 0± 8.70 )× 10 3 μm2 ;损伤后 3d表达强度进一步升高 ,阳性细胞的灰度和面积分别为 (12 8.0 3± 12 .5 9)和 (112 .99± 10 .0 1)× 10 3 μm2 。损伤后 1d ,HO - 1mRNA表达阳性细胞的灰度和面积为 (10 6 .0 2± 9.10 )和 (70 .0 5± 9.2 6 )×10 3 μm2 ;3d时为 (85 .82± 9.0 7)和 (87.37± 10 .95 )× 10 3 μm2 ,与对照组相比差异有非常显著性意义(P <0 .0 1)。　结论　大鼠脊髓损伤后 ,HO - 1表达显著增加 ,有一定的保护作用。     

糖尿病大鼠视网膜NF-kB表达与其血流改变的实验性研究

目的:连续6个月,观察NF-kBp65在视网膜的表达,研究糖尿病大鼠视网膜中央动脉、静脉血流动力学的变化,并探讨分析两者的相关性。方法:采用右下腹腔内一次性注射Streptozotocin 60mg/kg诱导Wistar大鼠糖尿病模型35只,分别于成模后1、2、34、、5及6个月,行视阀膜NF-kBp65的免疫组织化学检测、视网膜血管消化铺片和彩色多普勒血流显像检查。结果:NF-kBp65在正常对照组大鼠视网膜的血管层有少许阳性表达,随糖尿病病程延长,NF-kBp65的阳性表达数目和范围增加,同时,视网膜中央动脉速度减低,博动指数、阻力指数增加,视网膜中央静脉流速增加,视网膜微血管出现狭窄闭塞。结论:NF-kBp65的表达随糖尿病病程延长、视网膜组织缺血缺氧的加重而显著增加。     

Chronic fatigue stress leads to up-regulation of nitric oxide synthase in the rat nucleus accumbens

In the present study, the effect of chronic fatigue stress on the neuronal nitric oxide synthase (nNOS) in the rat nucleus accumbens (NAc) was assessed in order to explore the neurobiology mechanism of central fatigue stress, especially the role of the NAc in central fatigue. In the experiment, adult male Wistar rats were forced to swim till exhaustion every day for 4 weeks. Immunohistochemistry was used for measurement of the nNOS-positive neurons associated with the image manipulation. Our results showed that a long-time exposure to chronic forced swim stress increased the number of nNOS immunoreactive-positive neurons in the rat NAc (106.7%, P<0.001), distributed area (150.2%, P<0.001) and gray degree value (11.3%, P<0.01). The results indicate that nitric oxide (NO)/nNOS may be involved in the formation of the fatigue stress, and that NO may play a role in the regulation of stress in the NAc. The up-regulation of NO/nNOS during the exposure to long-time swim stress is likely to be one of the results of brain damage and psychiatric disorder induced by NO overproduction.     

＋Gz重复暴露对大鼠脑组织一氧化氮合成酶基因表达的影响

为了了解＋Gz重复暴露后大鼠脑组织一氧化氮合成酶（NOS）基因表达的变化，探讨＋Gz引起脑损害的分子机制，本文用建立的定量反转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测方法检测＋Gz重复暴露后大鼠脑组织内NOS mRNA表达的变化。结果＋Gz重复暴露后30min和6h大鼠脑组织NOS mRNA明显升高，但24h时恢复正常，表明＋Gz重复暴露可刺激大鼠脑组织NOS mRNA的表达，NO可能参与了＋Gz所致脑损害的病理过程，但这种损害是可逆的。     

The importance of a neck exam in sport-related concussion: Cervical schwannoma in post concussion syndrome

ObjectiveFew cases of cervical schwannoma have been reported following head trauma. The present case, involves a schwannoma of the C2 spinal nerve mimicking post-concussion symptoms following a sport-related concussion (SRC).DesignCase study.SettingUniversity of Calgary, Sport Medicine Clinic, Calgary, Alberta, Canada.ResultsWe report a 28 year old, athlete who developed headache, dizziness, photophobia, and neck pain following a cycling accident. She presented nine months later to our sports clinic with persistent symptoms. She had a normal neurological examination but complained of painful neck range of motion, and exacerbation of symptoms with neck extension. On palpation, a lump was found in the right suboccipital muscles and MRI showed a T2 hyperintense mass at the C1-2 level. The patient underwent resection and histology revealed a schwannoma of the C2 nerve root. Following resection her symptoms improved, with no recurrence at 2 months follow up.ConclusionOur patient's slow recovery following SRC is consistent with a schwannoma formation, which may have been precipitated by the injury itself or merely unmasked from trauma. This case illustrates the importance of a thorough physical examination and broad differential in patients presenting with worsening of symptoms after initial improvement in SRC.     

