男性不育患者精子XY染色体的荧光原位杂交分析

目的探讨用荧光原位杂交分析的方法来检测少、弱、畸形精子症患者中精子XY染色体畸变率。方法将30例少、弱、畸形精子症患者和20例正常生育男性精液精子标本用荧光原位杂交分析的方法检测精子X和Y染色体的数目畸变的发生率,并将结果进行分析、比较。结果研究组单倍体精子数32 189个,其中单倍体X精子数占（45.34±6.56）%,单倍体Y精子数占（47.32±7.18）%;二倍体精子率为（0.168±0.059）%,精子X和Y染色体数目畸变率为7.34%。对照组单倍体精子数为19 246个,其中单倍体X精子数为（46.87±5.54）%,单倍体Y精子数为（49.32±6.17）%;二倍体精子率为（0.074±0.038）%,精子X和Y染色体数目畸变率为3.81%。两组二倍体精子率、精子数目畸变率差异有统计学意义（P〈0.05）。结论少、弱、畸形精子症患者中精子X和Y染色体数目畸变率比正常生育人群高。     

双色荧光原位杂交检测男性不育患者精子X和Y染色体

目的建立男性不育患者精子核双色荧光原位杂交技术（FISH）的检测方法。方法将20例男性不育患者精子标本经低渗液处理、固定后制片,用二硫苏糖醇（DTT）使精子去凝集,变性后与双色荧光标记（CEPX、Y）探针杂交。结果20例患者的6672个精子中,X染色体精子率为47．78％,Y染色体精子率为47．24％,性染色体数目异常的精子率为4．53％,有效杂交率为99．55％。结论成功地建立了检测人精子X和Y染色体的检测方法。     

双色FISH检测人精子染色体非整倍体方法的建立

建立：用双色FISH检测人精子染色体非整倍体的方法。方法：采用双色荧光原位杂交（FISH）方法取适量精子标本用EDTA／PBS处理,然后用二硫苏糖醇（DTT）,使精子去凝集。固定后滴片,然后与双色荧光直接标记探针杂交。结果：在OLYMPUS荧光显微镜下可以清楚看到精子头部的蓝色杂交信号,头部有1个绿色荧光杂交信号的精子为X染色体精子（X精子）,有1个红色荧光杂交信号的精子为Y染色体精子（Y精子）。精子头部有2个荧光杂交信号的精子为染色体数目异常精子。结论：双色荧光原位杂交（FISH）方法可以用于测定人精子染色体非整倍体率的变化。     

一种快速稳定的人精子核双色荧光原位杂交技术的建立

目的:建立快速稳定的人精子核双色荧光原位杂交的实验方法。方法:采用双色荧光原位杂交(fluores cence in situ hybridization, FISH )方法取精子标本用EDTA/PBS液处理,再用二硫苏糖醇(DTT)使精子去凝集,甲醇/冰醋酸固定后制片,变性后与双色荧光直接标记(CEP X、Y)探针杂交。结果:在荧光显微镜下可见标本背景清晰,精子头部染成蓝色,边界清楚,头部有1个绿色荧光信号的精子为 X精子,有 1 个红色荧光信号的精子为 Y精子。精子头部有2个或2个以上信号的精子为染色体数目异常精子。结论:本方法具有快速、稳定、荧光信号强、易分辨等优点,可用于人性染色体非整倍体率的分析研究。     

应用荧光原位杂交技术检测男性肺癌细胞性染色体数目的改变

目的 应用荧光原位杂交技术（FIsH）研究肺癌细胞性染色体数目的改变及其意义。方法 用X、Y号染色体的着丝粒探针与17例男性肺癌标本的间期细胞进行杂交检测。结果男性患者中，X染色体的获得占10例（58．82％），Y染色体的丢失占9例（52．94％），Y染色体的获得占2例。结论 FISH技术可检测肺癌间期细胞的染色体数目改变，性染色体数目异常在肺癌中的发生率很高，与肺癌的发生、发展有一定的联系。     

荧光原位杂交技术在快速诊断胎儿染色体数目异常中的应用

目的 探讨荧光原位杂交（FISH）技术在快速产前诊断胎儿染色体数目异常中的价值.方法 采用13、18、21、X和Y染色体特异性DNA探针,对123例高危孕妇的羊水间期细胞进行FISH检测,同时行常规染色体核型分析平行诊断,以此监测对比荧光原位杂交结果的准确性.结果 所测123份标本的13、18、21、X、Y染色体数目均与常规染色体核型分析的结果相符,其中,检测结果显示染色体数目正常的为120例,染色体数目异常的为3例,分别为21-三体2例,18-三体1例;正、异常与常规染色体核型分析结果符合率均为100%.结论 荧光原位杂交技术检测过程简单、快捷,特异性较强,且灵敏度较高,是一种可用于临床的快速产前诊断方法.     

应用荧光原位杂交技术检测停育胚胎或绒毛染色体数目异常

目的：使用荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization,FISH）对停育胚胎染色体数目异常进行快速检测并评估其临床应用价值。方法：使用第13、18、21、X和Y 5条染色体特异性的FISH探针对66例停育胚胎绒毛进行分析。结果：13、18、21、X和Y数目异常20例,占46.97%,正常例数35例,间异例数11例。在所有异常胚胎中性染色体异常占75%,其中Turner＇s Syndrome 45X（TS 45X）所占比例最高与其他任何一种异常的发生率相比差异显著（P〈0.05）。结论：FISH检测停育胚胎第13、18、21、X和Y数目异常是简单、快速和准确的诊断方法。     

荧光原位杂交技术在自然流产或死胎中的应用

目的:利用荧光原位杂交技术(FISH)快速检测流产儿是否患有染色体疾病,为流产组织的遗传检测提供一种有效的检测方法。方法:选用13、18、21、X、Y无色探针对不明原因流产后的胎儿皮肤或绒毛等组织进行FISH检测。结果:26例标本中检测出异常染色体9例,异常率为34.6%;其中45X 2例、46XX/46XY 1例、47XN+18 2例、47XXY 1例、47XN+21 2例、69XXY 1例。结论:荧光原位杂交技术可用于检测流产、死胎后的组织标本,为无法进行细胞培养核型分析的胎儿标本提供一种有效的检测方法。     

用荧光原位杂交技术快速诊断孕早期胚胎染色体数目异常

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术在快速产前诊断孕早期胚胎染色体数目异常中的价值.方法采用13,18,21,X和Y染色体特异性DNA探针,对46例孕47～65 d高危孕妇的绒毛间期细胞进行FISH检测,同时行常规染色体核型分析平行诊断.结果与染色体核型分析结果一致的染色体数目正常43例,异常3例(47,XY 21;47,XY 18和45,X).3例异常核型胚胎经治疗性流产后再分别对其绒毛行常规染色体核型分析,结果与产前诊断相符.结论FISH技术用于产前诊断孕早期胚胎染色体数目异常具有快速、准确等优点.     

利用PCR，FISH对异常核型中额外染色体的证实

目的：检测在常规G显带下，45，X［115］/46，X+mar［45］/46，XY［29］异常核型中额外小染色体的来源。方法：利用PCR对SRY基因进行检测；对人的Y染色体进行标记，利用荧光原位杂交技术，在荧光显微镜下观察。结果：用Y染色体杂交，发现在额外小染色体上有荧光信号。结论：额外小染色体来源于Y染色体。     

应用荧光原位杂交技术检测性染色体异常

探讨荧光原位杂交技术在性染色体异常诊断中的价值。方法：应用Ｘ、Ｙ染色体着丝粒探针,对１９例女性性腺发育不全及５例男性不育患者的外周血染色体或间期细胞进行杂交。结果发现的异常核型有：４６,Ｘ,ｒ（Ｘ）,４５,Ｘ／４６,Ｘ,ｒ（Ｘ）、４５,Ｘ／４６,Ｘ,ｄｉｃｉ（Ｙｑ）、４５,Ｘ／４６,ＸＹ、４５,Ｘ／４７,ＸＸＸ、４５,Ｘ／４６,ＸＸ／４７,ＸＸＸ、４５,Ｘ及４７,ＸＸＹ等类型。结论应用ＦＩＳＨ技术     