内皮型一氧化氮合酶在急性放射性脑水肿中的表达

目的：探讨大剂量＾６０Ｃｏγ刀照射后脑血管内皮细胞内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）表达变化及其与急性放射性脑水肿的关系。方法单次２００Ｇｙ＾６０Ｃｏγ刀照射大鼠右侧尾状核头部,于照射后１４ｄ内分批活杀动物,采用光镜,电镜、免疫组化及原位杂交技术研究照射后急性放射性脑水肿的发生发展及脑血管内皮细胞ｅＮＯＳ表达变化。结果照射后２ｈ出现急性放射性脑水肿病理改变。照射后３ｄ达高峰;脑血管内皮细胞ｅＮＯＳ于照     

诱导型一氧化氮合酶在中耳胆脂瘤组织中的表达及其意义

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在中耳胆脂瘤组织中的表达及在发病机制中的可能作用。方法采用免疫组化Elivision法检测20例中耳胆脂瘤组织,10例正常外耳道皮肤中iNOS的表达。结果 20例中耳胆脂瘤组织中iNOS的阳性表达率为70%(14/20),正常外耳道皮肤中iNOS的阳性表达率为0(0/10)。iNOS阳性表达两组间差异有显著意义,P<0.001。结论 iNOS在中耳胆脂瘤组织中的高表达,提示iNOS可促进血管形成、细胞增殖和邻近骨质吸收,在中耳胆脂瘤的发生、发展过程中起着重要促进作用。     

脑震荡大鼠认知行为障碍及多巴胺能神经元的变化

目的　探讨脑震荡大鼠认知障碍的特征及多巴胺能神经元的变化。方法　用金属单摆打击装置复制大鼠单纯性脑震荡模型。随机分为伤后1，2，4，8，16，24d六个损伤组和对照组（各12只）；应用Morris水迷宫评价大鼠的学习记忆功能；用免疫组织化学方法研究中脑黑质致密区（SNC）和腹侧被盖区（VTA）多巴胺能神经元的变化。结果　8d组脑震荡后1～3d大鼠隐匿平台逃避潜伏期显著延长（P〈0，05），16d组和24d组水迷宫实验与对照组比较，差异无统计学意义。SNC和VTA的神经元酪氨酸羟化酶在伤后各组均不同程度增强，4d组反应最强，24d组有所减弱；24d组的SNC与对照组比较差异无统计学意义，但VTA与对照组比较，差异仍有统计学意义（P〈0，05）。结论 （1）脑震荡后大鼠出现近期空间学习记忆功能障碍；（2）脑震荡后多巴胺能神经元酪氨酸羟化酶表达增高。     

Smad5基因在小鼠耳蜗中的表达及定位

目的 了解Smad5基因在小鼠耳蜗中的表达及定位。方法 应用RT-PCR检测Smad5基因的表达,用原位杂交法检测耳蜗中Smad5 mRNA的表达部位,用免疫组织化学方法确定Smad5蛋白在耳蜗中的定位。结果 Smad5基因在小鼠耳蜗中有高表达,表达部位在毛细胞、螺旋神经节细胞、支持细胞、血管纹、基底膜等。结论 Smad5在耳蜗中存在,是耳蜗中众多蛋白中的一种。它可能在耳蜗的形成、毛细胞的分化过程中起着重要的作用。     

高压氧下大鼠脑组织中氧化氮合酶阳性细胞的表达(论著)

目的：探讨高压氧（HBO）对视觉中枢的影响。方法：SD大鼠12只，随机分为3组：分别为常压对照组（NP组），高压空气对照组（HBA组），和HBO实验组（HBO组）。HBA组和HBO组动物分别给予0．25MPa高压空气和纯氧，升压20分钟，在0．25MPa下稳压4小时，然后经20分钟减至常压。动物出舱后立即灌注取脑，利用NADPH-黄递酶（NADPH-diaphorase）组织化学方法，观察氧化氮合酶（NOS）阳性细胞见脑组织外侧膝状体（LGN）、视皮层及大脑顶叶皮层的表达。结果：NOS阳性细胞存在于大鼠LGN、视皮层及大脑项叶皮层中。在0．25MPaHBO作用下，视皮层、大脑顶叶皮层中NOS阳性细胞明显增加（P＜0．05），而LGN与对照组相比无显著性差异（P＞0．05）。结论：HBO对视觉中枢的毒性作用与视皮层NOS阳性细胞增加密切相关。