用X、Y双色探针行人胚分裂球植入前诊断

目的:运用X?Y双色探针行人类胚胎分裂球植入前诊断, 探讨荧光原位杂交技术在人类胚胎植入前诊断中的应用价值?方法:对常规获得的胚胎, 采用胚胎活检或直接行胚胎透明带的溶解,获取胚胎分裂球采用X?Y双色着丝粒探针进行荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization, FISH)分析?结果:FISH分析成功率为79.49%,有价值结果获得率为23.98%?采用活检方法固定率?杂交率?完整信号率和有价值结果获得率分别为84.06%?77.59%?33.33%?21.74%;直接消化透明带固定率?杂交率?完整信号率和有价值结果获得率分别为77.17%?80.61%?40.51%?25.20%?两者相比无明显差异?结论:X?Y双色探针荧光原位杂交技术适用于胚胎植入前单个胚胎分裂球的遗传学诊断?     

Investigation of the frequency of chromosomal aneuploidy using triple fluorescence in situ hybridization in 12 Chinese infertile men

Background Chromosomal aberrations are the major cause of pre- and post-implantation embryo wastage and some studies suggest that half of all human conceptions have a chromosomal abnormality. A chromosomal aberration in human sperms is also one of the causes of failure of in vitro fertilization. This study was designed to ascertain whether chromosomal aneuploidy in spermatozoa is a risk factor for male infertility.Methods Twelve infertile men were divided into two groups: 10 with oligoasthenoteratozoospermia (OAT, Group A) and two with a normal semen analysis (Group B). Two normal healthy sperm donors acted as controls (Group C). We used fluorescence in situ hybridization (FISH) and probes for chromosomes X, Y and 18 to determine the frequency of aneuploidy. Results The frequencies of spermatozoa disomy for chromosomes X, Y and 18 were 0.30% and 0.30%, respectively, in Group B. The percentages were not significantly different from those of Group C （0.15% and 0.16%）. The frequencies of nullisomy for chromosomes X, Y and 18 were 0.15% and 0 for Group B, and 0 and 0.15% for Group C (P>0.05). In Group A, the incidences of disomy were 1.13% and 0.96% and the frequencies of nullisomy were 1.13% and 1.60%. In these three groups, the incidences of diploidy were 0.60%, 1.00%, and 0.30%, respectively. Both the frequencies of disomic and nullisomic spermatozoa for chromosomes X, Y, and 18 and of diploid spermatozoa were significantly higher in Group A than in Groups B and C. The estimated total aneuploidy rates in the sperm from the three groups were 42.44%, 6.05%, and 2.59%, respectively.Conclusion These results indicate that chromosomal aneuploidy in spermatozoa may be a risk factor for infertility.     

X、Y、18三色探针同时检测植入前人胚的实验研究

目的:探讨X、Y、18 三色探针同时检测植入前人胚,以鉴定其性别及倍体的可行性 .方法:对体外受精(in vitro fertilizatio n, IVF)所获18个剩余胚104个卵裂球,采用X、Y、18三色着丝粒探针进行FISH分析. 结果:FISH分析成功率97.5%(77/79), 9例(9/11,81.9%)单精受精胚胎为二倍体, 性染色体嵌合未影响胚胎性别的诊断, 7例双精受精胚胎呈多种倍体异常. 结论: 采用X 、Y、18三色探针FISH法同时检测植入前人胚准确、有效,每胚分析2 个卵裂球具有代表性.     

荧光原位杂交法检测特纳氏综合征患者的微小标记染色体

目的确定特纳氏综合征（Turner's syndrom)患者微小标记染色体（Small marker chromosome,smr)的来源。方法用 Ｘ和Ｙ染色体着丝粒特异的ＤＮＡ探针进行荧光原位杂交（Fluorescence in situ bybridization,FISH),检测３例核型为 ４５, Ｘ／４６, Ｘ＋smr的特纳氏综合征患者的smr。结果 ２例患者smr染色体来源于Ｙ染色体, １例来源于Ｘ染色体。结论 ＦＩＳＨ技术可快速准确鉴别微小标记染色体,对临床诊断和治疗方案的选择有重要指导作用。